Entomologie moléculaire et étude de la structuration génétique des anophèles - Présentation de la 2e édition du Cours international « Atelier Paludisme » - RANDRIANASOLO Laurence - INSTITUT PASTEUR de MADAGASCAR BP 1274 Antananarivo, Madagascar - laurandrianas@yahoo.fr

1. Entomologie moléculaire et
étude de la structuration
génétique des anophèles
Présentée par Laurence Randrianasolo
laurandrianas@yahoo.fr
Institut Pasteur de Madagascar
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Atelier Paludisme 2004

2. 1- Problématiques
1.1- Taxonomie
1.1.1- Principe :
- la morphologie
- la biogéographie
Anopheles nili
- la bionomie du vecteur
1.1.2- Inconvénients
- Il y a des complexes d’espèces jumelles
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3. 1.2- Cytogénétique
1.2.1- Principe
Déterminer les inversions chromosomiques
caractéristiques de chaque espèce.
1.2.2- Inconvénients
- parfois absence d’inversion typique
- présent seulement dans les femelles semi-
gravides
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4. 2- Entomologie moléculaire
2.1- Avantages de l’étude sur ADN
2.1.1- Une stabilité de la molécule
conservation par dessiccation ou
immersion à l’alcool
2.1.2- Génome présente des mutations
- identification
- étude des polymorphismes
- étude du flux génétique
- étude de la phylogénie
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5. 2.1- Avantages de l’étude sur
ADN
2.1.3- ADN ribosomal
Anopheles nili
Anopheles carnevalei
Anopheles ovengensis
Anopheles somalicus
Anopheles nili
(Source : Kengne P. et al. Med. Vet. Entomol. 2003) 5

6. 2.1- Avantages de l’étude sur ADN
2.1.3- ADN ribosomal
une structure commune composée 18S, 5.8S et 28S séparées les
unes aux autres par ETS, ITS1, ITS2 et IGS.
étude des complexes d’espèces
2.1.4- ADN mitochondrial
stable de génération en génération
étude de la phylogénie
2.1.5- Microsatellite
très instable
étude du flux génétique 6

7. 2.2- Méthodes d’étude de
l’ADN
Technique principe avantages inconvénients
une sonde d’ADN -rapide -affinité moins de
Hybridation connue qui va se -moins cher 90%
fixer au niveau de -sensitive -librairie des
l’ADN à tester génomes
Polymerase Réaction de -très sensible -non quantitative
Chain polymérisation en -très spécifique -contamination
Reaction chaîne -très cher
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8. 2.2- Méthodes d’étude de l’ADN : PCR
Technique principe avantages inconvénients
primer pas besoin de non spécifique
RAPD-PCR arbitraire connaître la
séquence de
l’ADN
enzymes de étude du chevauchement
RFLP-PCR restriction : polymorphisme entre les
endonucléases inter espèce et marqueurs et le
intra spécifique prélèvement
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9. Exemple : complexe Anopheles nili
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(Source : Kengne P. et al. Med. Vet. Entomol. 2003)

10. 3- Structuration génétique d’une
population
3.1- Evaluation de la variation génétique
- étude de la fréquence des génotypes
- étude du flux génique
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11. 3.2- Facteurs influençant la
structuration génétique d’une
population
- croisement préférentiel entre génotypes
similaires tend vers la réduction du nombre
des hétérozygotes
- taille de la population influence la fréquence
des gènes
- migration modifie la fréquence génique
- mutation apportent de nouveaux gènes
- sélection change la fréquence génique
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12. 4-Apport de l’entomologie
moléculaire
-Elle permet d’ expliquer les échecs d’un
programme de lutte anti-vectorielle.
-Elle permet d’ orienter les nouvelles
approches de lutte anti-vectorielle.
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13. Références
•http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?CMD=Text&DB=PubMed
•http://sunsite.berkeley.edu/PCR/
•http://www.google.fr/search?hl=fr&ie=UTF-8&oe=UTF-
8&as_qdr=all&q=IRD+AND+biologie+moleculaire+AND+anopheles&btnG=Recherche+Google&meta=
•http://www.pasteur.fr/recherche/RAR/RAR2001/Bbmi.html
•http://www.tours.inra.fr/sfpar/j-EntomologieMedicale/Fontenille.pdf
•http://www.snv.jussieu.fr/bmedia/codegenet/CodeGenet.htm
•http://www.tours.inra.fr/sfpar/j-EntomologieMedicale/Fontenille.pdf
•Walter J. Tabachnik and William C. Black IV. Population genetics in vector biology. The biology of disease
vectors.Chapitre25:417-437
•Jaroslam Krywinski and Nora J. Besansky. Molecular systematics of anopheles : from subgenera to
subpopulations. Annu Rev Entomol. 2003;48:111-39.
•Walter J. Tabachnik and William C. Black IV.Molecular taxonomy and systematics of arthropod vectors.
The biology of disease vectors. chapitre 26:438-470
•J. Pinto, MJ. Donnelly, CA Sousa, V. Gil, C. Ferreira, N. Elissa, VE. Do Rosario et D. Charlwood. Genetic
structure of Anopheles gambiae (Diptera: Culicidae) in Sao Tomé and Principe (West Africa)/ implications
for malaria control. Molecular Ecology, 2002;11:2183-2187.
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14. Je vous
remercie
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