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2011                                                                 Poster 11
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    GRADIENT ALBUMINE SÉRUM-
  ASCITES ET CHOLESTÉROL DANS
  LE DIAGNOSTIC DIFFÉRENTIEL DES
             ASCITES
Fatoumata Koné1, Angèle Edjème -Aké 1,2 , Mireille Tré-Yavo3, Mari eLaure Hauhouot -
Attounbgré 1, AyaThérèse N’dri-Yoman 3, 4, Dagui Monnet1

1- Laboratoire de Biochimie, UFR Sciences Pharmaceutiques et Biologiques, Université
de Cocody, Abidjan, Côte d’Ivoire.
2- Laboratoire de Biochimie : Institut Pasteur, Côte d’Ivoire.
3- Laboratoire de cytologie, UFR Sciences Médicales, Université de Cocody , Abidjan,
Côte d’Ivoire
4- Service d’Hépato-Gastro-Entérologie, CHU de Yopougon, Abidjan, Côte d’Ivoire


                                                                                   1
2011     2011                 Présentation générale / introduction


 Ascite = épanchement liquidien dans la cavité abdominale à physiopathologie variable en fonction
 de l’étiologie.
  Diagnostic clinique assez aisé, cependant diagnostic étiologique parfois difficile nécessitant alors
 des examens paracliniques notamment biochimiques.
 En Côte d’Ivoire, le test de Rivalta et la détermination des protéines totales encore utilisées pour
 classer les ascites en transsudats et exsudats mais cette classification est peu pertinente.

 Selon les études antérieures:
 performance diagnostique du gradient albumine sérum ascite (GASA) supérieure à celle de la
 concentration de protéines dans le liquide d’ascite
 utilisation du cholestérol dans le liquide d’ascite pour distinguer les ascites néoplasiques et non
 néoplasiques; or ascites néoplasiques = exsudats suggérant la possibilité de distinguer les ascites
 exsudatives des transudatives grâce au cholestérol dans le liquide d’ascite.

 Objectifs:
 Comparer la valeur diagnostique du GASA et de la concentration de cholestérol par rapport à
 celle du test de Rivalta et de la concentration de protéines respectivement dans la classification
 des ascites selon le concept transsudat-exsudat




                                                                                                          2
2011                       Matériels & Méthodes (1)

                                              Patients
Type: étude transversale
Cadre: services d’hépato-gastro-entérologie des CHU d’Abidjan
SUR 100 PATIENTS RECRUTES 98 RETENUS; DEUX GROUPES DEFINIS:
ASCITE EXSUDATIVE (53%) – ASCITE TRANSUDATIVE (45%)

           Pour chaque patient inclus :
Ponction d’ascite sur deux tubes stériles, l’un pour les examens biochimiques et l’autre pour
l’examen cytologique
Prélèvement de sang veineux en tube sec de 5 ml pour le dosage des protéines totales et de
l’albumine. Après centrifugation sérum reparti en aliquotes de 0,5 ml et conservé à -80 C.

                                              Méthodes
Dosage quantitatif par colorimétrie des protéines totales, de l’albumine et du cholestérol total dans
le liquide d’ascite et/ou dans le sérum respectivement par les méthodes de Biuret, vert de bromo-
crésol et TRINDER; un test de Rivalta également sur les prélèvements du liquide d’ascite .
Une ascite est exsudative (inflammatoire)         Concentration de protéines dans le liquide d’ascite
≥ 30 g/L ou test de Rivalta positif.
 Ascite transudative (non inflammatoire)         Concentration de protéines ≤ 30 g/L ou test de
Rivalta négatif.



                                                                                                         3
2011                        Matériels & Méthodes (2)

Détermination des gradients
 Le gradient albumine sérum ascite (GASA) = Concentration d’albumine (sérum) − Concentration
d’albumine (ascite) en g/L.
 GASA≥ 11 g/L           ascite transudative; GASA< 11 g/L       ascite exsudative
Gradient protéine sérum ascite (GSPA) = Concentration de protéines (sérum) − Concentration de
protéines (ascite) en g/L

Analyse Statistique
Comparaison des variables quantitatives: Student ou Wilcoxon et des variables qualitatives:
Chi2. Seuil de signification: α < 0.05.
Détermination de valeurs seuils, sensibilité et spécificité après analyse de l’aire sous la courbe
ROC (AUROC : Area Under Receiver Operating Characteristic) pour le cholestérol et le GPSA.
Une AUROC ≤ 50% étant considérée non significative.



