El documento describe diferentes métodos para evaluar la susceptibilidad antimicrobiana, incluyendo el método de difusión de discos de Kirby-Bauer, el método Epsilon-test (E-test), y el método de dilución en líquido o en agar. El método de Kirby-Bauer es el más utilizado debido a su practicidad, sencillez y capacidad de analizar múltiples antibióticos al mismo tiempo, aunque sólo proporciona resultados cualitativos. El método de dilución es el patrón de oro al proporcionar resultados cuant

1. Seminario 4
Objetivos
Objetivos
Estudio de sensibilidad
En el laboratorio se puede estudiar la
susceptibilidad a antimicrobianos que
presentan bacterias aisladas desde una
muestra biológica...
La susceptibilidad a antimicrobianos, junto
con la identidad de la bacteria aislada y
ciertos factores del huésped constituyen las
bases para la elección de una terapia
antimicrobiana adecuada…
Dr. Juan Alberola. Facultad de Medicina i Odontología

2. Seminario 4
Técnicas de valoración antimicrobiana
Método de Difusión en agar
Métodos cualitativos o cuantitativos basados en la
difusión de un antimicrobiano en una placa de agar
Método de difusión en disco. Kirby Bauer
Método Epsilon test (E-test)
Método de Dilución en líquido o en agar
Métodos cuantitativos basados en gradientes de
concentración de un antimicrobiano diluido en
medio líquido o sólido
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3. Seminario 4
Cosmopolita
Sencillez
Reproductibilidad
Fácil
Interpretación
Método de difusión de discos de Kirby-Bauer
Es el método más usado…
Es práctico y sencillo de realizar
Permite analizar un gran número de antibióticos al
mismo tiempo y bajo las mismas condiciones…
Entrega un resultado cualitativo… (bacteria sensible
o resistente)
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4. Seminario 4
Método de difusión de discos de Kirby-Bauer
Utiliza pequeños discos impregnados con antibióticos
Nombre del Antibiótico
Disco
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5. Seminario 4
Método de difusión de discos de Kirby-Bauer
Código: ID del Antibiótico
Concentración del
antibiótico en Unidades o
en microgramos μg
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6. Seminario 4
Epsilon-test (E-test)
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7. Seminario 4
Objetivos
Objetivos
Método de difusión de discos de Kirby-Bauer
Estos discos se colocan en la superficie de la placa de
agar de Mueller Hinton inoculado, y se incuban a 37º C
durante 24 horas.
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8. Seminario 4
Método de difusión de discos de Kirby-Bauer
Bacterial growth
incubation
Zone of inhibition
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9. Seminario 4
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10. Seminario 4
Método de difusión de discos de Kirby-Bauer
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11. Seminario 4
Método de dilución en líquido o en agar
Objetivos
Gold standar
Cuantitativo CMI
Complejo
Técnica de referencia en la mayoría de los estudios
clínicos de susceptibilidad a antimicrobianos.
Entrega un resultado cuantitativo, ya que permite
determinar la concentración inhibitoria mínima (CIM).
Método complejo y de alto coste.
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12. Seminario 4
Objetivos
Método de dilución en líquido o en agar
Se preparan una serie de tubos de caldo, cada uno que
contiene un medio líquido y una concentración
diferente de un antimicrobiano. Los tubos se inoculan
con el organismo a testar y se incuban durante 16-20
horas a 35 º C.
Después de la incubación, los tubos se examinan
comprobando en cuales de ellos hay turbidez, lo cual
significa crecimiento y por tanto no actividad del
antimicrobiano
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13. Seminario 4
Método de dilución en líquido o en agar
Objetivos
Se puede realizar en medio líquido (dilución en caldo)
o en medio sólido (dilución en agar).
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14. Seminario 4
Método de dilución en líquido o en agar
Se puede realizar en medio líquido (dilución en caldo)
o en medio sólido (dilución en agar).
Dr. Juan Alberola. Facultad de Medicina i Odontología

15. Seminario 4
Epsilon-test (E-test)
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16. Seminario 4
Epsilon-test (E-test)
Objetivos
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17. Seminario 4
Que modifica la actividad antibacteriana “in vivo”
pH del medio de cultivo: algunos antibióticos son activos
a pH ácido (nitrofurantoína) y otros lo son a pH alcalino
(aminoglucósidos).
Componentes del medio de cultivo: pueden ser
antagónicos al antibiótico (extracto de levadura y las
sulfonamidas).
Estabilidad del medicamento: algunos antibióticos se
inactivan a la temperatura de cultivo (clortetraciclina, en
menor grado penicilina
Efecto inóculo: si hay muchas bacterias, la
susceptibilidad es menor y pueden aparecer mutantes
resistentes.
Tiempo de incubación: si es muy breve los m.o. no
mueren; si es muy largo, pueden aparecer mutantes
resistentes o inactivarse el medicamento.
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18. Seminario 4
Beta lactamasa
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19. Seminario 4
Detección genotípica
Genotipo
Fenotipo
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20. Seminario 4
Ventajas
Desventajas
Detección Fenotípica
Informar los resultados en categorías
clínicas, S, I, R
Evaluación del nivel de expresión
La detección de nuevos mecanismos
Bajo coste
Requiere un cultivo puro
Demora mínima: 24-48H. Variable
Problema de detectar ciertos tipos de
resistencia
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21. Seminario 4
Detección genotípica
Ventajas
Se puede realizar a partir de cualquier tipo de muestras, incluso sin
cultivo crecido
Posibilidad de una respuesta rápida <2 horas
Tratamiento precoz con antibióticos
Desventajas
Sólo se detecta lo que se conoce
Respuesta: presencia o ausencia
No detecta el nivel de expresión (excepto la cuantificación de ARNm)
Coste variable pero> método fenotípico
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22. Seminario 4
Interés de la detección genotípica
Demora
Una mejor atención del paciente (aislamiento, tratamiento)
Reducir el coste de los antibióticos, las complicaciones
Las bacterias de crecimiento difícil (M. tuberculosis, H. pylori)
Eficacia
La detección de MRSA, ERV, -Lactamasas
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23. Seminario 4
Detección genotípica
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