Cuándo considerar el uso del desfibrilador automático implantable (DAI) en mi...
Reporte "La membrana y el transporte celular"
1. REPORTE DE PRÁCTICA DE BIOQUIMICA II
NOMBRE DEL ALUMNO (A) _______________________________GRADO Y GPO_____CALIF______
INSTRUCCIONES: LLENAR CON TINTA NEGRA Y LETRA CLARA CADA UNO DE LOS ESPACIOS DE
ACUERDO A LO QUE SE PIDE.
NÚMERO Y NOMBRE DE LA PRÁCTICA:
Práctica Nº 4: La membrana y transporte celular
OBJETIVO:
Tener conocimientos acerca de los componentes de una membrana.
Conocer los factores que puedan afectar y/o alterar la integridad de una membrana
Explicar cómo se da la osmolaridad en los tejidos.
Identificar cuándo la célula se encuentra hipotónica, isotónica e hipotónica
INTRODUCCIÓN:
La membrana celular está formada por una capa doble de fosfolípidos, proteínas y carbohidratos.
Cada fosfolípido está compuesto por glicerol, ácidos grasos y fosfato, que en conjunto crean una
barrera hidrofóbica entre los compartimientos acuosos de la célula. Las proteínas permiten el
paso de moléculas hidrofílicas a través de la membrana, determinan las funciones específicas de
ésta e incluyen bombas, canales, receptores, moléculas de adhesión, transductores de energía y
enzimas. Las proteínas periféricas están asociadas con las superficies, mientras que las integrales
están incrustadas en la membrana y pueden atravesar completamente la capa doble. La función
de los carbohidratos adheridos a las proteínas (glucoproteínas) o a los fosfolípidos (glucolípidos)
es la de adhesión y comunicación intercelular. El colesterol , que es un esteroide (lípido),
determina la fluidez de la membrana.
Para que la célula funcione eficientemente, debe mantenerse en la misma un ambiente estable
conocido como homeostasis . Para mantener este equilibrio existen mecanismos para el
transporte selectivo de materiales hacia el interior o exterior de la célula. Las membranas de la
célula son selectivamente permeables , permitiendo el paso de algunas sustancias o partículas
(moléculas, átomos, o iones), e impidiendo el paso de otras. Esta selectividad se debe a la capa
doble de fosfolípidos de la membrana. La manera en que las moléculas pasan por la membrana
depende en parte de la polaridad de las mismas. Las moléculas hidrofóbicas, o no polares, pasan
con relativa libertad a través de la capa de lípidos, mientras que moléculas hidrofílicas, o polares,
incluyendo el agua, y las moléculas de mayor tamaño, pasan a través de canales formados por
proteínas transportadoras . La regulación del transporte de las moléculas, o la dirección en que se
mueven depende de su gradiente de concentración (diferencia en concentración entre dos
lugares).
2. Las moléculas se mueven constantemente debido a su energía cinética y se esparcen
uniformemente en el espacio disponible. Este movimiento, llamado movimiento browniano , es la
fuerza motriz de la difusión. Difusión se define como el movimiento natural de las partículas de un
área de mayor concentración a un área de menor concentración hasta alcanzar un equilibrio
dinámico , en el cual el movimiento neto de partículas es cero. La difusión no requiere gasto de
energía por parte de la célula y por lo tanto es un movimiento pasivo . Cuando la célula
transporta sustancias en contra de un gradiente de concentración (de un área de menor
concentración a un área de mayor concentración) se requiere energía (ATP) y sucede movimiento
activo .
FUNDAMENTO:
La membrana celular está formada por una capa doble de fosfolípidos, proteínas y carbohidratos.
Cada fosfolípido está compuesto por glicerol, ácidos grasos y fosfato, que en conjunto crean una
barrera hidrofóbica entre los compartimientos acuosos de la célula.
Las membranas de la célula son selectivamente permeables , permitiendo el paso de algunas
sustancias o partículas (moléculas, átomos, o iones), e impidiendo el paso de otras. Esta
selectividad se debe a la capa doble de fosfolípidos de la membrana. La manera en que las
moléculas pasan por la membrana depende en parte de la polaridad de las mismas. Las moléculas
hidrofóbicas, o no polares, pasan con relativa libertad a través de la capa de lípidos, mientras que
moléculas hidrofílicas, o polares, incluyendo el agua, y las moléculas de mayor tamaño, pasan a
través de canales formados por proteínas transportadoras .