Logiciel d’analyses statistiques: SAS 9.1 by SAS Institue Inc Cary, NC; analyse des AUROC par
le progiciel MEDCALC version demo 8.2.0.1




                                                                                                      4
2011                                Résultats (1)
Cellularité du liquide d’ascite: Nombre de lymphocytes, globules blancs, polynucléaires
neutrophiles et cellules mésothéliales significativement plus élevées (p <0.0001) chez les patients
souffrant d’une ascite exsudative par rapport à ceux souffrant d’une ascite transudative.

Biochimie du liquide d’ascite:
Concentrations des protéines totales, de cholestérol et d’albumine plus élevées (p < 0.0001) chez
les sujets souffrant d’une ascite exsudatives. GASA et GPSA plus élevés (p = 0.0092) chez les
patients à ascite transudative.
Existence d’une bonne concordance entre le Rivalta et la concentration de protéines totales dans
le liquide d’ascite (PTA) (coefficient kappa= 0,72) soit 88%.
Analyse de valeurs diagnostiques (GASA, Rivalta et PTA) : GASA = une meilleure sensibilité
(86.79%) et une moindre spécificité (40%) ( valeur seuil : 11g/L); De même pour le test de Rivalta
et le PTA (Tableau 1).

Tableau 1: Valeur diagnostique de: GASA, Rivalta et PTA dans la classification des ascites en
exsudats et transsudats
                                                Sensibilité   Spécificité
       Test           VP    VN    FP     FN                                   VPP (%)      VPN(%)
                                                   (%)            (%)

   GASA (n=98)        46    18     27     7       86.79           40           63.01            72

   GASA (n=91)        46    18     20     7       86.79          47.37         63.01            72

Test Rivalta (n=98)   46    23     22    12       77.36          51.11         65.08        65.71

    PTA (n=98)        44    20     25     9       83.02          44.44         63.77        68.97
                                                                                                      5
2011                             Résultats (2)
Sept (7) souffraient d’une ascite causée par une insuffisance rénale; c’est-à dire des transudats
avec GASA bas (<11 g /L) et donc mal classées. En extrayant ces patients de la population d’étude,
les indices de performance du GASA sont ceux de l’effectif n=91(tableau 1).
Recherche de La valeur diagnostique des deux tests (cholestérol total et GPSA) à l’aide des
courbes ROC. Pour chacun des tests, la courbe ROC a fourni un seuil qui a une pertinence
diagnostique (tableau 2). Les meilleurs seuils sont en gras dans le tableau3
Ces courbes ROC ont fourni les valeurs seuil et AUROC à partir desquelles on a pu classer les
ascite. Ainsi, un GPSA ≤ à la valeur du point de césure sur la courbe ROC (=seuil) indique une
ascite exsudative et dans le cas contraire, une ascite transudative.
Une concentration de cholestérol dans le liquide d’ascite > à la valeur du point de césure (0.183
g/L) indique un exsudat et dans le cas contraire un transsudat.

Tableau 2: Sensibilité et spécificité du gradient protéines sérum ascite (GPSA), de la
concentration de cholestérol en fonction de différents points de césures
                    Points de
       Tests                       Sensibilité     Spécificité       VPP            VPN
                     césure
                      ≤ 23.5          54.7            77.8           74.4            59.3
      GPSA
                      ≤ 23.7          56.6            77.8            75             60.3
      (g/L)
                      ≤ 23.8          56.6            75.6           73.2            59.6
                      > 0, 18         64.2            84.4           82.9            66.7
    Cholestérol
                     > 0. 183         64.2            86.7            85             67.2
      (g/L)
                      > 0. 20         62.3            86.7           84.6            66.1
                                                                                                     6
2011                               Résultats (3)
                                           T




Finalement la concentration de cholestérol dans le liquide d’ascite (seuil ≥ 0.183 g/L) a fourni la
meilleure performance diagnostique dans la classification des ascites transudatives et exsudatives
avec une sensibilité de 64.20%, une spécificité de 86.70%, une valeur prédictive positive de 85% et
une valeur prédictive négative de 67.20%, AUROC, 0.79 (p <0.001) (Tableau 2, figure 1).




