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ESCOLA SECUNDÁRIA AUGUSTO GOMES, MATOSINHOS
FORMAÇÃO DE ADULTOS | CURSO EFA DUPLA CERTIFICAÇÃO | 2012-13
Curso Técnico de Controlo de Qualidade Alimentar
Formação tecnológica
Módulo 50h – Pesquisa e contagem de microrganismos
Formadora – Sofia Pimenta
PROVA CONSULTA 7-6-2013
Parte II
Staphylococcus aureus
O Staphylococcus aureus é uma bactéria patogénica que produz uma toxina que não é
destruída a altas temperaturas. Esta toxi-infeção alimentar encontra-se geralmente associada a
alimentos que são muito manuseados (ex: carne picada cozinhada, alimentos feitos à base de
carne e ovos).
Imagine que no laboratório onde trabalha lhe é pedido uma avaliação da qualidade de
almôndegas à venda numa superfície comercial. Apresente um relatório técnico dessa
avaliação.
-----------------------------------------------------------------------------------------
Relatório técnico
Técnico: Isabel Maria Falcão Passos
Amostra: nº J11/2013
Objetivo: Pesquisa de Staphylococcus aureus em almôndegas.
Página 2 de 3
Etapa 1
Sala de receção de amostras
Receção de amostra de almôndegas acondicionada em recipiente esterilizado em gelo.
Após etiquetagem da embalagem a amostra foi colocada em frigorífico à temperatura de
4°C, por 24h.
Etapa 2
Sala de preparação de amostras
Pesou-se 10g de amostra de almôndegas
Adicionou-se 90 ml de solução salina (0,85% NaCl) de forma a obter uma diluição de 1/10;
Levou-se ao homogeneizador durante 1 minuto.
Deixou-se em repouso, durante cerca de 30 minutos;
Etapa 3
Sala de inoculação de amostras em meios de cultura
Assegurou-se condições de assepsia, trabalhando junto a bico de Busen e esterilizando o
material utilizado na chama.
Identificou-se tubos de ensaio e caixas de Petri com a data, o meio de cultura e a diluição
realizada (1/20;1/10; 2/10; 3/10; 4/10; 5/10);
Realizou-se as diluições necessárias em tubos com solução salina (0,85%).
Preparou-se meio de cultura específico de agar Manitol sal, meio selectivo para
Staphylococcus aureus. A elevada concentração de cloreto de sódio (7,5%) inibe o
crescimento dos restantes microrganismos, com a exceção das bactérias halotolerantes. As
bactérias fermentadoras do manitol originam a formação de um halo amarelo em torno das
colónias.
Preparou-se uma placa de Petri com meio de agar não selectivo (nutriente agar), placa de
controlo.
Manteve-se as placas tapadas e deixou-se arrefecer até o meio de cultura solidificar.
Com uma micropipeta inoculou-se 1 mL de suspensão da amostra nas placas de Petri;
Colocou-se parafilme para isolar as caixas de Petri;
Interverteu-se as caixas e levou-se a incubar em estufa durante 48h a 37ºC;
Página 3 de 3
Etapa 4
Sala de contador de vidas
Levou-se as placas ao MOC e observou-se a presença de colónias rodeadas de um halo
amarelo.
Constatou-se a presença de bactérias fermentadoras de manitol que originaram o halo
amarelo em torno das colónias.
Concluiu-se que há existência de colónias de Staphylococcus aureus.
Inoculou-se a amostra na Galeria de Identificação com Meios Desidratados e colocou-se no
Contador de Vidas para efetuar a contagem de microrganismos e despistar a estirpe.
Nota: Para a contagem de microrganismos contabilizou-se como 1ª diluição a junção de 90
ml de solução salina a 0,85% aos 10 g de amostra.
Etapa 5
Sala de descontaminação e esterilização
Colocou-se todo o material utilizado na pesquisa, no aparelho de autoclave, para
descontaminação e esterilização.
As placas de Petri e o restante material de vidro seguiram para lavagem e posterior
reutilização, o material plástico inutilizado seguiu para o lixo comum.
Etapa 6
Resultados
Na contagem de microrganismos contabilizou-se um elevado número de vidas de uma
estirpe já registada no Arquivo de Coleções de Culturas, pelo que não foi necessário
guardar amostra.
A pesquisa foi sujeita a Processo de Rastreabilidade dos Resultados, procedendo-se ao
seu registo no livro de Registos de Culturas.
Informa-se o cliente e respectivas entidades oficiais que é urgente retirar o produto do
mercado.
