La histoquímica utiliza reacciones químicas y bioquímicas para localizar sustancias y actividades celulares. Existen numerosas técnicas histoquímicas que permiten visualizar específicamente sustancias como colágeno, mucinas, glucosas, pigmentos, microorganismos como hongos y parásitos. Estas técnicas se basan en el uso de colorantes que se unen selectivamente a los componentes celulares para ser observados al microscopio.
2. La histoquímica es la aplicación de reacciones
químicas y bioquímicas en la técnica histológica,
para localizar y establecer de forma científica
ciertas sustancias o su actividad. Las técnicas
histoquímicas comprenden el conjunto de métodos
empleados para la demostración de la naturaleza
química de los componentes tisulares y celulares.
Se recurre al empleo de estas tinciones
histoquímicas cuando se pretende visualizar
específicamente una sustancia determinada.
3. Una tinción o coloración es una técnica
auxiliar utilizada en microscopía para
mejorar el contraste en la imagen vista
al microscopio. Los colorantes y tinturas
son sustancias que usualmente se utilizan
en biología y medicina para resaltar
estructuras en tejidos biológicos que van a
ser observados con la ayuda de diferentes
tipos de microscopios
4. . Los diferentes colorantes pueden ser
utilizados para aumentar la definición y
examinar grandes cortes de tejido
(resaltando por ejemplo fibras
musculares o tejido conectivo), poblaciones
celulares(por ejemplo clasificando
diferentes células sanguíneas) o incluso
para resaltar organelas dentro de células
individuales
5. En bioquímica, esto implica agregar un colorante
específico ( significa que de una de manera
selectiva ya sea
a ADN, proteínas, lípidos, carbohidratos, etc.) a
un sustrato para cualificar o cuantificar la
presencia de un determinado compuesto. Tanto
la tinción como el marcado fluorescente pueden
servir para los mismos propósitos.
Diferentes tipos de tinciones biológicas son
utilizadas también para marcar células
en citometría de flujo y para marcar proteínas ó
ácidos nucleícos en electroforesis en gel.
6. La mayoría de los colorantes son
compuestos orgánicos que tienen alguna
afinidad específica por los materiales
celulares. Muchos colorantes utilizados con
frecuencia son moléculas cargadas
positivamente (cationes) y se combinan con
intensidad con los constituyentes celulares
cargados negativamente (aniones), tales
como los ácidos nucleicos y los
polisacáridos ácidos.
8. COLAGENO: Tricròmico de Masson , Gomori
y Van Gieson
RETICULINA: Plata Amoniacal, ejemplo:
Método de Snook, Wilder y Manuel .
ELASTINA: Hematoxilina Férrica: Método de
Verhoeff , Fucsina resorcina: Método de
Hart y Fucsina aldèhica: Método de Gomori
18. Las coloraciones de lípidos se efectúan
frecuentemente en
secciones obtenidas por congelación o tejidos fijados
.
METODO DE ACEITE ROJO.
19. Los pigmentos son sustancias que tienen
color propio.
Los pigmentos mas comunes presentes en los
tejidos son de color marrón o negro.
Los métodos mas utilizados son: Warthin-
Starry para melanina , Método de hall para
bilirrubinas, método de Perls para hierro,
Método de Von Kossa para sales minerales y
método de Rodanina para localizar cobre.
23. La demostración de organismos infecciosos
en secciones de parafina y frotes a través de
técnicas especiales de coloración
constituyen un elemento de diagnóstico de
valor inestimable.
24. La coloración de gram-negativa y gram-
positiva puede lograrse con los métodos de
coloración de gram disponibles. A pesar de
que la coloración requiere de colorantes y
descolorantes de diferentes concentraciones,
los procedimientos de tinción no varían en
forma significativa
La coloración de Brown y Hopps y las de
Brown Brenn son las mas utilizadas.
34. Los hongos son plantas que no tienen
tallo, hojas y raíces, y además carecen de
clorofila.
La estructura de los hongos varían de
acuerdo a la clasificación, pueden ser
filamentosos alargadas llamadas hifas.
Las enfermedades producidas por hongos
que infectan a los seres humanos pueden
agruparse en superficies como la piel, uñas o
sistemas invadidos u órganos.
35. Entre las principales coloraciones para
hongos tenemos:
GMS ............................. Aspergillius F.
PAS............................... Cándida Albicans
GIEMSA......................... Dermatofitos
GRIDLEY FUNGUS.......... Blastomicetos
GRAM POSITIVO............ Actinomices sp
MUCICARMIN................ Criptococcus
neoformans
45. En esta categoría se incluyen una serie de
organismos que varían entre los protozoos
unicelulares y los helmintos visibles
macroscópicamente. Los protozoos de la
leshmania son vistos con la coloración de
Giemsa.
El Pneumocystis Carinii, es un organismo
oportunista que se evidencia en los pulmones
de los pacientes con deficiencia inmunitaria y
lo podemos observar con la coloración de
Giemsa, Papanicolaou y Fluorescencia.
51. Los métodos histoquímicos se fundamentan
en hacer reaccionar químicamente reactivos
con los componentes celulares o tisulares
que queremos demostrar para obtener un
producto final que es coloreado y puede
verse con el microscopio. La histoquímica se
pueden clasificar en tres tipos en función de
lo que tiñan: sustancias, microorganismos y
especiales.
52. METODOS HISTOTECNOLOGICOS.
Mills, Bob y Edna B.
Instituto de Patología de los Estados Unidos
AFIP
Impreso en Washington, D. C. 1995.
280 pág..