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Perfil diabético
Perfil diabético
TÉCNICO LABORATORISTA DE ANÁLISIS CLÍNICOS
¿Qué es un perfil? 
Los exámenes de laboratorio por si solo no son diagnósticos, pero usados 
conjuntamente con la historia clínica y el examen físico, aportan una valiosa 
información sobre el estado del paciente. 
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Glucosa
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Se realiza cuando la persona presenta niveles normales en las pruebas de glucosa en sangre en 
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Dado que los síntomas son muy claros en diabetes tipo 1, esta prueba por lo general se 
aplica para detección de diabetes tipo 2 o diabetes gestacional.
El día de la toma de muestra el paciente debe… 
• Comer normalmente durante algunos días antes del examen. 
• No comer ni beber nada durante al menos 8 horas antes del 
examen y tampoco durante éste. 
• Consultar al médico si cualquiera de los medicamentos que 
toma puede afectar los resultados del examen. Puede ser que el 
médico le pida suspenderlo temporalmente, ya que algunos 
medicamentos también pudieran afectar los resultados de esta 
prueba. 
• Evitar situaciones de estrés e infecciones, alza febril, 
patologías u hospitalizaciones recientes. 
La persona debe llegar con 12 hrs. de ayuno antes del 
examen. Dentro del estudio, se le da a beber un líquido con una 
medida controlada de glucosa y se van realizando pruebas de 
glucosa en sangre cada 30 a 60 minutos hasta por 3 horas para ver 
de qué manera el organismo responde a la carga de glucosa y 
detectar el funcionamiento de la insulina producida.
Prueba de tolerancia a la 
glucosa oral (PTGO) 
Técnica 
O B J E T I VO: 
D e f i n i r q u ími c ame n t e l a 
d i a b e t e s . 
Los clínicos suelen servirse de la 
respuesta del paciente ante una 
sobrecarga de glucosa, esta 
sobrecarga se ha estandarizado: 
Tras la ingesta o la infusión 
venosa de glucosa se determinan 
los valores plasmáticos de ésta.
MUESTRA 
Muestra sanguínea sin 
anticoagulante. 
MATERIALES 
 Espectrofotómetro 
 Incubadora 
 Tubos de ensaye 
 Centrifuga 
REACTIVO 
Reactivo para determinación 
glucosa.
1. Realizar entre las 7 y 9 de la mañana y después de 30 minutos de reposo una muestra de sangre para 
determinar la glucosa basal. 
2. Dependiendo el nivel de glucosa basal que presente el paciente se le dará a ingerir la sobrecarga. 
3. Una vez que el paciente haya terminado la sobrecarga, se toma el tiempo cuando terminó de ingerirla, a 
partir de este momento se toman muestras de sangre a los 30 minutos, 1 hora, 2 horas y hasta 3 horas (si es 
requerida por el médico) de la hora en la cual terminó el paciente de ingerir la sobrecarga. 
4. Realizar la determinación de glucosa de cada una de las muestras.
Diabetes Tipo II 
 En ayunas: De 60 a 100 mg/dL 
 1 hora después de la carga de glucosa: menos de 200 mg/dL 
 2 horas después de la carga de glucosa: menos de 140 mg/dL. 
Si los resultados se encuentran entre 140 y 200 mg/dL ya se puede hablar de una 
manifestación de intolerancia a la glucosa comúnmente llamada “prediabetes’’. 
Si los niveles sobrepasan los 200 mg/dL ya se puede diagnosticar a la persona con diabetes.
Diabetes Gestacional 
 Ayunas: Menor a 95 mg/dL 
 1hra. después de la carga de glucosa: Menor a 180 mg/dL 
 2 hrs. después de la carga de glucosa: Menor a 155 mg/dL 
 3 hrs. después de la carga de glucosa: Menor a 140 mg/dl
Interpretando Resultados…
Los diferentes diagnósticos se harán dependiendo de los siguientes resultados… 
Tolerancia Anormal a la Glucosa: 
 Nivel de glicemia en ayunas mayor de 100 mgs/dl 
y menor a 125 mgs.dl 
 Nivel de glicemia 2 horas después de la ingesta 
de la solución glucosada, estuvo entre 140 mg/dl. 
a 199 mg/dl.. 
