2. ÍNDICE.
oHistoria del Microscopio.
oTécnicas del Microscopio.
oPartes del Microscopio.
oTipos de Microscopio.
oInstalación.
oMantenimiento de
Microscopio.
3. HISTORIA DEL
MICROSCOPIO.
El microscopio se invento, hacia 1610, por Galileo, según los italianos, o por Jansen, en opinión
de los holandeses. La palabra microscopio fue utilizada por primera vez por los componentes
de la "Accademia dei Lincei" una sociedad científica a la que pertenecía Galileo y que publicaron
un trabajo sobre la observación microscópica del aspecto de una abeja.
Sin embargo las primeras publicaciones importantes en el campo de la microscopia aparecen en
1660 y 1665 cuando Malpighi prueba la teoría de Harvey sobre la circulación sanguínea al
observar al microscopio los capilares sanguíneos y Hooke publica su obra Micrographia.
A mediados del siglo XVII un comerciante holandés, Leenwenhoek, utilizando microscopios
simples de fabricación propia describió por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides
y glóbulos rojos.
Durante el siglo XVIII el microscopio sufrió diversos adelantos mecánicos que aumentaron su
estabilidad y su facilidad de uso aunque no se desarrollaron mejoras ópticas. Las mejoras mas
importantes de la óptica surgieron en 1877 cuando Abbe publica su teoría del microscopio y
por encargo de Carl Zeiss mejora la microscopía de inmersión sustituyendo el agua por aceite
de cedro lo que permite obtener aumentos de 2000A principios de los años 30 se había
alcanzado el limite teórico para los microscopios ópticos no consiguiendo estos, aumentos
superiores a 500X o 1000X sin embargo existia un deseo científico de observar los detalles de
estructuras celulares ( núcleo, mitochondria... etc.).
El microscopio electrónico de transmisión (T.E.M.) fué el primer tipo de microscopio
electrónico desarrollado este utiliza un haz de electrones en lugar de luz para enfocar la
muestra consiguiendo aumentos de 100.000 X. Fue desarrollada por Max Knoll y Ernst Ruska en
Alemania en 1931.
Posteriormente, en 1942 se desarrolla el microscopio electrónico de barrido (SEM).
4. TÉCNICAS DEL
MICROSCOPIO
Una de las finalidades de la
microscopía es permitir observar los
especímenes de la mejor manera
posible, logrando un buen balance
entre el contraste y la resolución.
La modificación de la manera como
incide la luz sobre el espécimen:
Empleo de condensadores y filtros:
- Microscopio de campo oscuro.
- Microscopio de contraste de fase.
- Microscopio de luz polarizada,
Microscopio petrográfico y
metalúrgico.
- Contraste por interferencia
diferencial (Differential Interference
Contrast) Nomarski.
• La modificación de la fuente
emisora de luz: Cambiando la luz
blanca por luz ultravioleta o rayos
láser:
- Microscopio de luz ultravioleta.
- Microscopio de fluorescencia.
- Microscopio confocal.
5. TÉCNICAS DEL
MICROSCOPIO
Se han diseñado técnicas microscópicas más complejas
que incrementan el contraste sin afectar la resolución.
Son artificios que proporcionan efectos ópticos en la
muestra, permitiendo que aquellos detalles que pasan
desapercibidos se traduzcan en cambios de intensidades
luminosas las cuales si pueden ser reconocidas por el ojo
humano.
En este sentido, las limitaciones presentadas por los
microscopios compuestos ordinarios han sido superadas
mediante el diseño y fabricación de microscopios
particulares o de accesorios especiales
6. PARTES DEL
MICROSCOPIO oCOMPONENTES
MECÁNICOS: Son
aquellos que sirven
de sostén,
movimiento y
sujeción de los
sistemas ópticos y
de iluminación así
como de los objetos
que se van a
observar.
oCOMPONENTES
ÓPTICOS: Son los
objetivos, los
oculares, el
condensador y los
prismas. Los tres
primeros están
constituidos por
sistemas de lentes
7. COMPONENTES
MECÁNICOS.
oBase o pie: Es un soporte metálico, amplio y sólido en
donde se apoyan y sostienen los otros componentes del
microscopio.
oBrazo, estativo o columna: Permite la sujeción y traslado
del microscopio. Soporta al tubo óptico, a la platina y el
revolver.
oPlatina: Superficie plana de posición horizontal que
posee una perforación circular central. En ella se apoya la
preparación (lámina portaobjetos que contiene a la
muestra que se va a examinar) que se sujeta a la platina
mediante pinzas o con un carrito o charriot que,
mediante mandos especiales facilitan el movimiento de
la preparación de derecha a izquierda y de adelante hacia
atrás
8. oTubo óptico: Consiste en un cilindro metálico que suele
medir 160mm o 170 mm de longitud (dependiendo del
fabricante del microscopio) el cual en un extremo, está
conectado al revolver o porta objetivos y en el otro se
relaciona con el (los) ocular(es).
oRevolver o porta-objetivos: Es un componente que gira
alrededor de un eje con la finalidad que los objetivos
que sostiene coincidan de manera perpendicular con la
perforación central de la platina. En su superficie inferior
posee varios agujeros donde se atornillan los objetivos.
oTornillos macrométrico y micrométrico: Generalmente
están situados en la parte inferior del brazo o columna.
