Alelo Abcc11 270110 Zulay Rivera
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Ficha bibliográfica presentada por la Dra. Zulay Rivera, Residente III del Postgrado de Dermatología, Instituto de Biomedicina, UCV
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- 1. El alelo funcional ABCC11 es esencial en la Formación Bioquímica del olor axilar en humanos Martin A, Saathoff M, Kuhn F, Max H, Terstegen L, Natsch A. A Functional ABCC11 Allele Is Essential in the Biochemical Formation of Human Axillary Odor Zulay M. Rivera P.
- 2. Huellas de Olor El ADN y las huellas digitales Exclusivos del individuo Identificar criminales Departamento de Seguridad Nacional (DHS) “ Prueba de olor" Cada persona tiene un olor corporal distinto al de los demás y de intensidad variable Relacionado con su carga genética.
- 3. Olor Axilar: Gandulas Sudoríparas Adrenalina Secretan una variedad de precursores de odoriferos que se transforman en sustancias volátiles aromáticas por enzimas de las bacterias lozalizadas en la superficie de la piel
- 4. Olor Axilar: Composición química volátil Wysocki CJ, Preti G. Facts, fallacies, fears, and frustrations with human pheromones. Anat Rec 2004;281A:1201–11 Carbohidratos volátiles Ácido (E)-3-metil-2-hexenoico (E-3M-2H) Ácidos grasos Ramificados 3-metil-3-hidroxilhexanoico (HMHA) Esteroides volátiles: Androstenona androstenol 4,16-Androstenadien-3-ona (androstenodiona) androstenodienol) Gower D, Mallet A, Watkins W, Wallace L, Calame J. Steroid Biochem. Mol Biol 1997;63:81 Austin C, Ellis J. Steroid Biochem. Mol Biol 2003;87:105. Troccaz M, Starkenmann C, Niclass Y et al. 3-Methyl-3-sulfanylhexan-1-ol as a major descriptor for the human axilla-sweat odour profile. Chem Biodivers 2004; 1:1022–35. Alelo ABCC11 … formación bioquímica olor axilar Ácidos Grasos Volátiles : Corynebacterio sub-grupo A Acido Isosteárico (↑ odorífero) Microccoccus luteus Brevibacterio epidermidis Leucina Ac Isovalérico Compuestos sulfurados volátiles: Degradación Aa c/Azufre Eubaceria limosum y-liasa, lipasa, cistationasa, triptofanasa Aa-SO3 S-cisteina OLOR
- 12. Resultados Alelo ABCC11 … formación bioquímica olor axilar 07 11 07 1.28 0,9 0,71 p no significativa
- 13. Wysocki C, Preti G. Facts, fallacies, fears and frustrations with human pheromones. The Anatomical Record Part 2004;281;1201-1211 Olor Axilar: Espectrometría masas/Cromatografía de gases Abundacia Relativa Tiempo Odoríferos
- 15. Resultados Alelo ABCC11 … formación bioquímica olor axilar AG AA GG ND 1,180 0,85 Estos datos indican que el gen ABCC11 es esencial para la secreción de aminoácidos conjugados de los correspondientes olores axilares 0,170 0,160 Análisis de los precursores odorantes por LC-MS.
- 17. Resultados Alelo ABCC11 … formación bioquímica olor axilar
- 19. Resultados Alelo ABCC11 … formación bioquímica olor axilar El ácido hexadecanoico, es uno de los principales componentes de la capa de lípidos Curiosamente, los niveles de ácidos grasos de cadena larga: Acido hexadecanoico. Acido octadecanoico. Acido linoleico. Son similares entre los diferentes genotipos ABCC11 (P-values40.3).
- 20. Resultados Alelo ABCC11 … formación bioquímica olor axilar Lo mismo sucede para los ácidos grasos de cadena corta: Acido butírico. Acido hexanoico. Acido octanoico (Pvalues40.1), que son odoríferas, aunque en mucho menor medida en que los ácidos ramificados
- 21. Resultados Alelo ABCC11 … formación bioquímica olor axilar p < 0.005 Por el contrario, los niveles de los ácidos ramificados odoriferos: 3-metil-butírico (isovalérico ácido) 2-metil-butírico. Se redujo significativamente en muestras de sudor de la AA en comparación con los homocigotos de AG y de los genotipos GG
- 26. Resultados Expresión ABCC11 es específico en el tejido que contienen las glándulas sudoríparas.
Notas del editor
- Pero lo que intenta es desarrollar una prueba capaz de identificar un olor de manera tan precisa como lo haría un perro. El profesor Wyatt cree que el estudio es interesante, pero se muestra escéptico de que realmente funcione. &quot;Uno de los problemas -afirma- es que nuestro olor corporal cambia y esto se debe a que es algo muy complejo. &quot;Por ejemplo, como en el caso de los gemelos idénticos, nuestro olor cambia cuando comemos alimentos distintos Cada persona tiene un olor diferente, del mismo modo que cada persona tiene una huella dactilar diferente. De acuerdo con una teoría reciente el olor de una persona puede estar directamente conectado con los genes únicos de esa persona. Los genes del sistema inmunitario determinan la composición de las bacterias de la piel de una persona. Las bacterias transforman el sebo de las glándulas sebáceas en ácidos grasos. A través de este proceso cada persona recibe una composición única de ácidos grasos, lo que determina sus características olorosas. Por tus olores podrán saber si mientes o eres un delicuente El olor de los seres humanos pudiese ser un indicador biométrico para identificar cuando mientes o permitir identificar a individuos en conductas delictivas, cual huella dactilar. La tecnología va a ser desarrollada para el Departamento de Seguridad Nacional de los Estados Unidos por Mitre Corp. , quienes en los momentos está recolectando olores emblemáticos. Pulsa aquí para ir a noticia relacionada en este blog El olor para identificar delincuentes BBC Mundo Viernes, 13 de marzo de 2009 Sabemos que tanto el ADN como las huellas digitales son exclusivos del individuo y, por lo tanto, se usan comúnmente para identificar criminales. Ahora científicos en Estados Unidos investigarán si el olor corporal podría también ser una herramienta para combatir el delito. El objetivo del estudio, llevado a cabo por el Departamento de Seguridad Nacional (DHS) de ese país, será desarrollar una &quot;prueba de olor&quot; para determinar si una persona está mintiendo o si violado la ley. Según el DHS es un estudio &quot;para determinar si el olor humano puede servir como un indicador del engaño&quot;. ¿Olor único? Hoy en día se utilizan perros -animales de gran capacidad olfativa- para identificar a individuos. Y eso, como dijo a la BBC el profesor Tristram Wyatt , experto en feromonas de la Universidad de Oxford, Inglaterra, quizás demuestra que todos tenemos un olor corporal único. &quot;Los perros son extremadamente buenos para rastrear a una persona por su olor, excepto cuando se trata de gemelos idénticos que comen los mismos alimentos y la misma dieta&quot;, dice el investigador. La investigación del DHS , llevada a cabo por la organización Mitre Corp. , todavía está en sus inicios y se sabe poco sobre ella. Pero lo que intenta es desarrollar una prueba capaz de identificar un olor de manera tan precisa como lo haría un perro. El profesor Wyatt cree que el estudio es interesante, pero se muestra escéptico de que realmente funcione. &quot;Uno de los problemas -afirma- es que nuestro olor corporal cambia y esto se debe a que es algo muy complejo. &quot;Por ejemplo, como en el caso de los gemelos idénticos, nuestro olor cambia cuando comemos alimentos distintos&quot;. Pocos éxitos Ésta no es la primera vez que el DHS intenta desarrollar tecnologías biométricas a partir de ideas que podrían sonar &quot;descabelladas&quot;. Pero hasta ahora se han logrado muy pocos éxitos en la búsqueda de métodos de reconocimiento de seres humanos a partir de rasgos físicos o biológicos. Por ejemplo, a pesar de la enorme investigación que se ha dedicado al desarrollo de un detector de mentiras, hasta ahora no hay uno que sea totalmente efectivo. E incluso las tecnologías establecidas, como la identificación por huellas digitales, a menudo resultan muy controvertidas. La única excepción, hasta ahora, es la prueba de ADN. El DHS informó que ya está llevando a cabo &quot;experimentos en conducta engañosa y recolectando muestras de olor humano&quot;. El objetivo, dice, será tener una especie de base de datos de olores humanos para identificar, por ejemplo, si un individuo está mintiendo. Como señala el profesor Wyatt, hasta ahora no existe evidencia de que nuestro olor corporal sea distinto cuando estamos mintiendo. &quot;Una de las razones por las que las máquinas detectoras de mentiras han fracasado es porque no examinan el engaño, sino examinan la tensión nerviosa del individuo&quot;, dice el experto. &quot;La idea es que cuando estamos nerviosos sudamos más y por lo tanto despedimos más olor corporal. &quot;El problema es que a menudo estar nervioso no es un indicador de que estamos mintiendo, sino puede indicar muchas otras cosas&quot;. Huellas de olor Estudios en el pasado han demostrado que en el sudor humano hay varios marcadores que pueden potencialmente diferenciar a individuos. Son marcadores que según los científicos actúan como &quot;huellas de olor&quot; individuales.
