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Biología
4° Medio
Biología molecular
del gen
Unidad 1: pp. 211 - 232
1
b.
3.4 nm
2 nm
0.34 nm
G
C
A
T
T
A
P
P
P
P
C
G
G
C
Pareo de bases
complementarias
azúcar Puentes de hidrógeno
Esqueleto de
azúcar fosfato
2
Resumen
 Material genético
 Transformación
 Estructura del DNA
 Watson y Crick
 Replicación del DNA
 Procariota versus Eucariota
 Errores de replicación
 Transcripción
 Traducción
 Estructura of Eucariota cromosoma
3
Material genético
Frederick Griffith investigó la virulencia de
Streptococcus pneumoniae
Griffith postuló la existencia de un factor de
transformación.
Investigaciones posteriores hechas por Avery
et al. descubrieron que el DNA es la sustancia
transformante.
DNA de células muertas fueron incorporadas
en el genoma de las células vivas
4
Experimento de Transformación,
realizado por Griffith
Las ratas fueron inyectadas con dos cepas
de neumococos: una encapsulada (S) y
una no encapsulada (R).
La Cepa S es virulenta (Las ratas mueren);
tienen una cápsula mucosa y forma colonias
brillantes.
La cepa R no es virulenta (Las ratas viven); no
tienen cápsula y forman colonias opacas.
5
Experimento de transformación de
Griffith
cápsula
Se les inyectó
cepas S vivas con
cápsula y causan
la muerte a las
ratas
a. b.
Se les inyectó
cepas R vivas sin
cápsula y las
ratas viven
c.
Se les inyectó
cepas S muertas
por calor y no
causan la muerte
a las ratas.
d.
Se les inyectó cepas S
muertas por calor más
cepas R vivas. Esto
causó la muerte a las
ratas.
Bacterias de la cepa S
vivas fueron retiradas
de las ratas.
¿Hipótesis que se
planteó Griffith?
Animación
 (Todo lo explicado en esta excelente animación,
fue traducido gentilmente por su profesor. La
traducción del texto está en el sector de Notas
del orador)
http://dnaftb.org/17/concept/index.html
 Y, obviamente, responderán 3 problemas que
están en la última sección de esta herramienta
de aprendizaje, relacionada con el experimento
de Avery et al.
6
7
Estructura del DNA
DNA contiene:
dos Nucleótidos con bases púricas
 Adenina (A)
 Guanina (G)
dos Nucleótidos con bases pirimídicas
 Timina (T)
 Citosina (C)
Del cromosoma al ADN
8
http://www.biologieenflash.net/animation.php?ref=bio-0023-2
9
Regla de Chargaff
 La cantidad de A, T, G, y C en el DNA:
 Idéntica en gemelos Idénticos
 Varía entre individuos de una especie
 Varía más de especie a especie
 En cada especie, hay igual cantidad de:
 A y T
 G y C
 Todo esto sugiere que el DNA usa bases
complementarias que se parean para almacenar
información genética
 Los cromosomas humanos contienen, en
promedio, 140 millones de pares de bases
 El número de posibles secuencias de
Nucleótidos es de 4.140.000,000
10
Composición del Nucleótido del DNA
O
N
N
CH
CH
C
C
NH2
Citosina
(C)
3
C C2
C1
OHO P O
O
H
HH
HH
OH
CH3
O
HN
N
C
CH
C
C
OHO P O
O
H
HH
HH
OH
HN
N
N
C
CH
O
C
C
C
N
H2N
C2
C2
C1
C1
OHO P O
O
Guanina
(G)
fosfato
H
HH
HH
OH
N
N
N
HC
CH
NH2
C
C
C
N
4
3
C2
C1
5
O
O
O
O
O
O
H
HH
HH
OH
c. Datos de Chargaf
Composición del DNA en varias especies (%)
especie
Homo sapiens (humano)
Drosophila melanogaster (mosca )
Zea mays (Maíz)
Neurospora crassa (Hongo)
Escherichia coli (bacteria)
Bacillus subtilis (bacterium)
31.0
27.3
25.6
23.0
24.6
28.4
31.5
27.6
25.3
23.3
24.3
29.0
19.1
22.5
24.5
27.1
25.5
21.0
18.4
22.5
24.6
26.6
25.6
21.6
A T G C
a. Nucleótidos Purina b. Nucleótidos Pirimidina
Base que contiene
Nitrógeno.
azúcar= desoxiribosa
Timina
(T)
Adenina
(A)
HO P O CH2
5
CH2
5
CH2
5
CH2
C
4
C
4
C
4
C
C
3
C
3
C
Animación
11
Please note that due to differing
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12
Modelo de Watson y Crick
Watson y Crick, 1953
Construyeron un modelo del DNA
El modelo de Doble hélice es similar a una
escalera de caracol
 El esqueleto de azúcar-fosfato forma los laterales
 Bases unidas por puentes de H forman los
peldaños
Recibieron el Premio Nobel en 1962
13
Modelo Del DNA de Watson/Crick
P
P
P
P
c.
b.
Bases
complementarias
Esqueleto de
Azúcar-fosfato
3.4 nm
2 nm
0.34 nm
P
P
S
S
4
5
3
1
1
23
2
3
5
4
5
CG
G
C
C
G
T
T
A
A
C
G
a.
d.d.
5
Azúcar
Puentes de H
14
Difracción de rayos X del DNA
 Rosalind Franklin estudió la estructura del DNA
usando rayos X.
 Descubrió que si se hacía una solución viscosa y
concentrada de DNA, la molécula podía ser
separada en fibras.
 Bajo condiciones correctas, las fibras pueden
producir patrones de difracción bajo rayos X.
 Ella produjo fotografías de difracción de rayos X.
 Esto aportó evidenca que el DNA tenía los siguientes
caracteres:
 DNA es una hélice.
 Alguna porción de la hélice está repetida.
15
Difracción de rayos X del DNA
© Photo Researchers, Inc.; c: © Science Source/Photo Researchers, Inc.
Haz de rayos X
b.
c.
Rosalind Franklin
Patrón de difracción
DNA
cristalino
Difracción de
Rayos X
a.
http://www2.uacj.mx/IIT/CULCYT/Enero-Febrero2007/6ARTCULOCAMACHO.PDF Si desea saber más sobre R. Franklin, lea este
apasionante artículo: “Quien fue Rosalind Franklin”
Flujo Info genética desde el ADN a
las proteínas: Pulso y caza
16
Realice la actividad de la página 14 del libro guía
17
Flujo de la Información Genética y el
Dogma Central de la Biología molecular
hebra no molde, sentido o codificante
3'5'
A G G G A C C C C
T C G C T G G G G
5'3'
hebra molde o no codificanteTranscripción
En el núcleo
3'5'
mRN
DNA
A G G G A C C C C
codón 1 codón 2 codón 3
polipéptido
Traducción
En el ribosoma
N N NC C C C C C
R1 R2 R3
Serina Aspartato Prolina
O O O
18
Replicación Del DNA
Replicación del DNA es el proceso de
copiado de una molécula de DNA.
La replicación es semiconservativa, con
cada hebra de la doble hélice original
(molécula parental) sirviendo como un
molde (modelo) para una hebra nueva en
una molécula hija.
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Animación
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22
Replicación: Eucariota
Replicación del DNA comienza en numerosos
puntos en toda la longitud del cromosoma
DNA se desenrrolla y se abre en dos hebras
Cada hebra vieja del DNA sirve como un
molde para una hebra nueva
Las bases complementarias que se parean
forman una hebra nueva en cada hebra vieja
Requiere de la enzima DNA polimerasa
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25
Replicación: Eucariota
Las burbujas de replicación se expanden bi-
direccionalmente hasta que se encuentran
Los nucleótidos complementarios se unen
para formar hebras nuevas. Cada molécula
de DNA hija contiene una hebra vieja y una
hebra nueva.
La replicación es semiconservativa:
 una hebra original es conservada en cada
molécula hija. Así, cada doble hélice hija tiene una
hebra parental y una hebra nueva.
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27
Replicación semiconservativa del DNA
región del DNA parental
(doble hélice)
G
G
G
T
A
A
C
C
3'5'
AT
C G
A T
A
G
GC
C G
A
región de replicación:
nuevos Nucleótidos
se pairean con los
de la hebra parental
región
Replicación
complementada
DNA hijo doble hélice
Hebra vieja Hebra nueva
DNA hijo doble hélice
Hebra viejaHebra nueva
C
C
A
A
T
T
G
G
T
A
T
A
C
G
A
T
A
T
A
C
GA
TA
T
A
T
A
C
G
C
G
A
G
T
A
C
G
C
G
A
Animación
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30
Aspectos de la Replicación del DNA
GC
AT
T
GC
G C
AP
P
P
P
P
P
P
P
P
P
P
P se une aquíOH
CH2
C
C C
C
H H
H
H H
OH
OHO
Base Nitrogenada se une aquí
5′ end
Extr.3′ Extr.5′
hebra molde
Dirección de replicación
hebra nueva
Molécula desoxirribosa
RNA primer
3′
3′
5′
3′
5′
5′
Hélice de DNA perental
Helicasa en la horquilla de replicación
Hebra adelantada
nueva
hebra molde
hebra molde
Hebra retrasada
DNA polimerasa
DNA polimerasaDNA ligasa
Fragmento de Okazaki
Horquilla de replicación introducescomplicaciones
5
7
6
4
3
2
1
DNA polimerasa
Se une a un nuevo
Nucleótido en el
Carbono 3’ del
Nucleótido previo.
