Técnica de tinción May-Grünwald/Giemsa en frotis sanguíneo
1. Universidad de Chile
Facultad de Medicina
Escuela de Tecnología Médica
Tinción May-Grünwald/Giemsa
en frotis sanguíneo
Maximiliano Martínez Ilabaca
2. Frotis sanguíneo
• El Frotis sanguíneo es la herramienta básica en todos los
laboratorios de Hematología para analizar las
características de los elementos sanguíneos del
paciente, colaborando en la descripción de su estado de
salud.
• Para estudiar las características microscópicas de la sangre
debe extenderse en un portaobjeto y luego teñirse, paso
fundamental para hacer visible al microscopio las
características particulares de sus elementos figurados.
3. Componentes de la tinción
Esta técnica combina los principios de coloración
desarrollados por May Grunwald y Giemsa, usando 2
soluciones colorantes:
• Solución May Grunwald: Contiene eosina (colorante
aniónico) y Azul de metileno ( colorante
catiónico), disueltos en metanol.
• Solución Giemsa: Contiene Eosina, Azul de metileno y
productos de oxidación de este segundo compuesto.
4. Principio de la tinción
Los componentes celulares se clasifican por esta
tinción en:
• Componentes aniónicos ( ácidos): Al unirse a los
tintes catiónicos se tiñen en tonos azules. Son
llamados “Basófilos”. Ej:
DNA, RNA, proteínas, mitocondrias, ribosomas.
• Componentes catiónicos (básicos): Se unen a
Eosina, tiñendo en variados tonos rojos y naranja. Se
les llama acidófilos o eosinófilos. Ej: Hemoglobina.
5. Fases de la tinción May Grunwald-
Giemsa:
1° Fijación: Sumergir los frotis secos por 2 minutos en
solución de May Grunwald.
2° Lavado y rehidratación: Dejar por 1 minuto en agua
destilada y escurrir el agua.
3° Tinción con Giemsa: Sumergir por 15 minutos en
Giemsa. Luego retirar y escurrir.
Posteriormente se retiran los frotis montados y
se dejan secar para su posterior lectura al microscopio
óptico con aumento 100X.
6. Observación al microscopio
Una vez teñidos los frotis y observados con objetivo de
inmersión con aceite (aumento 100X) al microscopio se puede
distinguir:
• Núcleos: Azul-púrpura
• Citoplasma: Violeta pálido-marrón
• Eritrocitos: Rosado
• Gránulos de neutrófilos: Violeta-marrón
• Gránulos de eosinófilos: Naranja
• Gránulos de basófilos: Azul-negro
• Gránulos de linfocitos: Púrpura
7. Resultados
Una vez teñidos y visualizados los frotis al
microscopio el Tecnólogo Médico puede informar
sobre las características de los elementos
sanguíneos que visualiza en el
paciente, contribuyendo al diagnóstico que
elaborará el clínico, y sugiriendo otros exámenes si
es necesario.
8. Principales cuadros identificables
• Anemia: Concentración disminuida de eritrocitos
en sangre. Debe ser complementado para
informarse con niveles de Fierro sérico y
hematocrito para conocer su causa.
• Microcitosis: Disminución del tamaño normal de
los eritrocitos, observable en anemia ferropénica.
• Hipocromía: Eritrocitos de tonalidad pálida, con
aumento de la claridad central.
• Leucocitosis: Aumento de leucocitos en
sangre, originada principalmente en caso de
infecciones.
9. Identificación de cuadros malignos en
frotis sanguíneo
Si el Tecnólogo identifica en el paciente alguna célula
sospechosa, como en el caso de observar Blastos en sangre
periférica, y se sospecha de algún tipo de leucemia u otra
enfermedad hematológica se informa al clínico para solicitar
nuevamente un examen o indagar con otro tipo de
procedimientos, como mielograma o biopsia medular o linfática
según sea el caso. Estos datos deben ser complementados con el
estado del paciente y evaluación genética.
Es fundamental informar hallazgos de este tipo con la
mayor precisión y rapidez posible para atender de forma oportuna
al paciente.
10. Parásitos identificables en frotis
También se puede identificar por frotis enfermedades
parasitarias como:
• Enfermedad de Chagas
• Malaria
• Toxoplasmosis
• Dengue
En este caso el Tecnólogo informa
inmediatamente al médico el hallazgo
identificado y se solicitan exámenes
serológicos para confirmar el cuadro que
padece el paciente, para tomar medidas
rápidamente para iniciar un pronto
tratamiento y cuidado en estos casos que
pueden ser muy graves.