A R T Í C U L O S


                                                                                                      ...
A R T Í C U L O S


        José Luis Cortés. Nuevas Perspectivas...
12
     INTRODUCCIÓN

     La creación de bancos de l...
A R T Í C U L O S


                                                                                              Diciembr...
A R T Í C U L O S


       José Luis Cortés. Nuevas Perspectivas...
14

     formará parte del Banco de Células           ...
Próxima SlideShare
Cargando en…5
×

Nuevas perspectivas para el embriólogo

474 visualizaciones

Publicado el

Un banco de líneas celulares troncales tiene como funciones la elaboración, el almacenamiento, la conservación y la gestión de líneas celulares de diverso tipo, de acuerdo con las normas y estándares que determina la legislación nacional e internacional. Dentro de los tipos de líneas celulares se encuentran las de origen embrionario, obtenidas a partir de la masa celular interna de blastocistos procedentes de preembriones sobrantes de ciclos de FIV, donde la figura de un embriólogo que manipule los preembriones es necesaria. Para poder definir aspectos en cuanto al perfil de este tipo de profesional, debemos buscar las similitudes con los centros de reproducción asistida. Mediante este trabajo se pretenden describir las funciones de un embriólogo dedicado a la derivación de líneas celulares embrionarias humanas dentro del Banco de Líneas Celulares de Andalucía

Publicado en: Salud y medicina
0 comentarios
0 recomendaciones
Estadísticas
Notas
  • Sé el primero en comentar

  • Sé el primero en recomendar esto

Sin descargas
Visualizaciones
Visualizaciones totales
474
En SlideShare
0
De insertados
0
Número de insertados
2
Acciones
Compartido
0
Descargas
8
Comentarios
0
Recomendaciones
0
Insertados 0
No insertados

No hay notas en la diapositiva.