En este caso la persona puede tener Resisitencia a 
la Insulina ó Prediabetes y en cualquiera de los dos 
casos, el diagnóstico de Diabetes aún podría ser 
prevenido. 
Tolerancia Normal a la Glucosa 
 Todos los valores de glicemia (glucosa en 
sangre) fueron menores a 200 mg/dl 
durante las 2 primeras horas 
 Niveles de glicemia a las 2 horas 
después de la ingesta de la solución 
glucosada fue menor a 140 mg/dl.
Los diferentes diagnósticos se harán dependiendo de los siguientes resultados… 
 Diabetes: Se considera que una persona tiene 
Diabetes cuando su nivel de glicemia en 
ayunas es mayor a 126 mgs/dl y el nivel de 
glicemia 2 horas después de la ingesta de la 
solución glucosada es mayor a 200 mgs/dl. 
 Diabetes Gestacional 
Una mujer tiene Diabetes Gestacional 
cuando los niveles de glicemia, 1 hora 
después de la ingesta de solución 
glucosada es de 180 mg/dl ó más, 
155mg/dl ó más 2 horas después y 140 
mg/dl ó más 3 horas después de 
tomada dicha solución.
Prueba de Glicemia Postpandrial
La medición de la glucemia permite saber si hay una buena regulación del nivel 
de azúcar en la sangre. Este examen es prescrito cuando se sospecha 
una hiperglucemia, o hipoglucemia, es decir un nivel de azúcar insuficiente en la 
sangre. 
Algunos de los síntomas que podría presentar un paciente para que se le 
realizase esta prueba son los clásicos relacionados con la diabetes, como poliuria, 
polidipsia.
Para el análisis de química clínica el paciente debe cumplir con las 
siguientes especificaciones: 
 Dieta: se recomienda que tome una comida normal entre las 7 y 8 de la noche. 
 Ayuno: el paciente debe estar en ayuno obligatoriamente para la realización de estos 
exámenes especialmente glicemia, perfil lipídico. 
 Ejercicio: es importante que el paciente no realice ejercicio físico antes de la toma 
de muestra. 
 No ingerir alcohol 
 No fumar 
 Medicamentos: el paciente debe saber que medicamentos está tomando ya que 
pueden interferir en los resultados de los análisis.
1. El procedimiento para la toma de muestra es: 
El paciente llega al medico en ayunas se le realiza una 
extracción sanguínea, se le pide que ingiera alimentos 
azucarados, a la hora se le realiza otra extracción, y a 
las 2 horas nuevamente otra extracción.
Agua Destilada 
Pipeta Automática 
Gradilla de Aluminio 
Reactivo de Glucosa 
Tubos de Ensaye
M(Muestra) 
Reactivo de Trabajo 
(ml.) 
3.0ml 
Muestra (μl) (Suero del 
paciente). 
30μl 
퐀퐛퐬 풎풖풆풔풕풓풂 
퐀퐛퐬 퐞퐬퐭á퐧퐝퐚퐫 
Muestra en Ayuno ∙ ퟏퟎퟎ
M(Muestra) 
Reactivo de Trabajo 
(ml.) 
Muestra (μl) (Suero del 
paciente). 
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퐀퐛퐬 퐞퐬퐭á퐧퐝퐚퐫 
3.0ml 
30μl 
SegundaMuestra ∙ ퟏퟎퟎ
M(Muestra) 
Reactivo de Trabajo 
(ml.) 
3.0ml 
Muestra (μl) (Suero del 
paciente). 