- Natsch A, Derrer S, Flachsmann F, Schmid J (2006) A broad diversity of volatile carboxylic acids, released by a bacterial aminoacylase from axilla secretions, as candidate molecules for the determination of human-body odor type. Chem Biodivers 3:1–20 Natsch A, Gfeller H, Gygax P, Schmid J (2005) Isolation of a bacterial enzyme releasing axillary malodor and its use as a screening target for novel deodorant formulations. Int J Cosmet Sci 27:115–22 Natsch A, Gfeller H, Gygax P, Schmid J, Acuna G (2003) A specific bacterial aminoacylase cleaves odorant precursors secreted in the human axilla. J Biol Chem 278:5718–27 Natsch A, Schmid J, Flachsmann F (2004) Identification of odoriferous sulfanylalkanols in human axilla secretions and their formation through cleavage of cysteine precursors by a C-S lyase isolated from axilla bacteria. Chem Biodivers 1:1058–72 Skin of color: Biology, structure, function, and implications for dermatologic disease Susan C. Taylor, J Am Acad Dermatol 2002;46:S41-62.) Diferencias raciales y étnicas en cutáneo apéndices Glándulas sudoríparas ecrinas. Glándulas sudoríparas ecrinas son una parte clave del sistema de termorregulación del cuerpo. Debido a lapremisa de que el establecido en las carreras evolucionado como resultado de la selección del medio ambiente, es plausibles para creer que una diferencia racial en ecrinas glándulas sudoríparas entre una raza adaptada a una caliente-andhumid el clima (por ejemplo, la raza negroide), en comparación con razas adaptadas a climas más fríos podrían existir. Étnico y las diferencias raciales en la cantidad, la estructura y función de las glándulas sudoríparas ecrinas son controvertidos. De hecho, la mayor parte de la evidencia no sugiere diferencias significativas entre las razas. A pesar de las diferencias interindividuales en el número de las glándulas sudoríparas ecrinas entre razas se han establecido por Szabo, 47 el mismo diferencial no parece que existen entre las personas en blanco y negro. 48,49 Sin embargo, una diferencia racial en funcional actividad de las glándulas sudoríparas ecrinas se ha señalado. En 1941, Robinson et al50 informaron de mayor sudoración tasas por los estadounidenses blancos en comparación con el negro Estadounidenses durante el trabajo físico. McCance et al51, 52 mide la producción de sudor en el antebrazo de los temas a partir del 3 de diferentes grupos raciales en respuesta a trabajo físico y la estimulación colinérgica por pilocarpina. (Las glándulas ecrinas están inervados por el sistema colinérgico.) Se informó de que en blanco Los europeos tenían una mayor tasa de sudoración que cualquiera de los dos negro africanos o asiáticos indios. Sin embargo, hubo dificultades técnicas asociadas con las mediciones. Además, en este estudio, la medición de pilocarpina estimulada concentración de sodio en reveló que el sudor negro africanos tuvo una significativa menor concentración de sodio en el sudor de su en comparación con blancos europeos o asiáticos indios. Esto puede ser reflejo de la más eficaz conservación de electrolito observó con los de África ancestry.53 Herrmann et al54 medida la aparición de la sudoración y la cantidad de sudor producido a partir del 4 de hombre negro Americanos en comparación con 16 hombres blancos americanos. No encontraron ninguna diferencia significativa entre los 2 grupos. Rebeldes y también Kirk55 no encontró diferencias entre sudor en blanco y negro temas. Una serie de estudios electrofisiológico indirectamente sudor de la frente en blanco y negro temas resistencia a través de la piel measurements.56-59 (Cuidado de la Piel resistencia se correlaciona con una mayor glándulas ecrinas actividad.) Todos los estudios encontraron una mayor resistencia en la piel negro en comparación con sujetos de color blanco temas. Uno de los ensayos se evaluaron también esta actividad en temas hispanos de origen mexicano y español subjects.56 Tanto Hispanos y españoles tenían una media de resistencia de que entre el blanco y negro temas. Debido español son también temas que se consideran Caucasoid, mientras que muchos mexicanos representan racial materias, pigmentación también pueden haber desempeñado un papel en estos resultados. Por lo tanto, las personas de piel oscura Se informa de que tienen una mayor resistencia a la piel de blanco o de piel individuos. No está claro si estas diferencias observadas se basan en la genética o el medio ambiente adaptaciones. Un estudio realizado por Kawahata y Saramoto60 de los ainu, un Japonés grupo étnico que parece representar una Australoid mezcla de razas y Caucasoid, apoya la influencia de este último. Demostraron que Ainu nacido en Japón que emigraron a las zonas tropicales ha el mismo número de glándulas sudoríparas como ainu nació en Japón, que siguen viviendo en Japón. Sin embargo, ainu nacido en los trópicos tiene un mayor número de sudor glándulas que los otros grupos. Las glándulas sudoríparas son unas glándulas tubulares enrolladas que están situadas en la dermis y constan de largos y delgados tubos, cerrados por el extremo inferior, donde se apelotonan, formando un ovillo. Por los poros que se abren al exterior segregan el sudor, un líquido de sabor salado y de composición parecida a la de la orina. Las glándulas sudoríparas forman junto con las glándulas sebáceas, los folículos pilosos y las uñas, las faneras o anexos cutáneos. Las glándulas sudoríparas se dividen en: Glándulas sudoríparas ecrinas: están formadas por un glomérulo secretor y un conducto excretor que desembocan directamente ala superficie de la piel. Existen unas 600 glándulas por centímetro cuadrado de piel, con mayor concentración en palmas de las manos, plantas de los pies y región frontal de la cara. Segregan 1 litro al día en condiciones basales y pueden perder hasta 10 L en condiciones extremas. Las glándulas sudoríparas desempeñan funciones importantes en el metabolismo hidroclorado, en la termorregulación por la evaporación del sudor y humedad de la superficie cutánea que también está relacionada con la prensión de los objetos con las manos. Glándulas ecrinas se encuentran en toda la piel, pero son especialmente concentran en las palmas de las manos, las suelas de los pies, y la frente. inicia desarrollo palmas yplantas 55ª65dias de EGA Sem 16 porcion secretora detectablea Son glandulas tubulares enrolladas con sus porciones secretoras habitualmente localizadas con sus porciones secretoras habitualmente localizadas en zonas profundas de la dermis, o con mas frecuencia, en la hipodermis. El fino conducto asciende a traves de la dermis y la epidemris para abrirse en un poro sudoriparo en la superficie cutanea. Su nuemro oscila entre 3 y 4 millones y , aunque cada una pesa 30 – 40 microgramos, su epso en conjunto es aproximadamente euivalente de un riñon. Deriva de la creta epidérmica primitiva se compone de una espiral ( parte glandular que origina un conducto proximal enrollado y después un conducto recto que al final atraviesa la epidermis. La espiral secretora esta compuesta por cellas claras que contienen glucogeno y de células oscuras que están rodeadas de una capa de células mioepiteliales; por fuera de ellas se sitúa la membrana basal. Existen muchas glándulas ecrinas en la planta de los pies. El sudor ecrino consta sobre todo de agua. pero contiene glicoproteínas (en particular, la interleuquina 1), ácido láctico, azúcares, aminoácidos ácidosy electrolytes.4 contenido en sales de las secreciones se reduce en el conducto proximal dando lugar a la liberación del sudor hipotonico en la superficie cutanea. El sudor disipa el calor corporal por medio de evaporación superficial Proceso muy rápido grandes cantidades hasta 1 litro o mas por hora se produce en el momento de la sudoración. Claro acuoso pH 4,5 5,5 hipotónico, no existe periodo refractario por ningún estimulo fisiológico, la actividad continua mientras dura la estimulación, responde al calor a estímulos emocionales y gustativos. Órgano mayor de la termorregulación. Sudar es un mecanismo natural del organismo que permite regular la temperatura del cuerpo y mantener hidratada la piel. El sudor es producido por las glándulas sudoríparas que se encuentran en la piel, las cuales reaccionan ante el calor, el aumento de actividad física, la ansiedad y el estrés.
