Células de mamíferos

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Células de mamíferos

  1. 1. Células de Mamíferos ( CHO, BHK, COS)
  2. 2. Aplicaciones Ensayos funcionales in vivo Interaccion entre proteinas Generacion de anticuerpos Líneas celulares CHO ( ovario de hamster chino) COS ( BHK ( riñón de hamster bebe)
  3. 3. • En domesticación desarrollaron enfermedades degenerativas, debido a su estrecho parentesco entre si. • Bajo número de cromosomas (2n=22) • Dr. Theodore T. Puck ( aisló ovario y estableció una nueva línea celular) CHO ( chinese hamster ovary)
  4. 4. Vectores utilizados • Vectores de DNA viral. • Plásmidos con secuencias de DNA viral. Entre los DNA virales escogidos:SV40 , adenovirus, papilomavir us.
  5. 5. VECTOR VIRAL
  6. 6. Estrategia para el desarrollo línea de células CHO
  7. 7. Estrategia para el desarrollo línea de células CHO
  8. 8. COS ( green monkey kidney) • Las células COS son células de simio derivada de la línea celular CV-1 de la que manifiesta en cultivo permanentemente, transformadas en proteínas SV40 defectivo en el origen de replicación. • Estas proteínas de SV40 promueve la replicación reiterada del vector. • Las células COS transfectada mueren al cabo de 3-4 días posiblemente por una sobrecarga de DNA vector epidemico que resulta toxico.
  9. 9. • Son monocapas de fibroblastos de riñón de hámster . • La línea original se derivó de los riñones de cinco hámster de sexo no determinado, en 1961. • Características beneficiosas: rápido crecimiento, pases limitados y alta eficiencia. • Es susceptibles a los virus de la rabia, herpes simple, rubeola, estomatitis vesicular, fiebre aftosa. BHK ( baby hamster kidney)
  10. 10. Ventajas • Generar proteínas con un plegado correcto y con modificaciones post traduccionales (MPT) idénticas a las proteínas endógenas. • Este sistema es también perfectamente adecuado para la producción de anticuerpos, proteínas para su uso como estándar en el ELISA o la espectrometría de masas.
  11. 11. Desventajas • Rendimiento de producción más bajo que otros sistemas eucariotas, una tasa de crecimiento lento y un coste más alto, debido a la necesidad de medios de cultivo complejos. • Aun cuando la capacidad de la células CHO para expresar glicoproteínas es alta, estas células carecen de enzimas que permiten la glicosilación terminal de proteínas humanas. • Esta líneas celulares ( tumorales ) pueden contener retrovirus. • Son vulnerables a la contaminación viral, proveniente del medio suero fetal bovino. Actualmente algunos no contienen el suero fetal.
  12. 12. Gracias

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