Surveillance de la chimiosensibilité de Plasmodium falciparum - Conférence de la 1ère édition du Cours international « Atelier Paludisme » - RANDRIANARIVELOJOSIA Milijaona
Surveillance de la chimiosensibilité de Plasmodium falciparum
1. Surveillance de la chimiosensibilité
de Plasmodium falciparum
Milijaona Randrianarivelojosia
Groupe de Recherche sur le Paludisme
Institut Pasteur de Madagascar
2. Plasmodium pathogènes pour l’homme
P. falciparum P. vivax
peut être
résistant
aux drogues
P. malariae P. ovale
4. Ce qu’il faut pour surveiller la
chimiosensibilité des plasmodies
Masse critique de Matériels
personnels compétents Mission de terrain, et infrastructure
(conception, gestion et formation, - laboratoires, dispensaires
exécution des études … manipulations en
- informatique, véhicule
etc.) laboratoire, analyse
des données … - médicaments
-… etc.
Diffusion des résultats
Cartographie
Prise de décision
…
5. Points importants :
Surveiller la « sensibilité des plasmodies » aux
médicaments
Surveiller la « qualité des médicaments »
6. Approches pour l’évaluation de la sensibilité de
Plasmodium falciparum aux antipaludiques
Test de
chimiosensibilité
Echantillon
Tests in vitro
de sang
Génotypage
(marqueurs de
résistance)
Test in vivo
(traitement et
suivi)
7. Extrait de la présentation de l’atelier :
A l’aube du troisième millénaire, beaucoup de
laboratoires du Nord font progresser la recherche
sur les maladies infectieuses, alors que les grandes
endémies touchent majoritairement les pays du
Sud.
Qu’est ce qu’on peut/doit faire :
- dans les pays d’endémie du « sud » ?
- dans le cadre de « collaboration » ?
8. Evaluation de la chimiosensibilité
de P. falciparum
Test in vivo
(traitement et
suivi)
10. Test in vivo : évaluation de l’efficacité
thérapeutique des antipaludiques
Protocoles d’étude
- WHO/CDS/CSR/EPH/2002.17
- WHO/MAL96.1077 Augmentation
de taux d’échec:
Alerte !
Médicaments
- molécules préconisées par la politique nationale
- molécules autorisées sur le marché et utilisées dans un pays
Dosage de taux plasmatique des médicaments
et/ou des métabolites
11. Evaluation de la chimiosensibilité de
P. falciparum
Test de
chimiosensibilité
Echantillon
Tests in vitro
de sang
Génotypage
(marqueurs de
résistance)
12. Test de chimiosensibilité in vitro
Examen microscopique
OMS, CTD/MAL/97.20 Rev. 2 2001
Phénotype
résistant + :
Colorimétrique (Elisa)
Alarme !
Moreno et al, 2001 : LDH
Noedl et al, 2002 : HRPII
Méthode isotopique
Desjardins et al, 1979; Le Bras & Deloron, 1983
Mise en culture des
parasites viables
Cytométrie en flux
Pattanapanyasat et al, 1997
13. Quand les anticorps seront « accessibles », …
Min
Concentration de drogue
Max
des tests seront faisables dans structures hospitalières (périphériques) !
15. Pfcrt, marqueur de résistance P. falciparum
à la chloroquine
MAL7P1.27 (www.plasmoDB.org)
(Fidock et al, 2000)
16. Pfdhfr, marqueur de résistance de P. falciparum
à la pyriméthamine
59
51
Drug/substrate
108
NADP
164
pfDHFR
17. Détections des mutations des
marqueurs de résistance
Génotype
mutant + :
PCR/séquençage
Alarme !
PCR nichée mutation spécifique
Utilisation des sondes
Amplification
par PCR PCR/RFLP
(Ranford-Cartwright et al, 2002)
18. Exemples de stratégie de surveillance (1)
Analyse des rapports émanant des structures de santé de
base, de district, provinciales …
Suivi de cohortes (sites sentinelles)
Mise en place de réseau (national, régional, …)
…
20. Exemples de stratégie de surveillance (2)
Test de chimiosensibilité
in vitro
Isolats de P. falciparum
- sensibles à la quinine (n = 441)
- sensibles au cycloguanil (n = 136)
- 95% (493/519) de phénotype
sensible à la chloroquine
(Randrianarivelojosia et al, 2002)
21. Exemples de stratégie de surveillance (3)
N
Mayotte
Antsiranana
Détections des mutations des
marqueurs de résistance
Sambava
ue
Andapa
Antsohihy
Pas de P. falciparum mutant pfcrt
b iq
Mahajanga Port-Bergé
76T détectés (n = 200),
zam
ni de mutant pfdhfr 108N (n = 160)
Mo
Toamasina
Tsiroanomandidy Saharevo
u
ien
al d
Morondava
Antananarivo Evaluation de l’efficacité
Ind
thérapeutique des traitements
C an
an
Taux d’échec thérapeutique à la
Océ
Toliara
chloroquine < 15% (n = 250)
Pas d’échec thérapeutique au
Tolagnaro Fansidar® (SP) (n = 50)
(Ariey et al, 2002; Rason et al, 2002)
Sites d’étude du RER en 2002
22. Etant donnée la situation de la résistance à
la chloroquine dans le monde, …
27. NOS REMERCIEMENTS AUX
Villageois et patients Directions provinciales
des sites d’étude de santé
SLP Madagascar GRP – IP Madagascar PNLP de l’Union
Louise H. Ranaivo Lucie Raharimalala des Comores
Josée Sahondra-Harisoa Laurence Randrianasolo Rahamatou Silai
Désiré Rakotoson Arthur Randriamantena Said Ahmed Bedja
Andrianirina Raveloson Arsène Ratsimbasoa Ahmed Ouledi
Arthur Rakotonjanabelo Léon Rabarijaona …
Virginio Pietra Ronan Jambou
… Frédéric Ariey
…
Bailleurs de fonds Correspondants du RER
Ministère de la Santé
Coopération Française Participants et facilitateurs de
Projet Raf 6025, IAEA l’Atelier Paludisme 2003
Institut Pasteur
…