- Los principales contribuyentes al olor axilar son: (i) no saturados hidroxilados o ácidos grasos ramificados con (E)-3-metil-2 - ácido hexenoico (3M2H) y 3-hidroxi-3-metil-hexanoico (HMHA) como componentes clave, (ii) sulfanylalkanols, en particular -3-metil-3-sulfanylhexan-1-ol (3M3SH) (Hasegawa et al. 2004; Natsch et al., 2004; Troccaz et al., 2004), y (iii) la esteroides odoríferas, 5a-androst-16-en-3-ona y 5a-androst - 16-en-3a-ol, que exhiben una muestra de orina o de olor a almizcle (Bird, y Gower, 1981). A pesar de los precursores de los ácidos odorante Se ha demostrado que se conjuga la glutamina que se rompen específicamente por una bacteria Na-acil-glutamina-aminoacylase de Un cuerpo estriado Corynebacterium? 20, se secretan sulfanylalkanols de las glándulas sudoríparas, como la cisteína-(S) o cisteína - glicina-(S) conjugados (Starkenmann et al., 2005; Emter y Natsch, 2008), y son puestos en libertad por la acción secuencial de la un dipeptidasa bacteriana, tpdA, y una cisteína b-liasa, que Se han clonado a partir de la misma cepa bacteriana (Emter y la Natsch, 2008). Sudoríparas apocrinas contiene cantidades relativamente altas deproteínas (Froebe et al., 1990; Jacoby et al., 2004) y nonodoriferous esteroides, por ejemplo, la dehidroepiandrosterona (DHEA), androsterona, la testosterona, y sus correspondientes sulfatos (Toth y Faredin, 1985). Se ha sugerido por varios autores que los dos esteroides odoríferas, 5a-androst-16-en-3-ona y 5a-androst-16-en-3a-ol, se nonodoriferous formado a partir de precursores esteroides como resultado de la metabolismo bacteriano (Labows et al., 1979, Gower et al., , 1997; Decreau et al., 2003). Troccaz M, Starkenmann C, Niclass Y et al. 3-Methyl-3-sulfanylhexan-1-ol as a major descriptor for the human axilla-sweat odour profile. Chem Biodivers 2004; 1:1022–35. La composición química del olor del sudor de los hombres comprende cuatro componentes principales. En primer lugar, un esteroide que contiene cuatro fracción muy oloroso esteroides, 5?-Androst-16 - n-3-ona, androsta-4 ,16-dien-3-ona, y sus respectivos alcoholes (5?-androst-16-en - 3?-Ol y androsta-4 ,16-dien-3?-Ol) [7]. Sin embargo, es sólo recientemente que las pruebas de la identidad exacta de los esteroides precursores volátiles olorosas presentes en el sudor ha apocrine sido reportado [8]. Wysocki CJ, Preti G. Facts, fallacies, fears, and frustrations with human pheromones. Anat Rec 2004;281A:1201–11. La axilar componentes más frecuentemente citados como putativo feromonas humanas son volátiles esteroides: Androstenone, androstenol, y 4,16-androstadien-3-ona (androstadienone). La concentración y la biogénesis de estos compuestos axilas en humanos han sido examinados (Rennie y al., 1991; y Ruparelia Gower, 1993). Además, Androstenone androstenol y se comprobó que estaban presentes en el característico olor fracción, en los niveles de 50-100 veces por debajo de la concentración de 3M2H y otros ácidos orgánicos (Zeng et al., 1992). Shinhoara et al. (2000) encontró que androstenol (obtenido comercialmente) podría alterar LH pulsante cuando se aplica a la parte superior del labio / región de las narinas 1.000 beneficiarios en las concentraciones? anteriormente endógeno concentraciones. Del mismo modo, Jacob y McClintock (2000) concentraciones (de los disponibles comercialmente androstadienone) que fueron también 1000? informó axilar anterior modulador de las concentraciones de feromonas para demostrar los efectos para androstadienone. Posterior trabajo de Lundström et al. (2003b) ha demostrado que la concentración utilizada por Jacob y McClintock (2000) arrojó vaporphase concentraciones de androstadienone que se acerca a el promedio de umbral olfativo para este compuesto, es decir, 211 vs 250? M utilizados por Jacob y McClintock (2000). Lundström et al. (2003a), sin embargo, hizo un informe único efecto significativo de ánimo ( &quot;estar centrado&quot;) cuando aplicado 250? M a la zona nasal de los sujetos. A pesar de que la identidad química específica quedan por determinado, los seres humanos llevan consigo único químicos firmas. Estas hipótesis son odorprints a consistir de un ramo de odorants cuyas cantidades relativas difieren a través de las personas. Estos odorants también pueden estar presentes en todos nuestros fluidos corporales y secreciones y se regulan y / o producidos en parte por el conjunto de genes que codifican para la función inmune (antígeno de leucocitos humanos; HLA). Varios estudios han demostrado que axilar volátiles recogidos en pastillas y / o camisetas que los individuos puedan identificar su olor, así como los de su cónyuge y cerrar familiares (Schleidt, 1980, Porter y Moore, 1981; Schleidt et al., 1981; Cernoch y Porter, 1985; Hepper, 1988). Estos estudios sugieren firmemente que contengan las secreciones axilares odorants única a las personas que pueden utilizarse para la identificación (signaler feromona). Algunos han sugerido que pueden desempeñar un papel en la elección mate (Jacob et al., 2002). HLA relacionados con las proteínas se han detectado tanto en el lactíferos conductos de la mama, una estructura análoga a la axilar apocrine glándulas, y parte de la intradermotuberculinización las glándulas sebáceas (Murphy et al., 1983). Estudios de un laboratorio (Zavazava et al., 1990, 1994) han informado de la presencia de una molécula HLA de clase 1 en la axila sudor recogido después del ejercicio (una mezcla de apocrine, apoeccrine, sebáceas, y secreción ecrinas). Estos investigadores también demostró que las personas que se HLAA23, -A24, B62-o expresado mayores niveles de HLA soluble moléculas en el suero de los individuos sin especificidades. Dos tercios de las personas que tuvieron el más fuerte cuerpo los olores, cuando se evaluó organolépticas, fueron de una de las anteriores características antigénicas, lo que sugiere una relación directa relación entre la intensidad del olor corporal y los niveles de solubles HLA relacionados con las proteínas. El único estudio que ha examinado las estructuras del sistema inmune relacionados con odorants se realizados con roedores (Singer et al., 1997). Los datos en este publicación sugieren que estos animales en la orina odorprint está formada por ácidos constituyentes. Fenilacético ácido es el único identificado compuestos ácidos que se significativamente diferente entre los dos grupos con diferentes MHCs. Actualmente, la hipótesis de que humanos odorprints También se formó por las proporciones de ácidos orgánicos en el axilas, orina y otros líquidos En segundo lugar, ácidos grasos volátiles (VFAs) puede estar formado por la acción de ciertas bacterias. Es evidente que la leucina puede actuar como un sustrato potencial para la generación de ácido isovaleric. Esta conversión se puede llevar por Corynebacterium spp. Otro grupo, el Corynebacterium sub-grupo A, no posee la capacidad para catabolise larga ácidos grasos (LCFAs), y, en cambio, productos de degradación parcial se forman (C6 ± 11 ácidos). Esto es especialmente el caso de la metil-ramificado ácidos grasos como isostearic ácido (C16 heterogéneo cóctel de ± 18 ramificada y ácidos grasos no ramificados). Con este sustrato, una serie de muy oloroso 2-metil-C6 ± 14 ácidos grasos se generan como punto final del metabolismo. VFA acumulación de sudor en apocrine debe depender de la Corynebacterium relativa de las actividades sub-grupo A vs bacterias VFA degradantes bacterias, como Micrococcus luteus o Brevibacterium epidermidis [9]. En tercer lugar, el principal contribuyente en olfativo sudor axilar es más probable que se (S)-3-methylhex-2-enoic ácido (1; cf. El sistema &quot;) y fue descubierto por Preti y compañeros de trabajo [10]. Una comparación de las cantidades relativas en el sudor masculino estimado en más de 1 700 veces mayor que la concentración de esteroides volátiles olorosos Androstenone [11]. El cinética de liberación rápida de 1 parecía incompatible con el recuento de bacterias catabólica metabolismo, por ejemplo, la degradación de ácidos grasos. Posteriormente se demostró que 1 es de hecho, vinculado a las proteínas secretadas por las glándulas de la apocrine ± apocrine secreción odourbinding proteínas (ASOBs) [12] [13]. Recientemente, Acuña y compañeros de trabajo clonado el gen para la enzima responsable de la liberación de 1 de Corynebacterium striatum [14]. También determinaron que la química relacionada con el ácido 3-hidroxi-3-ácido methylhexanoic representa otra forma de proteína determinada. Se puso de manifiesto que el ligando ácidos noncovalently vinculado a la proteína transportadora en forma de conjugados de glutamina. Por síntesis de estos precursores, un Zn2? aminoacylase dependientes, que en la práctica escindida tanto fuera de los ácidos conjugado glutamina, se ha identificado. Análisis de la la codificación de región del gen clonado reveló conservan cuatro aminoácidos motivos comunes a un número ofZn2? metaloproteasas dependientes [14]. Parece que la bacteriana la flora han evolucionado conjuntamente con el anfitrión en la medida en que las enzimas presentes con único sustrato perfiles en sintonía con las secreciones de acogida y de señalización chemosensory. Por último, degradación aminoácidos que contienen el azufre también pueden estar asociados con la generación de mal olor por la formación de volátiles sulfurados compounds. Mercapturates (S - [N-acetil] conjugados de cisteína) desempeñan un papel importante en la detoxificación de muchos xenobióticos potencialmente nocivos en los seres humanos (para una revisión, véase [15] y refs. cit. mismo). Por lo general, relativamente estable molécula que contiene tiol-que se produce es soluble y puede ser excretadas. Sin embargo, algunas bacterias también se han atribuido a la eliminación actividad para la S-cisteína conjugados [16]. -Eliminación de la S-cisteína conjugados se puede realizado por varias enzimas microbianas incluidas lipasa [17],-cystathionase (un enzimas involucradas en la biosíntesis