3. Proteínas totais Existem mais de 300 proteínas diferentes já identificadas no plasma sanguíneo. Apenas algumas são avaliadas rotineiramente Amostras mais usadas: sangue, urina, LCR, líquido amniótico, peritonial, pleural ou sinovial, saliva ou fezes.
5. Proteínas totais A concentração das proteínas plasmáticas é determinada por três fatores:- Velocidade de síntese: A maioria produzida no fígado. Cerca de 25g/dia num indivíduo de 70kgs- Volume de líquido: Cerca de 250g de proteínas são encontradas no compartimento vascular de um homem de 70kgs, dando uma concentração ao redor de 7,0g/dl
6. Proteínas totais - Velocidade do catabolismo: As proteínas totais são degradadas, liberando aminoácidos para a síntese de proteínas celulares. 20 a 50% das ptns urinárias – albumina Outros – ptnstamm-horsfall
7. Proteínas totais Determinação das proteínas totais:- Método do Biureto: O cobre, em meio alcalino, reage com a ligação peptídica. O produto apresenta bandas de absorção.Interferentes: Substâncias que possam reagir com o íon cúprico. Ex: Bilirrubina aumentada, triglicerídeos acima de 500mg/dlVR soro: 6,0 – 8,0g/dl
8. Proteínas totais Outros métodos:- Método de Lowry- Método de Bradford- Método de Smith Paciente: Jejum de 8 horasAmostra: soro sem hemólise e não lipêmico
12. Albumina Representa cerca de 60% das proteínas do plasma humano. Meia vida de 15-19 dias Velocidade de síntese depende da ingestão protéica e regulada por feedback negativo pelo teor de albumina circulante Produção de cerca de 15g/ dia
13. Albumina Funções- Regulação osmótica- Transporte e armazenamento : Ácidos graxos e esteróides; bilirrubina; fármacos Síntese : no fígado, na forma de pro-albumina. Degradação: mecanismo desconhecido, degradadas aleatoriamente (novas e velhas), provavelmente pelos endotélio dos capilares, medula óssea e sinusóides hepáticos.
14. Albumina Determinação da albumina- Métodos de corantes: Metilorange, HABA, verde de bromo cresol(VBC) e púrpura de bromocresolVR: 3,5 a 5,5g/dl - Eletroforese
15. Albumina Paciente : Não consumir dieta rica em gordura por 48hr antes da prova Amostra: soro, observar postura dos pacientes, pois em pacientes ambulatoriais o teor de albumina é cerca de 0,3g/dL maior que em pacientes hospitalizados. Interferências: Elevação agentes citotóxicos. Redução Paracetamol, aspirina, ampicilina
16. Albumina Hiperalbuminemia - É rara - Encontrada em casos de carcinomatose metastática, desidratação aguda, diarréia, estresse, febre reumática, meningite, osteomielites, traumatismo, tuberculose, hemoconcentração, entre outros.
17. Albumina Hipoalbuminemia- Redução da síntese: Cirrose- Ingestão inadequada de proteínas: A síntese é reduzida a um terço durante um jejum de 24hr- Perda protéica extravascular: Síndrome nefrótica (proteinúria massiva) e enteropatia perdedora de proteínas
18. Albumina - Queimaduras extensas : a pele é o maior local de armazenamento extravascular da albumina.- Hemodiluição: Ascites, ICC-Estresse- Analbuminemia- Bisalbuminemia
20. PRÉ - ALBUMINA transporta a tiroxina (T4 ) e a triiodotironina(T3) - MEIA VIDA – 12 h diminuem na inflamação, doenças malignas, cirrose hepática e enfermidades renais perdedoras de proteínas. Na doença de Hodgkin os níveis aumentam.
21. proteína ligadora de retinol (RBP) Transporta a vitamina A (retinol). Se eleva em enfermidades renais crônicas, especialmente em pacientes com proteinúria tubular. Redução - enfermidade hepática e má nutrição protéica. Como o zinco é necessário para a síntese de RBP, os estados de deficiência deste metal são caracterizados por baixos níveis de RBP e vitamina A.
22. Fracionamento eletroforético A eletroforese de proteínas (EFP) no soro é uma técnica simples para separar as proteínas do soro. É o teste de triagem mais utilizado para investigação de anormalidades das proteínas séricas. Em condições normais, são separadas cinco bandas do soro: albumina, alfa-1, alfa-2, beta e gamaglobulinas. Eventualmente, pode ser observada a presença da pré-albumina.
