Técnicas Histopatológicas e Exames Anatomopatológicos

Técnica Histopatológica IITécnica Histopatológica II
UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONASUNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS
FACULDADE DE CIÊNCIAS DA SAÚDEFACULDADE DE CIÊNCIAS DA SAÚDE
DEPARTAMENTO DE PATOLOGIA E MEDICINA LEGALDEPARTAMENTO DE PATOLOGIA E MEDICINA LEGAL
PATOLOGIA I E GERALPATOLOGIA I E GERAL
Prof. Jeconia CamaraProf. Jeconia Camara
Cintia L. FerreiraCintia L. Ferreira
Carla guimaraesCarla guimaraes
Michella LimaMichella Lima

Técnica HistopatológicaTécnica Histopatológica
PATOLOGIA
Procedimentos
convencionais
Análise macro e
microscópica
Tecnologia
Revolução
PATOLOGIA
Novos e
diversificados
instrumentos de
estudo
(Filho, Barbosa e Miranda ,2000)

Técnica HistopatológicaTécnica Histopatológica
 Análises por:Análises por:
 Exames CitológicosExames Citológicos
 Anatomopatológicos:Anatomopatológicos:
 BiópsiasBiópsias
 Peças Cirúrgicas (PC)Peças Cirúrgicas (PC)
 EndoscópicosEndoscópicos
 CuretagensCuretagens
 Por AgulhaPor Agulha
 TrepanaçãoTrepanação
 Dirigidos por aparelhos especiais (colposcopia,Dirigidos por aparelhos especiais (colposcopia,
ultrasonografia, estereotaxiaultrasonografia, estereotaxia
 Necrópsias (N)Necrópsias (N) (Filho, Barbosa e Miranda ,2000)

Exames CitológicosExames Citológicos
 Meio de diagnóstico de muitas doenças.Meio de diagnóstico de muitas doenças.
 Indicação:Indicação:
 Diagnóstico de lesões neoplásicasDiagnóstico de lesões neoplásicas
 Detecção de agentes infecciososDetecção de agentes infecciosos
 Detecção de agentes parasitáriosDetecção de agentes parasitários

Material para Análise Citológica:Material para Análise Citológica:
1.1. RaspadosRaspados da pele ou mucosa (ex. cervicovaginal) comda pele ou mucosa (ex. cervicovaginal) com
espátulas ou escovasespátulas ou escovas
2.2. Secreções (árvore traqueobrônquica, conteúdo de cistos,Secreções (árvore traqueobrônquica, conteúdo de cistos,
expressão mamilar, tubo gastrintestinal)expressão mamilar, tubo gastrintestinal)
3.3. Líquidos (serosas, urina, líquido amniótico, etc)Líquidos (serosas, urina, líquido amniótico, etc)
4.4. Punção Aspirativa [PAAF]. Lesões nodulares de diversosPunção Aspirativa [PAAF]. Lesões nodulares de diversos
órgãos (tireóide, mama, linfonodos, etc), sólidas ou císticas.órgãos (tireóide, mama, linfonodos, etc), sólidas ou císticas.

Aspectos importantes!Aspectos importantes!
- Fixação imediata (álcool etílico 95%) ainda úmida.- Fixação imediata (álcool etílico 95%) ainda úmida.
- Esfregaços secos (colorações hematológicas).- Esfregaços secos (colorações hematológicas).
-Secreções ricas em muco (escarro, material do tubo-Secreções ricas em muco (escarro, material do tubo
gastrintestinal) ou em proteínas (líquidos serosos)gastrintestinal) ou em proteínas (líquidos serosos) ⇒⇒ guardadasguardadas
em geladeira por até um dia antes de serem encaminhadas aoem geladeira por até um dia antes de serem encaminhadas ao
laboratóriolaboratório ⇒⇒ muco protege as céls., e as proteínas servemmuco protege as céls., e as proteínas servem
como nutrientes.como nutrientes.

