El documento proporciona información sobre diferentes tipos de inmunoterapia, incluyendo inmunización activa e inmunización pasiva. También describe varias vacunas específicas como vacunas contra enfermedades bacterianas como la difteria, la tosferina y la fiebre tifoidea, y vacunas contra enfermedades virales como el sarampión, la rubéola y la poliomielitis. Además, explica brevemente conceptos como la composición de las vacunas, los tipos de vacunas disponibles y sus dosis y esquemas de vac

1. INMUNOTERAPIA
INMUNOTERAPIA
Luz Esmeralda Murcia Urrego
Bacterióloga
Alexandra Galeano Gallego
Bioquímica
PROGRAMA DE ESPECIALIZACION EN MICROBIOLOGIA MEDICA
PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA

2. INMUNOTERAPIA
 Es el tratamiento y cura de enfermedades
mediante la manipulación, activación o
estimulación del sistema inmune.
 Incluye todos los tratamientos dirigidos a
potenciar la inmunidad frente a una
enfermedad

3. INMUNIZACIÓN
La inmunización es el proceso de inducir artificialmente
la inmunidad o proporcionar protección de la
enfermedad.
•Inmunización activa: es el proceso de estimular al
organismo a producir anticuerpos y otras respuestas
inmunes a través de la administración de una vacuna o
toxoide.
•Inmunización Pasiva: Transmisión rápida de resistencia
sin esperar a que se ponga en marcha la respuesta
inmune activa.

4. INMUNIZACION ESPECIFICA
 VACUNACION
 Administración de antígenos.
 ANTICUERPOS MONOCLONALES CONJUGADOS
 Administración de proteínas recombinantes con capacidad de
unión al antígeno, usualmente unidas a fármacos,
quimioterápicos, radioisótopos, etc. pero su uso aún no es
estándar.

5. INMUNOTERAPIA ESPECÍFICA
En el tratamiento de las enfermedades
alérgicas.
Mediante pautas establecidas de exposición a
concentraciones crecientes de alérgeno
Conduce a una insensibilidad de los linfocitos T
específicos de alérgeno.
Dichas células progresivamente dejan de
producir IL-4, IL-5 e IL-13 y pasan a producir
elevados niveles de IL-10 IgE

6. INMUNOTERAPIA ESPECÍFICA

7. La alergia al veneno de abeja
Veneno
Fosfolipasa
A2 (PLA2)
Células T Péptidos Células B
tolerancia al
alérgeno

8. INMUNOTERAPIA INESPECIFICA
 BCG*: Produce una estimulación inespecífica
del sistema retículo endotelial. Carcinomas
de vejiga.
 Citoquinas: disponibles en la actualidad por
tecnología recombinante.
 IFNα Leucemia mieloide crónica, leucemias de
bajo grado, mielomas, melanomas etc.
 IL-2: Hipernefromas.
 NK Linfocitos del propio paciente estimulados
in-vitro y re-infundidos. Melanomas.
*Bacilo de Calmette-Guerin

9. INMUNOTERAPIA ADOPTIVA
 Celular: Administración de células inmunitarias
obtenidas del paciente o de un donante más o
menos específicas frente a tumores.
 NK Linfocitos del propio paciente estimulados in-
vitro y re-infundidos. Melanomas.
 LIT Linfocitos de tumor resecado
 Transplante alogénico.Ingerto contra leucemia.
 Humoral: Administración de sueros o
inmunoglobulinas de pacientes o animales
inmunizados frente a un tumor

10. COMPOSICION DE LAS VACUNAS
 Microorganismos vivos atenuados o inactivados, o
fracciones del mismo.
 Líquido de suspensión, que pueden ser líquidos
salinos o complejos que contienen constituyentes
derivados de sistemas biológicos.
 Preservadores, estabilizadores y antibióticos,
usados para inhibir el crecimiento bacteriano en
cultivos virales o el producto final o para estabilizar
antígenos.
 Adyuvantes, que aumentan la respuesta a los
antígenos inactivados (aluminio, hidróxido o fosfato).