30μl 
퐀퐛퐬 풎풖풆풔풕풓풂 
퐀퐛퐬 퐞퐬퐭á퐧퐝퐚퐫 
Tercera Muestra ∙ ퟏퟎퟎ
Interpretando Resultados…
• Debe ser igual a 100 mg/dl osea entre 80 y 110 mg/100ml 
• Después de una hora: 175 mg/100 ml osea entre 140 y 170 mg /100 ml 
• Después de dos horas: El valor debe volver a ser normal, osea entre 80 y 110 mg/dL 
: 
Hay factores que pueden afectar como drogas que puede alterar los resultados 
Otros factores que pueden alterar los resultados: Etanol, Enfermedad reciente, Infección, 
Embarazo, Ejercicio activo, Estrés, Fracaso en el seguimiento de restricciones dietéticas.
Si el valor a las 2 horas no ha vuelto a la normalidad puede indicar enfermedades como: 
Hiperinsulinismo 
 Tumor pancreático 
 Hipoglucemia funcional 
 Mixedema 
 Malabsorción 
Diabetes mellitus 
 Pancreatitis 
 Síndrome de Cushing 
 Acromegalia 
 Feocromocitoma
Hemoglobina Glucosilada
El examen de hemoglobina glucosilada (HbA1c) le sirve al médico para determinar 
cómo ha sido el control glucémico de una persona con diabetes en los últimos tres meses. 
Por esta razón se recomienda hacer esta prueba cada tres meses y una ventaja es que no 
se requiere estar en ayuno para hacerla.
Ventajas… 
 La extracción puede realizarse en 
cualquier momento del día 
 El paciente no necesita estar en ayunas 
 La muestra obtenida puede mantenerse 
en heladera por hasta siete días 
 Su concentración predice el desarrollo 
de complicaciones 
Pero, no se debe dejar de tener en cuenta 
algunos aspectos del individuo evaluado por este 
método y que modifican el valor de HbA1c como 
son: 
 Edad 
 Raza 
 Embarazo 
 Anemias por pérdida de sangre o alteraciones 
en la producción de glóbulos rojos 
 Hemoglobinopatías
La Hemoglobina (Hb) es una proteína producida en los glóbulos 
rojos y tiene como función principal el transporte de las moléculas 
de oxígeno desde los pulmones hacia los tejidos y cada molécula 
que fabrica nuestro organismo, circula por sangre durante 
aproximadamente tres meses. 
Hb A
La técnica consiste en la adición de reactivos a la muestra del 
paciente (sangre con EDTA), posteriormente, la reacción 
producida da como resultado una aglutinación. La 
aglutinación es un agregado de células o partículas debido a 
una formación entrelazada. 
Reactivos para uso exclusivo en Autoanalizadores 
Se usan los reactivos A (1 x 30ml. Reactivo de Látex) y B (1 x 10ml. 
Disolución Tampón/Anticuerpos), directamente en el instrumento.
Metodo de cromatografia 
La glicohemoglobina ha sido definida operacionalmente como la "fracción rápida" de 
la hemoglobina (HbA1a, A1b, A1c) la cual fluye primero durante la cromatografía en 
columna con resinas de intercambio iónico. La hemoglobina no glucosilada, que 
constituye el resto de la hemoglobina, ha sido designada HbAo. El procedimiento para 
la determinación de la glicohemoglobina emplea una resina de intercambio catiónico 
de unión tenue para la separación de la glicohemoglobina (fracción rápida) de la 
hemoglobina no glucosilada.
