Identificación y medición de laIdentificación y medición de la
respuesta inmunerespuesta inmune
PRUEBAS SECUNDARIAS
§ SOLUBLE
§ PARTICULADO
§ SUPERFICIE + COMPLEMENTO
PRECIPITACIÓN
AGLUTINACIÓN
FIJACIÓN DE
COMPLEMENTO
La prueba a realizar...
Comparación precipitación - aglutinación
Antígeno
SOLUBLE
Antígeno
PARTICULADO
Y
Y
Y
Y
Y
Y
Formación de “retículo” “Amonto...
PRECIPITACIÓN
Fundamento: un antígeno soluble, al ser puesto en
contacto con su anticuerpo específico, forma
complejos inm...
Ag/mg
Precipitación
Y
Y
Y Y
Y
Y
Y
Y Y
Y Y
Y
Exceso de AC
Proporciones
óptimas
Exceso de Ag
YY
AC ESPECÍFICO
Ag SOLUBLE
MED...
MEDIO
LÍQUIDO SÓLIDO
• DIFUSIÓN DOBLE
• INMUNOELECTROFORESIS (IEF)
• INMUNODIFUSIÓN RADIAL (IDR)
• CONTRAINMUNOELECTROFORE...
DIFUSIÓN DOBLE
Fundamento: empleando el medio adecuado (agar
gel), es posible hacer migrar por difusión tanto Ag
como Ac (...
Test de Coggins para AIE
Placa de Petri
1. Agar gel 1
26
7
5
4
3
2.Sacabocados
3. Suero problema
1 3 5
4. Suero testigo (+...
6.Cámara húmeda
48 hs 7. LECTURA (fondo oscuro) e INTERPRETACIÓN
A
C B
A. NEGATIVO
B. POSITIVO
C. Débilmente POSITIVO
D. N...
APLICACIONES EN VETERINARIA
§ ANEMIA INFECCIOSA EQUINA
§ PIROPLASMOSIS EQUINA
§ LEUCOSIS BOVINA
§ BRUCELOSIS OVINA
§ BRUCE...
AGLUTINACIÓN
Fundamento: un antígeno particulado (ejemplo:
bacterias, eritrocitos), al ser puesto en contacto con su
antic...
Se produce cuando existe un marcado exceso de Ac con
respecto a los determinantes antigénicos de la partícula, de
tal mane...
AGLUTINACIÓN
AGLUTINACIÓN PASIVA
COAGLUTINACIÓN
HEMOAGLUTINACIÓN / INHIBICIÓN H. A.
A
G
L
U
T
I
N
A
C
I
Ó
N
Antígeno
particulado
(reactivo)
+
YY
YY Y
Suero problema
Proporción
Medio
Y
Y
Y
YY
AGLUTINACIÓN
AGLUTINACIÓN
En PLACA En TUBO
BrucellaSalmonella Micoplasma
BPA
Brucella
SAT+2-ME PAL
Aglutinación en placa: BPA
1. Suero problema 2. Antígeno específico
(reactivo)
Aglutinoscopio + placa de
vidrio
Prueba del...
3. Mezclar
8 MINUTOS
LECTURA E
INTERPRETACIÓN
Con GRUMOS Sin GRUMOS
AGLUTINACIÓN POSITIVA Negativa
Aglutinación en tubo: SAT + 2-ME
SAT (Seroaglutinación en Tubo)
Ig M Ig G
2- ME (2- Mercaptoetanol)
Se realizan en
simultá...
En TUBO: SAT + 2- ME
SUERO
BPA (+)
1. Suero problema
Título
SAT
2-ME
37ºC-48 hs
2. Solución fisiológica fenicada (SFF)
2. ...
LECTURA e INTERPRETACIÓN
37ºC-48 hs
POSITIVA INCOMPLETA NEGATIVA
Aglutinación en tubo: PAL
PRUEBA DEL ANILLO EN LECHE
Fundamento: si en una muestra de leche se encuentra
un anticuerpo esp...
1. Leche problema
2. Antígeno (reactivo)
37ºC-1 hora
LECTURA e INTERPRETACIÓN
+ ++ +++ ++++
PAL
APLICACIONES EN R. A.
BRUCELOSIS BOVINA
PAL - ELISA IVIGILANCIA
EPIDEMIOLÓGICA
FCDEFINITORIA
SAT + 2-ME – FPA
ELISA C
COMP...
v IN VITRO NEUTRALIZACIÓN
v IN VIVO PROTECCIÓN
PRUEBAS TERCIARIAS
NEUTRALIZACIÓN
Fundamento: estimación de la capacidad de una
anticuerpo de neutralizar la actividad biológica
de un antíge...
PROTECCIÓN
Fundamento: forma de análisis de neutralización
que se realiza totalmente in vivo para determinar
la capacidad ...
RESPUESTA INMUNE CELULAR
v PURIFICACIÓN DE LINFOCITOS
v IDENTIFICACIÓN LINFOCITOS T
v IDENTIFICACIÓN LINFOCITOS B
v PRUEBA...
Próxima SlideShare
Cargando en…5
×