5′
4′
3′ 2′
1′
Ext.3′
3′
31
Replicación: Procariota
Replicación en Procariota
Bacteria (la mayoría) y Archaea tienen un solo
cromosoma circular
La replicación se hace alrededor de la molécula
del DNA circular en ambas direcciones
Produce dos círculos Idénticos
La célula se divide entre los círculos, en app. 20
minutos (E. coli)
32
Replicación: Procariota vs. Eucariota
origen
Replicación
está
ocurriendo
en dos
direcciones
replicación está
completa
horquilla de replicación Burbuja de replicación
a. replicación en procariotas
Hebra parental
hebra hija
nuevo DNA
duplex
b. Replicación en eucariotas
33
Errores de replicación
 Las variaciones genéticas son la materia prima
para el cambio evolutivo
 Mutación:
 Un cambio permanente (pero no planificado) en la
secuencia de las bases pareadas
 Algunos se deben a errores en la Replicación del
DNA
 Otros, debido al daño del DNA
 El DNA tiene enzimas que generalmente están
disponibles para revertir la mayoría de los errores
34
Función de los Genes
Genes codifican para Enzimas
Beadle y Tatum:
 Experimentos en el hongo Neurospora crassa
 Propusieron que cada gen tiene información para la
síntesis de una enzima
 Hipótesis un-gen-una-enzima
Genes codifican para un Polipéptido
Gen es un segmento de DNA con información
la secuencia aminoacídica de un polipéptido
Sugiere que las mutaciones genéticas causan
cambios en la Estructura primaria de una
proteína
35
Síntesis de proteínas: desde el DNA al
RNA a la Proteína
El mecanismo de la expresión del gen
 El DNA en los genes poseen información, pero
la información no es Estructura ni Función
 La información genética es expresada en
Estructura y Función a través de la síntesis de
proteína
La expresión de la información genética en
estructura y función:
 El DNA en el gen controla la secuencia de los
Nucleótidos en una molécula de RNA
 El RNA controla la Estructura primaria de una
proteína
Animación
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37
Tipos de RNA
RNA: polímero de Nucleótidos de RNA
Los Nucleótidos de RNA son de 4 tipos:
Uracilo, Adenina, Citosina, y Guanina
Uracilo (U) reemplaza a Timina (T) del DNA
tipos de RNA
 Mensajero (mRNA) – Copia y lleva el mensaje
genético del DNA en el núcleo, a los ribosomas en el
citoplasma
 Ribosomal (rRNA) – Forma parte de los ribosomas,
los cuales leen el mensaje en el mRNA
 Transferencia (tRNA) - Transfiere amino ácidos
apropiados al ribosoma cuando es “instruido”
38
Estructura del RNA
G
U
A
C
S
S
S
S
P
P
P
P
ribosa
G
U La base es
Uracilo en vez
de Timina
A
C
un Nucleótido
39
Estructura del DNA vs. RNA
Su trabajo ahora es hacer un cuadro comparativo entre la estructura y función
del ADN y del ARN. Tiene 10 minutos para esto
40
El código genético
 Propiedades del código genético:
 Universal
 con pocas excepciones, todas las especies usan el código
genético de la misma manera (casi universal, entonces)
 Codifica 20 aminoácidos con 64 tripletes
 Degenerado (redundante)
 hay 64 codones disponibles para 20 aminoácidos
 La mayoría de los aminoácidos están codificados por dos o
más codones
 No ambiguo (Los codones son exclusivos)
 Ninguno de los codones codifica para dos o más aminoácidos
 Cada codón especifica sólo uno de los 20 aminoácidos
 Contiene señales start (inicio) y stop (parada)
 Codones de Puntuación
 Como las letras mayúsculas que usamos en inicio de una
frase y un punto, que indica el momento del término.
41
El código genético
 La unidad de un código son los codones, cada uno de
los cuales tiene un arreglo simbólico único.
 Cada uno de los 20 aminoácidos presentes en las
proteínas es codificado únicamente por uno o más
codones
 Los símbolos usados por el código genético son las bases
nitrogenadas del mRNA
 Funcionan como “letras” del alfabeto genético
 El alfabeto genético tiene solo 4 “letras” (U, A, C, G)
 Todos los codones en el código genético tienen 3 bases
(símbolos) de largo
 Funcionan como “palabras” de la información genética
 Permutaciones:
 hay 64 posibles ordenamientos de los 4 símbolos
combinándolos de a 3
 A menudo los libros le denominan tripletes a los codones
 El lenguage genético sólo tiene 64 “palabras”
42
Codones del RNA mensajero
Segunda Base Tercera
Base
Primera
Base
U C GA
U
C
A
G
UUU
fenilalanina
UCU
serina
UAU
tirosina
UGU
cisteína
UUC
fenilalanina
UCC
serina
UAC
tirosina
UGU
cisteína
UCA
serina
UUA
leucina
UCG
serina
UUG
leucina
UGG
triptófano
UGA
stop
UAA
stop
UAG
stop
U
C
A
G
CUU
leucina
CUC
leucina
CUA
leucina
CUG
leucina
CCU
prolina
CCC
prolina
CCA
prolina
CCG
prolina
CAC
histidina
CAA
glutamina
CAG
glutamina
CAU
histidina
CGA
arginina
CGG
arginina
CGU
arginina
CGC
arginina
U
C
A
G
AUG (start)
metionina
AUU
isoleucina
AUC
isoleucina
AUA
isoleucina
ACU
treonina
ACC
treonina
ACA
treonina
ACG
treonina
AAU
asparragina
AAC
asparragina
AAA
lisina
AAG
lisina
AGU
serina
AGC
serina
AGA
arginina
AGG
arginina
U
C
A
G
GUU
valina
GUC
valina
GUA
valina
GUG
valina
GCU
alanina
GCC
alanina
GCA
alanina
GCG
alanina
GAU
aspartato
GAC
aspartato
GAA
glutamato
GAG
glutamato
GGU
glicina
GGC
glicina
GGA
glicina
GGG
glicina
U
C
A
G
43
Pasos en la Expresión: Transcripción
Transcripción
 Los Genes se abren y exponen las bases no
pareadas
 Son como moldes para la formación del mRNA
 Los Nucleótidos sueltos del RNA se unen a las
bases expuestas del DNA usando la regla C=G
y A=U
 Cuando un gen completo es transcrito a mRNA,
éste es un pre-mRNA transcrito del gen
 La secuencia de bases del pre-mRNA se
complementa con la secuencia del DNA
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45
Transcripción del mRNA
 Un solo cromosoma consta de una muy larga molécula que codifica
a cientos o miles de genes
 La información genética en un gen describe la secuencia de amino
ácidos de una proteína
 La información está en la secuencia de bases de un lado (la hebra
“sentido”) de una molécula de DNA
 El gen es el equivalente funcional de una “frase”
 El segmento del DNA correspondiente a un gen se abre para
exponer las bases de la hebra sentido
 La información genética en el gen es transcrita (reescrita) en una
molécula de mRNA
 Las bases expuestas en el DNA determina la secuencia mediante la cual
serán conectadas las bases del RNA
 La RNA polimerasa conecta los Nucleótidos sueltos de RNA
 El transcrito completado contiene la información del gen, pero en una
imagen especular, es decir, una forma complementaria
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47
Transcripción
Hebra no
molde
Hebra molde
5'
C
C G
T A
A T
G
C
A
A
C
G
T
C
T
C
U
G
G
A
C
C
A
C
A
T
G
G
C
RNA
polimerasa
Hebra molde
del DNA
mRNA
transcrito
C
G
C
A T
C G
T A
tRNA procesándose
3'
3'
5'
Animación
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50
RNA polimerasa
a. 200m
b.
Espliceosoma
DNA
RNA
polimerasa
RNA
transcrito
51
Procesando al RNA mensajero
El Pre-mRNA, se modifica antes de salir del
núcleo de Eucariotas.
 Modificaciones en los extremos del transcrito
primario:
 Capucha de Guanina modificada en el extremo 5′
 La cap es un nucleótido de Guanina (G) modificado
 Ayuda al ribosoma a enlazarse cuando comienza la
traducción
 Cola Poli-A de 150+ adeninas en el extremo 3′
 Facilita el transporte del mRNA fuera del núcleo
 Inhibe la degradación del mRNA por enzimas
hidrolíticas.
52
Procesando al RNA mensajero
 El Pre-mRNA, posee exones e intrones.
 Los exones serán expresados,
 Los intrones, están entre los exones.