Materiales 
1. Micropipetas de 0.02 mL y 0.10 mL . 
2. Pipetas de 0.50 mL , 3.0 mL y 5.0 mL. 
3. Tubos de ensayo 13 X100 mm 
4. Mezclador o centrifugador 
5. Cronómetro y tablero de tubos de ensayo 
6. Instrumento 
Reactivos 
RESINA DE INTERCAMBIO IONICO PARA 
GLICOHEMOGLOBINA 
Calibrador de Glicohemoglobina
Tecnica 
Una preparación hemolizada de sangre entera se mezcla continuamente durante 
cinco minutos con una resina de intercambio iónico de ligadura tenue.Durante este 
tiempo, el HbAo se une a la resina. Después del periodo de mezclado se usa un filtro 
separador pararetirar la resina del líquido sobrenadante que contiene la 
glicohemoglobina. El porcentaje de glicohemoglobina se determina midiendo la 
absorbencia a 450 nm de la fracción de glicohemoglobina y la fracción de 
hemoglobina total, calculando la variación de las absorbencias, y comparando esta 
variación con la de un calibrador realizada durante el proceso de separación.
Procedimiento 
A. PREPARACION DE HEMOLIZADO: 
1. Coloque 0.5 mL de Reactivo Separador (Lysing Reagent) en tubos etiquetados: 
CALIBRADOR, CONTROL, MUESTRA 1, ETC. 
2. Coloque 0.1 mL de muestra de sangre bien mezclada en un tubo debidamente 
etiquetado. Mezcle hasta que la separación completa sea evidente. 
3. Permita reposar por 5 minutos.
B. SEPARACION DE GLICOHEMOGLOBINA: 
Nota: Antes de usarse, mezcle bien la resina invirtiendo la botella por lo menos seis veces. Menee la botella entre cada 
servido. 
1. Coloque 3.0 mL de Resina de intercambio iónico para Glicohemoglobina en tubos de 13 X 100 mL etiquetados: 
CALIBRADOR, CONTROL, MUESTRA1, etc. 
2. Coloque 0.1 mL del hemolizado del paso A en el tubo de resina propiamente etiquetado. 
3. Coloque el filtro separador en el tubo de modo que la manga de goma esté aproximadamente a 2 cm por encima del 
nivel de líquido. 
4. Coloque los tubos en el mezclador automático y mezcle continuamente durante 5 minutos. 
5. Retire los tubos del mezclador o centrifugador. 
6. Para facilitar la separación, permita que los tubos estén verticales en el tablero de tubos de ensayo durante unos 
cuantos minutos, luego empuje el filtro separador en el tubo hasta que la resina esté firmemente compactada. 
7. Coloque el liquido sobrenadante en otro tubo o directamente en una cubeta para medir la absorbencia. 
8. Ajuste el instrumento cero absorbencia a 415 nm utilizando agua desionizada como blanco. 
9. Lea y registre los valores de absorbencia para CALIBRADOR, CONTROL, MUESTRA 1, etc. Estas lecturas son para 
glicohemoglobina.
C. Fracción del Total de Hemoglobina 
1. Coloque 5.0 mL de agua desionizada en tubos etiquetados: CALIBRADOR, 
CONTROL, MUESTRA 1, etc. 
2. Coloque 0.02 mL de hemolizado del Paso A en el tubo propiamente etiquetado. 
Mezcle bien. 
3. Ajuste el instrumento cero absorbencia a 415 nm usando agua desionizada como 
blanco. 
4. Lea y registre los valores de absorbencia para CALIBRADOR, CONTROL, MUESTRA 1, 
etc. Estas lecturas son para el total de hemoglobina.
La Hemoglobina (Hb) de los seres humanos 
adultos está constituida principalmente por 
Hb A (97%), Hb A2 (2.5%), y Hb F (0.5%). La 
cantidad de hemoglobina glucosilada es 
proporcional a la concentracion de glucosa 
en sangre, por lo que en la diabetes hay 
mayor proporcion de Hb A1c de lo normal. 
• Normal: menos de 5.7 % 
 Prediabetes: 5.7 a 6.4% 
 Diabetes: 6.5% o más Normal 
Menos de 5.7% 
Diabetes 
6.5% o más
Mediante la prueba clínica se puede diagnosticar a un paciente denotando la 
importancia aplicada a la vida diaria. En general, cuanto más alto esté el HbA1c, mayor 
será el riesgo de desarrollar problemas como: 
 Enfermedad ocular 
 Cardiopatía 
 Enfermedad renal 
 Daño neurológico 
 Accidente cerebrovascular 
Si el nivel de HbA1c permanece alto por un período de tiempo largo, el riesgo de 
tener estos problemas es incluso mayor.