Cuando la célula contiene una concentración de solutos mayor que su ambiente externo, se dice
que la célula está en una solución hipotónica , y como consecuencia, el agua entra a la célula
causando que se expanda Si la concentración de solutos es mayor fuera de la célula, se dice que
la célula está en una solución hipertónica ; la célula pierde agua y se encoge. Si las
concentraciones de soluto son iguales en ambos lados de la membrana, se dice que la célula está
en una solución isotónica , donde el movimiento neto es cero.
EQUIPO, MATERIAL Y SUSTANCIAS:
EXPERIMENTO 1.- EFECTO DE LA TEMPERATURA
MATERIAL Y SUSTANCIAS
Gradilla Agua destilada
1 vaso de 100 ml 1 remolacha
1 vaso de 250 ml hielo
6 tubos de 14 x 125
1 vaso de 500 ml
1 horadador
1 termómetro
1 regla
1 nevera
1 navaja o exacto
1 pinza para tubo de ensayo
1 aguja de disección
1 probeta de 25 ml
1 pipeta de 5 ml
1 Perilla
1 marcador de cera
3. 1 envase
1 tripié
1 tela de asbesto
1 mechero Bunsen
EXPERIMENTO 2. EFECTO DE SOLVENTES
MATERIAL Y SUSTANCIAS
2 a 4 huevos de gallina Etanol al 1%, 25%, 50%
1 gradilla Acetona al 1%, 25%, 50%
6 tubos de 14 x 125 10 ml de aceite
1 remolacha
EXPERIMENTO3. DIFUSIÓN
A. DIFUSIÓN DE MOLÉCULAS DE AGUA
MATERIAL Y SUSTANCIAS
2 vasos de precipitados de 100 o 250 ml
1 probeta de 50 ml
Agua fría
Agua a temperatura
ambiente
Colorante vegetal
B. DIFUSIÓN A TRAVÉS DE UNA MEMBRANA SELECTIVAMENTE PERMEABLE (DIÁLISIS)
MATERIAL Y SUSTANCIAS
1 vaso de precipitados de 500 ml Reactivo de Benedict
1 bolsa de diálisis y cordón o banda de goma Solución de Yodo
1 gradilla 25 ml Solución de glucosa
al 30%
Tubos de 13 x 100 25 ml Solución de almidón
al 1%
1 baño maría
1 matraz Erlenmeyer de 125 o 250 ml
1 probeta de 50 ml
1 pinzas para tubo de ensayo
4. PROCEDIMIENTO (HACER DIAGRAMA DE FLUJO):
OBSERVACIONES (HACER DIBUJOS Y EXPLICARLOS EN FORMA ORDENADA):
Experimento 2: Efectos de solventes
Experimento 3: Difusión. A. -"Difusión de moléculas de agua"
Experimento 3: B. "Difusión a través de una membrana selectivamente permeable (diálisis)"
6 tubos de ensaye de 14 x 125 rotulados de
acuerdo a las especificaciones y con los cortes
de la remolacha de 15 mm
bolsa de diálisis con la mitad
de solución de glucosa y la mitad de solución de almidón.
5. Experimento 4: ÓSMOSIS: A) En células animales
RESULTADOS (HACER TABLA Y/O GRÁFICA CON SU INTERPRETACIÓN):
(HOJA ANEXA)
CONCLUSIÓN:
Se concluye con esta práctica la importancia que tiene saber acerca de los componentes de una
membrana así como todos aquellos factores que pueden alterar sus componentes, esto nos
conlleva a conocer que la membrana es permeable y que no permite el paso de cualquier sustancia
o partícula a la célula y la manera en que las moléculas pasan por la membrana depende en parte
de la polaridad de las mismas. Es vital por supuesto mencionar que hay otros puntos que se
aprendieron y se lograron observar en esta práctica, como lo fue: el gradiente de concentración en
donde cuando la célula contiene una concentración de solutos mayor que su ambiente externo, se
dice que la célula está en una solución hipotónica , y como consecuencia, el agua entra a la célula
causando que se expanda. Si la concentración de solutos es mayor fuera de la célula, se dice que la
célula está en una solución hipertónica ; la célula pierde agua y se encoge. Si las concentraciones
de soluto son iguales en ambos lados de la membrana, se dice que la célula está en una solución
isotónica , donde el movimiento neto es cero.