 Permite a una célula tomar y elegir cuáles exones irán en un
mRNA particular
 RNA splicing (corte):
 El transcrito primario consta de:
 Algunos segmentos que no serán expresados (intrones)
 Los segmentos que serán expresados (exones)
 Lo ejecuta el “complejo espliceosoma” en el nucleoplasma
 intrones son eliminados
 Los exones remanentes son vueltos a unir
 Resultado: un transcrito de mRNA maduro
53
RNA Splicing
En procariotas, los intrones son removidos
por “auto-splicing”—esto es, el intrón por si
mismo tiene la capacidad enzimática de
cortarse y eliminarse del pre-mRNA
Animación
54
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55
Procesando al RNA mensajero
exon
intron intron
exon exon
DNA
Transcripción
exon
intron intron
exon exon
5' 3'
pre-mRNA
exon exon exon
intron introncap Cola poli-A
5' 3'
exon exon exon
espliceosoma
cap Cola poli-A
Splicing del
pre-mRNA
intron RNA
5' 3'
cap Cola poli-A
mRNA
Poro nuclear en la
membrana nuclear
núcleo
citoplasma
5' 3'
Animación
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57
Funciones de los intrones
 A medida que los organismos aumentan su
complejidad:
 El N° de proteína codificadas por los genes no siguen
el ritmo
 Pero la propoción del genoma que tiene intrones
incrementa
 Humanos:
 genoma tiene sólo app. 25.000 genes codificantes
 Más del 95% de estos genes en el DNA son intrones
 Posibles funciones de los intrones:
 Permite empalmes alternativos
 Los exones pueden formar varias combinaciones, es
 Permitiría diferentes mRNAs resultantes de un segmento de
DNA
 Los intrones podrían regular la expresión del gen
58
Pasos en la Expresión del gen:
traducción
 La molécula de tRNA tiene dos sitios de enlace
 Uno asociado con el mRNA transcrito
 El otro asociado con un aminoácido específico
 Cada uno de los 20 aminoácidos de las proteínas se asocia
con una o más de las 64 especies de tRNA
 Traducción
 Un mRNA transcrito migra al RER
 Se asocia con el rRNA de un ribosoma
 El ribosoma “lee” la información en el transcrito
 El Ribosoma dirige a varias especies tRNA a que traigan los
amino ácidos específicos
 El tRNA especifico es determinado por el código siendo
traducido en el mRNA transcrito
59
tRNA
Hay 64 tipos diferentes de moléculas de tRNA
Todos muy similares excepto que
 un extremo lleva un triplete específico (de 64
posibles) llamado anticodón
 Al otro extremo se une un aminoácido específico
 La tRNA sintetasa une los aminoácidos correctos
a la molécula de tRNA
Todas las moléculas de tRNA con un
anticodón específico siempre se unirá con el
mismo aminoácido
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61
Estructura del tRNA
amino
ácido
leucina
3
5
Puente de
Hidrogeno
anticodón
mRNA
5'
codón
3'
b.
Extremo del
anticodón
Extremo del
aminoácido
62
Ribosomas
 RNA Ribosomal (rRNA):
 Producido de un molde de DNA en el nucleolo
 Combinado con proteínas en subunidades grande y
pequeña
 Un ribosomaa completo tiene 3 sitios de unión
para facilitar el pareo entre el tRNA y el mRNA
 El sitio E (por exit)
 El sitio P (por péptido) y
 El sitio A (por aminoácido)
63
Ribosoma: Estructura y Función
Subunidad grande
subunidad pequeña
a. Estructura de un ribosoma
Sitio de unión
Del tRNA
tRNA
saliendo
3
5
mRNA
b.Sitios de unión del ribosoma
polipéptido
tRNA
entrando
mRNA
c. Función de los ribosomas d. Poliribosoma
64
Pasos en la traducción: Iniciación
 Los Componentes necesarios para la iniciación
son:
 Pequeña subunidad ribosomal
 mRNA transcrito
 tRNA iniciador, y
 Subunidad grande ribosomal
 Factores de Iniciación (proteínas especiales que
colaboran en el proceso. Serán vistas más adelante)
 tRNA Iniciador:
 Siempre tiene el anticodón UAC
 Siempre lleva el aminoácido metionina
 Capaz de unirse al sitio P
65
Pasos en la traducción: Iniciación
Unidad ribosomal pequeña se une al
mRNA transcrito
El comienzo del transcrito siempre tiene el
codón START (AUG)
tRNA Iniciador (UAC) se une al sitio P
La subunidad grande ribosomal se une a la
subunidad pequeña
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67
Pasos en la traducción: Iniciación
Una subunidad pequeña ribosomal
Se une al mRNA; un tRNA iniciador
se parea con el mRNA en el codón
start AUG. La subunidad ribosomal grande
Completa el ribosoma. El tRNA
Iniciador ocupa el sitio P.
Elsitio A está listo para el
próximo tRNA.
Initiation
Met
aminoácido metionina
tRNA iniciador
U A CA U G
mRNA
subunidad pequeña
ribosomal
3'
5'
P sitio A sitioE sitio
Met
subunidad grande
ribosomal
U A C
A U G
codón de inicio5' 3'
68
Pasos en la traducción: Elongación
“Elongación” se refiere al crecimiento de l
tamaño del polipéptido
Moléculas de tRNA llevan su aminoácidos
al ribosoma
Ribosoma lee un codón en el mRNA
 Permite que solo un tipo de tRNA lleve su a’a’
 Debe tener el anticodón complementario para que
el codón del mRNA se lea
 Une el ribosoma a su sitio A
La metionina del iniciador es conectada al
aminoácido del 2do
tRNA por un enlace
peptídico
69
Pasos en la traducción: Elongación
 El segundo tRNA se mueve al sitio P
(translocación)
 El iniciador se mueve al sitio E y sale.
 El Ribosoma lee el próximo codón en el mRNA
 Permite que solo un tipo de tRNA lleve su aminoácido
 Debe tener el anticodón complementario al codón del mRNA
que está siendo leído
 Se une al ribosoma en el sitio A
 El Dipéptido en el 2do
aminoácido es conectado al
aminoácido del 3er
tRNA por un enlace peptídico
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71
Pasos en la traducción: Elongación
Un tRNA–aminoácido
Se acerca al ribosoma
y se une al sitio A.
Dos tRNAs pueden estar
en el ribosoma al mismo
tiempo; los anticodones
se parean a los codones.
Formación de enlace
peptídico que une el
Aminoácido a la nueva
cadena en formación.
El ribosoma se mueve hacia
adelante; el tRNA “vacío” sale del
sitio E ; el próximo complejo
aminoácido–tRNA esta llegando
al ribosoma.
1 2 3 4
Elongación
Enlace
peptídico
Met
Ala
Trp
Ser
Val
U
A
C A
UG G A C
3
3
C G
anticodón
tRNA
asp
U
Met
Ala
Trp
Ser
Val
U
A
C A
UG G A C
C U G
Asp
5
U
A
C A
UG G A C
C U G
Met
Val
Asp
Ala
Trp
Ser
Enlace
peptídico
5 3
U
C
A
G A C
C U G
AUG
U
G G
A C C
Met
Val
Asp
Ala
Trp
Ser Thr
5 3
72
Pasos en la traducción: Terminación
 El tRNA se mueve al sitio P
 El tRNA se mueve al sitio E y sale
 El ribosoma lee el codón STOP al final del
mRNA
 UAA, UAG, or UGA
 No codifican para un aminoácido
 El polipéptido es liberado del último tRNA por el
factor liberador
 El ribosoma libera al mRNA y se disocia en
subunidades
 mRNA es leído por otro ribosoma
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74
Pasos en la traducción: Terminación
Terminación
El factor liberador hidrolisa el enlace
entre el último tRNA en el sitio P y
el polipéptido, liberándolo. Las
Subunidades ribosomales se disocian.
3
5
A
G A
U G A
Al ribosoma llega un codón
stop en el mRNA. Se une al
sitio un Factor liberador.
U
A
U
A U G A
Codón STOP5' 3'
Asp
Ala
Trp
Val
Glu
Factor liberador
Ala
Trp
Val
Asp
Glu
U
C U
Animación
75
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76
Resumen de la expresión del gen
(Eucariotas)
Transcripción
1. El DNA en el núcleo sirve
como un molde para mRNA.
2. mRNA es procesado
antes de bandonar el núcleo.
mRNA
pre-mRNA
DNA
intrones
3. El mRNA se mueve
al citoplasma y
llega a asociarse
con los ribosomas.
traducción
mRNA
Subunidades ribosomales
Grande y pequeña
5
3'
Poro nuclear
4. Los tRNAs con
anticodones
lleve aminoácidos
al mRNA.
5
péptido
codón
ribosoma
3U
A
A
U
C
G
5 C C
GG
G
C
G
C
G
C
CCC
G
U
A
U
A
U
A
U
UA A
6. Durante la elongación del
polipéptido en síntesis, tiene lugar
un aminoácido al mismo tiempo. 7. El ribosoma unido al
polipéptido en el RER
entra al lumen, donde es doblado
y modificado.
8. Durante la terminación, un
ribosoma alcanza un codón
stop; el mRNA y las
subunidades ribosomales se
desmantelan..
5. Durante la iniciación, comienza el
pareo de bases complementarias
anticodón-codón a medida que las
subundades ribosomales se juntan
en un codón stop.
amino
ácido
anticodón
tRNA
C
U A
3'
Animación
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78
Estructura del cromosoma Eucariota
Contiene una sola molécula linear de DNA,
y está compuesta por más de un 50% de
proteína.
Algunas de estas proteínas están
relaciondas con la síntesis de DNA y RNA,
Histonas, juegan un rol estructural
 Cinco tipos de tipos de moléculas histonas
Responsible por empacar al DNA
 El DNA está enrollado alrededor de un núcleo de 8
moléculas de histona (llamado nucleosoma)
79
Estructura del cromosoma Eucariota
Copyright © The McGraw-Hill Companies, Inc. Permission required for reproduction or display.
a. Nucleosoma)
b. Fibra de 30-nm
c. Dominio de bucle radial
d. Heterocromatina
e. Cromosoma metafásico
1. Empaquetamiento del DNA
alrededor de proteínas histonas
4. Compactación estrecha de los bucles
Radiales para formar heterochromatin.
3. Enrollado suelto en bucles radiales
2. Formación de una estructura
tridimensional en Zig Zag por la histona
H1 y otras proteínas.
5. Cromosoma Metafásico se forma
con ayuda de una proteína
andamio.
2 nm
1 nm
300 nm
1,400 nm
700 nm
30 nm
DNA
doble hélice
histonas
histona H1
nucleosoma
eucromatina
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81
Resumen
 Material genético
 Transformación
 Estructura del DNA
 Watson y Crick
 Replicación del DNA
 Procariota versus Eucariota
 Errores de replicación
 Transcripción
 Traducción
 Estructura of Eucariota cromosoma
82
Transformación de Organismos en
la actualidad
 Resultan los llamados Organismos
genéticamente modificados (OGM)
 Herramienta importante en la biotecnología actual
 productos comerciales que son cada vez más usados
 Proteína fluorescente verde (GFP) usada como un
marcador
 Un gen de medusa codifica para GFP
 El gen es aislado y transferido a una bacteria o al embrión de
una planta, cerdo o ratón.