11. VACUNAS
 Inactivadas: Organismos completos inactivados por
calor, formalina, u otros agentes.
BCG, Polio
 Antígenos purificados: Proteína purificada,
antígenos polisacáridos de organismos completos y
toxoides.
Difteria
 Producidos por organismos genéticamente
alterados. Hepatitis B
 Antígenos sintéticos: modificados químicamente,
conjugados a proteínas acarreadoras.
Péptidos

12. VACUNAS
ADN: logran que sea el propio huésped el que
desarrolle el antígeno contra el germen inyectado,
ofreciendo así una protección eficazmente superior
frente al patógeno que invade el organismo.
Toxoides: Son toxinas bacterianas modificadas
producidas en cultivo bacteriano que han perdido su
toxicidad pero retienen habilidad para estimular la
formación de antitoxina. Difteria
Tetanos
Células muertas: La proteína que expresa su
antigenicidad se encuentra inactiva, pero expresa la
proteína que activa el anticuerpo. Tifoidea

13. No. DE VIA Y SITIO DE
ENFERMEDAD VACUNA DOSIS EDAD INTERVALO REFUERZO
DOSIS APLICACION
0.05 a 0.1
Intradérmica
ml. según
Menores de un región
Tuberculosis Antituberculosa BCG casa 1 No tiene No tiene
año supraescapular
productor
izquierda
a
Recién nacido Cuatro 18 meses y 5
Poliomielitis Antipoliomielítica VOP 2 gotas 4 Oral
2,4,6 meses semanas años
Intramuscular
Recién nacido 2 Mínimo 4 región
Hepatitis tipo b Antihepatitis B 1 ml. 3 No tiene
y 6 meses semanas anterolateral del
muslo
0.5 a 1 ml.
según Intramuscular
Difteria, Tosferina Mínimo 4 18 meses y 5
DPT casa 3 2, 4 y 6 meses profunda glúteo
y Tétanos semanas años
productor o muslo
a
Sarampión, 10 años, MEF
Subcutánea
rubéola, paperas y Triple Viral (SRP) 0.5 ml. 1 Un Año No tiene en Post-parto
brazo
rubéola congénita y Post-aborto
1a. dosis
Inicial.
2a. dosis a
las 4
semanas de
la 1a.
Tétanos neonatal Toxoide tetánico/diftérico MEF (10 A 49 3a. dosis a Intramuscular Una al
0.5 ml. 5
y difteria TT o Td años) los 6 meses brazo/glúteo Embarazo
de la 2a.
4a. dosis al
año de la 3a.
5a. dosis al
año de la 4a.
Neunonías y
Meningitis por Contra Haemophilus mínimo 4 Intramuscular
0.5 ml. 3 2, 4 y 6 meses No requiere
Haemophilus Influenzae Tipo B Hib semanas glúteo
Influenzae tipo b
Mayores de 1
año, toda la
población en
áreas de alto y
mediano riesgo.
Subcutanea
Fiebre Amarilla Antiamarílica 0.5 ml. 1 En áreas no Dosis Unica Cada 10 años
brazo
endémicas
deben vacunarse
los que van a a
salir fuera del
país

14. VACUNAS DISPONIBLES PARA ENFERMEDADES INFECCIOSAS DE HUMANOS
ENFERMEDAD TIPO DE VACUNA EMPLEADA
ENFERMEDADES BACTERIANAS
DIFTERIA TOXOIDE
TETANOS TOXOIDE
TOSFERINA BACTERIAS MUERTAS (BORDETELLA PERTUSIS)
FIEBRE TIFOIDEA BACTERIAS MUERTAS (SALMONELLA TYPHI)
FIEBRE PARATIFOIDEA BACTERIAS MUERTAS (SALMONELLA PARATYPHI)
COLERA CELULAS MUERTAS O EXTRACTOS DE CELULAS (VIBIRO CHOLERAE)
PESTE CELULAS MUERTAS O EXTRACTOS DE CELULAS (YERSINIA PESTIS)
TUBERCULOSIS CEPA ATENUADA DE MYCOBACTERIUM TUBERCULOSSIS (BCG)
MENINGITIS POLISACARIDO PURIFICADO DE NEISSERIA MENINGITIDITIS
NEUMONIA BACTERIANA POLISACARIDO PURIFICADO DE STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE
FIEBRE TIFUS BACTERIAS MUERTAS (RTICKETTSIA PROWAZEKII)
ENFERMEDADES VIRALES
VIRUELA CEPA ATENUADA (VACCIMIA)
FIEBRE AMARILLA CEPA ATENUADA
SARAMPION CEPA ATENUADA
PAROTIDITIS CEPA ATENUADA
RUBEOLA CEPA ATENUADA
POLIO CEPA ATENUADA (SABIN) O VIRUS INACTIVO (SALK)
INFLUENZA VIRUS INACTIVADO
RABIA VIRUS INACTIVADO (HUMANO) O VIRUS ATENUADO (PERROS Y OTROS ANIMALES)