Aspectos importantes!Aspectos importantes!
-- Líquidos pobres em proteínas ou em muco (liquor, urina)Líquidos pobres em proteínas ou em muco (liquor, urina) ⇒⇒
poucas horas na geladeirapoucas horas na geladeira ⇒⇒ não puder ir ao lab.não puder ir ao lab. ⇒⇒ fixá-lo emfixá-lo em
igual volume de etanol a 50%.igual volume de etanol a 50%.
- Coloração universal dos esfregaços celulares é Papanicolau.- Coloração universal dos esfregaços celulares é Papanicolau.
Citologia
HPV

Técnica para ExamesTécnica para Exames
CitológicosCitológicos
Swabs Kit de coleta ginecológico
Fonte: http://www.anticorpos.com.br

Espátulas cervicais de Ayre Escovas cervicais

Punção Aspirativa por Agulha Fina (PAAF)

Frascos para lâminas fixadas em álcool
Spray de Fixação

Citocentrifugadora
Tubo de citocentrifugadora

 Resultado de Exame Citológico:Resultado de Exame Citológico:
 Diagnóstico morfológico das doenças e complementadosDiagnóstico morfológico das doenças e complementados
quando possível, com outros dados de interesse clínico.quando possível, com outros dados de interesse clínico.
 Rastreamento de lesões pré-cancerosas ou paraRastreamento de lesões pré-cancerosas ou para
diagnóstico de doenças malignasdiagnóstico de doenças malignas

- Classificação de Papanicolau:Classificação de Papanicolau:
 Classe 0Classe 0 ⇒⇒ material inadequado ou insuficiente paramaterial inadequado ou insuficiente para
diagnóstico (repetir colheita);diagnóstico (repetir colheita);
 Classe IClasse I ⇒⇒ normal;normal;
 Classe IIClasse II ⇒⇒ presença de atipias celulares, porém nãopresença de atipias celulares, porém não
associadas a malignidades. Refere-se em geral aassociadas a malignidades. Refere-se em geral a
processos inflamatórios;processos inflamatórios;
 Classe IIIClasse III ⇒⇒ esfregaço duvidoso para malignidade;esfregaço duvidoso para malignidade;
 Classe IVClasse IV ⇒⇒ esfregaço sugestivo mas não conclusivo deesfregaço sugestivo mas não conclusivo de
malignidade;malignidade;
 Classe VClasse V ⇒⇒ esfregaço positivo para malignidade.esfregaço positivo para malignidade.

Exames AnatomopatológicosExames Anatomopatológicos
 A patologia cirúrgica é o estudo anatomopatológicoA patologia cirúrgica é o estudo anatomopatológico
de órgãos ou suas partes retirados cirurgicamentede órgãos ou suas partes retirados cirurgicamente
(biópsias ou peças cirúrgicas).(biópsias ou peças cirúrgicas).
 Tem como objetivo principal fornecer o diagnósticoTem como objetivo principal fornecer o diagnóstico
da lesão, orientando o tratamento e o prognósticoda lesão, orientando o tratamento e o prognóstico
do paciente.do paciente.
 Existem duas modalidades principais de exame - oExistem duas modalidades principais de exame - o
exame do material incluído em blocos de parafina eexame do material incluído em blocos de parafina e
a biópsia por congelação.a biópsia por congelação.

AnatomopatologiaAnatomopatologia
 O exame anatomopatológico + freqüente ⇒⇒ histopatologia com
inclusão em parafina de pequenos fragmentos para confecção de
um preparado histológico padrão ⇒⇒ hematoxilina-eosina.
 O exame histopatológico ⇒⇒ precedido de um procedimento
cirúrgico:
 biópsia incisional
 biópsia excisional
 retirada parcial ou total de um órgão
 biópsia por agulha grossa ("core biopsy").

Biópsia IncisionalBiópsia Incisional
 Retira-se parte da lesão,Retira-se parte da lesão,
bem como pequena áreabem como pequena área
marginal de tecido normalmarginal de tecido normal
para comparação.para comparação.
 A maior parte da lesãoA maior parte da lesão
continua no paciente,continua no paciente,
aguardando o resultado doaguardando o resultado do
exame histopatológico paraexame histopatológico para
definir a forma de tratamentodefinir a forma de tratamento
mais adequada.mais adequada.