 Cuando este gen es transferido a otro organismo, este brilla
en la oscuridad
Animación (omítala, no la estudie)
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84
Transformación de organismos
A normal canola plant (left) y a transgenic canola
plant expressing GFP (right) under a fluorescent light.
Copyright © The McGraw-Hill Companies, Inc. Permission required for reproduction or display.
(Bacteria): © Martin Shields/Photo Researchers, Inc.; (Jellyfish): © R. Jackman/OSF/Animals Animals/Earth Scenes; (Pigs): Courtesy Norrie Russell, The Roslin Institute;
(Mouse): © Eye of Science/Photo Researchers, Inc.; (Plant): © Dr. Neal Stewart
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SylviaS.Mader,
traducidoymodificado
porG.Toledo
Copyright © The McGraw Hill Companies Inc. Permission required for reproduction or display
PowerPoint® Lecture Slides are prepared by Dr. Isaac Barjis, Biología Instructor
Biología
4° Medio
Biología molecular
del gen
Unidad 1: pp. 211 - 232
87
Power point traducido y modificado por gustavo toledo C. para mis alumnos del 4°medio, San Fdo. College
b.
3.4 nm
2 nm
0.34 nm
G
C
A
T
T
A
P
P
P
P
C
G
G
C
Bases complementarias
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ribosa puentes de H
Columna de ribosa-fosfato

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Biología molecular del gen

  • 1. SylviaS.Mader, traducidoymodificado porG.Toledo Copyright © The McGraw Hill Companies Inc. Permission required for reproduction or display PowerPoint® Lecture Slides are prepared by Dr. Isaac Barjis, Biología Instructor Biología 4° Medio Biología molecular del gen Unidad 1: pp. 211 - 232 1 b. 3.4 nm 2 nm 0.34 nm G C A T T A P P P P C G G C Pareo de bases complementarias azúcar Puentes de hidrógeno Esqueleto de azúcar fosfato
  • 2. 2 Resumen  Material genético  Transformación  Estructura del DNA  Watson y Crick  Replicación del DNA  Procariota versus Eucariota  Errores de replicación  Transcripción  Traducción  Estructura of Eucariota cromosoma
  • 3. 3 Material genético Frederick Griffith investigó la virulencia de Streptococcus pneumoniae Griffith postuló la existencia de un factor de transformación. Investigaciones posteriores hechas por Avery et al. descubrieron que el DNA es la sustancia transformante. DNA de células muertas fueron incorporadas en el genoma de las células vivas
  • 4. 4 Experimento de Transformación, realizado por Griffith Las ratas fueron inyectadas con dos cepas de neumococos: una encapsulada (S) y una no encapsulada (R). La Cepa S es virulenta (Las ratas mueren); tienen una cápsula mucosa y forma colonias brillantes. La cepa R no es virulenta (Las ratas viven); no tienen cápsula y forman colonias opacas.
  • 5. 5 Experimento de transformación de Griffith cápsula Se les inyectó cepas S vivas con cápsula y causan la muerte a las ratas a. b. Se les inyectó cepas R vivas sin cápsula y las ratas viven c. Se les inyectó cepas S muertas por calor y no causan la muerte a las ratas. d. Se les inyectó cepas S muertas por calor más cepas R vivas. Esto causó la muerte a las ratas. Bacterias de la cepa S vivas fueron retiradas de las ratas. ¿Hipótesis que se planteó Griffith?
  • 6. Animación  (Todo lo explicado en esta excelente animación, fue traducido gentilmente por su profesor. La traducción del texto está en el sector de Notas del orador) http://dnaftb.org/17/concept/index.html  Y, obviamente, responderán 3 problemas que están en la última sección de esta herramienta de aprendizaje, relacionada con el experimento de Avery et al. 6
  • 7. 7 Estructura del DNA DNA contiene: dos Nucleótidos con bases púricas  Adenina (A)  Guanina (G) dos Nucleótidos con bases pirimídicas  Timina (T)  Citosina (C)
  • 8. Del cromosoma al ADN 8 http://www.biologieenflash.net/animation.php?ref=bio-0023-2
  • 9. 9 Regla de Chargaff  La cantidad de A, T, G, y C en el DNA:  Idéntica en gemelos Idénticos  Varía entre individuos de una especie  Varía más de especie a especie  En cada especie, hay igual cantidad de:  A y T  G y C  Todo esto sugiere que el DNA usa bases complementarias que se parean para almacenar información genética  Los cromosomas humanos contienen, en promedio, 140 millones de pares de bases  El número de posibles secuencias de Nucleótidos es de 4.140.000,000
  • 10. 10 Composición del Nucleótido del DNA O N N CH CH C C NH2 Citosina (C) 3 C C2 C1 OHO P O O H HH HH OH CH3 O HN N C CH C C OHO P O O H HH HH OH HN N N C CH O C C C N H2N C2 C2 C1 C1 OHO P O O Guanina (G) fosfato H HH HH OH N N N HC CH NH2 C C C N 4 3 C2 C1 5 O O O O O O H HH HH OH c. Datos de Chargaf Composición del DNA en varias especies (%) especie Homo sapiens (humano) Drosophila melanogaster (mosca ) Zea mays (Maíz) Neurospora crassa (Hongo) Escherichia coli (bacteria) Bacillus subtilis (bacterium) 31.0 27.3 25.6 23.0 24.6 28.4 31.5 27.6 25.3 23.3 24.3 29.0 19.1 22.5 24.5 27.1 25.5 21.0 18.4 22.5 24.6 26.6 25.6 21.6 A T G C a. Nucleótidos Purina b. Nucleótidos Pirimidina Base que contiene Nitrógeno. azúcar= desoxiribosa Timina (T) Adenina (A) HO P O CH2 5 CH2 5 CH2 5 CH2 C 4 C 4 C 4 C C 3 C 3 C
  • 11. Animación 11 Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 12. 12 Modelo de Watson y Crick Watson y Crick, 1953 Construyeron un modelo del DNA El modelo de Doble hélice es similar a una escalera de caracol  El esqueleto de azúcar-fosfato forma los laterales  Bases unidas por puentes de H forman los peldaños Recibieron el Premio Nobel en 1962
  • 13. 13 Modelo Del DNA de Watson/Crick P P P P c. b. Bases complementarias Esqueleto de Azúcar-fosfato 3.4 nm 2 nm 0.34 nm P P S S 4 5 3 1 1 23 2 3 5 4 5 CG G C C G T T A A C G a. d.d. 5 Azúcar Puentes de H
  • 14. 14 Difracción de rayos X del DNA  Rosalind Franklin estudió la estructura del DNA usando rayos X.  Descubrió que si se hacía una solución viscosa y concentrada de DNA, la molécula podía ser separada en fibras.  Bajo condiciones correctas, las fibras pueden producir patrones de difracción bajo rayos X.  Ella produjo fotografías de difracción de rayos X.  Esto aportó evidenca que el DNA tenía los siguientes caracteres:  DNA es una hélice.  Alguna porción de la hélice está repetida.
  • 15. 15 Difracción de rayos X del DNA © Photo Researchers, Inc.; c: © Science Source/Photo Researchers, Inc. Haz de rayos X b. c. Rosalind Franklin Patrón de difracción DNA cristalino Difracción de Rayos X a. http://www2.uacj.mx/IIT/CULCYT/Enero-Febrero2007/6ARTCULOCAMACHO.PDF Si desea saber más sobre R. Franklin, lea este apasionante artículo: “Quien fue Rosalind Franklin”
  • 16. Flujo Info genética desde el ADN a las proteínas: Pulso y caza 16 Realice la actividad de la página 14 del libro guía
  • 17. 17 Flujo de la Información Genética y el Dogma Central de la Biología molecular hebra no molde, sentido o codificante 3'5' A G G G A C C C C T C G C T G G G G 5'3' hebra molde o no codificanteTranscripción En el núcleo 3'5' mRN DNA A G G G A C C C C codón 1 codón 2 codón 3 polipéptido Traducción En el ribosoma N N NC C C C C C R1 R2 R3 Serina Aspartato Prolina O O O
  • 18. 18 Replicación Del DNA Replicación del DNA es el proceso de copiado de una molécula de DNA. La replicación es semiconservativa, con cada hebra de la doble hélice original (molécula parental) sirviendo como un molde (modelo) para una hebra nueva en una molécula hija.
  • 19. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 20. Animación 20 Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 21. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 22. 22 Replicación: Eucariota Replicación del DNA comienza en numerosos puntos en toda la longitud del cromosoma DNA se desenrrolla y se abre en dos hebras Cada hebra vieja del DNA sirve como un molde para una hebra nueva Las bases complementarias que se parean forman una hebra nueva en cada hebra vieja Requiere de la enzima DNA polimerasa
  • 23. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 24. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 25. 25 Replicación: Eucariota Las burbujas de replicación se expanden bi- direccionalmente hasta que se encuentran Los nucleótidos complementarios se unen para formar hebras nuevas. Cada molécula de DNA hija contiene una hebra vieja y una hebra nueva. La replicación es semiconservativa:  una hebra original es conservada en cada molécula hija. Así, cada doble hélice hija tiene una hebra parental y una hebra nueva.
