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EVALUACIÓNDE LOS NIVELES DE INMUNOGLOBULINA
A SECRETORA ANTI-Helicobacter pylori Y TEST DE UREASA
EN UNA POBLACIÓN INFANTIL DE CUMANÁ, ESTADO
SUCRE
Introducción
Introducción
Helicobacter pylori Enfermedad
Crónica
OMS 1994
Carcinógeno tipo I
Introducción
Taxonomía
Reino: Procarionte
Orden: Eubacteriales
Superfamilia: Proteobacteria
Familia: Helicobacteriaceae
Género: Helicobacter
Siglo XIX
Bacilo Gram
negativo, forma de
S, móvil, 4-6
flagelos
Introducción
Factor de
Virulencia
Citotoxina
(CagA)
Codificada por el
gen CagA
Gastritis crónica,
atrófica, úlcera
péptica
Citotoxina
vacuolizante
(VagA)
Codificada por el
gen VagA
Formación de las
vacuolas en
células del epitelio
gástrico
Introducción
Tratamiento erradicador
Omeprazol
Claritromicina
Amoxicilina
Signos y Síntomas
Dolor epigástrico
Náuseas
Vómitos
Pérdida del apetito
Asfixia
Flatulencia
Introducción
Diagnóstico de H. pylori
Técnicas Invasivas
Técnicas no InvasivasPrueba rápida de ureasa
Sensibilidad 98,0%
Especificidad 97,0%
Introducción
Pacientes infectados
por H. pylori
IgG, IgA, IgM
Producen
Indican infección inicial
o activa
ELISA
Sensibilidad 90,0%
Especificidad 85,0%
Introducción
Inmunoglobulinas
La IgA constituye
De 10-15%
La IgAs puede jugar un
papel protector contra la
colonización de H. pylori.
Los individuos con deficiencias
de IgA, pueden mostrar una
mayor frecuencia de infecciones
gastrointestinales causadas por
patógenos entéricos.
Introducción
• Tasas elevadas de
infección en la infancia
• 70-80%
Países con
bajas
condiciones
higiénico-
sanitarias
• La infección se
concentra en la edad
adulta
• 11-60%
Naciones
desarrolladas
Se observan mayores tasas de
infección en clases socialmente
bajas con nivel cultural escaso,
con malos hábitos higiénicos-
dietéticos y hacinamiento .60% de la población
venezolana, portadora
de H. pylori
Úlcero-péptica
Gastritis atrófica
Adenocarcinoma
gástrico
Introducción
Observándose una tendencia
al aumento de los niveles de
IgAs, siendo estos niveles
más elevados en pacientes
con gastritis crónica activa y
H. pylori positivo.
Cavazza et al., 2005
Introducción
La detección de IgAs presentó una
buena correlación con los hallazgos
histológicos y bioquímicos; además,
cuando se confrontó con los valores de
IgG en suero, expresó una mejor
correspondencia con la enfermedad.
Ortíz et al., 2009
Objetivos
Objetivos
General
Evaluar la presencia de Inmunoglobulina
A secretora (IgAs) anti- Helicobacter pylori
(H. pylori) y la prueba de ureasa en una
población infantil de Cumaná, estado
Sucre.
Objetivos
Específicos
Determinar la presencia de la IgAs anti- H.pylori en
saliva utilizando ensayo inmunoenzimático (ELISA)
en la población infantil en estudio.
Determinar mediante la prueba de ureasa la
presencia de H. pylori en las muestras de biopsias
de la población infantil estudiada.
Asociar los niveles de IgAs anti- H. pylori con la
prueba de ureasa en la población infantil estudiada.
Metodología
Metodología
Edad: 2-12 años
Ambos sexos
Autorización
firmada por el
representante
Recolección de
la muestra
Población
Metodología
Recolección de la muestra de saliva
Las muestras fueron
transportadas en dichos envases
estériles y se conservaron a -
20ºC.
Recolección de la muestra de biopsia
Olympus XQ10-OES
La muestra se colocó
en el medio comercial
CLO-test.
Metodología
ELISA
Lectura a 450 nm, con un
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Rayto, modelo RT-
2100C.