Biópsia IncisionalBiópsia Incisional
 Biópsia endoscópica:Biópsia endoscópica:
 endoscopia digestiva alta,endoscopia digestiva alta,
 colonoscopia,colonoscopia,
 mediastinoscopia,mediastinoscopia,
 broncoscopiabroncoscopia
 Costuma ser do tipoCostuma ser do tipo
incisional, uma vez queincisional, uma vez que
não permite a retiradanão permite a retirada
de lesões maiores quede lesões maiores que
alguns milímetros.alguns milímetros.

Biópsia ExcisionalBiópsia Excisional
 Numa biópsia excisional retira-se toda a lesão, comNuma biópsia excisional retira-se toda a lesão, com
pequena margem de tecido normal, como segurança.pequena margem de tecido normal, como segurança.
 Muito utilizada em lesões pigmentadas ou tumorais daMuito utilizada em lesões pigmentadas ou tumorais da
pelepele ⇒⇒ Diagnóstico e TratamentoDiagnóstico e Tratamento..

Peça CirúrgicaPeça Cirúrgica
 A retirada total ou parcial de qualquer órgão costuma serA retirada total ou parcial de qualquer órgão costuma ser
feita após uma primeira biópsia ou exame citopatológico terfeita após uma primeira biópsia ou exame citopatológico ter
diagnosticado a natureza da lesão e que esse tipo dediagnosticado a natureza da lesão e que esse tipo de
procedimento radical é o mais indicado.procedimento radical é o mais indicado.

 Constitui-se tratamento cirúrgico de doenças variadas,Constitui-se tratamento cirúrgico de doenças variadas,
neoplásicas ou não.neoplásicas ou não.
 Podem ser simples (vesícula biliar) ou compostas ouPodem ser simples (vesícula biliar) ou compostas ou
radicais (mama + linfonodos axilares + músculo).radicais (mama + linfonodos axilares + músculo).

http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/FEMHTML/FEM027.html

Punção Agulha GrossaPunção Agulha Grossa
 Procedimento que vem crescendo nos últimos anos.Procedimento que vem crescendo nos últimos anos.
 A técnica baseia-se na introdução de uma agulha grossa (2 a 5A técnica baseia-se na introdução de uma agulha grossa (2 a 5
mm) no órgão afetado, até alcançar a lesão.mm) no órgão afetado, até alcançar a lesão.

Punção Agulha GrossaPunção Agulha Grossa
 Com isso obtém-se um cilindroCom isso obtém-se um cilindro
de tecido para ser estudado.de tecido para ser estudado.
 Deve ser acompanhada deDeve ser acompanhada de
método radiológico paramétodo radiológico para
assegurar o posicionamento daassegurar o posicionamento da
agulha em caso de lesõesagulha em caso de lesões
focais.focais.
 Vantagens:Vantagens:
 Rápida, fácil de realizar,Rápida, fácil de realizar,
utiliza anestesia local,utiliza anestesia local,
dispensa internação edispensa internação e
diminui os custos.diminui os custos.
 Muito utilizada em tumores daMuito utilizada em tumores da
mama e próstata e em doençasmama e próstata e em doenças
hematológicas onde umahematológicas onde uma
biópsia da medula óssea ébiópsia da medula óssea é
necessária.necessária. Fonte: http://www.anticorpos.com.br

 Após a retirada cirúrgica do material, segue-se um importanteApós a retirada cirúrgica do material, segue-se um importante
procedimento - a fixação do material em solução de formol a 10% (6 aprocedimento - a fixação do material em solução de formol a 10% (6 a
10 vezes o volume do espécime).10 vezes o volume do espécime).
 Solução de formol tamponado a 10%:Solução de formol tamponado a 10%:

Formol a 10%Formol a 10%
Água
Formaldeido a 40%
90%
10%
•Mais utilizado
•Rápida penetração nos tecidos
•Boa penetração nas organelas
•Limita o encolhimento e o
endurecimento dos tecidos
•Utilizado para maioria dos
estudos imuno-histíquimica e
moleculares