15. ENFERMEDAD VACUNA
Existe actualmente una vacuna oral
de bacterias vivas, atenuada por
ingeniería genética, derivada del
serotipo Inaba 569B.
Cólera
Tiene una eficacia del 67-100%.
Debe administrarse con al menos
una hora de ayuno previo y
posterior a la vacunación.

16. ENFERMEDAD VACUNA
La aparición de la vacuna bacteriana a
células enteras en la década del '50,
combinada con las de difteria y
tétanos, disminuyó en forma
Coqueluche (tos
espectacular la incidencia de la
convulsa)
coqueluche.
Actualmente, además de ésta, se ha
desarrollado otra con menos efectos c

17. ENFERMEDAD VACUNA
El agente inmunizante es un toxoide
diftérico obtenido de cultivos de
Corynebacterium diphteriae productor
de toxina, e inactivado con formol
Difteria
(asociado siempre con toxoide
tetánico).
Su eficacia es del 95% y es el único
método de control de la infección

18. ENFERMEDAD VACUNA
A virus vivos atenuados, provoca una
seroconversión del 95% entre los 7 y
21 días, lo que la convierte en una de
Fiebre amarilla las vacunas más eficaces. Se refuerza,
si es necesario, cada 10 años (los
certificados de vacunación
internacionales, tienen esta validez).

19. ENFERMEDAD VACUNA
La vacuna a células enteras muertas, ya no
se utiliza por sus efectos colaterales.
Actualmente existen dos: una con
Fiebre tifoidea polisacáridos capsulares purificados
(antígeno Vi), de administración
parenteral; y Otra oral, que contiene una
cepa mutante atenuada de S.typhi (Ty21a)
En abril del 2001, se conoció el desarrollo de una vacuna
conformada por un polisacárido capsular de la Salmonella typhi
Vi, unido a la exotoxina A de otra bacteria, la Pseudomona
aeruginosa recombinante no tóxica (denominada rEPA).

20. ENFERMEDAD VACUNA
La Organizacion Mundial de la Salud ha
implementado una red de monitoreo de los
virus gripales, en más de 80 países en todo
Gripe o el mundo; esto le permite indicar las cepas
Influenza de los virus en circulación para la
preparación de las vacunas antigripales de
la siguiente temporada, siendo asi más
efectivas.

21. ENFERMEDAD VACUNA
Las primeras vacunas fueron elaboradas
solamente con el polisacárido capsular
purificado. estas no protegían
adecuadamente a los menores de 2 años
(los más susceptibles).
Haemophilus
influenzae b Las vacunas actuales utilizan este
polisacárido (PRP) de la cápsula del bacilo,
conjugado con una proteína transportadora
("carrier": toxoide tetánico, diftérico o de
la membrana del meningococo). Se aplica
en forma intramuscular.

22. ENFERMEDAD VACUNA
En 1976 fue aislada en Australia, una cepa
del virus de hepatitis A, que condujo a la
vacuna. En 1988, comenzaron los ensayos
Hepatitis A
clínicos y su uso formal, se inició en 1991.
Es una vacuna que contiene virus
inactivados.