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Perfil diabético

  • 3. TÉCNICO LABORATORISTA DE ANÁLISIS CLÍNICOS
  • 4. ¿Qué es un perfil? Los exámenes de laboratorio por si solo no son diagnósticos, pero usados conjuntamente con la historia clínica y el examen físico, aportan una valiosa información sobre el estado del paciente. Los exámenes básicos o rutinas de laboratorio sirven para detectar la función de los órganos. A este grupo de pruebas se les describe como paneles o perfiles, según el órgano que se seleccione para monitorear o la enfermedad.
  • 5. Prueba de Tolerancia a la Glucosa
  • 6. Consideraciones del Médico Se realiza cuando la persona presenta niveles normales en las pruebas de glucosa en sangre en ayunas, pero se sospecha la posibilidad de que padezca diabetes. Dado que los síntomas son muy claros en diabetes tipo 1, esta prueba por lo general se aplica para detección de diabetes tipo 2 o diabetes gestacional.
  • 7. El día de la toma de muestra el paciente debe… • Comer normalmente durante algunos días antes del examen. • No comer ni beber nada durante al menos 8 horas antes del examen y tampoco durante éste. • Consultar al médico si cualquiera de los medicamentos que toma puede afectar los resultados del examen. Puede ser que el médico le pida suspenderlo temporalmente, ya que algunos medicamentos también pudieran afectar los resultados de esta prueba. • Evitar situaciones de estrés e infecciones, alza febril, patologías u hospitalizaciones recientes. La persona debe llegar con 12 hrs. de ayuno antes del examen. Dentro del estudio, se le da a beber un líquido con una medida controlada de glucosa y se van realizando pruebas de glucosa en sangre cada 30 a 60 minutos hasta por 3 horas para ver de qué manera el organismo responde a la carga de glucosa y detectar el funcionamiento de la insulina producida.
  • 8. Prueba de tolerancia a la glucosa oral (PTGO) Técnica O B J E T I VO: D e f i n i r q u ími c ame n t e l a d i a b e t e s . Los clínicos suelen servirse de la respuesta del paciente ante una sobrecarga de glucosa, esta sobrecarga se ha estandarizado: Tras la ingesta o la infusión venosa de glucosa se determinan los valores plasmáticos de ésta.
  • 9. MUESTRA Muestra sanguínea sin anticoagulante. MATERIALES  Espectrofotómetro  Incubadora  Tubos de ensaye  Centrifuga REACTIVO Reactivo para determinación glucosa.
  • 10. 1. Realizar entre las 7 y 9 de la mañana y después de 30 minutos de reposo una muestra de sangre para determinar la glucosa basal. 2. Dependiendo el nivel de glucosa basal que presente el paciente se le dará a ingerir la sobrecarga. 3. Una vez que el paciente haya terminado la sobrecarga, se toma el tiempo cuando terminó de ingerirla, a partir de este momento se toman muestras de sangre a los 30 minutos, 1 hora, 2 horas y hasta 3 horas (si es requerida por el médico) de la hora en la cual terminó el paciente de ingerir la sobrecarga. 4. Realizar la determinación de glucosa de cada una de las muestras.
  • 11. Diabetes Tipo II  En ayunas: De 60 a 100 mg/dL  1 hora después de la carga de glucosa: menos de 200 mg/dL  2 horas después de la carga de glucosa: menos de 140 mg/dL. Si los resultados se encuentran entre 140 y 200 mg/dL ya se puede hablar de una manifestación de intolerancia a la glucosa comúnmente llamada “prediabetes’’. Si los niveles sobrepasan los 200 mg/dL ya se puede diagnosticar a la persona con diabetes.