        Figure1: Courbe ROC de la concentration de cholestérol dans le liquide d’ascite.

                 Test cholesterol. AUROC: 0.79. CI 95%:0.69 -0.86, p < 0.0001
                                                                                                  7
2011                      Discussions / Conclusions
                                             DISCUSSION
Notre étude: classification des liquides d’ascites en exsudats et transudats en déterminant les
indices diagnostics du GASA et du cholestérol dans cette classification.

           Concentrations de protéines, d’albumine et de cholestérol plus élevées dans les ascites
exsudatives que transudatives; pouvant s’expliquer par le rôle de défense du péritoine. GASA et
GPSA plus élevés dans les exsudats. Ainsi GASA: résultats en accord avec la littérature. Mais
capacité du GPSA dans cette classification = très peu documentée ;
           La valeur diagnostique du GASA avec une valeur seuil de 11g/L s’est avérée peu
excellente donc en désaccord à ceux de la littérature. Cette discordance pourrait être due à
l’inclusion de patients ayant une ascite par insuffisance rénale (7,14% de
l’échantillon) contrairement à de nombreux auteurs ; autre raison: le seuil de 11 g/L pourrait être
inadapté pour une classification optimale des liquides d’ascite de notre population d’où la nécessité
d’un nouveau seuil adapté. Nos résultats sont en accord avec ceux de Goran et al. 2003.
Concentration de cholestérol (valeur seuil de 0,183 g/L ): Résultats en accord avec ceux de
Gupta et al. et de PFALZER et al.. Ces résultats confortent notre hypothèse selon laquelle la
concentration de cholestérol dans le liquide d’ascite pourrait servir dans le diagnostic des ascites
exsudatives et transudatives. Cette valeur seuil diffère de celle rapportée par l’étude de PFALZER
et al. (0,60 g/L).

                                            CONCLUSION
1. Forte sensibilité pour le GASA mais avec faible spécificité.
2. Le cholestérol dans le liquide d’ascite a fourni la meilleure performance diagnostique dans la
   classification des ascites en exsudat et transsudat.
3. Cependant, étant donné la bonne sensibilité du GASA, il devrait être associé à ces tests pour
   un meilleur diagnostic différentiel des ascites.
                                                                                                        8