100 de saliva
en microplacas
Se lavo 3 veces
con 300 de sln
de lavado
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100 de
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IgA
Se lavo 3 veces
con 300 de sln
de lavado
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15’ 18-25ºC
100 de sln de
parada
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Metodología
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en el test
3 h a
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Transcurrido el tiempo
de incubación, se
colocó a TA.
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2NH4
++HCO3
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ureas
a
Metodología
Análisis Estadístico
Estadística Descriptiva (Tablas)
Chi-cuadrado ( 2) con un nivel de
confiabilidad de 95,0%
Resultados y
Discusión
Resultados y Discusión
Tabla 1. Relación porcentual de los resultados de la Inmunoglobulina A secretora anti-
H. pylori en saliva en pacientes que acudieron al servicio de gastroenterología infantil
del Servicio Autónomo Hospital Universitario “Antonio Patricio de Alcalá”, Cumaná,
estado Sucre, septiembre-diciembre de 2011.
Inmunoglobulina
A secretora anti-
H. pylori
Número (Nº) Porcentaje (%)
Positivo 16 44,4
Negativo 20 55,6
Total 36 100
Cavazza et al., (2005)
Ortiz et al., (2003)
Resultados y Discusión
Tabla 2. Relación porcentual de los resultados de la prueba de ureasa en pacientes
que acudieron al servicio de gastroenterología infantil del Servicio Autónomo Hospital
Universitario “Antonio Patricio de Alcalá”, Cumaná, estado Sucre, septiembre-
diciembre de 2011.
Test de Ureasa
para H. pylori
Número (Nº) Porcentaje (%)
Positivo 13 36,1
Negativo 23 63,9
Total 36 100
Salvatierra et al., (2000)
Sánchez et al., (2008)
Resultados y Discusión
Tabla 3. Asociación entre la Inmunoglobulina A secretora anti-H. pylori y la
prueba de ureasa en pacientes que acudieron al servicio de gastroenterología
infantil del Servicio Autónomo Hospital Universitario “Antonio Patricio de Alcalá”,
Cumaná, estado Sucre, septiembre-diciembre de 2011.
Test de
Ureasa
Inmunoglobulina A secretora
Presencia Porcentaje
(%)
Ausencia Porcentaje
(%)
Total Porcentaje
(%)
2
Positivo 12 33,3 1 2,8 13 36,1
15,97
Negativo 4 11,1 19 52,8 23 63,9
Total 16 44,4 20 55,6 36 100
*: p<0,01 (significativo); ns: p>0,01 (no significativo)
Cavazza et al., (2005)
Conclusiones
La prueba de la Inmunoglobulina A secretora anti-
H. pylori arrojo excelentes resultados que
concuerdan con la patología del paciente.
La técnica de la Inmunoglobulina A secretora anti-
H. puede ser utilizada para elpylori monitoreo del
tratamiento durante la infección.
La prueba de ureasa, confiere resultados
directamente proporcionales a la cantidad de
bacterias presentes en la muestra.
La prueba de ureasa y la Inmunoglobulina A
secretora anti-H. pylori son variables
independientes, no se encuentran asociadas
entre sí.
Existe asociación entre la Inmunoglobulina A
secretora anti-H. pylori y la forma activa de la
gastristis crónica causada por H. pylori.
Recomendaciones
Es recomendable utilizar, al menos, dos métodos para el
diagnóstico de H. pylori.
Promover cursos y campañas de entrenamiento dirigidos a los
bioanalistas y a estudiantes para dar a conocer las nuevas
técnicas para el diagnóstico de H. pylori.
Para la determinación de H. pylori a través de técnicas no
invasoras y fácilmente aplicables, destaca la Inmunoglobulina A
secretora en saliva por su facilidad de obtención, sensibilidad,
especificidad y que además muestra una alta certeza para
tamizar pacientes positivos para H. pylori, es por ello que se
recomienda el uso de esta técnica en los laboratorios de
pruebas especiales.
Para futuros estudios, podrían incluirse un número mayor de
pacientes con un rango de edad más amplio, un número mayor
de pruebas a emplear o realizar monitoreo del tratamiento a
través de la Inmunoglobulina A secretora anti-H. pylori.