Nuevas perspectivas para el embriólogo

  1. 1. A R T Í C U L O S Diciembre 2006 Vol. 11 • Nº2 11 NUEVAS PERSPECTIVAS PARA EL EMBRIÓLOGO: PAPEL EN EL BANCO DE LÍNEAS CELULARES DE ANDALUCÍA (NODO CENTRAL BANCO NACIONAL DE LÍNEAS CELULARES) New perspectives for the embryologist: role in the Andalusian Stem Cell Bank (Spanish Central Node) José Luis Cortés*, Fernando Cobo, Carmen Cabrera, Angela Helen Barnie, Purificación Catalina, Ana Nieto, Rosa Montes, Alicia Barroso, Ángel Concha Banco de Líneas Celulares de Andalucía (Nodo Central Banco Nacional de Líneas Celulares). * Banco de Líneas Celulares de Andalucía. Hospital Universitario Virgen de las Nieves. Avda Fuerzas Armadas 2, 18014 Granada. E-mail: josel.cortes.sspa@jun tadeandalucia.es RESUMEN: Un banco de líneas celulares troncales tiene como funciones la elaboración, el almacenamiento, la conservación y la gestión de líneas celulares de diverso tipo, de acuerdo con las normas y estándares que determina la legislación nacional e internacional. Dentro de los tipos de líneas celulares se encuentran las de origen embrionario, obtenidas a partir de la masa celular interna de blastocistos procedentes de preembriones sobrantes de ciclos de FIV, donde la figura de un embriólogo que manipule los preembriones es necesaria. Para poder definir aspectos en cuanto al perfil de este tipo de profesional, debemos buscar las similitudes con los centros de reproducción asistida. Mediante este trabajo se pretenden describir las funciones de un embriólogo dedicado a la derivación de líneas celulares embrionarias humanas dentro del Banco de Líneas Celulares de Andalucía. PALABRAS CLAVE: Banco de líneas celulares troncales, blastocisto, célula troncal embrionaria, embriólogo, FIV, masa celular interna. SUMMARY: The functions of a stem cell bank are the elaboration, storage, conservation and management of all the cell line types, according to national and international regulations currently in force. One of these cell lines is the embryonic stem cell line, which is obtained from the inner cell mass of blastocysts of IVF spare embryos, where the figure of an embryologist who manipulates the embryos is necessary. To be able to define some aspects about the profile of this type of professional, we must look for the similarities with the Assisted Reproduction Centres. A description of the functions of the embryologist who derives human embryonic stem cell lines in the Andalusian Stem Cell Bank has been carried out. KEY WORDS: Stem cell bank, blastocyst, embryonic stem cell, embryologist, IVF, inner cell mass.
  2. 2. A R T Í C U L O S José Luis Cortés. Nuevas Perspectivas... 12 INTRODUCCIÓN La creación de bancos de líneas celu- poder regenerativo de las células tron- ya formado. lares troncales públicos es un hecho cales embrionarias, numerosos cen- reciente en Europa (aproximadamen- tros de investigación han iniciado pro- La ASMR 2004, en la guía para labo- te 5 años), siendo España pionera en yectos de derivación de hESCs, don- ratorios de embriología y andrología, este sentido, con la inauguración del de la figura del embriólogo adquiere enumera los servicios que ofrecen en Banco de Líneas Celulares de otra perspectiva. concreto los laboratorios de embriolo- Andalucía (BLCA), en Granada, el 23 gía clínica: de Enero de 2004. Tanto la derogada Aún así, para poder definir aspectos reforma de la Ley 35/1988 (Ley referentes a la figura del embriólogo - Preparación de los medios de cul 45/2003, de 21 de Noviembre), como en un centro de investigación debe- tivo y control de calidad la actual Ley 14/2006, de 26 de Mayo, mos buscar las “homologías” con el - Identificación de ovocitos mediante sobre Técnicas de Reproducción papel desempeñado en los centros de examen del líquido folicular Asistida, así como la Directiva Europea reproducción asistida. - Evaluación de la madurez y calidad (European Union, 2004), permiten a los ovocitaria bancos de líneas celulares españoles ASEBIR ha publicado en el año - Preparación del esperma: recolec- derivar líneas celulares embrionarias 2006, dentro del programa de ción y análisis del semen, lavado y ca- humanas (siglas inglesas hESCs hu- Cuadernos de Embriología Clínica, unas pacitación espermática man embryonic stem cells) a partir de Recomendaciones sobre Recursos - Inseminación de los ovocitos preembriones sobrantes de ciclos de Humanos y Físicos para el Laboratorio - Determinación de la fertilización FIV, siempre bajo el consentimiento in- de Reproducción Asistida Humana. En y evaluación de la calidad del zigoto formado de los progenitores. estas recomendaciones, el embriólogo - Cultivo embrionario y evolución sería el encargado de tomar las decisio- de la calidad embrionaria Algo novedoso en la Ley es la elimi- - Transferencia embrionaria nes clínicas dentro del laboratorio de nación de las diferencias en la consi- - Crioconservación, almacenaje y acuerdo con los protocolos estableci- deración de los preembriones crio- descongelación de esperma, ovocitos dos, y realizaría la mayor parte de la conservados con anterioridad a la en- y embriones labor asistencial del laboratorio de an- trada en vigor de la Ley 45/2003, y los - Micromanipulación de ovocitos drología y embriología. que pudieran generarse posterior- humanos y/o embriones mente, en cuanto a sus posibles des- Respecto a la formación del embrió- tinos, siempre supeditados a la volun- Es obvio que en