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  • 1. 2011 Poster 11 Biochimie Biochemistry GRADIENT ALBUMINE SÉRUM- ASCITES ET CHOLESTÉROL DANS LE DIAGNOSTIC DIFFÉRENTIEL DES ASCITES Fatoumata Koné1, Angèle Edjème -Aké 1,2 , Mireille Tré-Yavo3, Mari eLaure Hauhouot - Attounbgré 1, AyaThérèse N’dri-Yoman 3, 4, Dagui Monnet1 1- Laboratoire de Biochimie, UFR Sciences Pharmaceutiques et Biologiques, Université de Cocody, Abidjan, Côte d’Ivoire. 2- Laboratoire de Biochimie : Institut Pasteur, Côte d’Ivoire. 3- Laboratoire de cytologie, UFR Sciences Médicales, Université de Cocody , Abidjan, Côte d’Ivoire 4- Service d’Hépato-Gastro-Entérologie, CHU de Yopougon, Abidjan, Côte d’Ivoire 1
  • 2. 2011 2011 Présentation générale / introduction Ascite = épanchement liquidien dans la cavité abdominale à physiopathologie variable en fonction de l’étiologie.  Diagnostic clinique assez aisé, cependant diagnostic étiologique parfois difficile nécessitant alors des examens paracliniques notamment biochimiques. En Côte d’Ivoire, le test de Rivalta et la détermination des protéines totales encore utilisées pour classer les ascites en transsudats et exsudats mais cette classification est peu pertinente. Selon les études antérieures: performance diagnostique du gradient albumine sérum ascite (GASA) supérieure à celle de la concentration de protéines dans le liquide d’ascite utilisation du cholestérol dans le liquide d’ascite pour distinguer les ascites néoplasiques et non néoplasiques; or ascites néoplasiques = exsudats suggérant la possibilité de distinguer les ascites exsudatives des transudatives grâce au cholestérol dans le liquide d’ascite. Objectifs: Comparer la valeur diagnostique du GASA et de la concentration de cholestérol par rapport à celle du test de Rivalta et de la concentration de protéines respectivement dans la classification des ascites selon le concept transsudat-exsudat 2
  • 3. 2011 Matériels & Méthodes (1) Patients Type: étude transversale Cadre: services d’hépato-gastro-entérologie des CHU d’Abidjan SUR 100 PATIENTS RECRUTES 98 RETENUS; DEUX GROUPES DEFINIS: ASCITE EXSUDATIVE (53%) – ASCITE TRANSUDATIVE (45%) Pour chaque patient inclus : Ponction d’ascite sur deux tubes stériles, l’un pour les examens biochimiques et l’autre pour l’examen cytologique Prélèvement de sang veineux en tube sec de 5 ml pour le dosage des protéines totales et de l’albumine. Après centrifugation sérum reparti en aliquotes de 0,5 ml et conservé à -80 C. Méthodes Dosage quantitatif par colorimétrie des protéines totales, de l’albumine et du cholestérol total dans le liquide d’ascite et/ou dans le sérum respectivement par les méthodes de Biuret, vert de bromo- crésol et TRINDER; un test de Rivalta également sur les prélèvements du liquide d’ascite . Une ascite est exsudative (inflammatoire) Concentration de protéines dans le liquide d’ascite ≥ 30 g/L ou test de Rivalta positif. Ascite transudative (non inflammatoire) Concentration de protéines ≤ 30 g/L ou test de Rivalta négatif. 3
  • 4. 2011 Matériels & Méthodes (2) Détermination des gradients Le gradient albumine sérum ascite (GASA) = Concentration d’albumine (sérum) − Concentration d’albumine (ascite) en g/L. GASA≥ 11 g/L ascite transudative; GASA< 11 g/L ascite exsudative Gradient protéine sérum ascite (GSPA) = Concentration de protéines (sérum) − Concentration de protéines (ascite) en g/L Analyse Statistique Comparaison des variables quantitatives: Student ou Wilcoxon et des variables qualitatives: Chi2. Seuil de signification: α < 0.05. Détermination de valeurs seuils, sensibilité et spécificité après analyse de l’aire sous la courbe ROC (AUROC : Area Under Receiver Operating Characteristic) pour le cholestérol et le GPSA. Une AUROC ≤ 50% étant considérée non significative. Logiciel d’analyses statistiques: SAS 9.1 by SAS Institue Inc Cary, NC; analyse des AUROC par le progiciel MEDCALC version demo 8.2.0.1 4
