2. RNA’s d’Interferència Molècules de 20-25 nt Precursors Llargs

4. siRNA Precursor: llargues molècules de dsRNA Dicer: RNAsa Tipus III. Degrada dsRNA a siRNA RISC: RNA-induced-silencing complex . Riboproteïna que identifica mRNA en seqüencia complementària

5. RISC El complex RISC està format per l’RNAi i per diverses proteïnes. La més important és Argonauta (Ago) . Es troba en unes zones del citoplasma d’alta degradació de l’mRNA anomenades cossos P . Aquestes regions es creu que també podrien estar implicades en la sintesi de miRNA Si el RISC es troba unit a un siRNA, indueix a la degradació de l’mRNA.

6. miRNA Precursor: pri-microRNA (tipus de dsRNA) RNAses: Drosha, DGCR8 i Dicer Complex silenciador: miRISC/miRNP similars a siRISC

7. Processament de miRNA

8. Processament de miRNA 1. Transcrició de pri-miRNA's (RNApol II) 2. Formació de bucles al pri-miRNA 3. Processament al nucli: - Formació de pri-miRNA més petits (Drosha i DGR8) 4. Transport nucli-citoplasma (Exp.5 i RanGTP) 5. Processament al citoplasma: - Tall del bucle de pri-miRNA (Dicer) - Dúplex de RNA: miRNA/miRNA* 6. Acoplament de miRISC: degrada miRNA*, incorpora miRNA 7. Complex RISC-miRNA: - Reconeixement de regions diana al mRNA (miRNA) - Bloqueig de la traducció(RISC)

9. Inhibició traduccional Els miRNA es caracteritzen per aparellament imperfecte amb la regió diana del mRNA, després d'aquest reconeixement reprimeixen l'expressió gènica (Knock down). Aquest procés ,també, es dóna als cossos P La inhibició transcripcional es pot dur a terme de 3 formes: -Repressió de la traducció abans que s'inicii -Inhibició de la traducció un cop iniciada -Desestabilització del RNA per deadenilació

10. http://www.youtube.com/watch?v=kCxQdXX0Dbk

11. Malatia d’Alzheimer

12. Aplicació de siRNA contra BACE1 Raó principal: L’estructura característica del lloc actiu de BACE1 dificulta la possible creació de petites molècules inhibidores pel lloc actiu. Un cop vist que pels mètodes tradicionals no era viable, és va optar per l’alternativa d’utilitzar siRNA (lenti-siRNA, que actuen en cèl·lules no divisories com les neurones) contra BACE1. La idea és que el siRNA s’uneixi al mRNA que codifica per BACE1, inhibint així l’expressió d’aquest. Ja que un cop unit el siRNA al mRNA causa el seu bloqueig i la seva degradació.

16. Experiment 3 Immunoreactivitat de APP i CTF a l’hipocamp (a): en transgènics APP tractats amb lenti-siGlut4, APP i CTF molt alts en comparació als tractats amb lenti-siBACE1-6. Els no transgènics presenten nivells normals ELISA A β 1-42 (b): en transgènics APP tractats amb lenti-siGlut4, els nivells de A β 1-42 són molt més alts que els no transgènics, mentres que els transgènics APP tractats amb lenti-BACE1-6 presenten nivells una mica més propers als no transgènics