Diagnóstico del Distemper Canino Claudia López A., M.V., M.Sc Alejandro Flores A., T.M

1. Diagnóstico del
Distemper Canino
Claudia López A., M.V., M.Sc
Alejandro Flores A., T.M
SIMPOSIO DE ACTUALIZACION EN DISTEMPER 2012

2. • CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS DE LA
ENFERMEDAD Y RESPUESTA INMUNE
• CARACTERÍSTICAS DEL AGENTE
• DIAGNÓSTICO:
• EXAMEN CLÍNICO
• EXÁMENES DE LABORATORIO
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3. Enfermedad viral altamente contagiosa, producida
por un Morbillivirus de la familia Paramyxoviridae,
pantrópico, que genera por lo usual un cuadro
neumoentérico y nervioso.
VIRUS
Tej linfoide
focal
Tej linfoide sistémico
(Desarrollo R.I)
Tractos respiratorio, alimentario,
urogenital
(Signos clínicos)
Encefalitis
Recuperación
0
1 semana
1-2
semanas
2-3
semanas
2-12
semanas
Viremia
Viremia
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4. Exámenes de
Laboratorio
1. HEMATOLOGÍA Y BIOQUÍMICA SANGUÍNEA
 INESPECÍFICOS ¡¡¡¡ Sólo tienen valor para el
monitoreo y el pronóstico de la enfermedad.
• Anemia normocítica –normocrómica,
regenerativa
• La linfopenia absoluta x necrosis del tejido
linfoide.
• Trombocitopenia moderada
Monocitosis relativa o absoluta es el cambio
más constante en el leucograma.
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5. FORMAS DE PRESENTACIÓN
• AGUDA
P.I: 7-14 días
Entre los 3-7 primeros días  fiebre + leucopenia
Segunda fase febril va acompañada de rinitis,
conjuntivitis, anorexia y cuadro neumoentérico
agravado si hay infección secundaria
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6. • SUBAGUDA
Encefalomielitis
• CRÓNICA
Encefalomielitis mulfifocal
Encefalitis crónica del perro viejo
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7. Características del agente
H y N:
Adhesión
F: Fusión de
membranas
IgG
IgM
La eliminación del virus
depende de la capacidad
del SI (Ig) para reconocer
las proteínas de la
envoltura viral,
especialmente H y N
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8. Diagnóstico
• HISTORIA CLÍNICA
• EXAMEN FÍSICO
EXÁMENES DE LABORATORIO
‘ Todos los métodos usados pueden
dar falsos negativos ‘
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9. • Leucocitosis neutrófila con o sin
desviación a la izquierda, en cuadros con
infección bacteriana secundaria.
• Proteínas totales normales. Pueden
aumentar en cuadros que cursan con
deshidratación (↑ albúminas)
• Las globulinas suelen estar aumentadas
en pacientes inmunocompetentes.
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10. 2.- DETECCIÓN DE ANTÍGENO VIRAL
Las partículas virales (antígenos) se pueden
encontrar en los leucocitos, eritrocitos y
células epiteliales tempranamente en el curso
de la infección, a menudo antes de la
aparición de los signos clínicos.
Luego de la aparición de estos signos, el
antígeno CDV puede desaparecer de la
sangre, conjuntiva y epitelio genital antes de
una semana
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11. La detección de antígenos virales de Distemper
(acúmulos de cápsides intracitoplasmáticas) puede
realizarse mediante métodos serológicos o
citológicos
INMUNOCROMATOGRA
FIA
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12. MICROSCOPÍA DE CUERPOS DE INCLUSIÓN CDV EN
CÉLULAS SANGUÍNEAS Y CONJUNTIVALES
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13. Exámenes de
Laboratorio
2.- SEROLOGÍA
De todos los métodos diagnósticos para
Distemper, el serodiagnóstico es el más
utilizado.
Si bien las pruebas son confiables EL
PROBLEMA SE PRODUCE AL INTERPRETAR
LOS RESULTADOS
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14. La IgM puede ser detectada en perros infectados no
vacunados, entre los 6 y 8 días post infección. La
IgG aparece entre los 10 y 20 días.
la IgM en perros infectados persiste por 5 semanas
a 3 meses dependiendo de la cepa y la respuesta
del huésped. En perros vacunados la IgM
persiste por aprox. 3 semanas.