Identificacion de ag

633 visualizaciones

Publicado el

IDENTIFICACION DE ANTIGENOS- RESPUESTA INMUNE

Publicado en: Salud y medicina
0 comentarios
0 recomendaciones
Estadísticas
Notas
  • Sé el primero en comentar

  • Sé el primero en recomendar esto

Sin descargas
Visualizaciones
Visualizaciones totales
633
En SlideShare
0
De insertados
0
Número de insertados
7
Acciones
Compartido
0
Descargas
10
Comentarios
0
Recomendaciones
0
Insertados 0
No insertados

No hay notas en la diapositiva.

Identificacion de ag

  1. 1. Identificación y medición de laIdentificación y medición de la respuesta inmunerespuesta inmune PRUEBAS SECUNDARIAS
  2. 2. § SOLUBLE § PARTICULADO § SUPERFICIE + COMPLEMENTO PRECIPITACIÓN AGLUTINACIÓN FIJACIÓN DE COMPLEMENTO La prueba a realizar depende de las características del Ag
  3. 3. Comparación precipitación - aglutinación Antígeno SOLUBLE Antígeno PARTICULADO Y Y Y Y Y Y Formación de “retículo” “Amontonamiento” Y YY Y PRECIPITACIÓN AGLUTINACIÓN Anticuerpo
  4. 4. PRECIPITACIÓN Fundamento: un antígeno soluble, al ser puesto en contacto con su anticuerpo específico, forma complejos inmunes que al encontrarse en proporciones óptimas se insolubilizan dando una reacción de precipitación
  5. 5. Ag/mg Precipitación Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Exceso de AC Proporciones óptimas Exceso de Ag YY AC ESPECÍFICO Ag SOLUBLE MEDIO PROPORCIÓN YY Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y RETÍCULO SOLUBLE
  6. 6. MEDIO LÍQUIDO SÓLIDO • DIFUSIÓN DOBLE • INMUNOELECTROFORESIS (IEF) • INMUNODIFUSIÓN RADIAL (IDR) • CONTRAINMUNOELECTROFORESIS (CIEF) Test de Ascoli - Valente CARBUNCLO
  7. 7. DIFUSIÓN DOBLE Fundamento: empleando el medio adecuado (agar gel), es posible hacer migrar por difusión tanto Ag como Ac (difusión “doble”), de modo que al encontrarse en proporciones óptimas, interaccionen, produciendo una banda de precipitado visible Inmunodifusión en Gel de Agar Ejemplo: test de Coggins para diagnóstico de AIE
  8. 8. Test de Coggins para AIE Placa de Petri 1. Agar gel 1 26 7 5 4 3 2.Sacabocados 3. Suero problema 1 3 5 4. Suero testigo (+) (reactivo) 2 4 6 5. Antígeno específico (reactivo) 7 1 26 7 5 4 3 26 7 4 26 7 4
  9. 9. 6.Cámara húmeda 48 hs 7. LECTURA (fondo oscuro) e INTERPRETACIÓN A C B A. NEGATIVO B. POSITIVO C. Débilmente POSITIVO D. NEGATIVO E. Fuertemente POSITIVO F. POSITIVO G. POSITIVO H. Banda INESPECÍFICA I. Banda INESPECÍFICA 26 7 4 D F E G I H
  10. 10. APLICACIONES EN VETERINARIA § ANEMIA INFECCIOSA EQUINA § PIROPLASMOSIS EQUINA § LEUCOSIS BOVINA § BRUCELOSIS OVINA § BRUCELOSIS CANINA
  11. 11. AGLUTINACIÓN Fundamento: un antígeno particulado (ejemplo: bacterias, eritrocitos), al ser puesto en contacto con su anticuerpo específico en proporciones óptimas, se une por medio de enlaces cruzados. Este complejo de unión agruma, produciendo una reacción de aglutinación.