FixaçãoFixação
 Objetivos:Objetivos:
 Interromper a autólise e limitar a difusão dosInterromper a autólise e limitar a difusão dos
componentes celularescomponentes celulares
 Prevenir alterações relacionadas á ação bacterianaPrevenir alterações relacionadas á ação bacteriana
(putrefação)(putrefação)
 Facilitar as reações subseqüentes de coloraçãoFacilitar as reações subseqüentes de coloração

 A fixação ideal é obtida com solução de formol tamponado a 10%A fixação ideal é obtida com solução de formol tamponado a 10%
por 24-48 horas.por 24-48 horas.
 Uma fixação mais prolongada não interfere com a qualidade doUma fixação mais prolongada não interfere com a qualidade do
exame histopatológico, porém pode diminuir a imuno-reatividade doexame histopatológico, porém pode diminuir a imuno-reatividade do
material e até causar resultado falso-negativo.material e até causar resultado falso-negativo.
 Demora na fixaçãoDemora na fixação ⇒⇒ pode prejudicar a histopatologia devido àpode prejudicar a histopatologia devido à
autólise, também pode ter o mesmo efeito negativo na imuno-autólise, também pode ter o mesmo efeito negativo na imuno-
histoquímica.histoquímica.

 Dicas importantes!!!Dicas importantes!!!
 Fixador universalFixador universal ⇒⇒ Formaldeído 40%Formaldeído 40%
 9 parte de água e 1 de formol comercial (formol a 10%)9 parte de água e 1 de formol comercial (formol a 10%)
 Relação de volume de formol em relação a peça cirúrgica é deRelação de volume de formol em relação a peça cirúrgica é de
6 – 10 vezes o volume da peça.6 – 10 vezes o volume da peça.
 Dependendo do caso ou necessidade de técnicas especiaisDependendo do caso ou necessidade de técnicas especiais ⇒⇒
álcool 95%, Zenker, Bouin, glutaraldeído etc).álcool 95%, Zenker, Bouin, glutaraldeído etc).
 Amostras para ImunofluorescênciaAmostras para Imunofluorescência ⇒⇒ Solução salinaSolução salina
tamponada em frasco imerso em gelo triturado ou emtamponada em frasco imerso em gelo triturado ou em
álcool 70% resfriadoálcool 70% resfriado ⇒⇒ preservação por maior tempo.preservação por maior tempo.

 Dicas importantes!!!Dicas importantes!!!
 Dúvida em relação ao fixador antes da cirurgiaDúvida em relação ao fixador antes da cirurgia ⇒⇒
CONSULTE UM PATOLOGISTA PREVIAMENTE!!!CONSULTE UM PATOLOGISTA PREVIAMENTE!!!
 O material cirúrgico coletado preferencialmente sóO material cirúrgico coletado preferencialmente só
deverá ser clivado ou esvaziado pelo patologista.deverá ser clivado ou esvaziado pelo patologista.
 Todo material para exame cito ou anatomopatológicoTodo material para exame cito ou anatomopatológico
deve ser acompanhado de requisição onde constemdeve ser acompanhado de requisição onde constem
dados de identificação do paciente, informes clínicosdados de identificação do paciente, informes clínicos
relevantes, resultados de exames complementares erelevantes, resultados de exames complementares e
hipóteses diagnósticas.hipóteses diagnósticas.

REQUISIÇÃO DE EXAME DE BIÓPSIAREQUISIÇÃO DE EXAME DE BIÓPSIA
Hospital Universitário Getúlio VargasHospital Universitário Getúlio Vargas
Faculdade de Ciências da Saúde – DPMLFaculdade de Ciências da Saúde – DPML
N. Registro:........................N. Registro:........................
Nome:...............................................RG:...............Sexo:.......Idade:........cor:..............Est. Civil:................Nome:...............................................RG:...............Sexo:.......Idade:........cor:..............Est. Civil:................
End:................................................Naturalidade:.....................Nac:....................Profissão:.......................End:................................................Naturalidade:.....................Nac:....................Profissão:.......................
Serviço:.......................................Obteção do especime:...............................................................................Serviço:.......................................Obteção do especime:...............................................................................
Historico:Historico:
Achado operatorio:Achado operatorio:
Hipótese diagnóstica.........................................................................................................Hipótese diagnóstica.........................................................................................................
Local e data.....................................Assinatura e CRMLocal e data.....................................Assinatura e CRM//CRO...........................................CRO...........................................

