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Restriction
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Notas del editor
- 核酸 的構成序列中，有一種特殊鹼基序列，其鹼基的排列是前後互補 ( 如 GAATTC) ，稱之為 palindrome ；此字是文學上的用字，文句可以自由由前面向後念，或由後面向前面念者稱之 ( 如 madam) 。 有一大類酵素，可以辨認核酸序列上的這種特殊構造，並且予以水解，統稱為 限制脢 (restriction enzyme) ；這是因為含有某種限制脢的大腸菌，會限制某些入侵的病毒攻擊。 天字第一號的限制脢為 Eco RI ，是從大腸桿菌分離出來的，把 GAATTC 序列不對稱地切開，切口會形成 sticky ends (cohesive ends) 。 具有相同 sticky ends 的核酸片段，可以互相準確地黏在一起，在基因重組技術上有很大貢獻。
- 因為 限制脢可以辨認核酸序列上的特定序列，因此對某段固定的核酸，每次用相同限制脢所切的位置是固定的，所得到的大小片段也都是恆定的，這些片段可用電泳分離之，稱為限制脢圖譜。 當然，使用不同的限制脢會切在不同的地方，因此 A, B 兩種限制脢所切得的電泳圖譜也會不同。 若 同時 使用這兩種限制脢，則由所得到的圖譜，可推出這兩種限制脢在該段核酸上的切點位置。 例如上面的兩種限制脢分別切出 2 + 8 (A) 以及 3 + 7 (B) 兩種圖譜，合起來都是 10 kb ，對其切點的預測有兩種可能；但經由混合水解所得到的 2 + 3 + 5 片段，可以推出兩個限制脢切點之間相隔 5 kb ，若不做混合水解則無法得知。
- 限制脢 所切出來的 sticky ends ，可以與另一相同的 sticky end 相連結，再用 DNA ligase 連結脢把各股接好，這使得 DNA 的剪接非常精準有效，是基因操作的最基本工具之一。任何兩個鈍端 (blunt ends) 也可相互連接，而且沒有專一性，但其連結效率非常低。 這些工具提供了在核酸序列上的精確剪接動作，可以像編輯錄音帶一樣，把所要的核酸片段剪出，然後接到另一段核酸上，開啟了基因操作的大門，科學家也快樂地打開了潘多拉的盒子。