Resultado final do experimento sobre resistencia a antimicrobianos de sorogrupos de E. coli. Trabalho apresentado na semana de iniciação científica da UFT

2. Introdução
Escherichia coli
• Bacilo Gram-negativo
• Família Enterobacteriaceae
• Uma das mais antigas bactérias
simbiontes do homem e dos animais
– Microbiota intestinal
• Inofensiva...?

3. Introdução
E. coli e saúde pública
• Patogenicidade
– Oportunistas
– Estirpes diferentes*
• Índice de coliformes
termotolerantes na
água
• Diarréia do turista

4. Introdução
E. coli – principais grupos patogênicos
• EPEC (E.coli enteropatogênica)*
– Causam diarréias não sanguinolentas
– Primeiros estudos epidemiológicos 1920 e 1930
• ETEC ( E.coli enterotoxigênica):
– Diarréia do turista,
• EIEC (E.coli enteroinvasiva):
– Úlceras e inflamação da mucosa intestinal
• EAEC (E.coli enteroagregativa):
– semelhantes às da ETEC".
• STEC (E. coli produtora de toxina Shiga)*
– Sindrome Hemolítica urêmica

5. Introdução
Caracteristicas Clínicas e Epidemiológicas
• Reservatório
– Animais de sangue quente
• Período de incubação
– Nove a dez horas (adultos)
• Modo de transmissão
– fecal-oral;
• mãos,
• objetos e alimentos (carne crua) contaminados com fezes.
• Susceptibilidade e resistência
– afeta crianças em período de desmame,
• Diagnóstico
– Sorologia
• Tratamento
– Terapia de hidratação
– Nos casos severos podem ser administrados antibióticos
– Não usar antibiótico para o tratamento das STEC.

6. Introdução
Uso de Antibióticos
• Antibióticos mais utilizados no tratamento
das diarréias causadas por E. coli
– Penicilina
– Cefalosporinas
– Quinolonas
– Estreptomicina
– Ácido nalidixico
– Ampicilina
– Cefalotina
– Ciprofloxacina
– Gentamicina
– Levofloxacina
– Nitrofurantoina
– Sulfazotrim*

7. Objetivos
• Patógeno emergente
• Difícil tratamento
• Perfil dos antibióticos
• Antibióticos na produção animal
– Benefícios?

8. Metodologia
• Coleta das amostras no frigorífico
– Antes da oclusão do reto
– Swabs estéreis
– Aleatória
• Tocantins
• Pará

9. Metodologia
• Semeadura em ágar McConkey
– Foram avaliadas 20 amostras*
– Semeadura por estrias
– Escolha de 5 colônias isoladas
• Testes bioquímicos:
- “Triple Sugar Iron” (TSI)
- Teste do Citrato de Simons

10. Metodologia
• Ágar sangue base

11. Metodologia
• Sorologia
– Soros polivalentes Probac®
• Polivalente A
• Polivalente B
• Polivalente C
• Monovalente O157

12. Metodologia
• Antibiograma
– Inoculação em caldo BHI
– Semeadura em ágar Mueller Hinton
– Técnica de difusão de discos

13. Metodologia
• Antibióticos testados:
– Amoxiciclina +
ácido clavulânico
– Amicacina
– Ampicilina
– Aztreonam
– Cefaclor
– Cefalotina
– Cefalexina
– Cefazolina
– Ciprofloxacina
– Clorafenicol
– Eritromicina
– Estreptomicina
‾ Gentamicina
‾ Imipenem
‾ Lomefloxacina
‾ Levofloxacina
‾ Meropenem
‾ Ácido nalidíxico
‾ Nitrofurantoína
‾ Norfloxacina
‾ Penicilina
‾ Ácido pipemídico
‾ Sulfazotrim
‾ Tetraciclina

14. Resultados e Discussão
– Escolha de 5 colônias isoladas no MacConkey
– Lactose positivas
– Morfologia das colônias:
• róseo-avermelhada
• pequenas a médias
• arredondadas e opacas

15. • Testes bioquímicos
– Citrato
• Negativas
– “Triple-Sugar-Iron” (TSI)
• Ácido
• Formação de gás
• Sem produção de
ácido sulfídrico
Resultados e Discussão

16. Resultados e Discussão

17. Resultados e Discussão
• Das 71 amostras testadas (235 cepas)
– 42 cepas positivas para EPEC
– Nenhuma positiva para O157:H7

18. Resultados e Discussão
• Dos 24 antibióticos
testados...
– 100% de resistência:
• Eritromicina
• Penicilina
• Ácido pipemídico
– Apresentaram maior
resistência:
• Gentamicina (75%)
• Cefalotina (65%)
• Estreptomicina (51%)
• Amicacina (47,5%)
• Lomefloxacina (43%)
• Cefaclor (31%)

19. Resultados e Discussão – Perfil
de resistência
x
Gentamicina
(75%)
Cefalotina
(65%)
Estreptomicina
(51%)
Amicacina
(47,5%)

20. • 72% de Cepas multirresistentes (RANGEL & MARIN, 2009)
• 22% de Cepas sensíveis a todos os ATBs (RANGEL & MARIN, 2009)
Resultados e Discussão – Perfil
de resistência

21. Resultados
• Colônias resistentes
• Presentes em 32 cepas
– Cefaclor
– Cefazolina
– Amicacina
– Ampicilina
– Aztreonam
– Cefalexina
– Clorafenicol
– Nitrofurantoína
– Norfloxacin
– Ácido Pipemídico
– Sulfazotrim

23. Resultados
• Maior sensibilidade
– Imipenem
– Meropenem
– Levofloxacina

24. Resultados e Discussão – Perfil
de sensibilidade

25. Resultados e Discussão
• 100% das amostras EPEC são multirresistentes
• Nenhum dos fármacos testados obteve 100% de
sensibilidade

26. Resultados e Discussão
Por quê?!

27. Discussão
• Larga utilização de antibióticos na
produção animal
–Combate à doenças
–Controle
–Prevenção
–Crescimento
–Prescrição indiscriminada
Causam...Causam...

28. Discussão
• Produção de enzimas que destroem o fármaco ativo
• Alvo estrutural alterado para o fármaco
• Via metabólica alternativa,
– Se desvia da reação inibida
• Elaboração de uma enzima
modificada
– Desempenha sua função
metabólica
– Menos afetada pelo fármaco

29. Conclusão

Existem alternativas de tratamento para
E. coli enteropatogênica

A resistência vem aumentando com o
passar do tempo

Necessário o uso consciente dos
antibióticos.

30. Obrigada ^_^