de la metionina),-también pueden catalizar cystathionase -- eliminación [18], tryptophanase (uno de transaminasas), y-liasa de Eubaceria limosum [19]. Se sabe que el azufre que contienen los aminoácidos son secretados en el sudor, y que dependientes de piridoxal-fosfato-liasa actividad puede ser en parte responsable de la generación de mal olor axilar de las secreciones apocrine. Esta conexión representa uno de los pocos ejemplos en los que tioles (como compuestos volátiles sulfurados) se indican como componentes fundamentales de la persona humana axilar mal olor, aunque no hay datos sobre estructuras de moleculares intermedios o de la enzima purificada se describen las actividades [20] buena aproximación a la realidad de olores, según lo determinado por el panel sensorial, pero claramente falta importante impacto moléculas. Estas re-creaciones faltan sólo en la volátil compuestos de azufre (VSCs) que no estarán representados, debido a su problemática identificación. De hecho, de unos 20 años, los investigadores han estudiado para caracterizar este subconjunto importante de odorants.Whilst interesantes y útiles, el cuerpo olor reconstituciones utilizando mezclas de ácidos y los esteroides (incluyendo androstrenone y 1) carecen de la general picante naturaleza típicamente se encuentran en axila olor. Como se ha descrito anteriormente, también puede VSCs ser importantes para el cuerpo olfactive descriptores de olor, aunque no han sido las estructuras informó [20]. Van de Waal et al. intento de sustituir el componente que falta VSC con el 1-methoxyhexane-3-tiol de Clary salvia (Salvia sclarea L.) con cierto éxito [22]. Sin embargo, no informes enla literatura de las estructuras han sido VSC próxima. Hemos querido estudiar la naturaleza y la generación de VSCs en humanos por el mal olor del sudor con un enfoque pragmático de la construcción de un ejercicio / sauna instalación con el fin de recoger sudor de la axila voluntarios después de la sudoración excesiva. El objetivo era utilizar esta inodoro de material para recrear un auténtico mal olor axilar in vitro en un medio ambiente para poder acceder a las de bajo umbral VSC componente. Aquí se describe la el aislamiento de varias cepas de bacterias y su caracterización de expertos en la generación de sobaco olor humano. Además, presentamos nuestros resultados iniciales y describir 3 -- metil-3-sulfanylhexan-1-ol (4; régimen), como compuestos volátiles de azufre generados en sudor humanos por acción microbiana. 2. Resultados. ± 2,1 Colección sudor. La media de las cantidades de sudor axila fueron recogidos de 3 ml / macho voluntario después de ciclismo y 10 ml después de la sauna. Un total de 500 ml de no odourous, estéril sobaco sudor y 125 ml de sudor maloliente se de 30 voluntarios recogieron más de un período de ocho semanas. Aproximadamente 100 ml de sudor contaminado (es decir, contaminada por los perfumes o los olores de alimentos) también fueron recogidos y desecharse. El promedio de concentración de proteínas de recogida de muestras se sobaco sudor ca. 0,25 mg / ml. Esta cantidad fue de aproximadamente. diez veces menor que la concentración informa encuentra en el apocrine secreciones [23]. Sin embargo, la dilución de las secreciones apocrine ecrinas con el sudor no afecta a la generación de una aceptable sudor y picante después de bacteriolysis olor. Como parte de un experimento de control, nos confirmó que la ecrinas próximos sudor de la frente no produjo ningún organismo / olor axilar cuando incubados con bacterias aisladas (datos no mostrados). 2,2 Bacterially de creación sudor mal olor. 2.2.1. Diversidad microbiana y su Relación con el mal olor axilar. Un promedio de 2? 105? 5? 104 cfu/cm2 total aeróbica cuenta fueron recuperados de axilas, la muestra 6 h después de la ducha. Como ya se informó, no hay diferencia cualitativa entre la izquierda y la derecha se observó axila [9]. Diphtheroids fueron en gran parte representada por Corynebacterium spp. en una concentración de 1? 102? 2? 101 cfu/cm2. Micrococci incluyendo Staphylococcus spp., Micrococcus spp. y Kocuria spp. fueron las más comunes en una concentración de 2,5? 105? 5? 104 cfu/cm2. Un Bacillus sp. se recuperó a partir de un solo tema en un nivel muy bajo concentración de 0,1 cells/cm2. Todas las bacterias Gram-positivas, excepto el Bacillus sp. se describieron como los microorganismos implicados en el mal olor axilar [2] [9]. Muy pocos Las bacterias Gram-negativas (algunos Enterobacter spp. Y Pseudomonas spp.) Fueron recuperados. Olfactive una selección de estos microorganismos se realizó con respecto a sus capacidad de biotransformación de extractos axilares. Ácido malodours fueron producidos por la incubación de Propionibacterium sp.; sin embargo, la intensidad de la señal es baja. Gram bacterias dio casi ninguna contribución a la mal olor axilar. Por el contrario, corynebacteria, micrococci, y el Bacillus sp. generado un intenso y picante malodours. De hecho, cinco cepas bacterianas fueron seleccionados por su capacidad de generar fuerte olor axilar y se han tomado para profundizar en la caracterización y descriptivo análisis sensorial. Las cinco cepas por escrito la secuencia 16S rDNA (Instituto Pasteur) se Corynebacterium tuberculostearicum, Corynebacterium minutissimum, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus haemolyticus, y Bacillus licheniformis y fueron designados Ax 1 ± 5, respectivamente. 2.2.2. Análisis sensorial. Corynebacterium xerosis de DSM 20743 fue elegido como uno el olor de referencia de generación de tensión. Como era de esperar, las seis cepas fueron capaces de convertir estéril, inodoro malodourous sudor en sudor. Los perfiles de olor después de 12 h incubación con los seis cepas están representados en la fig. 1. Los olores son más intensos obtenida a través de la incubación con C. xerosis, B. licheniformis Ax 5 y San haemolyticus Ax 4, con el sudor (acre) intensidad puntuaciones de 7,2, 7,3, y 7,9, respectivamente. Un predominio de sudor, la cebolla, el ácido y las notas se han generado con C. xerosis, que más sudor, cebolla, mantequilla y notas descriptivas de la Santa haemolyticus convertido - muestra. Este último fue también responsable de la generación de una zona verde y Clary sage-como olor. B. licheniformis se describió como el sudor con predominio de la cebolla y el toma nota de pollo, mientras que C. minutissimum Ax 2 se caracteriza por una mayor florales calificación (1,2). La incubación de S. epidermidis Ax 3 dio un caldo de pollo y de carácter se evaluó como el sudor, como mínimo Corynebacterium tuberculostearicum, Corynebacterium minutissimum, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus haemolyticus y Bacilluslicheniformis, fueron aislados y caracteriza por su capacidad para generar un auténtico olor axilar de material que se acumule el sudor. Ya que espera, todos de las cinco cepas bacterianas producen fuertes olores del sudor. Sorprendentemente, tras extensas evaluación olfativa, la cepa de Staphylococcus haemolyticus producido más sudor sulfury carácter La leucina (abreviada Leu o L ) es uno de los veinte aminoácidos que utilizan las células para sintetizar proteínas . Está codificada en el ARN mensajero como UUA, UUG, CUU, CUC, CUA o CUG. Su cadena lateral es no polar, un grupo isobutilo (2-metilpropilo). La cisteína (abreviada Cys o C ) es uno de los veinte aminoácidos que utilizan las células para sintetizar proteínas . Está codificada en el ARN mensajero como UGU o UGC. La cisteína es un aminoácido no esencial, sulfurado, que puede oxidarse dando el dímero cistina . Se sintetiza a partir de la metionina , que es un aminoácido esencial, por medio de dos reacciones: transmetilación , en la que la metionina se transforma en homocisteína y transulfuración , en la que la homocisteína pasa a ser cisteína. Su nombre sistemático (poco utilizado) es ácido 2-amino-3-mercaptopropióni
- La característica del olor axilar humano está formado por la acción bacteriana sobre los precursores de olores que se originan en las glándulas sudoríparas. Los caucásicos y africanos poseen un fuerte olor axilar, mientras que muchos asiáticos sólo tienen una olor ácido débil. En este estudio, que proporcionan pruebas de que el gen ABCC11 (MRP8), que codifica una apical bomba de salida, es crucial para la formación del olor axilar característico y que un solo nucleótido - polimorfismo (SNP) 538G-A, que se destaca entre los pueblos de Asia, conduce a una pérdida casi completa de la componentes típico olor del sudor axilar. La secreción de amino-ácidos conjugados de humanos-odorantes específicos se suprime en los portadores homocigotas del SNP, y olores esteroideos y sus precursores putativo reducido significativamente. Por otra parte, se muestra que ABCC11 se expresa y se localiza en las glándulas sudoríparas. Estos datos apuntan a una función clave de ABCC11 en la secreción de sustancias odoríferas y sus precursores de apocrinas las glándulas sudoríparas. SNP 538G-A, que también determina el tipo de cera de los oídos humanos, está presente en un haplotipo extendido, que ha alcanzado el 495% de la frecuencia en algunas poblaciones en la evolución humana reciente. Un fuerte y positiva de selección en la elección de pareja para los socios de bajo olor con un gen ABCC11 disfuncional parece plausible explicación de esta frecuencia sorprendente de una pérdida de función del alelo
- Curiosamente, se había informado anteriormente que las características de cera de los oídos están interconectados con la fuerza de el olor axilar, por el que la cerilla mojada es acompañado por un fuerte olor axilar y cera seca va junto con una falta el olor axilar (Adachi, 1937). La conexión de la cera de los oídos y olor axilar puede explicarse por la estrecha relación entre ceruminosas y glándulas sudoríparas apocrinas, tanto pertenecientes a las glándulas apocrinas tipo histológico que comparten muchos y las características funcionales (Stoeckelhuber et al., 2006).
