Influenza A Virus Antibody Test KitKit de d€tection d’anticorps contre le virus de l’Influenza A   Kit para la detecci‚n d...
VersiŽn Espa•olaKit para la detección de anticuerpos frente al Virus de la Influenza APara uso veterinario exclusivo.Nombr...
Diluya las muestras 10 veces (1/10) con el diluyente de muestras antes de analizarlas (por ejemplo, mediante la diluciŽn d...
Manufacturer/Hersteller/Fabricant/Fabricante                  Distributor/Vertrieb/Distributeur/DistribuidorINSTITUT POURQ...
Próxima SlideShare
Cargando en…5
×

Influenza a-insert 53101-01-14_may10

169 visualizaciones

Publicado el

Publicado en: Salud y medicina
0 comentarios
0 recomendaciones
Estadísticas
Notas
  • Sé el primero en comentar

  • Sé el primero en recomendar esto

Sin descargas
Visualizaciones
Visualizaciones totales
169
En SlideShare
0
De insertados
0
Número de insertados
1
Acciones
Compartido
0
Descargas
1
Comentarios
0
Recomendaciones
0
Insertados 0
No insertados

No hay notas en la diapositiva.

Influenza a-insert 53101-01-14_may10

  1. 1. Influenza A Virus Antibody Test KitKit de d€tection d’anticorps contre le virus de l’Influenza A Kit para la detecci‚n de anticuerpos frente al Virus de la Influenza ATestkit zum Nachweis von Antikƒrpern gegen das Virus der Influenza A Part-Nr. 99-53101 Version: 53101-01 (ES) No. de registro: 1288-RD
  2. 2. VersiŽn Espa•olaKit para la detección de anticuerpos frente al Virus de la Influenza APara uso veterinario exclusivo.Nombre y uso indicadoEl kit de ensayos Influenza A Ab es un inmunoensayo enzim•tico para la detecciŽn de anticuerpos frente al virus de la Influenza A enmuestras de suero.Información generalLas especies dom†sticas y silvestres se ven afectadas por los virus de la Influenza A. La enfermedad en s‘ se caracteriza por una ampliavariedad de respuestas, que van desde la ausencia virtual de signos cl‘nicos hasta mortalidad alta.La virulencia de la influenza A var‘a con la cepa y/o aislamiento viral, la edad y el estatus inmunitario del animal, la presencia deinfecciones virales habituales y la eventual complicaciŽn con infecciones secundarias. Los signos respiratorios incluyen tos, descarga nasaly/u ocular, estornudos y disnea. La hipertermia puede observarse en asociaciŽn con anorexia, p†rdida de peso, letargia y postraciŽn.Debido a la variaciŽn y gravedad de los s‘ntomas cl‘nicos, las pruebas serolŽgicas nos aportan importantes ventajas para la detecciŽn de laInfluenza A. La vigilancia de la exposiciŽn de grupos animales se facilita con la mediciŽn de anticuerpos frente al virus de la Influenza A en elsuero.Descripciones y principiosEste ensayo est• dise•ado para medir el nivel relativo de anticuerpos frente a la Influenza A en muestras de suero. El ensayo se realiza enplacas de 96 pocillos que se tapizan con el ant‘geno viral de la Influenza A. Tras la incubaciŽn de la muestra a analizar en los pocillostapizados, el anticuerpo espec‘fico frente a la Influenza A forma un complejo con el ant‘geno. Tras eliminar el material no unido, se a•adeun conjugado enzim•tico de anticuerpos monoclonales anti-Influenza A a los pocillos. Si no hay anticuerpos frente a la Influenza Apresentes en la muestra a analizar, el conjugado puede reaccionar libremente con el ant‘geno de la Influenza A presente en la placa. Alcontrario, si hay anticuerpos frente a la Influenza A presentes en la muestra, el conjugado anti-Influenza A no puede unirse al ant‘geno. Elconjugado no unido se elimina mediante lavado y se a•ade un sustrato enzim•tico. El color que aparece a continuaciŽn es inversamenteproporcional a la cantidad de anticuerpos anti-Influenza A en la muestra a analizar.Reactivo Volumen 1. Placas tapizadas con ant‘geno del virus de la Influenza A 5 2. Control positivo de Influenza A 2,0 ml 3. Control negativo 2,0 ml 4. Conjugado Anti-Influenza A :HRPO 55 ml 5. Diluyente de las muestras 235 ml H. Sustrato TMB 60 ml I. SoluciŽn de frenado 60 ml 8. SoluciŽn concentrada de lavado (10X) 235 mlMateriales necesarios y no suministradosPipetas de precisiŽn y un pipeteador multicanal con puntas de pipetas desechables, lector de placas de 96 pocillos, tubos de ensayo paradiluir muestras, agua destilada o desionizada y dispositivo para dispensaciŽn y aspiraciŽn de soluciŽn de lavado.Precauciones y advertencias para los usuariosManipular todos los materiales biolŽgicos de la Influenza A como si pudieran transmitir la Influenza A. Las placas tapizadas con ant‘genopodr‘an ser una fuente de Influenza A. Antes del tapizado en la