  • 26. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 27. 27 Replicación semiconservativa del DNA región del DNA parental (doble hélice) G G G T A A C C 3'5' AT C G A T A G GC C G A región de replicación: nuevos Nucleótidos se pairean con los de la hebra parental región Replicación complementada DNA hijo doble hélice Hebra vieja Hebra nueva DNA hijo doble hélice Hebra viejaHebra nueva C C A A T T G G T A T A C G A T A T A C GA TA T A T A C G C G A G T A C G C G A
  • 28. Animación 28 Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 29. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 30. 30 Aspectos de la Replicación del DNA GC AT T GC G C AP P P P P P P P P P P P se une aquíOH CH2 C C C C H H H H H OH OHO Base Nitrogenada se une aquí 5′ end Extr.3′ Extr.5′ hebra molde Dirección de replicación hebra nueva Molécula desoxirribosa RNA primer 3′ 3′ 5′ 3′ 5′ 5′ Hélice de DNA perental Helicasa en la horquilla de replicación Hebra adelantada nueva hebra molde hebra molde Hebra retrasada DNA polimerasa DNA polimerasaDNA ligasa Fragmento de Okazaki Horquilla de replicación introducescomplicaciones 5 7 6 4 3 2 1 DNA polimerasa Se une a un nuevo Nucleótido en el Carbono 3’ del Nucleótido previo. 5′ 4′ 3′ 2′ 1′ Ext.3′ 3′
  • 31. 31 Replicación: Procariota Replicación en Procariota Bacteria (la mayoría) y Archaea tienen un solo cromosoma circular La replicación se hace alrededor de la molécula del DNA circular en ambas direcciones Produce dos círculos Idénticos La célula se divide entre los círculos, en app. 20 minutos (E. coli)
  • 32. 32 Replicación: Procariota vs. Eucariota origen Replicación está ocurriendo en dos direcciones replicación está completa horquilla de replicación Burbuja de replicación a. replicación en procariotas Hebra parental hebra hija nuevo DNA duplex b. Replicación en eucariotas
  • 33. 33 Errores de replicación  Las variaciones genéticas son la materia prima para el cambio evolutivo  Mutación:  Un cambio permanente (pero no planificado) en la secuencia de las bases pareadas  Algunos se deben a errores en la Replicación del DNA  Otros, debido al daño del DNA  El DNA tiene enzimas que generalmente están disponibles para revertir la mayoría de los errores
  • 34. 34 Función de los Genes Genes codifican para Enzimas Beadle y Tatum:  Experimentos en el hongo Neurospora crassa  Propusieron que cada gen tiene información para la síntesis de una enzima  Hipótesis un-gen-una-enzima Genes codifican para un Polipéptido Gen es un segmento de DNA con información la secuencia aminoacídica de un polipéptido Sugiere que las mutaciones genéticas causan cambios en la Estructura primaria de una proteína
  • 35. 35 Síntesis de proteínas: desde el DNA al RNA a la Proteína El mecanismo de la expresión del gen  El DNA en los genes poseen información, pero la información no es Estructura ni Función  La información genética es expresada en Estructura y Función a través de la síntesis de proteína La expresión de la información genética en estructura y función:  El DNA en el gen controla la secuencia de los Nucleótidos en una molécula de RNA  El RNA controla la Estructura primaria de una proteína
  • 36. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 37. 37 Tipos de RNA RNA: polímero de Nucleótidos de RNA Los Nucleótidos de RNA son de 4 tipos: Uracilo, Adenina, Citosina, y Guanina Uracilo (U) reemplaza a Timina (T) del DNA tipos de RNA  Mensajero (mRNA) – Copia y lleva el mensaje genético del DNA en el núcleo, a los ribosomas en el citoplasma  Ribosomal (rRNA) – Forma parte de los ribosomas, los cuales leen el mensaje en el mRNA  Transferencia (tRNA) - Transfiere amino ácidos apropiados al ribosoma cuando es “instruido”
  • 38. 38 Estructura del RNA G U A C S S S S P P P P ribosa G U La base es Uracilo en vez de Timina A C un Nucleótido
  • 39. 39 Estructura del DNA vs. RNA Su trabajo ahora es hacer un cuadro comparativo entre la estructura y función del ADN y del ARN. Tiene 10 minutos para esto
  • 40. 40 El código genético  Propiedades del código genético:  Universal  con pocas excepciones, todas las especies usan el código genético de la misma manera (casi universal, entonces)  Codifica 20 aminoácidos con 64 tripletes  Degenerado (redundante)  hay 64 codones disponibles para 20 aminoácidos  La mayoría de los aminoácidos están codificados por dos o más codones  No ambiguo (Los codones son exclusivos)  Ninguno de los codones codifica para dos o más aminoácidos  Cada codón especifica sólo uno de los 20 aminoácidos  Contiene señales start (inicio) y stop (parada)  Codones de Puntuación  Como las letras mayúsculas que usamos en inicio de una frase y un punto, que indica el momento del término.
  • 41. 41 El código genético  La unidad de un código son los codones, cada uno de los cuales tiene un arreglo simbólico único.  Cada uno de los 20 aminoácidos presentes en las proteínas es codificado únicamente por uno o más codones  Los símbolos usados por el código genético son las bases nitrogenadas del mRNA  Funcionan como “letras” del alfabeto genético  El alfabeto genético tiene solo 4 “letras” (U, A, C, G)  Todos los codones en el código genético tienen 3 bases (símbolos) de largo  Funcionan como “palabras” de la información genética  Permutaciones:  hay 64 posibles ordenamientos de los 4 símbolos combinándolos de a 3  A menudo los libros le denominan tripletes a los codones  El lenguage genético sólo tiene 64 “palabras”
  • 42. 42 Codones del RNA mensajero Segunda Base Tercera Base Primera Base U C GA U C A G UUU fenilalanina UCU serina UAU tirosina UGU cisteína UUC fenilalanina UCC serina UAC tirosina UGU cisteína UCA serina UUA leucina UCG serina UUG leucina UGG triptófano UGA stop UAA stop UAG stop U C A G CUU leucina CUC leucina CUA leucina CUG leucina CCU prolina CCC prolina CCA prolina CCG prolina CAC histidina CAA glutamina CAG glutamina CAU histidina CGA arginina CGG arginina CGU arginina CGC arginina U C A G AUG (start) metionina AUU isoleucina AUC isoleucina AUA isoleucina ACU treonina ACC treonina ACA treonina ACG treonina AAU asparragina AAC asparragina AAA lisina AAG lisina AGU serina AGC serina AGA arginina AGG arginina U C A G GUU valina GUC valina GUA valina GUG valina GCU alanina GCC alanina GCA alanina GCG alanina GAU aspartato GAC aspartato GAA glutamato GAG glutamato GGU glicina GGC glicina GGA glicina GGG glicina U C A G
  • 43. 43 Pasos en la Expresión: Transcripción Transcripción  Los Genes se abren y exponen las bases no pareadas  Son como moldes para la formación del mRNA  Los Nucleótidos sueltos del RNA se unen a las bases expuestas del DNA usando la regla C=G y A=U  Cuando un gen completo es transcrito a mRNA, éste es un pre-mRNA transcrito del gen  La secuencia de bases del pre-mRNA se complementa con la secuencia del DNA
  • 44. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 45. 45 Transcripción del mRNA  Un solo cromosoma consta de una muy larga molécula que codifica a cientos o miles de genes  La información genética en un gen describe la secuencia de amino ácidos de una proteína  La información está en la secuencia de bases de un lado (la hebra “sentido”) de una molécula de DNA  El gen es el equivalente funcional de una “frase”  El segmento del DNA correspondiente a un gen se abre para exponer las bases de la hebra sentido  La información genética en el gen es transcrita (reescrita) en una molécula de mRNA  Las bases expuestas en el DNA determina la secuencia mediante la cual serán conectadas las bases del RNA  La RNA polimerasa conecta los Nucleótidos sueltos de RNA  El transcrito completado contiene la información del gen, pero en una imagen especular, es decir, una forma complementaria
  • 46. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 47. 47 Transcripción Hebra no molde Hebra molde 5' C C G T A A T G C A A C G T C T C U G G A C C A C A T G G C RNA polimerasa Hebra molde del DNA mRNA transcrito C G C A T C G T A tRNA procesándose 3' 3' 5'
  • 48. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 49. Animación 49 Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 51. 51 Procesando al RNA mensajero El Pre-mRNA, se modifica antes de salir del núcleo de Eucariotas.  Modificaciones en los extremos del transcrito primario:  Capucha de Guanina modificada en el extremo 5′  La cap es un nucleótido de Guanina (G) modificado  Ayuda al ribosoma a enlazarse cuando comienza la traducción  Cola Poli-A de 150+ adeninas en el extremo 3′  Facilita el transporte del mRNA fuera del núcleo  Inhibe la degradación del mRNA por enzimas hidrolíticas.