REQUISIÇÃO DE EXAME DE BIÓPSIAREQUISIÇÃO DE EXAME DE BIÓPSIA
Hospital Universitário Getúlio VargasHospital Universitário Getúlio Vargas
Faculdade de Ciências da Saúde – DPMLFaculdade de Ciências da Saúde – DPML
N. Registro:........................N. Registro:........................
Nome:...............................................RG:...............Sexo:.......Idade:........cor:..............Est. Civil:................Nome:...............................................RG:...............Sexo:.......Idade:........cor:..............Est. Civil:................
End:................................................Naturalidade:.....................Nac:....................Profissão:.......................End:................................................Naturalidade:.....................Nac:....................Profissão:.......................
Serviço:.......................................Obtenção do espécime:...............................................................................Serviço:.......................................Obtenção do espécime:...............................................................................
Histórico:Histórico:
Achado operatório:Achado operatório:
Hipótese diagnóstica.........................................................................................................Hipótese diagnóstica.........................................................................................................
Local e data.....................................Assinatura e CRMLocal e data.....................................Assinatura e CRM//CRO...........................................CRO...........................................
PC 078-06
João Brasil 85439 M 53 negro casado
Rua Lua, 123 - Centro amazon. brasil. comerciante
odontologia biopsia excisional
Placa branca, irregular, não ulcerada, não removível pela
raspagem, medindo 3 x 5 cm, na borda lateral esquerda da
língua, estendendo-se para o dorso e em direção ao assoalho da
boca. O material foi fixado em formol 10%.
Paciente apresentou-se com história de placa branca assintomática, na
borda lateral esquerda da língua. O paciente não sabe há quanto tempo
a lesão está presente. A última vez que consultou um dentista foi a 5 anos.
O mesmo afirma ser tabagista e etilista. Não se recorda de qualquer
episódio traumático ou de dor oral.
Leucoplasia
Mao, 28.05.06 67493

Etapas da Técnica HistopatológicaEtapas da Técnica Histopatológica
PadrãoPadrão RecepçãoRecepção
 Análise MacroscópicaAnálise Macroscópica
 ClivagemClivagem
 Processamento laboratorial (manual ou automático)Processamento laboratorial (manual ou automático)
 DesidrataçãoDesidratação ⇒⇒ gradativa em álcoois (70%, 80%, 90% e 100%)gradativa em álcoois (70%, 80%, 90% e 100%)
 Diafanização (Clareamento)Diafanização (Clareamento) ⇒⇒ xilolxilol
 ImpregnaçãoImpregnação
 Inclusão em parafinaInclusão em parafina
 MicrotomiaMicrotomia
 DesparafinizaçãoDesparafinização
 ColoraçãoColoração
 Análise Microscópica (Microscópio óptico + comum)Análise Microscópica (Microscópio óptico + comum)
 ResultadoResultado

PadrãoPadrão
Para uma correta identificação o
material deve vir acompanhado de:
• Requisição preenchida com letra
legível, informando o nome,
prontuário, sexo, idade e cor do
paciente;
• Identificação da peça enviada;
• Breve resumo da sua história,
suspeita clínica, data e assinatura
com CRM/CRO do MÉDICO ou
CIRURGIÃO-DENTISTA solicitante.
http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/HISTHTML/HISTOTCH/TECH001.html

PadrãoPadrão
Estação de Clivagem Ideal
Material p/ clivagem - bisturis e lâminas

PadrãoPadrão
Análise e clivagem do material
Fonte: http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/HISTHTML/HISTOTCH/TECH003.html
Pequenos fragmentos da área de lesão e de outras, pré-estabelecidas por
um protocolo de clivagem. O número de fragmentos clivados varia de acordo
com a peça e com o tipo de lesão.

