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Universidad de Chile
 Facultad de Medicina
 Escuela de Tecnología Médica




Tinción May-Grünwald/Giemsa
      en frotis sanguíneo



                   Maximiliano Martínez Ilabaca
Frotis sanguíneo
• El Frotis sanguíneo es la herramienta básica en todos los
  laboratorios de Hematología para analizar las
  características de los elementos sanguíneos del
  paciente, colaborando en la descripción de su estado de
  salud.

• Para estudiar las características microscópicas de la sangre
  debe extenderse en un portaobjeto y luego teñirse, paso
  fundamental para hacer visible al microscopio las
  características particulares de sus elementos figurados.
Componentes de la tinción
       Esta técnica combina los principios de coloración
desarrollados por May Grunwald y Giemsa, usando 2
soluciones colorantes:

• Solución May Grunwald: Contiene eosina (colorante
  aniónico) y Azul de metileno ( colorante
  catiónico), disueltos en metanol.
• Solución Giemsa: Contiene Eosina, Azul de metileno y
  productos de oxidación de este segundo compuesto.
Principio de la tinción
        Los componentes celulares se clasifican por esta
tinción en:
• Componentes aniónicos ( ácidos): Al unirse a los
   tintes catiónicos se tiñen en tonos azules. Son
   llamados “Basófilos”. Ej:
   DNA, RNA, proteínas, mitocondrias, ribosomas.
• Componentes catiónicos (básicos): Se unen a
   Eosina, tiñendo en variados tonos rojos y naranja. Se
   les llama acidófilos o eosinófilos. Ej: Hemoglobina.
Fases de la tinción May Grunwald-
                Giemsa:
1° Fijación: Sumergir los frotis secos por 2 minutos en
solución de May Grunwald.
2° Lavado y rehidratación: Dejar por 1 minuto en agua
destilada y escurrir el agua.
3° Tinción con Giemsa: Sumergir por 15 minutos en
Giemsa. Luego retirar y escurrir.
       Posteriormente se retiran los frotis montados y
se dejan secar para su posterior lectura al microscopio
óptico con aumento 100X.
Observación al microscopio
       Una vez teñidos los frotis y observados con objetivo de
inmersión con aceite (aumento 100X) al microscopio se puede
distinguir:
• Núcleos: Azul-púrpura
• Citoplasma: Violeta pálido-marrón
• Eritrocitos: Rosado
• Gránulos de neutrófilos: Violeta-marrón
• Gránulos de eosinófilos: Naranja
• Gránulos de basófilos: Azul-negro
• Gránulos de linfocitos: Púrpura
Resultados
      Una vez teñidos y visualizados los frotis al
microscopio el Tecnólogo Médico puede informar
sobre las características de los elementos
sanguíneos        que        visualiza     en     el
paciente, contribuyendo al diagnóstico que
elaborará el clínico, y sugiriendo otros exámenes si
es necesario.
Principales cuadros identificables
• Anemia: Concentración disminuida de eritrocitos
  en sangre. Debe ser complementado para
  informarse con niveles de Fierro sérico y
  hematocrito para conocer su causa.
• Microcitosis: Disminución del tamaño normal de
  los eritrocitos, observable en anemia ferropénica.
• Hipocromía: Eritrocitos de tonalidad pálida, con
  aumento de la claridad central.
• Leucocitosis: Aumento de leucocitos en
  sangre, originada principalmente en caso de
  infecciones.
Identificación de cuadros malignos en
            frotis sanguíneo
        Si el Tecnólogo identifica en el paciente alguna célula
sospechosa, como en el caso de observar Blastos en sangre
periférica, y se sospecha de algún tipo de leucemia u otra
enfermedad hematológica se informa al clínico para solicitar
nuevamente un examen o indagar con otro tipo de
procedimientos, como mielograma o biopsia medular o linfática
según sea el caso. Estos datos deben ser complementados con el
estado del paciente y evaluación genética.
        Es fundamental informar hallazgos de este tipo con la
mayor precisión y rapidez posible para atender de forma oportuna
al paciente.
Parásitos identificables en frotis
       También se puede identificar por frotis enfermedades
parasitarias como:
• Enfermedad de Chagas
• Malaria
• Toxoplasmosis
• Dengue
         En este caso el Tecnólogo informa
inmediatamente al médico el hallazgo
identificado y se solicitan exámenes
serológicos para confirmar el cuadro que
padece el paciente, para tomar medidas
rápidamente para iniciar un pronto
tratamiento y cuidado en estos casos que
pueden ser muy graves.