Laminillas en donde se pudieron observar los cambios de los eritrocitos de la
sangre de vaca.
Como se observan los eritrocitos en las laminillas 1-4 en el microscopio.
7. CUESTIONARIOS DE LA PRÁCTICA Nº 4.
EXPERIMENTO 1.- EFECTO DE LA TEMPERATURA
CUESTIONARIO
1. ¿Qué tubo mostró más intensidad de color?
El tubo N°1
2. ¿Qué indica la intensidad del color?
Nos indica que a mayor daño que sufre la membrana, mayor es la cantidad de
pigmento que escapa de la célula.
3. ¿Cómo afectan las temperaturas altas a las membranas celulares?
Las colas de ácidos grasos de la bicapa fosfolípida pueden "disolverse" a altas
temperaturas, lo que significa que se vuelven más fluidas, posibilitando un
mayor movimiento. Esto modifica la permeabilidad de la célula, lo que puede
permitir el ingreso de moléculas que no deberían ingresar y, por ello, dañar a la
célula.
4. ¿Qué le pasa a las células en temperaturas bajas?
Las colas de ácidos grasos presentes en los fosfolípidos se tornan más rígidas
cuando se exponen a temperaturas frías. Esto afecta la fluidez, la permeabilidad
y la capacidad de supervivencia de las células. Cuando las células pierden
fluidez, quedan imposibilitadas de moverse y de crecer. El descenso de la
permeabilidad implica que moléculas vitales no puedan ingresar a las células.
Además, las temperaturas más frías pueden provocar una disminución o el
freno de las reacciones celulares.
5. ¿Por qué se usa remolacha?
Dado que las células de la remolacha poseen almacenada en la vacuola central una gran
cantidad de pigmento rojo llamado betacianina. Cuando ocurre un daño a la membrana
este pigmento puede escapar de la célula. Por lo tanto ante la presencia de un tensor
físico o químico el pigmento escapa de la célula. A mayor daño a la membrana, mayor
cantidad de pigmento escapará de la célula.
EXPERIMENTO 2. EFECTO DE SOLVENTES
1. ¿En qué tubos se observaron reacciones?
En todos los tubos se pudieron observar reacciones.
2. Basado en lo que se observó en los tubos de ensayos (refiriéndose a los tubos 1
- 6 y A - F), ¿cómo afecta la acetona a la membrana?
La acetona es un disolvente orgánico que actúa rompiendo la estructura de la membrana
ya que es más apolar debido al doble enlace, por lo que disolvería más los lípidos.
8. 3. ¿Cómo afecta el etanol a la membrana?
El etanol al igual que otros alcoholes puede actuar en las membranas biológicas
fundamentalmente de 3 formas: l) alterando la fluidez de las membranas, lo que
indirectamente afectaría el funcionamiento de las proteínas como enzimas y canales; 2)
produciendo una deshidratación a nivel de las membranas; 3) interactuando directamente
con las proteínas de la membrana.
4. ¿Qué indican los resultados sobre los componentes de la membrana?
Indican que al haber una alteración en la membrana, sus componentes no podrán cumplir
sus funciones
EXPERIMENTO3. DIFUSIÓN
A. DIFUSIÓN DE MOLÉCULAS DE AGUA
¿Afectó la temperatura la difusión del tinte?
Si afecto ya que la temperatura es directamente proporcional a la velocidad de difusión de
un liquido. A mayor temperatura mayor velocidad en la difusión.
B. DIFUSIÓN A TRAVÉS DE UNA MEMBRANA SELECTIVAMENTE PERMEABLE
(DIÁLISIS)
1. ¿Cuáles son los resultados de este experimento para las pruebas de yodo y de
Benedict? Explique.