  • 12. Diabetes Gestacional  Ayunas: Menor a 95 mg/dL  1hra. después de la carga de glucosa: Menor a 180 mg/dL  2 hrs. después de la carga de glucosa: Menor a 155 mg/dL  3 hrs. después de la carga de glucosa: Menor a 140 mg/dl
  • 14. Los diferentes diagnósticos se harán dependiendo de los siguientes resultados… Tolerancia Anormal a la Glucosa:  Nivel de glicemia en ayunas mayor de 100 mgs/dl y menor a 125 mgs.dl  Nivel de glicemia 2 horas después de la ingesta de la solución glucosada, estuvo entre 140 mg/dl. a 199 mg/dl.. En este caso la persona puede tener Resisitencia a la Insulina ó Prediabetes y en cualquiera de los dos casos, el diagnóstico de Diabetes aún podría ser prevenido. Tolerancia Normal a la Glucosa  Todos los valores de glicemia (glucosa en sangre) fueron menores a 200 mg/dl durante las 2 primeras horas  Niveles de glicemia a las 2 horas después de la ingesta de la solución glucosada fue menor a 140 mg/dl.
  • 15. Los diferentes diagnósticos se harán dependiendo de los siguientes resultados…  Diabetes: Se considera que una persona tiene Diabetes cuando su nivel de glicemia en ayunas es mayor a 126 mgs/dl y el nivel de glicemia 2 horas después de la ingesta de la solución glucosada es mayor a 200 mgs/dl.  Diabetes Gestacional Una mujer tiene Diabetes Gestacional cuando los niveles de glicemia, 1 hora después de la ingesta de solución glucosada es de 180 mg/dl ó más, 155mg/dl ó más 2 horas después y 140 mg/dl ó más 3 horas después de tomada dicha solución.
  • 16. Prueba de Glicemia Postpandrial
  • 17. La medición de la glucemia permite saber si hay una buena regulación del nivel de azúcar en la sangre. Este examen es prescrito cuando se sospecha una hiperglucemia, o hipoglucemia, es decir un nivel de azúcar insuficiente en la sangre. Algunos de los síntomas que podría presentar un paciente para que se le realizase esta prueba son los clásicos relacionados con la diabetes, como poliuria, polidipsia.
  • 18. Para el análisis de química clínica el paciente debe cumplir con las siguientes especificaciones:  Dieta: se recomienda que tome una comida normal entre las 7 y 8 de la noche.  Ayuno: el paciente debe estar en ayuno obligatoriamente para la realización de estos exámenes especialmente glicemia, perfil lipídico.  Ejercicio: es importante que el paciente no realice ejercicio físico antes de la toma de muestra.  No ingerir alcohol  No fumar  Medicamentos: el paciente debe saber que medicamentos está tomando ya que pueden interferir en los resultados de los análisis.
  • 19. 1. El procedimiento para la toma de muestra es: El paciente llega al medico en ayunas se le realiza una extracción sanguínea, se le pide que ingiera alimentos azucarados, a la hora se le realiza otra extracción, y a las 2 horas nuevamente otra extracción.
  • 20. Agua Destilada Pipeta Automática Gradilla de Aluminio Reactivo de Glucosa Tubos de Ensaye
  • 21. M(Muestra) Reactivo de Trabajo (ml.) 3.0ml Muestra (μl) (Suero del paciente). 30μl 퐀퐛퐬 풎풖풆풔풕풓풂 퐀퐛퐬 퐞퐬퐭á퐧퐝퐚퐫 Muestra en Ayuno ∙ ퟏퟎퟎ
  • 22. M(Muestra) Reactivo de Trabajo (ml.) Muestra (μl) (Suero del paciente). 퐀퐛퐬 풎풖풆풔풕풓풂 퐀퐛퐬 퐞퐬퐭á퐧퐝퐚퐫 3.0ml 30μl SegundaMuestra ∙ ퟏퟎퟎ
  • 23. M(Muestra) Reactivo de Trabajo (ml.) 3.0ml Muestra (μl) (Suero del paciente). 30μl 퐀퐛퐬 풎풖풆풔풕풓풂 퐀퐛퐬 퐞퐬퐭á퐧퐝퐚퐫 Tercera Muestra ∙ ퟏퟎퟎ
  • 25. • Debe ser igual a 100 mg/dl osea entre 80 y 110 mg/100ml • Después de una hora: 175 mg/100 ml osea entre 140 y 170 mg /100 ml • Después de dos horas: El valor debe volver a ser normal, osea entre 80 y 110 mg/dL : Hay factores que pueden afectar como drogas que puede alterar los resultados Otros factores que pueden alterar los resultados: Etanol, Enfermedad reciente, Infección, Embarazo, Ejercicio activo, Estrés, Fracaso en el seguimiento de restricciones dietéticas.