- Recientemente, el genotipo ABCC11 se asoció con la secreción de calostro, así como osmidrosis (Miura et al. 2007; Toyoda et al., 2009). ABCC11 es conocida para el transporte de una variedad de lipofílicas aniones (Chen et al., 2005; Kruh et al., 2007), incluyendo cíclica sulfatos de esteroides nucleótidos, el 17 de estradiol-BD-glucurónido, como el sulfato de dehidroepiandrosterona (DHEAS), y monoanionic los ácidos biliares. Como muchos de estos metabolitos de compartir similitudes con los diversos componentes de la apocrinas axilares sudor, que la hipótesis de que ABCC11 puede tener un importante papel en los procesos de transporte de las moléculas de olor apocrino y que el mencionado SNP en el gen pueden ABCC11 conducir a una pérdida de la secreción de los metabolitos que normalmente se esencial para la formación de olor axilar típico. Para verificar esta hipótesis, se llevó a cabo un detallado análisis químico de muestras de sudor axilar de 25 temas de diferentes ABCC11 genotipos. Además, hemos demostrado la expresión y la localización de ABCC11 humanos en las glándulas sudoríparas.
- Además, está presente en un largo haplotipo, que parece haber aumentado rápidamente en la frecuencia de fundador de una reciente (Yoshiura et al., 2006), lo que indica una la selección positiva de este fuerte (o el vinculado) SNP.
- Él utilizó una técnica llamada cromatografía de gas, la cual permite separar los componentes de mezclas complejas con el fin de detectar alrededor de 250 componentes orgánicos volátiles que se encuentran en el aire y que son exhalados por los pulmones Sin embargo, la cromatografía de gas por sí misma no puede identificar cada uno de los componentes, solo los separa. Para hacer las identificaciones, hay un segundo paso llamado espectrometría de masas, que calcula el peso de las moléculas de cada componente. Al utilizar la cromatografía de gas y la espectrometría de masas, investigadores pudieron, luego de años, identificar mas de 3 mil componentes que son regularmente exhalados, excretados o exudados por el cuerpo humano Una huella de cromatografía de gases, un extracto de los hombres axilar secreciones. Se sabe mucho sobre la química axilar. Por ejemplo, muchos de los picos en el cromatograma, se han identificado químicamente. Además, para muchos de los compuestos, los orígenes y, por tanto, la formación de olor también se entienden. Especificación de los componentes pheromonal dentro de la traza GC, si son visibles incluso en él, espera a la identificación bioensayo impulsada a través de la metodología. Con este fin, la química por sí sola puede no ser suficiente. Por ejemplo, los resultados de los bioensayos pueden sugerir componentes activos que no aparecen los picos en el cromatograma, que Se sabe que se producen al tratar de identificar los componentes activos en los alimentos o las fragancias de las flores. Al fin y al cabo, el uso de la nariz humana junto con la respuesta biológica y los análisis químicos deben demostrar para tener éxito Espectrómetro de masas De Wikipedia, la enciclopedia libre (Redirigido desde Espectrometría de masas ) Saltar a navegación , búsqueda Haz de iones por electrospray en un espectrómetro de masa. La espectrometría de masas es una técnica experimental que permite la medición de iones derivados de moléculas . El espectrómetro de masas es un instrumento que permite analizar con gran precisión la composición de diferentes elementos químicos e isótopos atómicos, separando los núcleos atómicos en función de su relación masa - carga (m/z). Puede utilizarse para identificar los diferentes elementos químicos que forman un compuesto, o para determinar el contenido isotópico de diferentes elementos en un mismo compuesto. Con frecuencia se encuentra como detector de un cromatógrafo de gases , en una técnica híbrida conocida por sus iniciales en inglés, GC-MS. El espectrómetro de masas mide razones carga/masa de iones, calentando un haz de material del compuesto a analizar hasta vaporizarlo e ionizar los diferentes átomos. El haz de iones produce un patrón específico en el detector, que permite analizar el compuesto. En la industria es altamente utilizado en el análisis elemental de semiconductores, biosensores y cadenas poliméricas complejas. Contenido [ocultar] 1 Historia 2 Fundamentos de la espectrometría de masas de iones secundarios (SIMS) 2.1 Conceptos clave 3 Límites de detección 4 Asistencia de iones positivos o negativos 5 Funcionamiento 6 Componentes 6.1 Fuente de ionización 6.2 Analizador de masa 6.3 Detector 7 Referencias 8 Enlaces externos Historia [ editar ] El fenómeno de emisión de iones secundarios fue observado por primera vez a comienzos del siglo XX. El primer instrumento similar a un espectrómetro de masas fue descrito en 1899 por el científico inglés J. J. Thomson, que estaba interesado en medir la relación masa-carga del electrón. En 1918 y 1919, A. J. Dempster y F. W. Aston construyeron los primeros instrumentos capaces de actuar como un espectrómetro de masas. Fundamentos de la espectrometría de masas de iones secundarios (SIMS) [ editar ] La técnica de detección de iones se basa en el fenómeno conocido como desbastado ( sputtering , en inglés) de partículas centradas en un blanco, que son bombardeadas por iones, átomos o moléculas. Dependiendo del intervalo de energía de la partícula primaria, ocurren colisiones elásticas e inelásticas: En el intervalo de los keV, las interacciones dominantes son las elásticas . Las colisiones inelásticas aumentan como aumenta la energía. Estas son más comunes en el intervalo de energía de los MeV. El proceso de dispersión produce iones secundarios en el rango de las energías cinéticas traslacionales. Las distribuciones de energía son distintas para iones atómicos o moleculares. La eficiencia de ionización del SIMS es definida como la fracción de los átomos esparcidos que se vuelven ionizados. La eficiencia varía con respecto al elemento de análisis en varios órdenes de magnitud. Las influencias más obvias son el potencial de ionización y la afinidad electrónica de los iones negativos. Conceptos clave [ editar ] La resolución (m/∆m) es la capacidad de separar y medir masas de iones de similar masa molecular. Masa monoisotópica y masa media : La masa monoisotópica es la suma de las masas monoisotópicas de cada elemento del analito. La masa media es la suma de la media química de las masas de sus componentes considerando su abundancia. La precisión de masa es un porcentaje de la masa medida y se mide tanto en tanto por ciento como en partes por millón. Límites de detección [ editar ] En general, a mayor velocidad de erosión, mejor sensibilidad, por lo que, a corriente alta, el haz primario de iones de alta energía es el ideal. Pero, desafortunadamente, con la energía, no solo la eficiencia del “sputtering” aumenta; también la profundidad de penetración y el volumen de cascada (daño inducido, perturbación). Es por eso que SIMS es una técnica de análisis destructiva. La distinción entre condiciones dinámicas y estáticas podemos comprenderla analizando el tiempo de vida (t) en la primera capa atómica encontrada en superficie: [1] t = 105 A * x / Ip * y donde: t = tiempo de vida de la monocapa. A = área de superficie pulverizada [cm2]. y = parte dispersada. Ip = flujo primario de partículas [cm-2]. Asistencia de iones positivos o negativos [ editar ] La asistencia del oxígeno (O2+) ocurre como resultado de los enlaces metal-oxígeno en una zona enriquecida con oxígeno. Cuando estos enlaces se rompen durante la emisión de iones, el oxígeno se carga negativamente debido a su alta afinidad electrónica, favorece la captura, y su alto potencial de ionización inhibe las partículas positivas (iones positivos). El metal es aislado entonces de cargas positivas. Además, el bombardeo con oxígeno incrementa la concentración de oxígeno en la superficie. Por otra parte, el bombardeo con cesio (Cs+) favorece los iones negativos de la muestra. Este fenómeno se pueden explicar por funciones trabajo que son reducidas por la implantación de cesio en la superficie de la muestra. Más electrones secundarios son excitados sobre la superficie de la barrera de potencial. Incrementar la disponibilidad de electrones lleva a la formación de iones negativos. Funcionamiento [ editar ] En términos generales, moléculas diversas tienen masas diversas, hecho utilizado por un espectrómetro de masas para determinar qué moléculas están presentes en una muestra. Por ejemplo, se vaporiza sal de mesa ( NaCl ) y se analizan los iones en la primera parte del espectrómetro de masa. Esto produce iones del sodio e iones del cloro que tienen pesos moleculares específicos. Estos iones también tienen una carga, que significa que debido a ella tendrán movimiento bajo influencia de un determinado campo eléctrico . Estos iones se envían a un compartimiento de aceleración y se pasan a través de una lámina metálica. Se aplica un campo magnético a un lado del compartimiento que atrae a cada uno de los iones con la misma fuerza (suponiendo carga idéntica) y se los desvía sobre un detector. Naturalmente, los iones más ligeros se desviarán más que los iones pesados porque la fuerza aplicada a cada ion es igual pero