  12. 12. Se produce cuando existe un marcado exceso de Ac con respecto a los determinantes antigénicos de la partícula, de tal manera que es poco probable que los dos sitios de unión de la Ig puedan unirse a dos determinantes antigénicos de dos partículas distintas, inhibiéndose de este modo la aglutinación. Generalmente ocurre en las diluciones bajas de sueros muy positivos. FENÓMENO DE ZONA O PROZONA
  13. 13. AGLUTINACIÓN AGLUTINACIÓN PASIVA COAGLUTINACIÓN HEMOAGLUTINACIÓN / INHIBICIÓN H. A. A G L U T I N A C I Ó N
  14. 14. Antígeno particulado (reactivo) + YY YY Y Suero problema Proporción Medio Y Y Y YY AGLUTINACIÓN
  15. 15. AGLUTINACIÓN En PLACA En TUBO BrucellaSalmonella Micoplasma BPA Brucella SAT+2-ME PAL
  16. 16. Aglutinación en placa: BPA 1. Suero problema 2. Antígeno específico (reactivo) Aglutinoscopio + placa de vidrio Prueba del Antígeno Brucélico Acidificado
  17. 17. 3. Mezclar 8 MINUTOS LECTURA E INTERPRETACIÓN Con GRUMOS Sin GRUMOS AGLUTINACIÓN POSITIVA Negativa
  18. 18. Aglutinación en tubo: SAT + 2-ME SAT (Seroaglutinación en Tubo) Ig M Ig G 2- ME (2- Mercaptoetanol) Se realizan en simultáneo
  19. 19. En TUBO: SAT + 2- ME SUERO BPA (+) 1. Suero problema Título SAT 2-ME 37ºC-48 hs 2. Solución fisiológica fenicada (SFF) 2. Solución 2-ME 3. Antígeno 60 MINUTOS 1/25 1/50 1/100 1/200
  20. 20. LECTURA e INTERPRETACIÓN 37ºC-48 hs POSITIVA INCOMPLETA NEGATIVA
  21. 21. Aglutinación en tubo: PAL PRUEBA DEL ANILLO EN LECHE Fundamento: si en una muestra de leche se encuentra un anticuerpo específico, y se le agrega un antígeno particulado coloreado, ambos se unirán, formando un complejo Ag-Ac que se adhiere a los glóbulos de grasa y asciende con la nata
  22. 22. 1. Leche problema 2. Antígeno (reactivo) 37ºC-1 hora LECTURA e INTERPRETACIÓN + ++ +++ ++++ PAL
  23. 23. APLICACIONES EN R. A. BRUCELOSIS BOVINA PAL - ELISA IVIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA FCDEFINITORIA SAT + 2-ME – FPA ELISA C COMPLEMENTARIAS BPA – ELISA ITAMIZ Prueba
  24. 24. v IN VITRO NEUTRALIZACIÓN v IN VIVO PROTECCIÓN PRUEBAS TERCIARIAS
  25. 25. NEUTRALIZACIÓN Fundamento: estimación de la capacidad de una anticuerpo de neutralizar la actividad biológica de un antígeno cuando se mezcla con él in vitro
  26. 26. PROTECCIÓN Fundamento: forma de análisis de neutralización que se realiza totalmente in vivo para determinar la capacidad protectora de un anticuerpo específico frente a su antígeno
  27. 27. RESPUESTA INMUNE CELULAR v PURIFICACIÓN DE LINFOCITOS v IDENTIFICACIÓN LINFOCITOS T v IDENTIFICACIÓN LINFOCITOS B v PRUEBA DE FUNCIÓN DE LINFOCITOS

×