Coloración Zielh Nielsen

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Coloración Zielh Nielsen

  1. 1. Coloración de Ziehl-Neelsen
  2. 2. Coloración de Ziehl-Neelsen Franz Ziehl (1857-1926), propuso tan sólo emplear ácido carbólico en lugar de anilina y Friedrich Karl A. Neelsen (1854-1894), cambió la genciana por fucsina. Es mérito de Paul Ehrlich. Fundamentó su método en el carácter AAR, utilizando ácido nítrico y coloreando con violeta de genciana o con fucsina, fortificadas por la presencia de anilina disuelta en agua Paul Ehrlich comunicó su descubrimiento el 1 de mayo de 1882
  3. 3. Fundamento  El mecanismo de la ARR es doble y requiere la interacción química con los ácidos micólicos y glicolípidos y péptidos de la pared celular de las micobacterias con la Fucsina Ac. Micólico  Los ácidos micólicos (complejo Fucsina-Pared) confieren la propiedad de resistir la decoloracíón con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos  La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras, así como aumenta la energía cinética de las moléculas del colorante facilitando su entrada a las bacterias
  4. 4. Control para la coloración de ZN Control positivo: Muestra positiva se le agrega unas gotas de Hipoclorito de Sodio se realizan extendidos cortos se dejan secar y se guardan protegidos de la luz. Control negativo: Extendidos con muestra negativa. Se procesan igual a C+ 04 05 06 C (+) C (-)
  5. 5. Defectos de la coloración Falsos positivos en la coloración de ZN • Transferencia de bacilos de una lámina a otra. • Precipitados de colorante no filtrados. • Decoloración deficiente. • Láminas reutilizadas. • Error administrativo Falsos negativos en la coloración de ZN • Toma, transporte, conservación inadecuada de las baciloscopias. • Muestra insuficiente en el extendido. • Técnica de coloración incorrecta. • Observación microscópica inadecuada. • Error administrativo
  6. 6. Procedimiento Aplicar la Fucsina Fenicada Caliente suavemente hasta que se inicien vapores por 5 minutos Deje enfriar y lave suavemente con agua Lave suavemente con agua y deje secar Cubra con azul de metileno por 2 minutos o estandarice el tiempo Lave suavemente con agua Cubra con alcohól ácido al 3% V/V por 1 minuto o mas si es necesario. No exceder 2 minutos.

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