  • 52. 52 Procesando al RNA mensajero  El Pre-mRNA, posee exones e intrones.  Los exones serán expresados,  Los intrones, están entre los exones.  Permite a una célula tomar y elegir cuáles exones irán en un mRNA particular  RNA splicing (corte):  El transcrito primario consta de:  Algunos segmentos que no serán expresados (intrones)  Los segmentos que serán expresados (exones)  Lo ejecuta el “complejo espliceosoma” en el nucleoplasma  intrones son eliminados  Los exones remanentes son vueltos a unir  Resultado: un transcrito de mRNA maduro
  • 53. 53 RNA Splicing En procariotas, los intrones son removidos por “auto-splicing”—esto es, el intrón por si mismo tiene la capacidad enzimática de cortarse y eliminarse del pre-mRNA
  • 54. Animación 54 Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 55. 55 Procesando al RNA mensajero exon intron intron exon exon DNA Transcripción exon intron intron exon exon 5' 3' pre-mRNA exon exon exon intron introncap Cola poli-A 5' 3' exon exon exon espliceosoma cap Cola poli-A Splicing del pre-mRNA intron RNA 5' 3' cap Cola poli-A mRNA Poro nuclear en la membrana nuclear núcleo citoplasma 5' 3'
  • 56. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 57. 57 Funciones de los intrones  A medida que los organismos aumentan su complejidad:  El N° de proteína codificadas por los genes no siguen el ritmo  Pero la propoción del genoma que tiene intrones incrementa  Humanos:  genoma tiene sólo app. 25.000 genes codificantes  Más del 95% de estos genes en el DNA son intrones  Posibles funciones de los intrones:  Permite empalmes alternativos  Los exones pueden formar varias combinaciones, es  Permitiría diferentes mRNAs resultantes de un segmento de DNA  Los intrones podrían regular la expresión del gen
  • 58. 58 Pasos en la Expresión del gen: traducción  La molécula de tRNA tiene dos sitios de enlace  Uno asociado con el mRNA transcrito  El otro asociado con un aminoácido específico  Cada uno de los 20 aminoácidos de las proteínas se asocia con una o más de las 64 especies de tRNA  Traducción  Un mRNA transcrito migra al RER  Se asocia con el rRNA de un ribosoma  El ribosoma “lee” la información en el transcrito  El Ribosoma dirige a varias especies tRNA a que traigan los amino ácidos específicos  El tRNA especifico es determinado por el código siendo traducido en el mRNA transcrito
  • 59. 59 tRNA Hay 64 tipos diferentes de moléculas de tRNA Todos muy similares excepto que  un extremo lleva un triplete específico (de 64 posibles) llamado anticodón  Al otro extremo se une un aminoácido específico  La tRNA sintetasa une los aminoácidos correctos a la molécula de tRNA Todas las moléculas de tRNA con un anticodón específico siempre se unirá con el mismo aminoácido
  • 60. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 61. 61 Estructura del tRNA amino ácido leucina 3 5 Puente de Hidrogeno anticodón mRNA 5' codón 3' b. Extremo del anticodón Extremo del aminoácido
  • 62. 62 Ribosomas  RNA Ribosomal (rRNA):  Producido de un molde de DNA en el nucleolo  Combinado con proteínas en subunidades grande y pequeña  Un ribosomaa completo tiene 3 sitios de unión para facilitar el pareo entre el tRNA y el mRNA  El sitio E (por exit)  El sitio P (por péptido) y  El sitio A (por aminoácido)
  • 63. 63 Ribosoma: Estructura y Función Subunidad grande subunidad pequeña a. Estructura de un ribosoma Sitio de unión Del tRNA tRNA saliendo 3 5 mRNA b.Sitios de unión del ribosoma polipéptido tRNA entrando mRNA c. Función de los ribosomas d. Poliribosoma
  • 64. 64 Pasos en la traducción: Iniciación  Los Componentes necesarios para la iniciación son:  Pequeña subunidad ribosomal  mRNA transcrito  tRNA iniciador, y  Subunidad grande ribosomal  Factores de Iniciación (proteínas especiales que colaboran en el proceso. Serán vistas más adelante)  tRNA Iniciador:  Siempre tiene el anticodón UAC  Siempre lleva el aminoácido metionina  Capaz de unirse al sitio P
  • 65. 65 Pasos en la traducción: Iniciación Unidad ribosomal pequeña se une al mRNA transcrito El comienzo del transcrito siempre tiene el codón START (AUG) tRNA Iniciador (UAC) se une al sitio P La subunidad grande ribosomal se une a la subunidad pequeña
  • 66. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 67. 67 Pasos en la traducción: Iniciación Una subunidad pequeña ribosomal Se une al mRNA; un tRNA iniciador se parea con el mRNA en el codón start AUG. La subunidad ribosomal grande Completa el ribosoma. El tRNA Iniciador ocupa el sitio P. Elsitio A está listo para el próximo tRNA. Initiation Met aminoácido metionina tRNA iniciador U A CA U G mRNA subunidad pequeña ribosomal 3' 5' P sitio A sitioE sitio Met subunidad grande ribosomal U A C A U G codón de inicio5' 3'
  • 68. 68 Pasos en la traducción: Elongación “Elongación” se refiere al crecimiento de l tamaño del polipéptido Moléculas de tRNA llevan su aminoácidos al ribosoma Ribosoma lee un codón en el mRNA  Permite que solo un tipo de tRNA lleve su a’a’  Debe tener el anticodón complementario para que el codón del mRNA se lea  Une el ribosoma a su sitio A La metionina del iniciador es conectada al aminoácido del 2do tRNA por un enlace peptídico
  • 69. 69 Pasos en la traducción: Elongación  El segundo tRNA se mueve al sitio P (translocación)  El iniciador se mueve al sitio E y sale.  El Ribosoma lee el próximo codón en el mRNA  Permite que solo un tipo de tRNA lleve su aminoácido  Debe tener el anticodón complementario al codón del mRNA que está siendo leído  Se une al ribosoma en el sitio A  El Dipéptido en el 2do aminoácido es conectado al aminoácido del 3er tRNA por un enlace peptídico
  • 70. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 71. 71 Pasos en la traducción: Elongación Un tRNA–aminoácido Se acerca al ribosoma y se une al sitio A. Dos tRNAs pueden estar en el ribosoma al mismo tiempo; los anticodones se parean a los codones. Formación de enlace peptídico que une el Aminoácido a la nueva cadena en formación. El ribosoma se mueve hacia adelante; el tRNA “vacío” sale del sitio E ; el próximo complejo aminoácido–tRNA esta llegando al ribosoma. 1 2 3 4 Elongación Enlace peptídico Met Ala Trp Ser Val U A C A UG G A C 3 3 C G anticodón tRNA asp U Met Ala Trp Ser Val U A C A UG G A C C U G Asp 5 U A C A UG G A C C U G Met Val Asp Ala Trp Ser Enlace peptídico 5 3 U C A G A C C U G AUG U G G A C C Met Val Asp Ala Trp Ser Thr 5 3
  • 72. 72 Pasos en la traducción: Terminación  El tRNA se mueve al sitio P  El tRNA se mueve al sitio E y sale  El ribosoma lee el codón STOP al final del mRNA  UAA, UAG, or UGA  No codifican para un aminoácido  El polipéptido es liberado del último tRNA por el factor liberador  El ribosoma libera al mRNA y se disocia en subunidades  mRNA es leído por otro ribosoma
  • 73. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 74. 74 Pasos en la traducción: Terminación Terminación El factor liberador hidrolisa el enlace entre el último tRNA en el sitio P y el polipéptido, liberándolo. Las Subunidades ribosomales se disocian. 3 5 A G A U G A Al ribosoma llega un codón stop en el mRNA. Se une al sitio un Factor liberador. U A U A U G A Codón STOP5' 3' Asp Ala Trp Val Glu Factor liberador Ala Trp Val Asp Glu U C U
  • 75. Animación 75 Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 76. 76 Resumen de la expresión del gen (Eucariotas) Transcripción 1. El DNA en el núcleo sirve como un molde para mRNA. 2. mRNA es procesado antes de bandonar el núcleo. mRNA pre-mRNA DNA intrones 3. El mRNA se mueve al citoplasma y llega a asociarse con los ribosomas. traducción mRNA Subunidades ribosomales Grande y pequeña 5 3' Poro nuclear 4. Los tRNAs con anticodones lleve aminoácidos al mRNA. 5 péptido codón ribosoma 3U A A U C G 5 C C GG G C G C G C CCC G U A U A U A U UA A 6. Durante la elongación del polipéptido en síntesis, tiene lugar un aminoácido al mismo tiempo. 7. El ribosoma unido al polipéptido en el RER entra al lumen, donde es doblado y modificado. 8. Durante la terminación, un ribosoma alcanza un codón stop; el mRNA y las subunidades ribosomales se desmantelan.. 5. Durante la iniciación, comienza el pareo de bases complementarias anticodón-codón a medida que las subundades ribosomales se juntan en un codón stop. amino ácido anticodón tRNA C U A 3'
  • 77. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 78. 78 Estructura del cromosoma Eucariota Contiene una sola molécula linear de DNA, y está compuesta por más de un 50% de proteína. Algunas de estas proteínas están relaciondas con la síntesis de DNA y RNA, Histonas, juegan un rol estructural  Cinco tipos de tipos de moléculas histonas Responsible por empacar al DNA  El DNA está enrollado alrededor de un núcleo de 8 moléculas de histona (llamado nucleosoma)
  • 79. 79 Estructura del cromosoma Eucariota Copyright © The McGraw-Hill Companies, Inc. Permission required for reproduction or display. a. Nucleosoma) b. Fibra de 30-nm c. Dominio de bucle radial d. Heterocromatina e. Cromosoma metafásico 1. Empaquetamiento del DNA alrededor de proteínas histonas 4. Compactación estrecha de los bucles Radiales para formar heterochromatin. 3. Enrollado suelto en bucles radiales 2. Formación de una estructura tridimensional en Zig Zag por la histona H1 y otras proteínas. 5. Cromosoma Metafásico se forma con ayuda de una proteína andamio. 2 nm 1 nm 300 nm 1,400 nm 700 nm 30 nm DNA doble hélice histonas histona H1 nucleosoma eucromatina
  • 80. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 81. 81 Resumen  Material genético  Transformación  Estructura del DNA  Watson y Crick  Replicación del DNA  Procariota versus Eucariota  Errores de replicación  Transcripción  Traducción  Estructura of Eucariota cromosoma
  • 82. 82 Transformación de Organismos en la actualidad  Resultan los llamados Organismos genéticamente modificados (OGM)  Herramienta importante en la biotecnología actual  productos comerciales que son cada vez más usados  Proteína fluorescente verde (GFP) usada como un marcador  Un gen de medusa codifica para GFP  El gen es aislado y transferido a una bacteria o al embrión de una planta, cerdo o ratón.  Cuando este gen es transferido a otro organismo, este brilla en la oscuridad
  • 83. Animación (omítala, no la estudie) Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 84. 84 Transformación de organismos A normal canola plant (left) y a transgenic canola plant expressing GFP (right) under a fluorescent light. Copyright © The McGraw-Hill Companies, Inc. Permission required for reproduction or display. (Bacteria): © Martin Shields/Photo Researchers, Inc.; (Jellyfish): © R. Jackman/OSF/Animals Animals/Earth Scenes; (Pigs): Courtesy Norrie Russell, The Roslin Institute; (Mouse): © Eye of Science/Photo Researchers, Inc.; (Plant): © Dr. Neal Stewart
  • 85. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 86. Animación Please note that due to differing operating systems, some Animacións will not appear until the presentation is viewed in Presentation Mode (Slide Show view). You may see blank slides in the “Normal” or “Slide Sorter” views. All Animacións will appear after viewing in Presentation Mode y playing each Animación. Most Animacións will require the latest version of the Flash Player, which is available at http://get.adobe.com/flashplayer.