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Técnica de tinción May-Grünwald/Giemsa en frotis sanguíneo

  • 1. Universidad de Chile Facultad de Medicina Escuela de Tecnología Médica Tinción May-Grünwald/Giemsa en frotis sanguíneo Maximiliano Martínez Ilabaca
  • 2. Frotis sanguíneo • El Frotis sanguíneo es la herramienta básica en todos los laboratorios de Hematología para analizar las características de los elementos sanguíneos del paciente, colaborando en la descripción de su estado de salud. • Para estudiar las características microscópicas de la sangre debe extenderse en un portaobjeto y luego teñirse, paso fundamental para hacer visible al microscopio las características particulares de sus elementos figurados.
  • 3. Componentes de la tinción Esta técnica combina los principios de coloración desarrollados por May Grunwald y Giemsa, usando 2 soluciones colorantes: • Solución May Grunwald: Contiene eosina (colorante aniónico) y Azul de metileno ( colorante catiónico), disueltos en metanol. • Solución Giemsa: Contiene Eosina, Azul de metileno y productos de oxidación de este segundo compuesto.
  • 4. Principio de la tinción Los componentes celulares se clasifican por esta tinción en: • Componentes aniónicos ( ácidos): Al unirse a los tintes catiónicos se tiñen en tonos azules. Son llamados “Basófilos”. Ej: DNA, RNA, proteínas, mitocondrias, ribosomas. • Componentes catiónicos (básicos): Se unen a Eosina, tiñendo en variados tonos rojos y naranja. Se les llama acidófilos o eosinófilos. Ej: Hemoglobina.
  • 5. Fases de la tinción May Grunwald- Giemsa: 1° Fijación: Sumergir los frotis secos por 2 minutos en solución de May Grunwald. 2° Lavado y rehidratación: Dejar por 1 minuto en agua destilada y escurrir el agua. 3° Tinción con Giemsa: Sumergir por 15 minutos en Giemsa. Luego retirar y escurrir. Posteriormente se retiran los frotis montados y se dejan secar para su posterior lectura al microscopio óptico con aumento 100X.
  • 6. Observación al microscopio Una vez teñidos los frotis y observados con objetivo de inmersión con aceite (aumento 100X) al microscopio se puede distinguir: • Núcleos: Azul-púrpura • Citoplasma: Violeta pálido-marrón • Eritrocitos: Rosado • Gránulos de neutrófilos: Violeta-marrón • Gránulos de eosinófilos: Naranja • Gránulos de basófilos: Azul-negro • Gránulos de linfocitos: Púrpura
  • 7. Resultados Una vez teñidos y visualizados los frotis al microscopio el Tecnólogo Médico puede informar sobre las características de los elementos sanguíneos que visualiza en el paciente, contribuyendo al diagnóstico que elaborará el clínico, y sugiriendo otros exámenes si es necesario.
  • 8. Principales cuadros identificables • Anemia: Concentración disminuida de eritrocitos en sangre. Debe ser complementado para informarse con niveles de Fierro sérico y hematocrito para conocer su causa. • Microcitosis: Disminución del tamaño normal de los eritrocitos, observable en anemia ferropénica. • Hipocromía: Eritrocitos de tonalidad pálida, con aumento de la claridad central. • Leucocitosis: Aumento de leucocitos en sangre, originada principalmente en caso de infecciones.
  • 9. Identificación de cuadros malignos en frotis sanguíneo Si el Tecnólogo identifica en el paciente alguna célula sospechosa, como en el caso de observar Blastos en sangre periférica, y se sospecha de algún tipo de leucemia u otra enfermedad hematológica se informa al clínico para solicitar nuevamente un examen o indagar con otro tipo de procedimientos, como mielograma o biopsia medular o linfática según sea el caso. Estos datos deben ser complementados con el estado del paciente y evaluación genética. Es fundamental informar hallazgos de este tipo con la mayor precisión y rapidez posible para atender de forma oportuna al paciente.
  • 10. Parásitos identificables en frotis También se puede identificar por frotis enfermedades parasitarias como: • Enfermedad de Chagas • Malaria • Toxoplasmosis • Dengue En este caso el Tecnólogo informa inmediatamente al médico el hallazgo identificado y se solicitan exámenes serológicos para confirmar el cuadro que padece el paciente, para tomar medidas rápidamente para iniciar un pronto tratamiento y cuidado en estos casos que pueden ser muy graves.