  • 26. Si el valor a las 2 horas no ha vuelto a la normalidad puede indicar enfermedades como: Hiperinsulinismo  Tumor pancreático  Hipoglucemia funcional  Mixedema  Malabsorción Diabetes mellitus  Pancreatitis  Síndrome de Cushing  Acromegalia  Feocromocitoma
  • 28. El examen de hemoglobina glucosilada (HbA1c) le sirve al médico para determinar cómo ha sido el control glucémico de una persona con diabetes en los últimos tres meses. Por esta razón se recomienda hacer esta prueba cada tres meses y una ventaja es que no se requiere estar en ayuno para hacerla.
  • 29. Ventajas…  La extracción puede realizarse en cualquier momento del día  El paciente no necesita estar en ayunas  La muestra obtenida puede mantenerse en heladera por hasta siete días  Su concentración predice el desarrollo de complicaciones Pero, no se debe dejar de tener en cuenta algunos aspectos del individuo evaluado por este método y que modifican el valor de HbA1c como son:  Edad  Raza  Embarazo  Anemias por pérdida de sangre o alteraciones en la producción de glóbulos rojos  Hemoglobinopatías
  • 30. La Hemoglobina (Hb) es una proteína producida en los glóbulos rojos y tiene como función principal el transporte de las moléculas de oxígeno desde los pulmones hacia los tejidos y cada molécula que fabrica nuestro organismo, circula por sangre durante aproximadamente tres meses. Hb A
  • 31. La técnica consiste en la adición de reactivos a la muestra del paciente (sangre con EDTA), posteriormente, la reacción producida da como resultado una aglutinación. La aglutinación es un agregado de células o partículas debido a una formación entrelazada. Reactivos para uso exclusivo en Autoanalizadores Se usan los reactivos A (1 x 30ml. Reactivo de Látex) y B (1 x 10ml. Disolución Tampón/Anticuerpos), directamente en el instrumento.
  • 32. Metodo de cromatografia La glicohemoglobina ha sido definida operacionalmente como la "fracción rápida" de la hemoglobina (HbA1a, A1b, A1c) la cual fluye primero durante la cromatografía en columna con resinas de intercambio iónico. La hemoglobina no glucosilada, que constituye el resto de la hemoglobina, ha sido designada HbAo. El procedimiento para la determinación de la glicohemoglobina emplea una resina de intercambio catiónico de unión tenue para la separación de la glicohemoglobina (fracción rápida) de la hemoglobina no glucosilada.
  • 33. Materiales 1. Micropipetas de 0.02 mL y 0.10 mL . 2. Pipetas de 0.50 mL , 3.0 mL y 5.0 mL. 3. Tubos de ensayo 13 X100 mm 4. Mezclador o centrifugador 5. Cronómetro y tablero de tubos de ensayo 6. Instrumento Reactivos RESINA DE INTERCAMBIO IONICO PARA GLICOHEMOGLOBINA Calibrador de Glicohemoglobina
  • 34. Tecnica Una preparación hemolizada de sangre entera se mezcla continuamente durante cinco minutos con una resina de intercambio iónico de ligadura tenue.Durante este tiempo, el HbAo se une a la resina. Después del periodo de mezclado se usa un filtro separador pararetirar la resina del líquido sobrenadante que contiene la glicohemoglobina. El porcentaje de glicohemoglobina se determina midiendo la absorbencia a 450 nm de la fracción de glicohemoglobina y la fracción de hemoglobina total, calculando la variación de las absorbencias, y comparando esta variación con la de un calibrador realizada durante el proceso de separación.