  • 87. SylviaS.Mader, traducidoymodificado porG.Toledo Copyright © The McGraw Hill Companies Inc. Permission required for reproduction or display PowerPoint® Lecture Slides are prepared by Dr. Isaac Barjis, Biología Instructor Biología 4° Medio Biología molecular del gen Unidad 1: pp. 211 - 232 87 Power point traducido y modificado por gustavo toledo C. para mis alumnos del 4°medio, San Fdo. College b. 3.4 nm 2 nm 0.34 nm G C A T T A P P P P C G G C Bases complementarias pareadas ribosa puentes de H Columna de ribosa-fosfato

Notas del editor

  1. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  2. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  3. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  4. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  5. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  6. ¿Hola? Soy Oswald Avery. Mis colegas y yo hicimos una serie de experimentos utilizando cepas de la bacteria neumococo, que causa la neumonía. El neumococo crece en el cuerpo del anfitrión, pero, al igual que otros tipos de bacterias, también se puede cultivar en cultivos sólidos o líquidos. En 1928, Fred Griffith publicó un estudio sobre las diferentes cepas de neumococo. Dos en particular, S y R, tienen un aspecto diferente. Las colonias S tienen una superficie lisa y brillante y las colonias R tienen un aspecto rugoso y opaco. Las colonias S lucen lisas, ya que cada bacteria tiene una cápsula hecha de azúcares. Esta capa protege a las bacterias S del sistema inmune del huésped, por lo que la cepa S es infecciosa. La cepa R, sin cápsula, no lo es. Griffith descubrió que los ratones inyectados con la cepa S desarrollan neumonía y mueren en cuestión de días. Los ratones inyectados con la cepa R no se enferman de neumonía. Griffith observó que diferentes cepas de neumococo puede ser cultivada a partir de un paciente. Comenzó a preguntarse si una cepa podría cambiar a otra. Para probar esta idea, hizo una serie de experimentos con las cepas R y S. En primer lugar, Griffith calentó el cultivo de la cepa S para matar las bacterias. Como se predijo, cuando se inyectan en ratones, las bacterias muertas por calor no producen una infección. Los ratones inyectados con cepas R vivas no desarrollaron neumonía. Griffith co-inyectó a ratones cepas S muerta por calor con cepas R vivas y, para su sorpresa, los ratones desarrollaron neumonía y murieron. Aún más asombroso, Griffith fue capaz de aislar la cepa S viva de la sangre de ratones infectados. Estos cultivos pueden infectar a otros ratones. La cepa S cultivada de los ratones infectados se mantuvo activa – lo que demuestra que el cambio se mantuvo estable y era heredable. Griffith llegó a la conclusión de que algún "principio" fue transferido desde la cepa S muerta por calor a la cepa R. El “ principio ” transformó la cepa R en cepa S infectiva y desarrolló una cápsula de azúcar. Cuando leí los resultados de Griffith, me interesé mucho en la identidad de este “ principio transformador". Junto con Colin MacLeod, Maclyn McCarty, comenzamos a experimentar en tubos de ensayo en lugar de ratones. Se utilizó un detergente para la lisis de las células S muertas por calor. Luego usamos este lisado para los ensayos de transformación. Probamos cada uno de los componentes del lisado para la actividad transformadora. En primer lugar, incubamos el lisado de las S muertas por calor con una enzima, SIII, que digieren completamente la capa de azúcar. Pusimos a prueba la capacidad transformadora del lisado carente de la capa de azúcar. El lisado sin la capa de azúcar todavía era capaz de transformar a las cepas R en S. A continuación, se incubó el extracto sin cápsula con enzimas que digieren proteínas - la tripsina y la quimotripsina. Pusimos a prueba la capacidad de este lisado para transformar a las bacterias R. Este lisado sin proteíncomo unún era capaz de transformar. De modo que el principio de transformación no era la proteína. Mientras probábamos y purificábamos el lisado, precipitamos con alcohol a los ácidos nucléicos - ADN y el ARN. Fuimos los primeros en aislar los ácidos nucléicos de neumococo. Ya que el principio de transformación no era ni la cápsula de azúcar ni las proteínas, se sospechaba que podía ser uno de los ácidos nucléicos. Disolvimos el precipitado en agua y probamos la capacidad transformadora de la solución.  En primer lugar, destruimos el ARN con la enzima RNasa. Probamos esta solución por su capacidad de transformar. La solución todavía tenía esa capacidad. Por lo tanto, el ARN no podía ser el principio de transformación. Lo que quedaba era prácticamente ADN puro. Como prueba final, incubamos la solución con la enzima ADNasa. Se utilizó esta solución para poner a prueba la capacidad de transformación.  Esta solución no fue capaz de transformar a las bacterias R en S . Mis colegas y yo llegamos a la conclusión de que el ADN es el principio de transformación y publicamos estos resultados en 1944. (Nota del traductor….Gtoledo: ¿Les cuento?...Parte de la comunidad científica no aceptó estos resultados y quienes zanjaron todas las dudas, fueron Hersey y Chasse Romper paradigmas……cuesta mucho). Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  7. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
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  12. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  13. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  14. Algunos Científicos habían imaginado modelos del ADN en el pasado, pero todos resultaron erróneos. Una radiografía de rayos X fue clave para confirmar el modelo del ADN. En vez de enfrascarse en experimentos de laboratorio, Watson y Crick idearon su modelo sobre la base de cálculos, con los que estimaron cómo debería verse la molécula. Pero no había manera de estar seguros de haber dado en el blanco. Hasta que un rayo los iluminó. Un equipo de investigadores del King´s College de Londres había estado haciendo experimentos durante varios años con una técnica relativamente nueva de cristalografía de rayos X. Uno de los científicos del grupo, Rosalind Franklin, había logrado una imagen de rayos X de ADN cristalino, que claramente lo mostraba formando una figura cruzada. El jefe de Franklin, Maurice Wilkins, le mostró la imagen a Watson durante una visita a Londres, pero no le dijo nada a Rosalind. Watson y Crick habían previsto que una foto del ADN debería verse así si su modelo era correcto. Cuando Watson vio la imagen, supo que tenían razón. No todos los que están Watson y Crick publicaron su famosa investigación en la revista  Nature  el 25 de abril de ese año, revelando la estructura de la doble hélice y sugiriendo que ésta permitía que el ADN creara copias idénticas de sí mismo. La idea tardó en atraer atención, pero a lo largo de los años se ha convertido en la base de muchos logros en el campo de la biología y la medicina. Los científicos, junto con Maurice Wilkins, fueron galardonados con el premio Nobel. Pero Rosalind Franklin murió de cáncer antes de alcanzar los 40 años de edad, sin haber podido brindar por su participación en un descubrimiento del que, aunque nunca lo supo, fue pieza clave. Las reglas del premio Nobel no permiten hacer reconocimientos post mortem. Watson se vinculó con el proyecto del Genoma humano, que descifró el significado de los millones de unidades de información genética contenidos en el ADN. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  15. Había dos equipos de investigadores rivales en pos de descifrar la estructura del  ADN .  Francis Crick  y  James Watson  del laboratorio Cavendish de Cambridge y del otro lado  Maurice Wilkins  y  Rosalind Franklin  del laboratorio del King's College en Londres. Los tres varones se conocían bien, intercambiaban cartas y participaban de eventuales reuniones. La única mujer del grupo,  Rosalind Franklin , era considerada por ellos " una bruja ", pero con una paradoja: El trabajo experimental de la  Franklin  los tenía obsesionados, al punto que muchas de sus cartas y conversaciones versaba en torno a su colega femenina. Y es que mientras los grupos investigaban y competían,  Rosalind  aplicó innovadoras técnicas para fotografiar con  rayos X estructuras complejas y pequeñas. Obtuvo así la famosa y ahora histórica "fotografía 51", que muestra un ángulo de la estructura del ADN . Su compañero de laboratorio,  Maurice Wilkins , agarró la foto sin su permiso y se la llevó a su amigo y competidor  Francis Crick . Crick  quedó fascinado con la imagen, tanto que luego admitió que fue una gran inspiración para el hallazgo de la estructura helicoidal del  ADN . La infidencia y abuso de confianza de  Wilkins  no pasó desapercibida ni para  Rosalind  ni para sus jefes, por lo que el asunto se convirtió en un escándalo, al punto que los directores de ambos laboratorios (del Cavendish de Cambridge y del King's College de Londres) los reunieron para prohibirles a  Crick  y  Watson , explícitamente, que siguieran aprovechándose del trabajo de  Rosalind . La deslealtad de  Wilkins  molestó tanto a  Rosalind  que su relación laboral se resquebrajó al punto que ella comenzó a buscar trabajo en otro laboratorio. " Confío en que el humo de la brujería salga pronto de nuestros ojos " le escribió  Wilkins  a Francis  Crick  en enero de 1953, poco antes de que  Crick  y  Watson  anunciaran su hallazgo al mundo. Con " humo de brujería "  Wilkins  aludía a  Rosalind  y su posible salida del laboratorio.  