los iones ligeros tienen menos masa. El detector mide exactamente cuán lejos se ha desviado cada ion y, a partir de ese dato se calcula el &quot;cociente masa por unidad de carga&quot;. Con esta información es posible determinar con un alto nivel de certeza cuál es la composición química de la muestra original. Hay muchos tipos de espectrómetros de masas que no solamente analizan los iones, sino que también producen diversos tipos de iones. Sin embargo, todos utilizan campos eléctricos y magnéticos para cambiar la trayectoria iónica de determinada manera. Componentes [ editar ] Un espectrómetro de masas tiene tres componentes fundamentales: la fuente de ionización, el analizador de masa y el detector. Fuente de ionización [ editar ] La fuente de iones es el elemento del espectrómetro que ioniza el material a ser analizado (el analito ). Luego los iones son transportados por los campos magnéticos o eléctricos al analizador total. Las técnicas para la ionización han sido dominantes para determinar qué tipos de muestras se pueden analizar por espectrometría de masa. La ionización del electrón y la ionización molecular se utilizan para los gases y los vapores. Dos técnicas, usadas a menudo con líquidos y muestras biológicas sólidas, incluyen la ionización por electrospray (debido a John Fenn) y el láser Matriz-Asistido Desorción/Ionización ( MALDI , debido a M. Karas y a F. Hillenkamp). Las fuentes inductivas del plasma se utilizan, sobre todo, para el análisis del metal en una amplia gama de los tipos de las muestras. Otras técnicas incluyen la ionización química rápida del bombardeo del átomo (FAB), termo spray, ionización química por presión atmosférica (APCI), espectrometría de masa de Ion sec Analizador de masa [ editar ] Parte eléctrica Parte magnética El analizador de masa es la pieza más flexible del espectrómetro de masa. Utiliza un campo eléctrico o magnético para afectar la trayectoria o la velocidad de las partículas cargadas de una cierta manera. La fuerza ejercida por los campos eléctricos y magnéticos es definida por la fuerza de Lorentz : donde E es la fuerza del campo eléctrico , B es la inducción del campo magnético , q es la carga de la partícula, v es su velocidad y x simboliza el producto cruz o producto vectorial. Todos los analizadores totales utilizan las fuerzas de Lorentz de una manera u otra en la determinación de masa-carga, estáticamente o dinámicamente. Además de los tipos originales del área magnética, otros tipos de analizadores están actualmente en un uso más común, incluyendo tiempo-de-vuelo , la trampa cudrupole del ion, cuadrupole y Fourier transforma analizadores de la masa de la resonancia del ciclotrón del ion. Además de éstos hay muchos más analizadores totales experimentales y combinaciones exóticas de analizadores. Según lo demostrado arriba, los instrumentos del área cambian la dirección de los iones que están volando a través del analizador total. Los iones incorporan un campo magnético o el campo eléctrico que dobla las trayectorias del ion dependientes en su masa y carga, desviando la mudanza más rápida, iones más ligeros más. Así, el analizador dirige las partículas al detector, variando un campo eléctrico o magnético que se basa en el cociente masa/carga (m/z). Actualmente existen diferentes métodos para &quot;filtrar&quot; los iones respecto a su relación Masa/carga. El más comúnmente usado es el denominado cuadrupolo. Se compone de 4 barras alargadas en formación cuadrada, conectadas eléctricamente entre sí en pares opuestos. A dichos pares (polos) se les aplica una tensión de radiofrecuencia variable que sintoniza con un determinado ion. Cuando existe sintonía entre el ion que está pasando por ellas y la frecuencia aplicada, dicho ion continúa su camino sin problema, desviándose todos los demás no sintonizados fuera del cuadrupolo y de esta manera no impactan en el detector. La configuración de los actuales espectrómetros de masa pasa por disponer de uno, dos y hasta tres cuadrupolos en serie (triplecuadrupolo muy en boga). Existen también configuraciones no cuadripolares, como pueden ser los hexapolos, aunque su funcionamiento es análogo al cuadripolo. El analizador se puede utilizar para seleccionar una gama estrecha de m/z's o para explorar a través de una gama de m/z's para catalogar los iones presentes: Quizás el más fácil de entender es el analizador del Tiempo-de-vuelo (TOF) que se integra típicamente con fuentes del ion de MALDI. Alza los iones a la misma energía cinética por el paso a través de un campo eléctrico y mide los tiempos que toman para alcanzar el detector . Aunque la energía cinética es igual, la velocidad es diferente, así que el ion más altamente cargado del alumbrador alcanzará el detector primero . Los analizadores totales cuadrupole y los campos eléctricos oscilantes del ion del uso cuadrupole de las trampas [ QIT ] estabilizan selectivamente o desestabilizan los iones que caen dentro de una ventana estrecha de los valores de m/z. Fourier transforma medidas del espectrometría de masa que se forma detectando la corriente de la imagen producida por los iones ciclotronándolos en presencia de un campo magnético. Poder escoger el analizador más adecuado para un experimento depende del tipo de información que se obtiene del experimento. Detector [ editar ] El elemento final del espectrómetro total es el detector. El detector registra la carga inducida o la corriente producida cuando un ion pasa cerca o golpea una superficie. En un instrumento de exploración la señal es producida en el detector durante la trayectoria de la misma (en qué m/z) y producirá un espectro de masa, un expediente del m/z's en el cual los iones están presentes. Típicamente, se utiliza un cierto tipo de multiplicador de electrones (electromultiplicador), aunque se han empleado otros detectores (como las tazas de Faraday ). Espectro de masas. El funcionamiento del electromultiplicador se basa en el efecto cascada producido al impactar un determinado ion (o iones) en el mismo. Aplicando una diferencia de potencial entre sus extremos, se consigue aumentar el factor de amplificación, que vendrá determinado por el número de subetapas amplificadoras que componen el detector. Normalmente, es un componente sometido a desgaste que ha de reemplazarse con el tiempo al perder eficiencia de amplificación. Ya que el número de iones que dejan el analizador total en un instante particular es realmente pequeño, una amplificación significativa es generalmente necesaria para conseguir una señal mínimamente procesable. Los detectores de la placa de Microchannel se utilizan comúnmente en instrumentos comerciales modernos. En FTMS el &quot;detector&quot; es un par de placas de metal dentro de la región total del analizador que los iones pasan solamente cerca. No se produce ninguna corriente de la C.C., sólo una corriente débil de la imagen de la CA se produce en un circuito entre las placas.
- Ácidos carboxílicos, que están presentes en el sudor en forma conjugada, se determinan directamente por la fracción de ácidos en los extractos de sudor axilar de sujetos de diferentes genotipos ABCC11 por cromatografía de gases-espectrometría de masas (GC-MS)(Cuadro 3).
- En la Tabla 3b, las cantidades detectadas de los diferentes ácidos se normalizaron a las cantidades de ácido hexadecanoico, que se es conocido por ser uno de los principales componentes del estrato de capa de lípidos. Curiosamente, los niveles de ácidos grasos de cadena larga ácidos, hexadecanoico, ácido octadecanoico, y el ácido linoleico, son similares entre los diferentes genotipos ABCC11 (P-values40.3). Lo mismo es cierto para grasos de cadena corta la recta los ácidos, el ácido butírico, ácido hexanoico y ácido octanoico (Pvalues40.1), que son odoríferas, aunque en mucho menor medida en que los ácidos ramificados. Por el contrario, los niveles de la olorosas ácidos ramificados, 3-metil-butírico (isovalérico ácido) y 2-metil-butírico, se redujo significativamente en muestras de sudor de la AA en comparación con los homocigotos de AG y de los genotipos GG (P-valores o0.005). Análisis de esteroides y de la concentración de proteínas en el sudor axilar muestras El contenido de los esteroides odoríferas, 5a-androst - 16-en-3-ona y 5a-androst-16-en-3a-ol, en el sudor axilar Se analizó en la fracción acuosa de las muestras extraídas sudor por ELISA (Cuadro 4) utilizando un anticuerpo policlonal de conejo desarrollados contra la androstenona-3-(O-carboximetil) oxima, que fue junto a hemocianina de lapa para inducir a la inmunogenicidad de del esteroide relativamente pequeño. Como acoplamiento proteína implicada el átomo de oxígeno en el C3 posición de los esteroides, el anticuerpo fue incapaz de distinguir entre 5a-androst-16-en-3-ona y de 5a-androst-16-en-3a-ol. Aunque el sudor axilar de GG homocigotos y heterocigotos AG mostró una mediana alta las concentraciones de los esteroides detectables mediante este ELISA (análisis de la mediana de la concentración de AG: 1070,18 ng / ml de sudor, med. conc. GG: 1371,26 ng / ml de sudor), las concentraciones se redujeron significativamente en los homocigotos AA (Med. conc. AA: 302,16 ng / ml de sudor, P-AA valor frente a AG y GG: P ¼ 0,000).