  • 35. Procedimiento A. PREPARACION DE HEMOLIZADO: 1. Coloque 0.5 mL de Reactivo Separador (Lysing Reagent) en tubos etiquetados: CALIBRADOR, CONTROL, MUESTRA 1, ETC. 2. Coloque 0.1 mL de muestra de sangre bien mezclada en un tubo debidamente etiquetado. Mezcle hasta que la separación completa sea evidente. 3. Permita reposar por 5 minutos.
  • 36. B. SEPARACION DE GLICOHEMOGLOBINA: Nota: Antes de usarse, mezcle bien la resina invirtiendo la botella por lo menos seis veces. Menee la botella entre cada servido. 1. Coloque 3.0 mL de Resina de intercambio iónico para Glicohemoglobina en tubos de 13 X 100 mL etiquetados: CALIBRADOR, CONTROL, MUESTRA1, etc. 2. Coloque 0.1 mL del hemolizado del paso A en el tubo de resina propiamente etiquetado. 3. Coloque el filtro separador en el tubo de modo que la manga de goma esté aproximadamente a 2 cm por encima del nivel de líquido. 4. Coloque los tubos en el mezclador automático y mezcle continuamente durante 5 minutos. 5. Retire los tubos del mezclador o centrifugador. 6. Para facilitar la separación, permita que los tubos estén verticales en el tablero de tubos de ensayo durante unos cuantos minutos, luego empuje el filtro separador en el tubo hasta que la resina esté firmemente compactada. 7. Coloque el liquido sobrenadante en otro tubo o directamente en una cubeta para medir la absorbencia. 8. Ajuste el instrumento cero absorbencia a 415 nm utilizando agua desionizada como blanco. 9. Lea y registre los valores de absorbencia para CALIBRADOR, CONTROL, MUESTRA 1, etc. Estas lecturas son para glicohemoglobina.
  • 37. C. Fracción del Total de Hemoglobina 1. Coloque 5.0 mL de agua desionizada en tubos etiquetados: CALIBRADOR, CONTROL, MUESTRA 1, etc. 2. Coloque 0.02 mL de hemolizado del Paso A en el tubo propiamente etiquetado. Mezcle bien. 3. Ajuste el instrumento cero absorbencia a 415 nm usando agua desionizada como blanco. 4. Lea y registre los valores de absorbencia para CALIBRADOR, CONTROL, MUESTRA 1, etc. Estas lecturas son para el total de hemoglobina.
  • 38. La Hemoglobina (Hb) de los seres humanos adultos está constituida principalmente por Hb A (97%), Hb A2 (2.5%), y Hb F (0.5%). La cantidad de hemoglobina glucosilada es proporcional a la concentracion de glucosa en sangre, por lo que en la diabetes hay mayor proporcion de Hb A1c de lo normal. • Normal: menos de 5.7 %  Prediabetes: 5.7 a 6.4%  Diabetes: 6.5% o más Normal Menos de 5.7% Diabetes 6.5% o más
  • 39. Mediante la prueba clínica se puede diagnosticar a un paciente denotando la importancia aplicada a la vida diaria. En general, cuanto más alto esté el HbA1c, mayor será el riesgo de desarrollar problemas como:  Enfermedad ocular  Cardiopatía  Enfermedad renal  Daño neurológico  Accidente cerebrovascular Si el nivel de HbA1c permanece alto por un período de tiempo largo, el riesgo de tener estos problemas es incluso mayor.