Crick  le respondió por escrito: " Esperamos que nuestro robo al menos produzca un frente unido en vuestro grupo ". Wilkins  le escribió en otra carta: " Pensar que Rosie tenía todos los datos en 3D desde hace nuevae meses y no vio que era una hélice y que yo le tomé la palabra de que los datos eran anti-hélice. Dios mío ". La gloria final del hallazgo de la estructura de la doble hélice recayó en  Crick,   Watson  y  Wilkins , por lo que ganaron el premio Nobel en 1962. En 1968  Watson  escribió una crónica del descubrimiento llamada " La Doble Hélice ", relato en el que se burla de Rosalind. No se trata aquí de desmerecer el trabajo de  Crick,   Watson  y  Wilkins , sino de rescatar la importancia de las investigaciones de Franklin  en el hallazgo, algo que hoy confirman las cartas recién descubiertas y publicadas en la revista  Nature . ¿Por qué ella no respondió a este libro y ni siquiera fue mencionada en la ceremonia de entrega del premio  Nobel  de 1962? Porque Rosalind Franklin  falleció en 1958, a los 37 años, víctima de cáncer a los ovarios, muy probablemente producto de sus trabajos de investigación con Rayos X. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  16. Mediante experimentos de pulso y caza, se suministran precursores radiactivos que marcan específicamente el ARN (uridina tritiada) a las células durante un breve período de tiempo (pulso). Una vez que las células han incorporado la uridina tritiada se transfieren a un medio con precursores sin marcar (caza). De este forma es posible seguir el destino del ARN marcado durante el pulso, ya que la síntesis del nuevao ARN se produce con precursores sin marcar (uridina normal). Las muestras de células tomadas después de la caza, mostraban marcaje en el núcleo, indicando que ARN se sintetiza allí, sin embargo, las muestras de células tomadas después de la caza mostraban el marcaje radiactivo en el citoplasma. Por tanto, parece que el ARN se sintetiza en el núcleo y se transporta posteriormente al citoplasma. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  17. Dogma central de la biología Watson y Crick sospecharon que una vez elucidada la estructura del ADN, sería más fácil entender su función. Razonaron, entonces, que si el ADN era la molécula que transmitía la información genética a las células hijas, esta debía funcionar como un código. Para mitad de los años 1950 se sabía que la secuencia de nucleótidos en el ADN daba origen a una secuencia de polipéptidos. Es decir, la molécula de ADN debía dirigir la síntesis de proteínas. ADN → Proteínas Pero si esto era cierto, faltaba dilucidar una pieza del rompecabezas ya que sabía que las proteínas se sintetizaban fuera del núcleo.  ¿Cómo podía el ADN, que estaba dentro del núcleo, dirigir la síntesis de proteínas fuera del mismo?  A Crick se le ocurrió la idea de que debía existir un intermediario. ADN → ¿? → Proteínas Un posible candidato para intermediario era el ARN, que se encuentra en el citoplasma. El ARN tenía varias características que lo hacían un firme candidato: un esqueleto de azúcares y fosfatos (a pesar de que tiene un azúcar distinto, ya que el ARN tiene ribosa en vez de desoxirribosa), tanto el ADN como el ARN usan las mismas bases nitrogenadas, pero el ARN tiene uracilo en vez de timina, el uracilo se puede unir a la adenina como lo hace la timina, el ARN es una cadena simple. Crick sintetizó esta idea en lo que él llamó el  dogma central de la biología , que especifica que el ADN se traduce ARN y este, a su vez, dirige la producción de proteínas. ADN → ARN → Proteínas Según este postulado, la información fluye de manera unidireccional: no puede moverse de las proteíncomo unl ADN. Es decir, una vez que la información llega a las proteínas, estas no pueden ser cambiadas o, lo que es lo mismo, las proteínas no pueden influir los genes.  Si bien Crick usó el término dogma en un sentido figurado y quizá con humor, ya que las ideas científicas sólo son aceptadas hasta que aparezca evidencia experimental que las desmienta, durante algún tiempo esta idea adquirió cierta dimensión de verdad absoluta en la mayoría de los libros de texto. Actualmente el “ dogma central de la biología ” ha sufrido algún resquebrajamiento, pues, para sorpresa de muchos, en 1971 se descubrió que algunos virus, como el de la inmunodeficiencia humana ( VIH ), llevan su información en forma de ARN, y que ella puede pasar al ADN de sus huéspedes. Ese proceso ocurre en el sentido contrario al esquema de Crick, ya que la información pasa del ARN al ADN. Además, actualmente sabemos que tanto el ARN como las proteínas pueden influir en la expresión del código genético. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  18. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
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  31. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  32. Aquí pueden practicar en una prueba http://glencoe.mcgraw-hill.com/sites/0078802849/student_view0/unit3/chapter12/chapter_test_practice-spanish.html Aquí un un buen apunte de replicación http://adn-bio-wiki.wikispaces.com/file/view/REPLICACI%C3%93N.pdf Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  33. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
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  49. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  50. El  espliceosoma  o  complejo de corte y empalme  es un complejo formado por cinco  ribonucleoproteínas nucleares pequeñas  (snRNP, del inglés  small nuclear ribonucleoproteins ) capaz de eliminar los intrones (secuencias no codificantes) de los precursores del mRNA; este proceso se denomina splicing de ARN. Las snRNP son complejos formados por unas diez proteínas más una pequeña molécula de RNA, rica en uracilo (U), que es la encargada de reconocer al intrón mediante apareamiento complementario de bases. Las snRNP que forman el spliceosoma se denominan U1, U2, U4, U5 y U6; y participan en diversas interacciones RNA-RNA y RNA-proteína. Las snRNP reconocen la secuencia consenso GU (Guanina-Uracilo) del extremo 5´ y AG (Adenina-Guanina) del extremo 3´ del intrón. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  51. ADICION DEL CAP: Consiste en adicionar el nucleótido guanina modificado en 7 metil guanina o guanilato (m7G) en el extremo 5'del primer nucleótido (generalmente una adenina) del transcrito primario en un enlace 5' - 5'. Recuerde que los enlaces del resto de la molécula son 5'-3'. La función de este CAP es reconocer el primer codón para iniciar la traducción del ARNt. Debe concienciar que éste proceso es propio de eucariotas. 2)ADICION DEL POLI A: Consiste en adicionar de 200 a 250 adeninas en el extremo 3' del transcrito primario (ARNtp). Existe una secuencia "consenso" indicadora del sitio de adición, donde una endonucleasa corta el transcrito primario y luego otra proteina adiciona la cola de adenina. Al POLI A se le atribuyen dos funciones: la primera es sacar el ARNm al citoplasma; ésta función es controvertida porque se conocen ARNm sin cola de adeninas (como el ARNm de la histona) y la segunda función es proteger el ARNm de las endonucleasas citoplasmáticas. Parece que las endonucleasas empiezan a degradar el ARNm sacando adeninas, que es compatible con la información que el largo de la cola de adenina es directamente proporcional con la vida media del ARNm. Los ARNm de eucariotas tienen una vida media de hasta 10 horas. El ARNm bacteriano no tiene Poli A y tiene una vida media de menos de una hora Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
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  55. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  56. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
  57. La presencia de intrones en los genes eucarióticos parecería ser una pérdida extrema de energía celular cuando se considera el número de nucleótidos incorporados en el transcripto primario y que luego son eliminados, así como también por la energía utilizada en la síntesis de la maquinaria de empalme. Sin embargo, la presencia de intrones puede proteger el genoma de un organismo del daño genético por influencias externas tales como productos químicos o radiación. Una función adicional importante de los intrones es permitir que ocurra el empalme alternativo, de tal modo, aumentando la diversidad genética del genoma sin el aumento del número total de genes. Por alteración de los patrones de exones de un solo transcripto primario, que son empalmados juntos, diferentes proteínas pueden presentarse del ARNm procesado a partir de un solo gen. El empalme alternativo puede ocurrir tanto en las etapas específicas de desarrollo o en los diferentes tipos de células. Este proceso de empalme alternativo ha sido identificado en los transcriptos primarios de por lo menos 40 genes diferentes. Dependiendo del sitio de la transcripción, el gen de calcitonina produce un ARN que sintetiza la calcitonina (tiroides) o el péptido relacionado con el gen de calcitonina (CGRP, cerebro). Aún más complejo es el empalme alternativo eso ocurre en el transcripto de la α-tropomiosina. Se han identificado al menos 8 diferentes ARNm de α-tropomiosina empalmados alternativamente. Las anormalidades en el proceso de empalme pueden conducir a varios estados de enfermedad. Muchos defectos en los genes de β-globina se conoce que conducen a las β-talasemias. Algunos de estos defectos son causados por mutaciones en las secuencias del gen que se requiere para el reconocimiento del intrón y, por lo tanto, resulta en un proceso anormal en el transcripto primario de la β-globina. Los pacientes que sufren de varias enfermedades del tejido conectivo tienen autoanticuerpos que reconocen complejos celulares ARN-proteína. Pacientes que sufren de lupus eritematoso sistémico tienen autoanticuerpos que reconocen el ARN U1 del espliceosoma. Biología, 9th ed,Sylvia Mader DNA Estructura y Función Slide # Chapter 13
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