23. ENFERMEDAD VACUNA
Las vacunas actuales, logradas por
Ingeniería Genética, son lo más efectivo
como prevención: utilizan el antígeno de
superficie del virus B (HBsAg) y se
Hepatitis B producen con ADN recombinante. El gen
es insertado en una levadura que se
reproduce conteniendo el HBsAg. Su
cultivo y posterior purificación determina
una vacuna altamente efectiva.

24. VACUNA CONTRA LA HEPATITIS
B

25. ENFERMEDAD VACUNA
Las vacunas están constituidas por
polisacáridos. Desde 1981 se dispone de
una vacuna combinada para los serogrupos
A, C, Y y W-135.
A Meningococo No se aconseja su aplicación en forma
masiva, a menos que existan riesgos
ciertos de epidemia. Los títulos de
anticuerpos obtenidos luego de la
vacunación descienden rápidamente y
debiera hacerse una revacunación al cabo
de algunos años.

26. ENFERMEDAD VACUNA
Esta vacuna polivalente fue elaborada con
antígenos polisacáridos purificados de la
cápsula de 23 serotipos, responsables del
85 a 90% de las infecciones
neumocóccicas. Provee además,
A Neumococo
protección cruzada con otros serotipos.
Existe desde hace poco tiempo, una nueva
presentación pediátrica, conteniendo siete
serotipos, que puede usarse por debajo
de los dos años.

27. ENFERMEDAD VACUNA
A virus vivos atenuados. En 1948 se
produjo la primer vacuna a virus muertos,
que luego de algunos años fue
Paperas o
desestimada porque generaba corta
Parotiditis
inmunidad. En 1967 se licenció en EE.UU.
urliana
la vacuna usada actualmente, conteniendo
la cepa Jeryl Lynn, cultivada en embrión
de pollo.

28. ENFERMEDAD VACUNA
PVO (Poliovirus Oral): a virus vivos
atenuados de tipo I, II y III, cultivados
en células de riñón de mono. Es conocida
como Sabin oral, haciendo honor al
apellido de quién la desarrolló, el Dr.
Poliomielitis
Albert Sabin.
PVI (Poliovirus Inactivados): también
incluye 3 tipos, pero los PV son cultivados
en células diploides humanas o Vero, e
inactivados con formalina.

29. ENFERMEDAD VACUNA
A virus vivos atenuados, se presenta en
forma aislada o combinada con
antiparotiditis y antisarampionosa.
Ver (Triple viral).
Rubeola
Se comenzó a usar en 1969, con otras
cepas distintas a la actual. La utilizada
desde 1979 a la fecha, contiene la cepa
RA 27/3, obtenida del cultivo de células
diploides humanas.

30. ENFERMEDAD VACUNA
Es una vacuna a virus vivos atenuados. Se
presenta sola o combinada con
antirrubeólica y antiparotiditis (Triple
viral). La presentación combinada sólo con
antirrubeólica se denomina Doble viral.
Sarampión
Aplicada antes de las 72 horas
posteriores a la exposición, previene la
enfermedad.
En la actualidad se está trabajando en
una vacuna en aerosol.

31. ENFERMEDAD VACUNA
Agente inmunizante: está compuesta por
toxoide tetánico inactivado con formol.
Tétanos Esta vacuna, luego de su administración
según calendario en la infancia, mantiene
efecto protector durante 10 años.

32. ENFERMEDAD VACUNA
Es un liofilizado de bacterias vivas
atenuadas, obtenidas de cultivo y
atenuación de bacilos bovinos
(Mycobacterium bovis), cuyo resultado
final es la llamada BCG, por las primeras
Tuberculosis letras que identifican al Bacilo de
Calmette-Guérin.
En la actualidad hay varias líneas de
trabajo en nuevas vacunas. Algunas
derivadas de la BCG o combinadas; y
otras aprovechando el descubrimiento del
genoma del bacilo.

33. ENFERMEDAD VACUNA
A virus vivos atenuados, elaborada con
una cepa atenuada (OKA) y cultivada en
células humanas MRC-5.
Varicela
La vacuna se presenta liofilizada. Una
vez diluida, debe ser aplicada dentro de
los 30 minutos posteriores.