25. Globulinas Região α1-Alfa1-antitripsina (AAT) Tem como função a inibição de várias proteases provenientes dos neutrófilos.Proteção contra destruição da parede alveolarVR: 20 - 60μmol/L
26. Globulinas - Alfa1-glicoproteína ácida(AAG) Tem como função primária inativar a progesterona, alem de interagir com alguma drogas. Aumentada na artrite reumatóide, Lúpus, queimaduras e infarto. O papel exato da AAG não é conhecido-Alfa1-Fetoproteína (AFP) Usada para detectar defeitos de tubo neural em fetos, examinado através do líquido amnióticoVR líquido amniótico: 5 a 25mg/dl-Alfa 1- Lipoproteína Transportadora de lipídeos
27. Globulinas Região α2-Haptoglobina (HAP) Transportadora de Hb para o retículo endotelial para ser degradada. Aumentada durante os processos inflamatórios e diminuída em síndromes hemolíticas. - Alfa2-macroglobulinainibidora de proteases. Aumentada durante a infância e na síndrome nefrótica e está diminuída em hepatopatias crônicas. - Ceruplasmina (CER)é fixadora de cobre. Está diminuída nas anemias e aumentada em neoplasias malignas; proteína de fase aguda tardia.
28. Globulinas Região β1-Transferritina(TRF)Transporta o ferro do intestino até a medula óssea. Está aumentada na depleção de ferro e diminuída nas perdas protéicas e hepatopatias crônicas. -Hemopexina (HX) Transporta o grupamento Heme até o fígado-Beta-lipoproteína Transportadora de lipídeos-Complemento C4 Resposta humoral, participa da via clássica do complemento. A deficiência resulta redução da resposta a infecções.
29. Globulinas Região β2- Fibrinogênio Substrato da trombina, não encontrado em fracionamentos eletroforéticos pois a amostra usada é o soro -Complemento fração C3 Atua na resposta imunológica humoral- Beta2- microglobulina (BMG) Proteína usada para testar a função tubular renal. Elevada em IR
30. Globulinas Região γ-Proteína C reativa Marcador não-específico de lesão tecidual, infecção ou necrose celular associada com infarto ou malignidadeVR: 80-800μg/dl
31. Globulinas Região γ- ImunoglobulinasSintetizadas pelo sistema imune em resposta a uma partícula estranha. -Reconhecem,reagem,neutralizam bactérias, vírus e proteínas estranhas. -Constituídas por proteínas com estrutura em y.-4 cadeias: 2 leves(L) e 2 pesadas(H)- Antígeno se liga a região variável das cadeias.- IgG, IgM, IgA, IgD e IgE
32. Globulinas ImunoglobulinasIgG (1,2,3,4)85% das Ig totais, atravessa a barreira placentáriaVR:800-1800mg/dlIgM 5-10% das Ig totaisVR: 50-150mg/dlIgE importante papel na atopia e imunidade antiparasitáriaVR:0-0,2mg/dl
34. Globulinas Gamopatias policlonais-Aumentos difusos das gamaglobulinemias-Causado por: lepra, tuberculose, cirrose biliar primária, cirrose portal, hepatite crônica ativa, doença de Crohn, lúpus eritematoso sistêmico Gamopatias monoclonais-Encontrada em: Mieloma múltiplo, macroglobulinemia de Waldenström, doença da cadeia pesada (doença de Franklin)
35. Globulinas Eletroforese de proteínas séricas em gel de agarose, (1) hipergamaglo-bulinemia em processo inflamatório; (2) e (3): fracionamento normal; (4) gama monoclonal no mieloma múltiplo.
36. Globulinas Perfis eletroforéticos patológicos: -Mau fornecimento protéico: albumina , 1 e 2, , -Perdas protéicas – Síndrome Nefrótica: albumina , 1, 2, , (varia) -Hepatite crônica: albumina, -Hepatite aguda: albumina ou normal, 1, 2 normal ou , e -Cirrose: albumina , 1,2 normal ou , , fusão das frações e
38. DESORDENS NO METABOLISMO DOS AMINOÁCIDOS Excesso de precursores tóxicos. Excesso de metabólitos tóxicos. Deficiência de metabólitos essenciais.
39. FENILCETONÚRIA (PKU) erro inato do metabolismo causado pela ausência (PKU clássica, tipo I) ou Deficiência parcial (tipo II) da enzima fenilalaninahidroxilase, que converte a fenilalaninaem tirosina. NÃO TRATADA : retardo mental e redução na expectativa de vida.
40. Outras desordens de aa Tirosinemia Cistinúria Cistinose – síndrome de Fanconi Homocistinúria Albinismo – tirosinase (converte tirosina em melanina)