PadrãoPadrão
Frascos p/ acondicionar o material
Cassetes

PadrãoPadrão
Cassete com fragmento

PadrãoPadrão
Auto-técnico

PadrãoPadrão
Moldes p/ inclusão
Parafina histológica
Material deverá ser incluído em parafina para proporcionar firmeza e maciez
suficientes para a realização de cortes finos (5 micra) o bastante para serem
distendidos sobre uma lâmina de vidro.

PadrãoPadrão
Auto-inclusor

PadrãoPadrão
Moldes p/ inclusão

PadrãoPadrão
Micrótomo
Navalhas descartáveis p/ micrótomo

PadrãoPadrão

PadrãoPadrão
Banho-maria histológico

Etapas da Técnica ConvencionalEtapas da Técnica Convencional
Lâminas histológicas

PadrãoPadrão
Banho-maria histológico (40ºC) e captura em lâmina

As lâminas com os cortes
parafinizados são
colocadas na estufa à 60o
para aumentar a aderência
do corte à lâmina e para
eliminar a parafina
Fonte:http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/HISTHTML/HISTOTCH/TECH011.html

Auto-corador

Auto-corador
http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/HISTHTML/HISTOTCH/TECH014.html

Colorações mais comuns e principais estruturas e substâncias
coradas:
• Hematoxilina-eosina (HE) ⇒ coloração histológica universal;
•Método de Papanicolau ⇒ coloração citológica universal;
•Tricômicos (Gomori, Masson e Mallory) ⇒ fibras colágenas,
músculo;
•Verhoeff-van Gieson ⇒ fibras elásticas, colágeno, músculo;
•Impregnação pela prata ⇒ fibras reticulares, melanina, axônio,
placas neuríticas, emaranhados neurofibrilares;

Colorações mais comuns e principais estruturas e substâncias
coradas:
• Prata (método de Grocott) ⇒ fungos, bacilos diversos;
•Ácido periódico-Schiff (PAS) ⇒ glicogênio, glicosaminoglicanos,
membrana basal, fungos, parasitas;
•Giemsa ⇒ células sanguíneas, bacilos espiralados, leishmânias;
•Wade e Ziehl Neelsen ⇒ BAAR;
•Vermelho-Congo ⇒ Amilóide;
•Sudan ⇒ Lipídeos

http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/CINJHTML/CINJ009.html
Coloração por HE

Lamínulas
Após a coloração, as lâminas são cobertas por lamínula com
bálsamo do Canadá ou outro meio de montagem, que serve para
aderir a lamínula à lâmina, aprisionando definitivamente o corte
corado, e a identificação é transcrita para uma etiqueta, que identifica
a lâmina.

Análise Microscópica
Fonte: http://www.zoneumidetoscane.it/eventi/microscopio.jpg

Arquivo de lâminas

Arquivo de blocos de parafina

 Biópsia por congelação ⇒⇒
realizadarealizada durante o ato cirúrgicodurante o ato cirúrgico
⇒⇒ cirurgião retira um pequenocirurgião retira um pequeno
fragmento de tecidofragmento de tecido ⇒⇒ analisado eanalisado e
diagnosticado pelo patologista emdiagnosticado pelo patologista em
poucos minutos.poucos minutos.
 Utilizado para se determinar aUtilizado para se determinar a
natureza de uma lesão - tumornatureza de uma lesão - tumor
benigno, maligno ou processobenigno, maligno ou processo
inflamatório, ou para se definir se ainflamatório, ou para se definir se a
margem cirúrgica está livre damargem cirúrgica está livre da
lesão.lesão.
 O resultado da biópsia deO resultado da biópsia de
congelação vai determinar acongelação vai determinar a
conduta a ser seguida peloconduta a ser seguida pelo
cirurgião.cirurgião.
gel para congelação
spray para congelação