Helicobacter pylori (IgAs y test de ureasa)

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Helicobacter pylori (IgAs y test de ureasa)

  • 1. EVALUACIÓNDE LOS NIVELES DE INMUNOGLOBULINA A SECRETORA ANTI-Helicobacter pylori Y TEST DE UREASA EN UNA POBLACIÓN INFANTIL DE CUMANÁ, ESTADO SUCRE
  • 4. Introducción Taxonomía Reino: Procarionte Orden: Eubacteriales Superfamilia: Proteobacteria Familia: Helicobacteriaceae Género: Helicobacter Siglo XIX Bacilo Gram negativo, forma de S, móvil, 4-6 flagelos
  • 5. Introducción Factor de Virulencia Citotoxina (CagA) Codificada por el gen CagA Gastritis crónica, atrófica, úlcera péptica Citotoxina vacuolizante (VagA) Codificada por el gen VagA Formación de las vacuolas en células del epitelio gástrico
  • 6. Introducción Tratamiento erradicador Omeprazol Claritromicina Amoxicilina Signos y Síntomas Dolor epigástrico Náuseas Vómitos Pérdida del apetito Asfixia Flatulencia
  • 7. Introducción Diagnóstico de H. pylori Técnicas Invasivas Técnicas no InvasivasPrueba rápida de ureasa Sensibilidad 98,0% Especificidad 97,0%
  • 8. Introducción Pacientes infectados por H. pylori IgG, IgA, IgM Producen Indican infección inicial o activa ELISA Sensibilidad 90,0% Especificidad 85,0%
  • 9. Introducción Inmunoglobulinas La IgA constituye De 10-15% La IgAs puede jugar un papel protector contra la colonización de H. pylori. Los individuos con deficiencias de IgA, pueden mostrar una mayor frecuencia de infecciones gastrointestinales causadas por patógenos entéricos.
  • 10. Introducción • Tasas elevadas de infección en la infancia • 70-80% Países con bajas condiciones higiénico- sanitarias • La infección se concentra en la edad adulta • 11-60% Naciones desarrolladas Se observan mayores tasas de infección en clases socialmente bajas con nivel cultural escaso, con malos hábitos higiénicos- dietéticos y hacinamiento .60% de la población venezolana, portadora de H. pylori Úlcero-péptica Gastritis atrófica Adenocarcinoma gástrico
  • 11. Introducción Observándose una tendencia al aumento de los niveles de IgAs, siendo estos niveles más elevados en pacientes con gastritis crónica activa y H. pylori positivo. Cavazza et al., 2005
  • 12. Introducción La detección de IgAs presentó una buena correlación con los hallazgos histológicos y bioquímicos; además, cuando se confrontó con los valores de IgG en suero, expresó una mejor correspondencia con la enfermedad. Ortíz et al., 2009
  • 14. Objetivos General Evaluar la presencia de Inmunoglobulina A secretora (IgAs) anti- Helicobacter pylori (H. pylori) y la prueba de ureasa en una población infantil de Cumaná, estado Sucre.
  • 15. Objetivos Específicos Determinar la presencia de la IgAs anti- H.pylori en saliva utilizando ensayo inmunoenzimático (ELISA) en la población infantil en estudio. Determinar mediante la prueba de ureasa la presencia de H. pylori en las muestras de biopsias de la población infantil estudiada. Asociar los niveles de IgAs anti- H. pylori con la prueba de ureasa en la población infantil estudiada.
  • 17. Metodología Edad: 2-12 años Ambos sexos Autorización firmada por el representante Recolección de la muestra Población
  • 18. Metodología Recolección de la muestra de saliva Las muestras fueron transportadas en dichos envases estériles y se conservaron a - 20ºC. Recolección de la muestra de biopsia Olympus XQ10-OES La muestra se colocó en el medio comercial CLO-test.