34. VACUNAS DE NUEVA GENERACIÓN
Se basa en la identificación de la proteína o
proteínas de un agente infeccioso capaces de
inducir una respuesta inmune protectiva de
forma semejante a la que induciría el agente
infeccioso completo
Mediante técnicas de ingeniería genética, se
pueden seleccionar los genes correspondientes
clonarlos y expresarlos en diferentes vectores
o eliminarlos mediante una delección selectiva.

35. VACUNAS DE NUEVA GENERACIÓN

36. PROTEÍNAS INACTIVADAS.
Las técnicas moleculares más utilizadas para la
obtención de grandes cantidades de proteínas
antigénicas en la actualidad son:
•La técnica de ADN
recombinante: Vacuna de
subunidades.
•La producción de proteínas
sintéticas: Vacunas
sintéticas.

37. LA TÉCNICA DE ADN RECOMBINANTE
Una vez conocida el
fragmento de ADN y su
secuencia, la proteína de
interés inmunológico, se
aísla el fragmento de ADN
(1), y se inserta en un
plásmido (2). Este plásmido
se introduce en un vector
de expresión (E. coli,
Baculovirus) (3). Algunos
aceptarán el gen y
producirán el
recombinante (4). Otros, la
mayoría, no (5).

38. MECANISMOS DE ACCION DE VACUNAS
Vacunas vivas atenuadas
 Producen una respuesta inmunológica compleja
simulando la infección natural.
 Variedad de antígenos.
 Es de larga duración, posiblemente de por vida.
 Puede ser inhibida por anticuerpos pasivos, ya sea por
la adquisición transplacentaria de la madre o por
recibir productos sanguíneos que contengan
inmunoglobulinas

39. MECANISMOS DE ACCION DE VACUNAS
Vacunas de antígenos inactivados o purificados
 Inducen respuesta únicamente a aquellos
componentes presentes en la vacuna.
 Generalmente, son necesarias dosis múltiples,
usualmente tres o más, para inducir niveles de
anticuerpos satisfactorios que persistan por
periodos largos.
 Las dosis de refuerzo a intervalos más amplios
(diez o más años) son necesarias para asegurar
una protección duradera.

41. VACUNAS ATENUADAS VACUNAS INACTIVADAS
Estimulación CD 4+ y CD 8+ Fundamentalmente CD 4+
CITOCINAS (Interferón) Menos CITOCINAS
MENOR ANTÍGENO MAYOR ANTÍGENO
MENOR ESTABILIDAD MAYOR ESTABILIDAD
ALMACENAMIENTO ALMACENAMIENTO
MENOS SEGURAS MÁS SEGURAS
ADYUVANTES NO CRÍTICOS ADYUVANTES SON CRÍTICOS

42. DETERMINANTES DE LA RESPUESTA
Los determinantes de la inmunogenicidad y respuesta a la
vacuna, incluyen las características de la vacuna y del
hospedero.
 Las dosis vacunales deben ajustarse antes de su
aplicación.
 La ruta de administración.
 El tiempo de administración de la dosis de vacuna.
 Los factores intrínsecos genéticos (polimorfismo del
MHC), edad, debilidad extrema, inmunosupresión, y
algunas enfermedades crónicas, etc.

43. Anticuerpos contra Tumores
C.A Janeway et al. ImmunoBiology (1999)

45. VACUNAS
 ETAPAS PRE CLINICA
 Síntesis y estudios acelulares y celulares.
 Propiedades físico-químicas.
 Efectos sobre sistemas acelulares y celulares.
 Toxicidad aguda
 Dosis incrementadas.
 DL50
 DE50
 Toxicidad subaguda y crónica
 Efectos a largo plazo
(Teratogénicos,mutagénicos, carcinogénicos)