criostato
suportes para o tecido

Biópsia por congelação -Biópsia por congelação -
ColoraçãoColoração

Imuno-HistoquímicaImuno-Histoquímica
 As técnicas de imuno-histoquímica (IHQ) detectam moléculasAs técnicas de imuno-histoquímica (IHQ) detectam moléculas
(antígenos) teciduais(antígenos) teciduais ⇒⇒ diagnósticos anatomopatológicos e nadiagnósticos anatomopatológicos e na
investigação científica.investigação científica.
 Mecanismo básico da imuno-histoquímica (IHQ)Mecanismo básico da imuno-histoquímica (IHQ) ⇒⇒
reconhecimento do antígeno por um anticorpo (Ac primário),reconhecimento do antígeno por um anticorpo (Ac primário),
que pode ser de forma:que pode ser de forma:
 diretadireta: o anticorpo primário é diretamente marcado,: o anticorpo primário é diretamente marcado,
geralmente por substância fluorescente ou enzima;geralmente por substância fluorescente ou enzima;
 indiretaindireta: o Ac primário serve como antígeno para um: o Ac primário serve como antígeno para um
segundo anticorpo (Ac secundário) de outra espécie animalsegundo anticorpo (Ac secundário) de outra espécie animal
marcado.marcado.

Direta Indireta
Técnica de ImunofluorescênciaTécnica de Imunofluorescência

Direta Indireta
Técnica de ImunohistoquímicaTécnica de Imunohistoquímica

Técnica de ImunohistoquímicaTécnica de Imunohistoquímica

Lóbulo mamário normal, com ácinos e ductos revestidos externamente
por células mioepiteliais imunomarcadas pelo anticorpo anti actina de
músculo liso. Células epiteliais do revestimento interno negativas. IHQ,
DAB, 10x.

 As principais indicações para a IHQ são:As principais indicações para a IHQ são:
 Definição da histogênese de neoplasiasDefinição da histogênese de neoplasias
morfologicamente indiferenciadas.morfologicamente indiferenciadas. Ex: carcinoma XEx: carcinoma X
linfoma X sarcomalinfoma X sarcoma
 Imunofenotipagem de neoplasias já classificadas pelaImunofenotipagem de neoplasias já classificadas pela
morfologia.morfologia.Ex: linfomas B ou T.Ex: linfomas B ou T.
 Identificar produtos de síntese das células neoplásicas,Identificar produtos de síntese das células neoplásicas,
especialmente tumores endócrinos.especialmente tumores endócrinos.Ex: tumor carcinóide,Ex: tumor carcinóide,
adenoma hipofisário.adenoma hipofisário.

 As principais indicações para a IHQ são:As principais indicações para a IHQ são:
 Pesquisa de marcadores prognósticos.Pesquisa de marcadores prognósticos.Ex: Ag deEx: Ag de
proliferação celular (PCNA, Ki67...), receptores hormonais...proliferação celular (PCNA, Ki67...), receptores hormonais...
 Auxílio na diferenciação entre neoplasias e estadosAuxílio na diferenciação entre neoplasias e estados
reacionais.reacionais.Ex: linfomas X linfadenopatias reacionaisEx: linfomas X linfadenopatias reacionais
 Detecção de antígenos de agentes infecciosos.Detecção de antígenos de agentes infecciosos.Ex: vírus,Ex: vírus,
bactérias...bactérias...

Patologia MolecularPatologia Molecular
•Subdivisão da Anatomia Patológica que lida com o diagnóstico
a partir da análise de moléculas, freqüentemente o DNA ou
RNA. Pode-se detectar a presença de genoma / proteínas
viróticas, outros agentes infecciosos, mutações genéticas,
superexpressão de gens, ploidia do DNA etc.
•As técnicas mais utilizadas são:
•Hibridização in situ
•Captura híbrida
•Reação em cadeia da polimerase - PCR
•Citometria
•Citogenética
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REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICASREFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
FILHO, G.B.; BARBOSA, A.J.A.; MIRANDA D. Métodos de Estudo
em Patologia. In: FILHO, G.B. Bogliolo. Patologia. 6ed. Rio de
Janeiro: Guanabara Koogan, p.6-18, 2000.
LABORATÓRIO ANTICORPOS. Disponível no endereço
eletrônico: http://www.anticorpos.com.br em 20/01/05.
WEBPATH. Disponível no endereço eletrônico: http://www-
medlib.med.utah.edu/WebPath/webpath.html em 21/02/05.
ZONEUMIDESTOCANE. Disponível no endereço eletrônico:
http://www.zoneumidetoscane.it/eventi/microscopio.jpg em
28/02/2005.

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