- En la Tabla 3b, las cantidades detectadas de los diferentes ácidos se normalizaron a las cantidades de ácido hexadecanoico, que se es conocido por ser uno de los principales componentes del estrato de capa de lípidos. Curiosamente, los niveles de ácidos grasos de cadena larga ácidos, hexadecanoico, ácido octadecanoico, y el ácido linoleico, son similares entre los diferentes genotipos ABCC11 (P-values40.3). Lo mismo es cierto para grasos de cadena corta la recta los ácidos, el ácido butírico, ácido hexanoico y ácido octanoico (Pvalues40.1), que son odoríferas, aunque en mucho menor medida en que los ácidos ramificados.
- Por el contrario, los niveles de la olorosas ácidos ramificados, 3-metil-butírico (isovalérico ácido) y 2-metil-butírico, se redujo significativamente en muestras de sudor de la AA en comparación con los homocigotos de AG y de los genotipos GG (p < 0.005).
- Análisis de esteroides y de la concentración de proteínas en el sudor axilar muestras El contenido de los esteroides odoríferas, 5a-androst - 16-en-3-ona y 5a-androst-16-en-3a-ol, en el sudor axilar Se analizó en la fracción acuosa de las muestras extraídas sudor por ELISA (Cuadro 4) utilizando un anticuerpo policlonal de conejo desarrollados contra la androstenona-3-(O-carboximetil) oxima, que fue junto a hemocianina de lapa para inducir a la inmunogenicidad de del esteroide relativamente pequeño. Como acoplamiento proteína implicada el átomo de oxígeno en el C3 posición de los esteroides, el anticuerpo fue incapaz de distinguir entre 5a-androst-16-en-3-ona y de 5a-androst-16-en-3a-ol. Aunque el sudor axilar de GG homocigotos y heterocigotos AG mostró una mediana alta las concentraciones de los esteroides detectables mediante este ELISA (análisis de la mediana de la concentración de AG: 1070,18 ng / ml de sudor, med. conc. GG: 1371,26 ng / ml de sudor), las concentraciones se redujeron significativamente en los homocigotos AA (Med. conc. AA: 302,16 ng / ml de sudor, P-AA valor frente a AG y GG: P ¼ 0,000).
- Análisis de esteroides y de la concentración de proteínas en el sudor axilar muestras El contenido de los esteroides odoríferas, 5a-androst - 16-en-3-ona y 5a-androst-16-en-3a-ol, en el sudor axilar Se analizó en la fracción acuosa de las muestras extraídas sudor por ELISA (Cuadro 4) utilizando un anticuerpo policlonal de conejo desarrollados contra la androstenona-3-(O-carboximetil) oxima, que fue junto a hemocianina de lapa para inducir a la inmunogenicidad de del esteroide relativamente pequeño. Como acoplamiento proteína implicada el átomo de oxígeno en el C3 posición de los esteroides, el anticuerpo fue incapaz de distinguir entre 5a-androst-16-en-3-ona y de 5a-androst-16-en-3a-ol. Aunque el sudor axilar de GG homocigotos y heterocigotos AG mostró una mediana alta las concentraciones de los esteroides detectables mediante este ELISA (análisis de la mediana de la concentración de AG: 1070,18 ng / ml de sudor, med. conc. GG: 1371,26 ng / ml de sudor), las concentraciones se redujeron significativamente en los homocigotos AA (Med. conc. AA: 302,16 ng / ml de sudor, P-AA valor frente a AG y GG: P ¼ 0,000).
- Análisis de esteroides y de la concentración de proteínas en el sudor axilar muestras El contenido de los esteroides odoríferas, 5a-androst - 16-en-3-ona y 5a-androst-16-en-3a-ol, en el sudor axilar Se analizó en la fracción acuosa de las muestras extraídas sudor por ELISA (Cuadro 4) utilizando un anticuerpo policlonal de conejo desarrollados contra la androstenona-3-(O-carboximetil) oxima, que fue junto a hemocianina de lapa para inducir a la inmunogenicidad de del esteroide relativamente pequeño. Como acoplamiento proteína implicada el átomo de oxígeno en el C3 posición de los esteroides, el anticuerpo fue incapaz de distinguir entre 5a-androst-16-en-3-ona y de 5a-androst-16-en-3a-ol. Aunque el sudor axilar de GG homocigotos y heterocigotos AG mostró una mediana alta las concentraciones de los esteroides detectables mediante este ELISA (análisis de la mediana de la concentración de AG: 1070,18 ng / ml de sudor, med. conc. GG: 1371,26 ng / ml de sudor), las concentraciones se redujeron significativamente en los homocigotos AA (Med. conc. AA: 302,16 ng / ml de sudor, P-AA valor frente a AG y GG: P ¼ 0,000).
- De un producto específico ABCC11 PCR de 556 pb fue detectado en muestras de raspado de las glándulas del sudor humano (CU1, Cu2), mientras que en las muestras de piel del párpado (EL1, EL2) no producto de PCR se amplificó. Expresión GAPDH (PCR amplificados producto: 597 pb) fue detectado en ambos, el curetaje y muestras de piel del párpado. w: control del agua.
- Inmunolocalización ABCC11 de proteína en las glándulas sudoríparas de los genotipos de ABCC11 diferentes. (a) genotipo GG. Incluso tinción ABCC11 fue detectadas en las células mioepiteliales (-). Por otra parte, una señal fuerte ABCC11 fue encontrado solo en las células secretoras ()). ¼ de barra de escala de 20 mm. (b) el genotipo GG. Negativo control sin anticuerpo primario. ¼ de barra de escala de 20 mm. (c) genotipo AA. ABCC11 tinción es visible en las células mioepiteliales (-) y solo las células secretoras ()). Escala ¼ de barra de 20 mm. (d) genotipo AA. Control negativo sin anticuerpo primario. ¼ de barra de escala de 20 mm. De señal Azul: núcleos teñidos con hematoxilina de Mayer; L: luz de las glándulas sudoríparas, la señal de color marrón rojizo: ABCC11 tinción específica Las secciones se rehidrata con solución salina tamponada de Tris (TBS) para la 15 minutos a temperatura ambiente y la actividad de peroxidasa endógena fue bloqueada por el tratamiento con 3% H2O2 por 15 minutos. Además, secciones se incubaron con avidina D, seguida de la biotina de incubación de 15 minutos para inhibir la biotina endógena vinculante (Avidina / biotina Blockin Kit, Vector Laboratories, Burlingame, CA). Las secciones fueron incubadas con 10% de suero normal de burro (Jackson Europa Immunoresearch, Suffolk, Reino Unido), diluido en TBS de 20 minutos para evitar que la unión no específica de anticuerpos. Inmediatamente, secciones se incubaron con IgG policlonal de conejo primaria de anticuerpos contra los aminoácidos 929-1144 de ABCC11 humanos (Santa Cruz, Santa Cruz, CA), diluido a 1:100 en TBS, de 18 horas a las 4 1C en una cámara de humedad. Un burro biotinilado secundaria anticuerpos (Jackson Europa Immunoresearch, Suffolk, Reino Unido), diluido al 1:200 en TBS, se aplicó a las diapositivas y se incuba durante 45 minutos a temperatura ambiente. Amplificación de la señal, se logró una la avidina-biotina-peroxidasa de rábano picante método complejo (Vectastin ABC Kit, Vector Laboratories, Burlingame, CA), según a la instrucción de la fabricación. Visualización de la inmunorreactivas sitios se llevó a cabo utilizando 3-amino-9-etilcarbazol (AEC sustrato cromógeno, DakoCytomation, Glostrup, Dinamarca). Entre todas las aplicaciones, las secciones fueron lavadas por 15 minutos con TBS. Los cortes fueron contrastados con hematoxilina de Mayer (Sigma-Aldrich) durante 8 minutos, rehidrata, y coverslipped utilizando medio de montaje acuoso (CV-Ultra, Leica, Wetzlar, Alemania). Los controles negativos fueron llevadas a cabo por la omisión de las primarias anticuerpos. Cortes de tejidos congelados de cáncer de mama humano (BioChain,Hayward, CA) se utilizaron como controles positivos (datos no mostrados).