los centros de inves- logo, éste deberá haber obtenido el tigación en los que se deriven hESCs, la tad de los progenitores. Es decir, cual- grado de Licenciado en Ciencias función del embriólogo será diferente a quier preembrión crioconservado, sea Biomédicas, como hemos expuesto las descritas anteriormente, pero pen- cual fuere su tiempo de crioconserva- anteriormente, poseer conocimientos samos que la persona encargada de de- ción, podría ser utilizado para fines de de fisiología humana, endocrinología rivar estas líneas sí debe de haber ad- investigación siempre y cuando los reproductiva, genética, técnicas de la- quirido anteriormente una amplia expe- progenitores firmen el consentimiento boratorio de andrología y embriología, riencia en este campo, lo que le otorga- y estén asociados a un proyecto con- y conocimientos de cultivo celular. rá propiedad a la hora de manipular los creto que deberán autorizar posterior- Además deberá poseer una experien- preembriones destinados a generar una mente los Comités Éticos correspon- cia de al menos 2 años y acreditar la línea celular. dientes. realización de 100 ciclos de FIV con ICSI y 200 preparaciones de semen De esta manera, las funciones del pro- PERFIL Y FUNCIONES DEL para inseminación artificial, supervi- fesional responsable del Área de EMBRIÓLOGO sados por el coordinador del laborato- Embriología dentro del BLCA son rio en cuestión, o por otro embriólogo (Figura 1): Aunque no es aún un título oficial, el embriólogo es aquel Licenciado en Ciencias Biomédicas (Medicina, Veterinaria, Farmacia, Biología o Química) con experiencia en Biología de la Reproducción. Según el R.D. 413/1996, de 1 de Marzo, para que un centro esté autorizado en la aplicación de las técnicas de reproducción asisti- da deberá estar dotado de una perso- na que cumpla los requisitos anterio- res. Hasta ahora, la figura del embrió- logo ha estado siempre relacionada con las clínicas de reproducción asis- tida, pero con el descubrimiento del
  3. 3. A R T Í C U L O S Diciembre 2006 Vol. 11 • Nº2 13 - Descongelación de preembriones rios métodos que consisten en el Medical Research (ICMR-DBT, crioconservados. Como los preem- aislamiento de la MCI y la elimina- 2006) expone que el profesional briones provienen de distintos cen- ción de las células del trofoectoder- que realice el tratamiento de fertili- tros, es competencia de esta área mo de los blastocistos. En nuestro dad y el investigador que derive la el conocimiento de todos los proto- centro hemos experimentado dos línea celular o que trabaje con ellas colos de congelación/descongela- métodos para realizar el aislamiento no sean la misma persona. Además ción utilizados para optimizar los de la MCI dependiendo de la cali- explica que la decisión sobre el des- resultados en cuanto a la obtención dad blastocitaria. Por un lado, un tino de los preembriones debe estar de hESCs. método mecánico, bien por micro- libre de la influencia de los investi- manipulación o por empleo del di- gadores que podrían alentar a los -Clasificación de preembriones sector láser, cuando los blastocistos progenitores hacia su uso con fines crioconservados descongelados, si- son de buena calidad con una MCI de investigación. guiendo criterios morfológicos bastante distinguible y con tamaño (Calderón et al., 2002): adecuado. En cambio, nosotros pensamos que el embriólogo del banco de cé- o Ritmo de división de las blastómeras El empleo del láser es un nuevo lulas troncales sí debe ser parte ac- o Apariencia del citoplasma de las método de aislamiento de la MCI tiva en el proceso de entrevista, ex- blastómeras probado en modelo murino por va- plicación y firma del consentimien- o Contacto entre las blastómeras rios grupos, dando buenas tasas de to informado por parte de la pareja, o Aspecto de la zona pelúcida derivación de líneas celulares em- o la mujer en su caso, estando dis- o Fragmentación de las blastómeras brionarias murinas (mESCs) ponible para realizar las entrevistas o Multinucleación de las blastómeras (Tanaka et al., 2006; Cortés et al., cuando sea necesario, ya que es o Evaluación de la calidad blasto 2006). Consiste en ir aplicando el experto en cuanto a cualquiera de citaria láser a las células del trofoectoder- los destinos propuestos por la Ley mo destruyéndolas, siendo sola- española (Ley 14/2006). Aunque algunos autores no rela- mente las células de la MCI las que cionan la calidad embrionaria y blas- se adhieren a la superficie de culti- El BLCA es un centro multidiscipli- tocitaria con la tasa de obtención de vo elegida (Fibroblastos murinos y nario donde varias áreas interaccio- líneas celulares (Mitalipova et al., humanos, MatrigelTM). nan para una adecuada coordina- 2004), desde nuestro centro pensa- ción, con el objetivo de elaborar, al- mos que esta clasificación sí es im- Para los blastocistos con una pe- macenar, conservar y gestionar to- portante a la hora de elegir el méto- queña o nada visible MCI, utiliza- dos los tipos de líneas celulares, de do de aislamiento de la masa celu- mos el método de cultivo directo del acuerdo a las actuales normativas lar interna (MCI) y posterior deriva- blastocisto sobre la superficie de nacionales e internacionales. Estas ción de la línea celular (Ver abajo). cultivo elegida (Kim et al., 2005). áreas o secciones son las siguientes Así, tanto las células del trofoecto- (Figura 1): Área de calidad; área de - Cultivo