  • 5. 2011 Résultats (1) Cellularité du liquide d’ascite: Nombre de lymphocytes, globules blancs, polynucléaires neutrophiles et cellules mésothéliales significativement plus élevées (p <0.0001) chez les patients souffrant d’une ascite exsudative par rapport à ceux souffrant d’une ascite transudative. Biochimie du liquide d’ascite: Concentrations des protéines totales, de cholestérol et d’albumine plus élevées (p < 0.0001) chez les sujets souffrant d’une ascite exsudatives. GASA et GPSA plus élevés (p = 0.0092) chez les patients à ascite transudative. Existence d’une bonne concordance entre le Rivalta et la concentration de protéines totales dans le liquide d’ascite (PTA) (coefficient kappa= 0,72) soit 88%. Analyse de valeurs diagnostiques (GASA, Rivalta et PTA) : GASA = une meilleure sensibilité (86.79%) et une moindre spécificité (40%) ( valeur seuil : 11g/L); De même pour le test de Rivalta et le PTA (Tableau 1). Tableau 1: Valeur diagnostique de: GASA, Rivalta et PTA dans la classification des ascites en exsudats et transsudats Sensibilité Spécificité Test VP VN FP FN VPP (%) VPN(%) (%) (%) GASA (n=98) 46 18 27 7 86.79 40 63.01 72 GASA (n=91) 46 18 20 7 86.79 47.37 63.01 72 Test Rivalta (n=98) 46 23 22 12 77.36 51.11 65.08 65.71 PTA (n=98) 44 20 25 9 83.02 44.44 63.77 68.97 5
  • 6. 2011 Résultats (2) Sept (7) souffraient d’une ascite causée par une insuffisance rénale; c’est-à dire des transudats avec GASA bas (<11 g /L) et donc mal classées. En extrayant ces patients de la population d’étude, les indices de performance du GASA sont ceux de l’effectif n=91(tableau 1). Recherche de La valeur diagnostique des deux tests (cholestérol total et GPSA) à l’aide des courbes ROC. Pour chacun des tests, la courbe ROC a fourni un seuil qui a une pertinence diagnostique (tableau 2). Les meilleurs seuils sont en gras dans le tableau3 Ces courbes ROC ont fourni les valeurs seuil et AUROC à partir desquelles on a pu classer les ascite. Ainsi, un GPSA ≤ à la valeur du point de césure sur la courbe ROC (=seuil) indique une ascite exsudative et dans le cas contraire, une ascite transudative. Une concentration de cholestérol dans le liquide d’ascite > à la valeur du point de césure (0.183 g/L) indique un exsudat et dans le cas contraire un transsudat. Tableau 2: Sensibilité et spécificité du gradient protéines sérum ascite (GPSA), de la concentration de cholestérol en fonction de différents points de césures Points de Tests Sensibilité Spécificité VPP VPN césure ≤ 23.5 54.7 77.8 74.4 59.3 GPSA ≤ 23.7 56.6 77.8 75 60.3 (g/L) ≤ 23.8 56.6 75.6 73.2 59.6 > 0, 18 64.2 84.4 82.9 66.7 Cholestérol > 0. 183 64.2 86.7 85 67.2 (g/L) > 0. 20 62.3 86.7 84.6 66.1 6
  • 7. 2011 Résultats (3) T Finalement la concentration de cholestérol dans le liquide d’ascite (seuil ≥ 0.183 g/L) a fourni la meilleure performance diagnostique dans la classification des ascites transudatives et exsudatives avec une sensibilité de 64.20%, une spécificité de 86.70%, une valeur prédictive positive de 85% et une valeur prédictive négative de 67.20%, AUROC, 0.79 (p <0.001) (Tableau 2, figure 1). Figure1: Courbe ROC de la concentration de cholestérol dans le liquide d’ascite. Test cholesterol. AUROC: 0.79. CI 95%:0.69 -0.86, p < 0.0001 7
  • 8. 2011 Discussions / Conclusions DISCUSSION Notre étude: classification des liquides d’ascites en exsudats et transudats en déterminant les indices diagnostics du GASA et du cholestérol dans cette classification.  Concentrations de protéines, d’albumine et de cholestérol plus élevées dans les ascites exsudatives que transudatives; pouvant s’expliquer par le rôle de défense du péritoine. GASA et GPSA plus élevés dans les exsudats. Ainsi GASA: résultats en accord avec la littérature. Mais capacité du GPSA dans cette classification = très peu documentée ;  La valeur diagnostique du GASA avec une valeur seuil de 11g/L s’est avérée peu excellente donc en désaccord à ceux de la littérature. Cette discordance pourrait être due à l’inclusion de patients ayant une ascite par insuffisance rénale (7,14% de l’échantillon) contrairement à de nombreux auteurs ; autre raison: le seuil de 11 g/L pourrait être inadapté pour une classification optimale des liquides d’ascite de notre population d’où la nécessité d’un nouveau seuil adapté. Nos résultats sont en accord avec ceux de Goran et al. 2003. Concentration de cholestérol (valeur seuil de 0,183 g/L ): Résultats en accord avec ceux de Gupta et al. et de PFALZER et al.. Ces résultats confortent notre hypothèse selon laquelle la concentration de cholestérol dans le liquide d’ascite pourrait servir dans le diagnostic des ascites exsudatives et transudatives. Cette valeur seuil diffère de celle rapportée par l’étude de PFALZER et al. (0,60 g/L). CONCLUSION 1. Forte sensibilité pour le GASA mais avec faible spécificité. 2. Le cholestérol dans le liquide d’ascite a fourni la meilleure performance diagnostique dans la classification des ascites en exsudat et transsudat. 3. Cependant, étant donné la bonne sensibilité du GASA, il devrait être associé à ces tests pour un meilleur diagnostic différentiel des ascites. 8