- Inmunolocalización ABCC11 de proteína en las glándulas sudoríparas de los genotipos de ABCC11 diferentes. (a) genotipo GG. Incluso tinción ABCC11 fue detectadas en las células mioepiteliales (-). Por otra parte, una señal fuerte ABCC11 fue encontrado solo en las células secretoras ()). ¼ de barra de escala de 20 mm. (b) el genotipo GG. Negativo control sin anticuerpo primario. ¼ de barra de escala de 20 mm. (c) genotipo AA. ABCC11 tinción es visible en las células mioepiteliales (-) y solo las células secretoras ()). Escala ¼ de barra de 20 mm. (d) genotipo AA. Control negativo sin anticuerpo primario. ¼ de barra de escala de 20 mm. De señal Azul: núcleos teñidos con hematoxilina de Mayer; L: luz de las glándulas sudoríparas, la señal de color marrón rojizo: ABCC11 tinción específica Las secciones se rehidrata con solución salina tamponada de Tris (TBS) para la 15 minutos a temperatura ambiente y la actividad de peroxidasa endógena fue bloqueada por el tratamiento con 3% H2O2 por 15 minutos. Además, secciones se incubaron con avidina D, seguida de la biotina de incubación de 15 minutos para inhibir la biotina endógena vinculante (Avidina / biotina Blockin Kit, Vector Laboratories, Burlingame, CA). Las secciones fueron incubadas con 10% de suero normal de burro (Jackson Europa Immunoresearch, Suffolk, Reino Unido), diluido en TBS de 20 minutos para evitar que la unión no específica de anticuerpos. Inmediatamente, secciones se incubaron con IgG policlonal de conejo primaria de anticuerpos contra los aminoácidos 929-1144 de ABCC11 humanos (Santa Cruz, Santa Cruz, CA), diluido a 1:100 en TBS, de 18 horas a las 4 1C en una cámara de humedad. Un burro biotinilado secundaria anticuerpos (Jackson Europa Immunoresearch, Suffolk, Reino Unido), diluido al 1:200 en TBS, se aplicó a las diapositivas y se incuba durante 45 minutos a temperatura ambiente. Amplificación de la señal, se logró una la avidina-biotina-peroxidasa de rábano picante método complejo (Vectastin ABC Kit, Vector Laboratories, Burlingame, CA), según a la instrucción de la fabricación. Visualización de la inmunorreactivas sitios se llevó a cabo utilizando 3-amino-9-etilcarbazol (AEC sustrato cromógeno, DakoCytomation, Glostrup, Dinamarca). Entre todas las aplicaciones, las secciones fueron lavadas por 15 minutos con TBS. Los cortes fueron contrastados con hematoxilina de Mayer (Sigma-Aldrich) durante 8 minutos, rehidrata, y coverslipped utilizando medio de montaje acuoso (CV-Ultra, Leica, Wetzlar, Alemania). Los controles negativos fueron llevadas a cabo por la omisión de las primarias anticuerpos. Cortes de tejidos congelados de cáncer de mama humano (BioChain,Hayward, CA) se utilizaron como controles positivos (datos no mostrados).
- Inmunolocalización ABCC11 de proteína en las glándulas sudoríparas de los genotipos de ABCC11 diferentes. (a) genotipo GG. Incluso tinción ABCC11 fue detectadas en las células mioepiteliales (-). Por otra parte, una señal fuerte ABCC11 fue encontrado solo en las células secretoras ()). ¼ de barra de escala de 20 mm. (b) el genotipo GG. Negativo control sin anticuerpo primario. ¼ de barra de escala de 20 mm. (c) genotipo AA. ABCC11 tinción es visible en las células mioepiteliales (-) y solo las células secretoras ()). Escala ¼ de barra de 20 mm. (d) genotipo AA. Control negativo sin anticuerpo primario. ¼ de barra de escala de 20 mm. De señal Azul: núcleos teñidos con hematoxilina de Mayer; L: luz de las glándulas sudoríparas, la señal de color marrón rojizo: ABCC11 tinción específica Las secciones se rehidrata con solución salina tamponada de Tris (TBS) para la 15 minutos a temperatura ambiente y la actividad de peroxidasa endógena fue bloqueada por el tratamiento con 3% H2O2 por 15 minutos. Además, secciones se incubaron con avidina D, seguida de la biotina de incubación de 15 minutos para inhibir la biotina endógena vinculante (Avidina / biotina Blockin Kit, Vector Laboratories, Burlingame, CA). Las secciones fueron incubadas con 10% de suero normal de burro (Jackson Europa Immunoresearch, Suffolk, Reino Unido), diluido en TBS de 20 minutos para evitar que la unión no específica de anticuerpos. Inmediatamente, secciones se incubaron con IgG policlonal de conejo primaria de anticuerpos contra los aminoácidos 929-1144 de ABCC11 humanos (Santa Cruz, Santa Cruz, CA), diluido a 1:100 en TBS, de 18 horas a las 4 1C en una cámara de humedad. Un burro biotinilado secundaria anticuerpos (Jackson Europa Immunoresearch, Suffolk, Reino Unido), diluido al 1:200 en TBS, se aplicó a las diapositivas y se incuba durante 45 minutos a temperatura ambiente. Amplificación de la señal, se logró una la avidina-biotina-peroxidasa de rábano picante método complejo (Vectastin ABC Kit, Vector Laboratories, Burlingame, CA), según a la instrucción de la fabricación. Visualización de la inmunorreactivas sitios se llevó a cabo utilizando 3-amino-9-etilcarbazol (AEC sustrato cromógeno, DakoCytomation, Glostrup, Dinamarca). Entre todas las aplicaciones, las secciones fueron lavadas por 15 minutos con TBS. Los cortes fueron contrastados con hematoxilina de Mayer (Sigma-Aldrich) durante 8 minutos, rehidrata, y coverslipped utilizando medio de montaje acuoso (CV-Ultra, Leica, Wetzlar, Alemania). Los controles negativos fueron llevadas a cabo por la omisión de las primarias anticuerpos. Cortes de tejidos congelados de cáncer de mama humano (BioChain,Hayward, CA) se utilizaron como controles positivos (datos no mostrados).
- Inmunolocalización ABCC11 de proteína en las glándulas sudoríparas de los genotipos de ABCC11 diferentes. (a) genotipo GG. Incluso tinción ABCC11 fue detectadas en las células mioepiteliales (-). Por otra parte, una señal fuerte ABCC11 fue encontrado solo en las células secretoras ()). ¼ de barra de escala de 20 mm. (b) el genotipo GG. Negativo control sin anticuerpo primario. ¼ de barra de escala de 20 mm. (c) genotipo AA. ABCC11 tinción es visible en las células mioepiteliales (-) y solo las células secretoras ()). Escala ¼ de barra de 20 mm. (d) genotipo AA. Control negativo sin anticuerpo primario. ¼ de barra de escala de 20 mm. De señal Azul: núcleos teñidos con hematoxilina de Mayer; L: luz de las glándulas sudoríparas, la señal de color marrón rojizo: ABCC11 tinción específica Las secciones se rehidrata con solución salina tamponada de Tris (TBS) para la 15 minutos a temperatura ambiente y la actividad de peroxidasa endógena fue bloqueada por el tratamiento con 3% H2O2 por 15 minutos. Además, secciones se incubaron con avidina D, seguida de la biotina de incubación de 15 minutos para inhibir la biotina endógena vinculante (Avidina / biotina Blockin Kit, Vector Laboratories, Burlingame, CA). Las secciones fueron incubadas con 10% de suero normal de burro (Jackson Europa Immunoresearch, Suffolk, Reino Unido), diluido en TBS de 20 minutos para evitar que la unión no específica de anticuerpos. Inmediatamente, secciones se incubaron con IgG policlonal de conejo primaria de anticuerpos contra los aminoácidos 929-1144 de ABCC11 humanos (Santa Cruz, Santa Cruz, CA), diluido a 1:100 en TBS, de 18 horas a las 4 1C en una cámara de humedad. Un burro biotinilado secundaria anticuerpos (Jackson Europa Immunoresearch, Suffolk, Reino Unido), diluido al 1:200 en TBS, se aplicó a las diapositivas y se incuba durante 45 minutos a temperatura ambiente. Amplificación de la señal, se logró una la avidina-biotina-peroxidasa de rábano picante método complejo (Vectastin ABC Kit, Vector Laboratories, Burlingame, CA), según a la instrucción de la fabricación. Visualización de la inmunorreactivas sitios se llevó a cabo utilizando 3-amino-9-etilcarbazol (AEC sustrato cromógeno, DakoCytomation, Glostrup, Dinamarca). Entre todas las aplicaciones, las secciones fueron lavadas por 15 minutos con TBS. Los cortes fueron contrastados con hematoxilina de Mayer (Sigma-Aldrich) durante 8 minutos, rehidrata, y coverslipped utilizando medio de montaje acuoso (CV-Ultra, Leica, Wetzlar, Alemania). Los controles negativos fueron llevadas a cabo por la omisión de las primarias anticuerpos. Cortes de tejidos congelados de cáncer de mama humano (BioChain,Hayward, CA) se utilizaron como controles positivos (datos no mostrados).
- Mediante el análisis de sudor axilar muestras de diferentes genotipos ABCC11, ofrecemos pruebas de que ABCC11 es directamente necesaria para la secreción de características de los componentes que contribuyen al olor axilar formación. Estos datos indican que es esencial para ABCC11 de la secreción de los aminoácidos conjugados 3M2H-Gln, HMHA-Gln, y Cys-Gly-(S) 3M3SH (Tabla 1), que son los precursores de los olores organismo clave, 3M2H, HMHA, y 3M3SH. Después de la liberación enzimática de sus precursores moléculas, todos los análisis de cadena ramificada olores se redujo significativamente en los panelistas del genotipo AA