y evolución de los preem- dermo, como las de la MCI se ad- trazabilidad; área de embriología; briones hasta estadio de blastocis- hieren a dicha superficie. Pasados área de cultivo celular; área de cito- to, donde se encuentra la MCI, unos días, los dos tipos celulares genética y biología molecular; área compuesta por las células tronca- sufren un crecimiento, y mecánica- de microbiología y área de investi- les, que darán lugar a las hESCs. mente se separa la MCI. Aparte gación. Para evaluar la calidad blastocitaria existe otro método de aislamiento atendemos al modelo propuesto de la MCI mediante inmunocirugía CONCLUSIÓN por el Instituto Cornell (Veeck and (Solter and Knowles, 1975), pero Zaninovic, 2004), donde se valora que está en desuso debido a que los En el BLCA pensamos que existe el grado de expansión del blastocis- medios utilizados contienen produc- una nueva figura de embriólogo in- to, así como el aspecto del trofoecto- tos de origen animal, con el riesgo de vestigador especializado en la ma- dermo y la MCI, quedando estable- contaminación cruzada. nipulación de preembriones huma- cidas tres categorías: nos destinados a generar nuevas - Coordinador entre los centros de re- hESCs. Este embriólogo debe haber o Blastocistos de buena calidad producción y el banco para la perfec- acreditado experiencia previa en con una MCI bastante distingui ta interlocución en la donación de embriología clínica, y debe de estar ble y con tamaño adecuado. preembriones para fines científicos. en contacto con las clínicas de re- o Blastocistos con una pequeña - Coordinador de la labor de obten- producción para la perfecta coordi- pero distinguible MCI. ción de los consentimientos infor- nación en la donación de preem- o Blastocistos de mala calidad con mados. La Guía para la Investigación briones con fines de investigación. una MCI poco definida. y Terapia con Células Troncales pro- Además, el área de embriología al - Derivación de hESCs. Existen va- puesta por la Indian Council of que estará integrado el embriólogo
  4. 4. A R T Í C U L O S José Luis Cortés. Nuevas Perspectivas... 14 formará parte del Banco de Células en blastocistos de ratón para obten- Stem Cells 2003;21:521-526.Real Troncales, con un stock propio de ción de células troncales embriona- Decreto 413/1996, de 1 de marzo, por líneas celulares embrionarias, para rias: cultivo directo vs. láser. IX el que se establecen los requisitos téc- su distribución a centros de investi- Congreso de la Asociación Española nicos y funcionales precisos para la gación que las puedan utilizar para de Bancos de Tejidos; 2006 May 17- autorización y homologación de los investigación básica y futuras apli- 19; Oviedo, España. P. 73-4. centros y servicios sanitarios relacio- caciones clínicas. nados con las técnicas de reproduc- European Union 2004. Directive ción humana asistida. BOE núm 72: AGRADECIMIENTO 2004/23/EC of the European 11256-11260. Parliament and of the Council of 31 Al Dr. José Antonio Castilla por su March 2004 on setting standards of Solter D, Knowles BB . Immunosurgery asesoramiento en la elaboración de quality and safety for the donation, of mouse blastocysts. Proc Natl Acad este artículo. procurement, testing, processing, pre- Sci USA 1975;72:5099-5102. servation, storage, and distribution of BIBLIOGRAFÍA human tissues and cells. Official Tanaka N, Takeuchi T, Neri QV, Sills ES, Journal of the European Union, L Palermo GD. Laser-assisted blastocyst ASEBIR, Recomendaciones sobre recur- 102/48. dissection and subsequent cultivation sos humanos y físicos para el laborato- of embryonic stem cells in a rio de reproducción. Cuadernos de ICMR-DBT. Indian Council of Medical serum/cell free culture system: appli- Embriología Clínica. Ed. Asociación Research. Guidelines for Stem Cell cations and preliminary results in a para el Estudio de la Biología de la Research and Therapy. 2006. murine model. J Transl Med. 2006. In Reproducción, 2006. www.icmr.nic.in. press DOI:10.1186/1479-5876-4-20. ASRM. American Society for Kim HS, Oh SK, Park YB, Anh HJ, Sung Veeck, LL, Zaninovic N. Human blas- Reproductive Medicine. Reviewed gui- KC, Kang MJ, et al. Methods for deriva- tocyst in vitro. En Veeck LL, Zaninovic delines for human embryology and an- tion of human embryonic stem cells. N, editors. An atlas of human blas- drology laboratories. 2004. Stem Cells 2005;23:1228-1233. tocysts. New York:The Parthenon www.asrm.org. Ley 45/2003, de 21 de noviembre, por Publishing Group; 2003. p. 99-137. Calderón G, Prados N, Caligara C, la que se modifica la Ley 35/1988, de Mantuana E, Navarro J, Pellicer A, 22 de noviembre, sobre Técnicas de Figura 1. Funciones del Área de Remohí J. Calidad embrionaria. Reproducción Asistida. BOE núm Embriología dentro del organigrama del Indicadores predictivos de vitalidad. 280:41458-41463. Banco de Líneas Celulares de En: Remohí J, Pellicer A, Simón C, Andalucía. Navarro J, editors. Reproducción Ley 14/2006, de 26 de mayo, sobre Humana. 2º ed. Madrid: McGraw-Hill- Técnicas de Reproducción Humana Interamericana de España; 2002. p. Asistida. BOE núm 126: 19947-19956. 463-468. Cortés JL, Cobo F, Catalina P, Cabrera Mitalipova M, Calhoum J, Shin S, CM, Nieto A, Montes RM, Sánchez L, Wininger D, Schulz T, Noggle S, et al. et al. Comparación de dos métodos de Human Embryonic Stem Cell Lines aislamiento de la masa celular interna derived from discarded embryos.

×