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Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux Cliff Threlkeld, D.O. Central Florida Research
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux ,[object Object],[object Object]
Cytomètre en flux typique Détecteur &Mécanique Computer System Puissance
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Flow Cytometry PMT     PC5 4 PMT    ECD Filtres dichroïques 3 Chambre de mesure PMT    PE 2 PMT    FITC 1 Laser  Passe-bande des filtres
Comment fonctionne le Abs 19 3 ZAP 70  5 FS SS
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux Application de la cytométrie en flux pour le dépistage des maladies de Lyme Traditionnels d'essai de deux test d'anticorps du protocole - ELISA et Western Blot (WB)méthodes de détection bactérienne - Culture et de la réaction en chaîne par polymérase (PCR) - La cytométrie en flux sous-utilisésEn utilisant la cytométrie en flux pour détecter Borreliaburgdorferi dans le sang du patient Anticorps avec l'étiquette de la fluorescéine (chèvre, KPL) ajouté à aliquote de sang du patient (EDTA)Incubation 1 heure à 37 ° CAnalyser le FC - Bb sont lumineuses fluorescentes événements
Cytométrie en flux de Borreliaburgdorferi positive patients
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux Comparaison des FC à la Banque mondiale et PCR Étude de phase 1 par rapport FC avec la Banque mondiale66 patients avec diagnostic clinique de la LD 5 positifs par WB, 4 de ces positive par le FC28 autres patients positifs par le FC
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux Comparaison des FC à la PCR Phase 2 par rapport au FC PCR chez 42 patients avec un diagnostic clinique de la LD16 patients positifs par le FC et 18 positifs par PCR 8 patients positifs par PCR et le FCSéquençage des gènes, effectuée le 14 PCR positive patients (5 FC positive)Bb 8 stricto sensu (4 CF)7 Bb lato sensu (nouveau sous-groupe, 2 par le FC)
Résultats
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux La sensibilité et la spécificité des FC et de la BM par rapport Sensibilité FC Spécificité = 66% = 92% WB Sensibilité Spécificité = 52% = 100%
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux La sensibilité et la spécificité des FC et de la PCR par rapport Sensibilité FC Spécificité = 62% = 100% PCR Sensibilité Spécificité = 64% = 100%
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux Disponibilité de la cytométrie en flux LD essais Recherche de la Floride centrale, Winter Haven, Floridesite Web - Http: / / www.centralfloridaresearch.com
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux Les applications futures Test de la maladie transmise par les tiques multiples pathogènes simultanément Ajouter anticorps espèces européennes de Borrelia Rechercher des antigènes dans les monocytes Bb
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  • 1. Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux Cliff Threlkeld, D.O. Central Florida Research
  • 2.
  • 3. Cytomètre en flux typique Détecteur &Mécanique Computer System Puissance
  • 5.
  • 6. Flow Cytometry PMT PC5 4 PMT ECD Filtres dichroïques 3 Chambre de mesure PMT PE 2 PMT FITC 1 Laser Passe-bande des filtres
  • 7. Comment fonctionne le Abs 19 3 ZAP 70 5 FS SS
  • 8. Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux Application de la cytométrie en flux pour le dépistage des maladies de Lyme Traditionnels d'essai de deux test d'anticorps du protocole - ELISA et Western Blot (WB)méthodes de détection bactérienne - Culture et de la réaction en chaîne par polymérase (PCR) - La cytométrie en flux sous-utilisésEn utilisant la cytométrie en flux pour détecter Borreliaburgdorferi dans le sang du patient Anticorps avec l'étiquette de la fluorescéine (chèvre, KPL) ajouté à aliquote de sang du patient (EDTA)Incubation 1 heure à 37 ° CAnalyser le FC - Bb sont lumineuses fluorescentes événements
  • 9.
  • 10. Cytométrie en flux de Borreliaburgdorferi positive patients
  • 11. Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux Comparaison des FC à la Banque mondiale et PCR Étude de phase 1 par rapport FC avec la Banque mondiale66 patients avec diagnostic clinique de la LD 5 positifs par WB, 4 de ces positive par le FC28 autres patients positifs par le FC
  • 12. Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux Comparaison des FC à la PCR Phase 2 par rapport au FC PCR chez 42 patients avec un diagnostic clinique de la LD16 patients positifs par le FC et 18 positifs par PCR 8 patients positifs par PCR et le FCSéquençage des gènes, effectuée le 14 PCR positive patients (5 FC positive)Bb 8 stricto sensu (4 CF)7 Bb lato sensu (nouveau sous-groupe, 2 par le FC)
  • 14. Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux La sensibilité et la spécificité des FC et de la BM par rapport Sensibilité FC Spécificité = 66% = 92% WB Sensibilité Spécificité = 52% = 100%
  • 15. Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux La sensibilité et la spécificité des FC et de la PCR par rapport Sensibilité FC Spécificité = 62% = 100% PCR Sensibilité Spécificité = 64% = 100%
  • 16. Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux Disponibilité de la cytométrie en flux LD essais Recherche de la Floride centrale, Winter Haven, Floridesite Web - Http: / / www.centralfloridaresearch.com
  • 17. Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux Les applications futures Test de la maladie transmise par les tiques multiples pathogènes simultanément Ajouter anticorps espèces européennes de Borrelia Rechercher des antigènes dans les monocytes Bb