Pueden estar separados o el tornillo micrométrico está
incorporado en la circunferencia del tornillo
macrométrico. Ambos tornillos permiten el
desplazamiento de la platina hacia arriba y hacia abajo
con la finalidad de acercar o alejar la preparación hacia
los objetivos y así conseguir un enfoque óptimo de la
imagen.
9. oEngranajes y
cremallera: Constituyen
mecanismos de
desplazamientos de las
diferentes partes del
microscopio.
oCabezal: Es un
componente situado en
relación con el tubo del
microscopio que
alberga principalmente
prismas o espejos que
sirven para acondicionar
en él dos o más
oculares, o sistemas
mecánicos que soportan
cámaras fotográficas, de
vídeo o sistemas de
proyección de la
imagen.
10. COMPONENTES
ÓPTICOS
oCondensador: Es el componente óptico que tiene como
función principal concentrar y regular los rayos luminosos que
provienen de la fuente luminosa. Está formado por una o dos
lentes convergentes que reúnen los rayos luminosos y los
orientan hacia la abertura central de la platina.
oObjetivos: Los objetivos están considerados los elementos
más importantes en la formación de la imagen microscópica,
ya que estos sistemas de lentes establecen la calidad de la
imagen en cuanto a su nitidez y la capacidad que tiene para
captar los detalles de la misma (poder de resolución).
11. CLASIFICACIÓN DE
OBJETIVOS.
oAcromáticos: Estos objetivos corrigen los rayos luminosos
azules y rojos haciéndolos coincidir en un solo plano focal. En
tanto que los otros rayos coloreados se forman en otro plano
focal generando una imagen cuyos bordes se observan
levemente difusos (espectro luminoso secundario). Los
objetivos de los microscopios “de estudiante” son acromáticos.
oSemiapocromáticos: Se les conoce también como objetivos
de “fluorita”, corrigen el espectro secundario dando como
resultado imágenes de bordes más nítidos. Por la alta
capacidad que tienen para transmitir las radiaciones luminosas
de onda corta, se les considera como los objetivos ideales
para microscopía de fluorescencia.
12. oApocromáticos: En estos objetivos se hacen coincidir en
solo plano los rayos luminosos azules, rojos y verdes,
obteniendo así una imagen de bordes sumamente
pero laberración trae consigo la acentuación de otra, que
de curvatura de campo, pues la superficie focal de la
es ligeramente curva, dando como resultado que, al
la imagen y tratar de enfocarla en la zona central del
microscópico se desenfoca la ona periférica y viceversa.
oPlanapocromáticos: Son los objetivos en los cuales se
corregido la mayor cantidad por la corrección de esta
aberración como la cromática, curvatura de campo, de
esfericidad y de astigmatismo; por lo tanto se obtienen
imágenes sumamente nítidas y el campo microscópico
aparece totalmente plano, enfocado en toda su
13. TIPOS DE
MICROSCOPIOS.
oEl microscopio compuesto: es el microscopio más
utilizado en la ciencia, el trabajo y el hobby. Consiste en dos
partes ópticas: lentes oculares (el que está próximo a tus
ojos) y los lentes objetivos (el que está posicionado cerca de
la prueba observada). El microscopio compuesto fue el
primero introducido por inventor holandés Zacarías Janssen
(el también es conocido por inventar el telescopio). Su
aparato sofisticado para el año 1590, llevaba a cabo dos
tareas: para ver estrellas y pequeños objetos. El instrumento
se convirtió en una invención del primer microscopio
compuesto y un telescopio al mismo tiempo.
14. o Microscopio óptico: liviano, es un
microscopio óptico común utilizando
las longitudes de las ondas de luz
visibles. Los microscopios livianos
son muy utilizados como herramienta
para ver objetos pequeños en
colores. El microscopio liviano puede
ser binocular o monocular, triocular
para el uso de aparatos de video.
Los microscopios ópticos o livianos
usan lentes refractivos y oculares
hechas de vidrio para dirigir una
imagen magnificada hacia el ojo u
otro aparato que captura la imagen.