46. ENSAYO PRE-CLINICO
DE INMUNOGENICIDAD
Ratones BALB/c
Hembras
6-7 semanas
100 ratones

47. INMUNIZACION
Ag
Inmunización primaria
Inmunización secundaria
Inmunización in vitro

48. GRUPOS DE TRABAJO
Nº Animales Freund Microesferas Montanide Control
DDC 10 10 10 10
50ug
250ug 10 10 10 10
Polímero 10 10 10 10
50ug
250ug 10 10 10 10
SPf66 10 10 10 10
50ug
250ug 10 10 10 10

49. ENSAYO
Dormir con éter 5 minutos ENSAYOS CELULARES
Criopreservación Sangría por punción ocular ELISPOT
del 80% en DMSO Pipeta Pasteur o capilares
ENSAYOS HUMORALES
Criopreservación
del 10% en Trizol
Disección y perfusión del bazo Citoquinas Citometría
de Flujo
Obtención de 108
Montaje de
Esplenocitos aprox. RT-PCR
ensayos celulares
con 10%
Esplenocitos Linfoproliferación
Citoquinas por ELISA

50. ENSAYO PRE-CLINICO
DE TOXICIDAD
Nacimientos 1ºDosis 2º Dosis 1ºSacrificio 3º Dosis 2ºSacrificio
Semanas
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
Meses
1 2 3 4 5
Pep1 Pep2 Pep3 control
Animales:
Ratones exogénicos ICR,
50%H / 50%M, 21 días de edad,
1 Adyuvante A 20 20 20 20 8-12 grs de peso.
- Cantidad necesaria : 40 (20H /
2 Adyuvante B 20 20 20 20 20M)
- Exclusión máxima : 10%
3 AlOH 20 20 20 20
- Origen: I.N.S.
4 ACF 20 20 20 20

51. VACUNAS
 ETAPA CLINICA
Evaluación del primer contacto del
inmunoterápico en humanos.
 Fase I: Reclutamiento de voluntarios sanos.
 Dosis: DMT.
 Toxicidad: TL.
 Farmacocinética.
 Fase II: Estimación de la actividad clínica de
la droga.
 Actividad.
 Efectos sin comparativos.

52. VACUNAS
 Fase III: Ensayo clínico comparativo.
 Mejor o peor?
 Aprobación.
 Fase IV: Evaluación de nuevas
aplicaciones.
 Dosis en ancianos, pacientes con falla renal
 Farmacovigilancia.

53. PROCESO, DESARROLLO Y APROBACIÓN DE NUEVAS
VACUNAS
ESTUDIOS
CONTROL
PRECLÍNICOS
FASES DE LA INVESTIGACIÓN CLÍNICA NACIONAL
DE APROBADO
DE SALUD
LABORATORIO
PRODUCTO
Y EN ANIMALES
FASE I FASE II FASE III
NUMERO DE VIGILANCIA DE
10-100 100-300 300-3000
INDIVIDUOS INOCUIDAD EN
INOCUIDAD EL CAMPO
REVELA REVELA REVELA
EVENTOS DE EVENTOS DE EVENTOS DE REVISIÓN DE FABRICACION
REACCIONES ALTA FRECUENCIA BAJA LOS ESTUDIOS
INFORME DEL INFORME DEL EN GRAN
INDESEABLES EVALUAR FRECUENCIA MODERADA FRECUENCIA PRODUCTOR DEL
PRODUCTOR ESCALA
INOCUIDAD Y PRODUCTO Y
A LA A LA
ACTIVIDAD LÍMITES DE LIMITES DE DE LA
AUTORIDAD AUTORIDAD
POTENCIA BIOLÓGICA EN CONFIANZA CONFIANZA DOCUMENTACI DISTRIBUCION
NACIONAL DE NACIONAL DE
ANIMALES DE AMPLIOS ESTRECHOS ÓN
SALUD CORRELA- SALUD
LABORATORIO PRESENTADA
----------- ------------ ----------- CIONES
PARA EL
POTENCIA -
REGISTRO
PROPORCIONA EFICACIA EDUCACION DE
PROPORCIONA
LA MAYORIA DE AUTORIDAD USUARIOS
EFICACIA DATOS
LOS DATOS
MÍNIMOS
CRÍTICOS

54. INMUNIZACION ESPECIFICA
 VACUNACION
 Administración de antígenos.
 ANTICUERPOS MONOCLONALES CONJUGADOS
 Administración de proteínas recombinantes con capacidad de
unión al antígeno, usualmente unidas a fármacos,
quimioterápicos, radioisótopos, etc. pero su uso aún no es
estándar.