Departamento de Análises de Controlo e Qualidade Alimentar
Assinatura do Técnico
Isabel Maria Falcão Passos

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  • 1. Página 1 de 3 ESCOLA SECUNDÁRIA AUGUSTO GOMES, MATOSINHOS FORMAÇÃO DE ADULTOS | CURSO EFA DUPLA CERTIFICAÇÃO | 2012-13 Curso Técnico de Controlo de Qualidade Alimentar Formação tecnológica Módulo 50h – Pesquisa e contagem de microrganismos Formadora – Sofia Pimenta PROVA CONSULTA 7-6-2013 Parte II Staphylococcus aureus O Staphylococcus aureus é uma bactéria patogénica que produz uma toxina que não é destruída a altas temperaturas. Esta toxi-infeção alimentar encontra-se geralmente associada a alimentos que são muito manuseados (ex: carne picada cozinhada, alimentos feitos à base de carne e ovos). Imagine que no laboratório onde trabalha lhe é pedido uma avaliação da qualidade de almôndegas à venda numa superfície comercial. Apresente um relatório técnico dessa avaliação. ----------------------------------------------------------------------------------------- Relatório técnico Técnico: Isabel Maria Falcão Passos Amostra: nº J11/2013 Objetivo: Pesquisa de Staphylococcus aureus em almôndegas.
  • 2. Página 2 de 3 Etapa 1 Sala de receção de amostras Receção de amostra de almôndegas acondicionada em recipiente esterilizado em gelo. Após etiquetagem da embalagem a amostra foi colocada em frigorífico à temperatura de 4°C, por 24h. Etapa 2 Sala de preparação de amostras Pesou-se 10g de amostra de almôndegas Adicionou-se 90 ml de solução salina (0,85% NaCl) de forma a obter uma diluição de 1/10; Levou-se ao homogeneizador durante 1 minuto. Deixou-se em repouso, durante cerca de 30 minutos; Etapa 3 Sala de inoculação de amostras em meios de cultura Assegurou-se condições de assepsia, trabalhando junto a bico de Busen e esterilizando o material utilizado na chama. Identificou-se tubos de ensaio e caixas de Petri com a data, o meio de cultura e a diluição realizada (1/20;1/10; 2/10; 3/10; 4/10; 5/10); Realizou-se as diluições necessárias em tubos com solução salina (0,85%). Preparou-se meio de cultura específico de agar Manitol sal, meio selectivo para Staphylococcus aureus. A elevada concentração de cloreto de sódio (7,5%) inibe o crescimento dos restantes microrganismos, com a exceção das bactérias halotolerantes. As bactérias fermentadoras do manitol originam a formação de um halo amarelo em torno das colónias. Preparou-se uma placa de Petri com meio de agar não selectivo (nutriente agar), placa de controlo. Manteve-se as placas tapadas e deixou-se arrefecer até o meio de cultura solidificar. Com uma micropipeta inoculou-se 1 mL de suspensão da amostra nas placas de Petri; Colocou-se parafilme para isolar as caixas de Petri; Interverteu-se as caixas e levou-se a incubar em estufa durante 48h a 37ºC;
  • 3. Página 3 de 3 Etapa 4 Sala de contador de vidas Levou-se as placas ao MOC e observou-se a presença de colónias rodeadas de um halo amarelo. Constatou-se a presença de bactérias fermentadoras de manitol que originaram o halo amarelo em torno das colónias. Concluiu-se que há existência de colónias de Staphylococcus aureus. Inoculou-se a amostra na Galeria de Identificação com Meios Desidratados e colocou-se no Contador de Vidas para efetuar a contagem de microrganismos e despistar a estirpe. Nota: Para a contagem de microrganismos contabilizou-se como 1ª diluição a junção de 90 ml de solução salina a 0,85% aos 10 g de amostra. Etapa 5 Sala de descontaminação e esterilização Colocou-se todo o material utilizado na pesquisa, no aparelho de autoclave, para descontaminação e esterilização. As placas de Petri e o restante material de vidro seguiram para lavagem e posterior reutilização, o material plástico inutilizado seguiu para o lixo comum. Etapa 6 Resultados Na contagem de microrganismos contabilizou-se um elevado número de vidas de uma estirpe já registada no Arquivo de Coleções de Culturas, pelo que não foi necessário guardar amostra. A pesquisa foi sujeita a Processo de Rastreabilidade dos Resultados, procedendo-se ao seu registo no livro de Registos de Culturas. Informa-se o cliente e respectivas entidades oficiais que é urgente retirar o produto do mercado. Departamento de Análises de Controlo e Qualidade Alimentar Assinatura do Técnico Isabel Maria Falcão Passos