La prueba del yodo o el lugol permite identificar la presencia de almidón, con este reactivo
se obtiene un color azul-violeta característico. Si no existe la hidrólisis del almidón la
prueba será positiva.
La prueba de Benedict permite identificar a los azucares reductores. Si existe hidrólisis del
almidón se formará un precipitado rojo ladrillo que indica la presencia de azúcares como
la glucosa y la maltosa
2. ¿Qué indican estos resultados?
La prueba de Benedict identifica azúcares reductores (aquellos que tienen su OH
anomérico libre), como el lactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa. En soluciones
alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solución
alcalina como Cu2O de color rojo-naranja.
3. ¿Qué característica tiene la membrana de diálisis que afecta los resultados?
Su composición química y la capacidad de depuración. Alta permeabilidad y gran
capacidad de absorción.
9. 4. Escribe la reacción química de la prueba de Benedict
Cu+ + OH - → Cu(OH) (precipitado amarillo)
El hidróxido pierde agua
2Cu(OH) → Cu2O (precipitado rojo ladrillo) + H2O
La aparición de un precipitado amarillo, anaranjado, o rojo ladrillo evidencia la
presencia de un azúcar reductor.
EXPERIMENTO 4. ÓSMOSIS: A) EN CÉLULAS ANIMALES
CUESTIONARIO
1. ¿Qué le pasó a las células al entrar en contacto con cada una de las soluciones?
¿Por qué?
Fueron cambiando de aspecto hasta el grado de que ocurriera una eritrocateresis, ya que
cuando la célula contiene una concentración de solutos mayor que su ambiente externo,
se dice que la célula está en una solución hipotónica , y como consecuencia, el agua
entra a la célula causando que se expanda. Si la concentración de solutos es mayor fuera
de la célula, se dice que la célula está en una solución hipertónica ; la célula pierde agua y
se encoge. Si las concentraciones de soluto son iguales en ambos lados de la
membrana, se dice que la célula está en una solución isotónica , donde el movimiento
neto es cero.
2. ¿Cuáles de las soluciones usadas fueron hipotónicas, hipertónicas e isotónicas
para los eritrocitos?
ERITROCITOS
Sol. hipotónica Sacarosa 0.1 y 0.6 M
Sol. hipertónica Sacarosa 0.3 M
Sol. Isotónica Solo la sangre de vaca
3. ¿En qué solución sucedió hemólisis de los eritrocitos y por qué?
En la solución hipotónica ya que éste pasa por un estado de turgencia (se hincha por el
exceso de líquido) y luego esta célula estalla debido a la presión.
4. ¿Qué indican los resultados acerca de la concentración de solutos en el plasma
sanguíneo?
Indican que cuando la célula contiene una concentración de solutos mayor que su
ambiente externo, se dice que la célula está en una solución hipotónica.
Si la concentración de solutos es mayor fuera de la célula, se dice que la célula
está en una solución hipertónica
Si las concentraciones de soluto son iguales en ambos lados de la membrana, se
dice que la célula está en una solución isotónica
10. TABLAS DE LOS EXPERIMENTOS
Experimento 1. Efecto de la temperatura
Tubo Solución Intensidad de color. 1=menos
intenso. 6= más intenso
1 70º C 6
2 55º C 4
3 37º C 3
4 20º C 5
5 En baño del hielo 2
6 En congelador 1
Experimento 2. Efectos de solventes
Tubo Solución Intensidad de color. 1=menos
intenso. 6= más intenso
1 Etanol 1% 3
2 Etanol 25 % 5
3 Etanol 50 % 6
4 Acetona 1% 4
5 Acetona 25 % 2
6 Acetona 50 % 1
Experimento 4. Ósmosis. A) En células animales
ERITROCITOS
Sol. hipotónica Sacarosa 0.1 y 0.6 M
Sol. hipertónica Sacarosa 0.3 M
Sol. Isotónica Solo la sangre de vaca
ERITROCITOS
LAMINILLA OBSERVACIÓN
1 Los eritrocitos se ven normales
2 Los eritrocitos se ven ensanchados
3 Se nota la separación de los eritrocitos
4 Ocurrió una eritrocateresis.