La IgG se produce en forma local en SNC en
perros con encefalitis
Ningún examen serológico en la actualidad
permite discernir entre los anticuerpos
maternales, vaccinales y por infección
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15. 0 5 10 15
0
80
160
240
320
400
480
560
640
720
Niveles de anticuerpos anti-CDV post vacunación (Warner T. et al)
Ac IgG
MATERNOS
Ac IgG
Ac IgM
Días post vacunación
Títulos aproximados (1:)
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16. INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA
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17. [Ac]
Ag- CDV purificado
Control positivo Formación del complejo
[Ag CDV]-[Ac CDV]
FA
Conjugado marcado anti IgM ó IgG
canino
FA
Unión del conjugado anti IgM
ó IgG canino
FA
Reacción enzimática de color
ELISA EN FASE SÓLIDA
(INMUNOCOMB)
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18. La reacción coloreada positiva en la fase sólida
puede cuantificarse, comparando la intensidad
del color de la reacción en una escala cromática
incluida en el kit (Comb Scale) e interpolando en el
gráfico adjunto para estimar los títulos de
anticuerpos anti-CDV.
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19. Escala de
valor
Resultado
¿Previamente
Vacunado?
Interpretación
0 Negativo Sí o No
No hubo respuesta humoral (anticuerpos).
Puede indicar estado agudo de la infección.
Retestear en 10-14 días, si el perro sobrevive.
1-2
Levemente
positivo
Sí
No
Titulo de anticuerpos no protector; retestear en
10-14 días. Poca respuesta humoral a la
infección o vacunación. Puede perdurar el
título en perros maduros.
Poca respuesta humoral a la infección o
puede haber anticuerpos maternales en
cachorros de no mas de 4 meses.
3-4 o Mayor
Medio-alto
positivo
Sí
No
Protector – alto titulo protector de anticuerpos.
Respuesta a la vacunación o infección.
Respuesta a la infección.
INTERPRETACIÓN DE
RESULTADOS
IgG (+) en FCE permite establecer un
diagnóstico definitivo  los Ac. se producen in situ
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20. 3.- DIAGNÓSTICO MOLECULAR
Reación de la Polimerasa en Cadena por
transcripción reversa (RT-PCR)  método
diagnóstico antemortem, altamente sensible y
específico, temprano y seguro
Utiliza muestras de sangre, suero y fluido
cerebroespinal, independiente de los hallazgos
clínicos, histopatológicos; de los títulos de
anticuerpos y de la distribución del antígeno
viral, en casos agudos y crónicos.
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21. Generalmente se amplifican fragmentos del
gen que codifica la nucleoproteina (NP), una
región conservada dentro del genoma viral.
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22. MUESTRA: SANGRE CON EDTA >
0,7 mL
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23. SIMPOSIO
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24. ELECTROFORESIS EN GEL DE AGAROSA
(CDV 287 pb)
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25. En animales enfermos, CDV se excreta por la
orina hasta por 50 días post-infección
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26. Toma de muestra para PCR según
los síntomas.
Síntomas Muestra a analizar
Fiebre (Viremia) Sangre (EDTA) o Suero
Conjuntivitis
Hisopado o escobillado
conjuntival
Rinitis con catarro Escobillado nasal
Problemas
neurológicos LCR
Problemas digestivos Heces
Traqueo bronquitis, tos,
bronconeumopatía Secreciones respiratorias
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27. Exámenes de
Laboratorio
4.- INMUNOHISTOQUÍMICA
Técnica que se aplica en tejidos. Se basa en la
detección del antígeno viral mediante un sistema
especializado de inmunocomplejos
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28. Técnica de
Inmunohistoquímica
Ac. Primario Anti CDV Ac. Secundario
Biotinilado
Complejo Streptavidina-
Peroxidasa
Diaminobenzidina
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29. SIMPOSIO
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30. SIMPOSIO
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SIMPOSIO
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31. SIMPOSIO
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32. SIMPOSIO
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33. MUESTRAS LABORATORIO DE PATOLOGÍA
• PULMÓN
• HÍGADO
• LINFONÓDULOS
• CEREBRO
• VEJIGA
• BAZO
• PIEL
• INTESTINO
Encefalitis desmielinizante no
supurativa
Cuerpos de Inclusión
intracitoplasmáticos o
intranucleares eosinofílicos
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34. DISTEMPERSIMPOSIO
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35. Diagnóstico del
Distemper Canino
Claudia López A., M.V., M.Sc
Alejandro Flores A., T.M
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