La habitual magnificación del
microscopio liviano es 1500x pero
también puede llegar a 2000x con
menos calidad de visión.
15. oMicroscopio digital: es un
aparato de captura de video y
una pantalla de video formando
una sola unidad sin oculares es
la definición apropiada para un
microscopio digital. Por otro
lado, si montas una cámara
digital en un microscopio
triocular por ejemplo, también
hará un buen microscopio
digital o microscopio USB "no
oficial". Para una mejor imagen
o resolución de video y mejor
calidad general, es mejor
utilizar un microscopio digital
apropiado ya que los lentes del
microscopio digital están
confeccionados especialmente
para la cámara. El microscopio
digital más común tiene un
monitor de 15 pulgadas y una
cámara con alrededor 2
millones de pixels.
16. Microscopio fluorescente: es igual al instrumento común de
microscopios livianos con la excepción que ilumina el espécimen
con la luz de una onda larga especial causando que el objeto
observado emita una luz con un color diferente por la absorción de
fluorophores. Las ciencias de vida utilizan de forma amplia
microscopios fluorescentes, la mayoría llamados "microscopios
epi-fluorescentes". El microscopio fluorescente es muy útil en
todos los campos de la biología, haciendo posible estudiar mejor
las proteínas y moléculas.
17. oEl microscopio electrónico: es el más
sofisticado de los microscopios conocidos en
la ciencia. El microscopio electrónico utiliza
lentes electrostáticos y electromagnéticos y a
través de los electrones ilumina un objeto,
magnificando una imagen hasta 2 millones de
veces mientras que la luz del microscopio lo
hace solo 2 mil veces. El microscopio
electrónico utiliza una onda larga de un
electrón llamado Broglie wavelength. Al
controlar el rayo de la radiación
electromagnética el microscopio electrón
hace posible focalizarse, produciendo una
imagen de gran escala.
18. Microscopio estéreo o
"microscopio de disección“:
es un microscopio óptico
utilizado para una visión
tridimensional. Capturando la
luz con dos objetivos, los
microscopios estéreos
permiten mejores estudios de
un espécimen grueso. Capaz
de permitir la observación de
superficies oscuras, las
funciones del microscopio
estéreo permiten ver dos rayos
de luz haciendo un efecto
visual estéreo. Los
microscopios estéreos no son
muy populares, la habitual
magnificación no es más
grande que 100 y 10 veces del
tiempo promedio. Algunos
microscopios estéreos utilizan
objetivos auxiliares para una
magnificación superior.
19. INSTALACIÓN Y
ALMACENAMIENTO
4. Verificar que el lugar
seleccionado cuente con una
toma eléctrica en buen estado,
cuyo
voltaje esté ajustado en
magnitud y frecuencia con los
códigos y normas eléctricas.
5. Instalar el microscopio sobre
una superficie nivelada de
estructura rígida.
6. Para facilitar la colocación
del micros copista,
proporcionar una silla de altura
variable,
que le brinde un buen soporte
lumbar.
7. Evitar que en sitios cercanos
al lugar de instalación del
microscopio haya equipos
que produzcan vibraciones.
8. Cubrir el microscopio con un
protector de polvo si no se usa
por períodos de tiempo
largos.
9. En zonas de humedad alta,
guardar el microscopio durante
la noche, en una cabina
provista de un bombillo de
máximo 40 W.
20. MANTENIMIENTO DEL
MICROSCOPIO
La limpieza del microscopio es
una de las rutinas más
importantes y debe considerarse
un procedimiento rutinario. Para
realizar la rutina
de limpieza se requiere lo
siguiente:
1. Una pieza de tela limpia, de textura
similar a la de los pañuelos.
2. Una botella de líquido para limpieza
de lentes.
3. Papel para limpieza de lentes. Se
consigue normalmente en las ópticas.
Si no es posible conseguir este
material, se puede sustituir con papel
absorbente suave o con algodón tipo
medicinal.
4. Una pieza de gamuza muy fina.
5. Una pera de caucho para soplar aire.
6. Una cubierta plástica. Se utiliza para
proteger el microscopio del ambiente
externo cuando no está en uso.
21. MANTENIMIENTO DEL
MICROSCOPIO
Instalación y almacenamiento.
1. Asegurarse que el ambiente
o área en que se instale el
microscopio esté protegido o
protegida del polvo y la
humedad.
2. Verificar que el ambiente o
área en que se instale el
microscopio disponga de
seguridad.
3. Confirmar que el lugar
seleccionado para ubicar el
microscopio esté alejado de
lugares como pocetas de agua
o donde se trabajen sustancias
químicas.