fase sŽlida, se ha inactivado el ant‘geno mediante tratamiento qu‘mico. Noobstante, no hay que presuponer su inactivaciŽn total. Algunos componentes del kit contienen azida de sodio como conservante. LaeliminaciŽn requiere lavar con agua en abundancia las ca•er‘as para que no se formen complejos de cobre o azida de plomo que podr‘anexplotar por percusiŽn. No exponer las soluciones TMB a luz intensa o a agentes oxidantes. Conservar todos los reactivos a 2€C–8€C.Todos los desechos deber‘an descontaminarse apropiadamente antes de eliminarse. No utilizar componentes despu†s de su fecha decaducidad y no mezclar componentes de kits con distintos n’meros de lote. Para mantener la precisiŽn y la exactitud, el pipeteado y ellavado deben hacerse con cuidado a lo largo de este procedimiento. El estricto seguimiento de este protocolo garantizar• unos resultadosŽptimos. SŽlo para uso veterinario.Preparación de las muestras Influenza A Ab - Version 53101-01 5/9
  3. 3. Diluya las muestras 10 veces (1/10) con el diluyente de muestras antes de analizarlas (por ejemplo, mediante la diluciŽn de 15 “l demuestra con 135 “l del diluyente de muestras).NOTA: NO DILUYA LOS CONTROLES. No olvide cambiar las puntas para cada muestra. Las muestras deben estar mezcladascorrectamente antes de dispensarlas.Preparación de la solución de lavadoEl concentrado de lavado 10X debe dejarse atemperar hasta que alcance la temperatura ambiente, (18€C–25€C), y luego mezclarse paraasegurar la disoluciŽn de las sales precipitadas existentes. El concentrado de lavado debe diluirse a 1/10 con agua destilada/desionizadaantes de utilizarse (por ejemplo, 30 ml de concentrado m•s 270 ml de agua por placa analizada).Procedimiento de análisisEspere a que los reactivos alcancen la temperatura ambiente (18€C–25€C) y luego mezcle mediante inversiones y giros.1. Tome una o m•s placas tapizadas con ant‘geno y anote la posiciŽn de la muestra en una ficha de trabajo.2. Dispense 100 “l de control negativo NO DILUIDO en dos pocillos.3. Dispense 100 “l de control positivo NO DILUIDO en dos pocillos.4. Dispense 100 “l de muestra diluida en los pocillos correspondientes.5. Incube durante 60 minutos (ƒ 5 minutos) a temperatura ambiente (18€C–25€C).6. Lave cada pocillo con aproximadamente 350 “l de soluciŽn diluida de lavado por 3 a 5 veces.7. Dispense 100 “l de suero anti-Influenza A conjugado con peroxidasa de r•bano en cada pocillo.8. Incube durante 30 minutos (ƒ 2 minutos) a temperatura ambiente (18€C–25€C).9. Repita el paso 6.10. Dispense 100 “l de soluciŽn sustrato TMB en cada pocillo.11. Incube durante 15 minutos (ƒ 1 minuto) a temperatura ambiente (18€C–25€C).12. Dispense 100 “l de soluciŽn de frenado en cada pocillo para detener la reacciŽn.13. Calibre el lector en blanco con aire.14. Meda y anote los valores de la absorbancia a 650nm, A(650).ResultadosPara que el ensayo sea v•lido, la absorbancia media A(650) del control negativo debe ser superior o igual a 0,600, y la relaciŽn M/N delcontrol positivo debe ser inferior a 0,50. En el caso de an•lisis no v•lidos, la t†cnica podr‘a ser la causante y habr‘a que repetir el ensayo.La presencia o ausencia de anticuerpos frente a la IA se determina por la relaciŽn muestra-control negativo (M/N) para cada muestra.Cálculos Media del control negativo (CNx) = CN1 A(650) + CN2 A(650) 1. 2 Media del control positivo (CPx) = CP1 A(650) + CP2 A(650) 2. 2 RelaciŽn M/N = Media de la Muestra A(650) 3. CNxInterpretación de los resultadosSuero aviar:Las muestras con valores M/N < 0,50 deber•n considerarse positivas a la presencia de anticuerpos frente a la Influenza A.Las muestras con una relaciŽn M/N ≥ 0,50 se consideran negativas a la presencia de anticuerpos frente a la Influenza A.Suero de otras especies:Las muestras con valores M/N < 0,60 deber•n considerarse positivas a la presencia de anticuerpos frente a la Influenza A.Las muestras con una relaciŽn M/N ≥ 0,60 se consideran negativas a la presencia de anticuerpos frente a la Influenza A.La inactivaciŽn del suero por calor puede dar como resultado falsos d†biles positivos en muestras de gansos. Influenza A Ab - Version 53101-01 6/9
  4. 4. Manufacturer/Hersteller/Fabricant/Fabricante Distributor/Vertrieb/Distributeur/DistribuidorINSTITUT POURQUIER SAS IDEXX Laboratories B.V.326 rue de la Galera Scorpius 6034090 MONTPELLIER – France 2132 LR HOOFDDORP – The Netherlands_______________________________________________________________________________________________________ Influenza A Ab - Version 53101-01 9/9

×