  • 19. Metodología ELISA Lectura a 450 nm, con un lector de ELISA marca Rayto, modelo RT- 2100C. 100 de saliva en microplacas Se lavo 3 veces con 300 de sln de lavado 30’ 18-25ºC 100 de antisuero anti- IgA Se lavo 3 veces con 300 de sln de lavado 30’ 18-25ºC 100 de sustrato crómogeno 15’ 18-25ºC 100 de sln de parada Procedimiento
  • 20. Metodología Procedimiento CLO-test Biopsia colocada en el test 3 h a 37ºC Transcurrido el tiempo de incubación, se colocó a TA. Positivo Negativo (NH2)2CO+2H2O+H+ 2NH4 ++HCO3 - ureas a
  • 21. Metodología Análisis Estadístico Estadística Descriptiva (Tablas) Chi-cuadrado ( 2) con un nivel de confiabilidad de 95,0%
  • 23. Resultados y Discusión Tabla 1. Relación porcentual de los resultados de la Inmunoglobulina A secretora anti- H. pylori en saliva en pacientes que acudieron al servicio de gastroenterología infantil del Servicio Autónomo Hospital Universitario “Antonio Patricio de Alcalá”, Cumaná, estado Sucre, septiembre-diciembre de 2011. Inmunoglobulina A secretora anti- H. pylori Número (Nº) Porcentaje (%) Positivo 16 44,4 Negativo 20 55,6 Total 36 100 Cavazza et al., (2005) Ortiz et al., (2003)
  • 24. Resultados y Discusión Tabla 2. Relación porcentual de los resultados de la prueba de ureasa en pacientes que acudieron al servicio de gastroenterología infantil del Servicio Autónomo Hospital Universitario “Antonio Patricio de Alcalá”, Cumaná, estado Sucre, septiembre- diciembre de 2011. Test de Ureasa para H. pylori Número (Nº) Porcentaje (%) Positivo 13 36,1 Negativo 23 63,9 Total 36 100 Salvatierra et al., (2000) Sánchez et al., (2008)
  • 25. Resultados y Discusión Tabla 3. Asociación entre la Inmunoglobulina A secretora anti-H. pylori y la prueba de ureasa en pacientes que acudieron al servicio de gastroenterología infantil del Servicio Autónomo Hospital Universitario “Antonio Patricio de Alcalá”, Cumaná, estado Sucre, septiembre-diciembre de 2011. Test de Ureasa Inmunoglobulina A secretora Presencia Porcentaje (%) Ausencia Porcentaje (%) Total Porcentaje (%) 2 Positivo 12 33,3 1 2,8 13 36,1 15,97 Negativo 4 11,1 19 52,8 23 63,9 Total 16 44,4 20 55,6 36 100 *: p<0,01 (significativo); ns: p>0,01 (no significativo) Cavazza et al., (2005)
  • 26. Conclusiones La prueba de la Inmunoglobulina A secretora anti- H. pylori arrojo excelentes resultados que concuerdan con la patología del paciente. La técnica de la Inmunoglobulina A secretora anti- H. puede ser utilizada para elpylori monitoreo del tratamiento durante la infección. La prueba de ureasa, confiere resultados directamente proporcionales a la cantidad de bacterias presentes en la muestra. La prueba de ureasa y la Inmunoglobulina A secretora anti-H. pylori son variables independientes, no se encuentran asociadas entre sí. Existe asociación entre la Inmunoglobulina A secretora anti-H. pylori y la forma activa de la gastristis crónica causada por H. pylori.
  • 27. Recomendaciones Es recomendable utilizar, al menos, dos métodos para el diagnóstico de H. pylori. Promover cursos y campañas de entrenamiento dirigidos a los bioanalistas y a estudiantes para dar a conocer las nuevas técnicas para el diagnóstico de H. pylori. Para la determinación de H. pylori a través de técnicas no invasoras y fácilmente aplicables, destaca la Inmunoglobulina A secretora en saliva por su facilidad de obtención, sensibilidad, especificidad y que además muestra una alta certeza para tamizar pacientes positivos para H. pylori, es por ello que se recomienda el uso de esta técnica en los laboratorios de pruebas especiales. Para futuros estudios, podrían incluirse un número mayor de pacientes con un rango de edad más amplio, un número mayor de pruebas a emplear o realizar monitoreo del tratamiento a través de la Inmunoglobulina A secretora anti-H. pylori.