55. ANTICUERPOS
MONOCLONALES
Cultivo continuo de células fusionadas
secretoras de anticuerpos con especificidad
predefinida.
Köhler, G. Milstein,C. Nature 256 :1 495-7. 1975

58. APLICACIONES
MOLECULAS ASOCIADAS A SUPERFICIE
 Diagnostico de infecciones.
 Diagnóstico e inmunolocalización de tumores.
 Determinación de tipos celulares.
MOLECULAS SOLUBLES
 Determinación y/o cuantificación de proteínas,
hormonas, enzimas medicamentos y drogas entre
otros.

59. Ingeniería de Anticuerpos
♦ Antecedentes
♦ Expresión y Presentación de Anticuerpos
♦ Clonación del Repertorio de Anticuerpos
♦ Ingeniería de Anticuerpos
♦ Perspectivas

60. ADN RECOMBINANTE
Restrictasas
Aislamiento de Genes Clonados
S. Linn, W. Arber. PNAS 59: 1300-1306 (1968)

61. Ciclo de vida del Fago λ
F.R. Blattner et al. Gene, 2: 95-113 (1977)
H. Lodish et al. Molecular Cell Biology, W.H. Feeman Ed. (1999)

62. GENES QUE CODIFICAN LA
MOLECULA DE Ac

63. ANTICUERPOS QUIMERICOS

64. ANTICUERPOS HUMANIZADOS

65. Humanización de Anticuerpos
G.L. Boulianne et al. Nature 312: 643-646 (1984)
P.T. Jones et al. Nature 321: 522-525 (1986)

66. CONSTRUCTOS DE ANTICUERPOS
RECOMBINANTES

67. Constructos de Anticuerpos Recombinantes

70. Expresión y Presentación de Anticuerpos
Expresión de Anticuerpos
Sistemas de Presentación

71. Expresión en
E. coli
Expresión de Fragmentos Fab
VH - CH -S-S- CL - VL
Expresión de Fragmentos scFV
VH (Gly4Ser)3 VL
M. Better, et al. Science 240: 1041-1043 (1988)
A. Skerra, A. Pluckthun. Science 240: 1038-1041 (1988)

72. SISTEMAS DE EXPRESION
Expresión en Hongos
Expresión en Levaduras
Expresión en Células COS
Expresión en Células CHO
Expresión en Animales transgénicos

73. Expresión en Plantas
Producción a bajo costo
Producción a gran escala
Correcto ensamblaje
Seguridad
Menor costo de capitalización
R.T. Fraley et al. PNAS 80: 4803-4807 (1983)
J.W. Larrick et al. Res. Immunol. 149: 603-608 (1998)

74. PLANTIBODIES
A. Hiatt et al. Nature 342: 76-78 (1989)

75. Expresión y Presentación de Anticuerpos
Expresión de Anticuerpos
Sistemas de Presentación

76. Presentación en Fagos
G.P. Smith, Science 228: 1315-1317 (1985)
J. McCafferty et al. Nature 348: 552-554 (1990)

77. Plasmid with DNA insert

78. Presentación en Fagos
H. de Haard et al. Advance Drug Delivery Reviews 31: 5-31 (1998)

79. Imitando al Sistema Inmune !

80. RESUMIENDO
Los genes de anticuerpos se pueden clonar
y expresar en diferentes sistemas
Presentación en Fagos: sistema efectivo para
obtención de Fragmentos de Anticuerpos

81. Para recordar…..
Anticuerpos Monoclonales Murinos
Anticuerpos Quiméricos
Anticuerpos Humanizados
Anticuerpos de Librerías de Fagos
Anticuerpos Transgénicos

82. Perspectivas

83. AcMo anti - β tubulina

84. AcMo anti-FNTα

85. INTRABODIES

89. GRACIAS