Dokumen ini membahas tentang pengertian dan cara isolasi protoplas dari sel tanaman. Protoplas adalah sel tanaman yang telah kehilangan dinding selnya. Ia dapat diisolasi dari berbagai organ tanaman dengan cara menghilangkan dinding selnya menggunakan enzim selulase. Terdapat dua metode isolasi protoplas, yaitu secara mekanik dan kimiawi menggunakan enzim. Kultur protoplas memiliki kelebihan untuk melakukan hib
2. PENGERTIAN PROTOPLAS
Sel tanaman pada umumnya dilindungi oleh dari
selulosa yang keras untuk menopangdinding
sel struktur tanaman. Sel tanaman yang telah
kehilangan dinding selnya disebut dengan
istilah protoplas. Protoplas dapat diisolasi dari
berbagai macam jaringan ataupun organ
tanaman seperti daun, tunas, akar, dan buah.
3. LANJUTAN.......
Protoplas adalah sel tumbuhan
yang dihilangkan dindingnya
Cara penghilangan dinding
dilakukan dengan pemberian
enzim selulase dan sejenisnya
4. PENGERJAANNYA
• Organ daun yang masih muda disterilkan
• diiris-iris atau disobek sehingga terpisah
antara bagian permukaan bawah dan atas
daun
• dimasukkan ke dalam larutan enzim dengan
kadar tertentu dan ditunggu selama 12-18 jam
• Selama itu sel-sel akan keluar dan dinding sel
akan lisis sehingga didapatkan protoplas
• Semua pengerjaan dilakukan secara aseptik
7. Tanaman hasil persilangan dua macam
protoplas
• pomato, sebagai persilangan antara tomat dan
kentang (Solanaceae)
• Penelitian lain dilakukan dengan
menyilangkan dua macam kloroplas (bukan
protoplas), yaitu antara jagung dengan tebu
(Poaceae)
8. Harapan dari persilangan itu adalah
• mendapatkan semua bahan yang dapat
dipakai manusia dalam satu individu
• Jika pomato menghasilkan buah maka di
bagian atas dapat dipanen buah tomat dan
dari umbi batang dihasilkan kentang
• persilangan kloroplas jagung dan tebu akan
dihasilkan buah jagung dan batang untuk
menghasilkan gula tebu dalam satu individu.
9. ISOLASI PROTOPLAS ADA 2 METODE
• Protoplas dapat diisolasi dari jaringan
dengan metode secara mekanik. Isolasi
protoplas secara mekanik diperkenalkan
sekitar 100 tahun yang lalu, dan protoplas
pertama dengan metode isolasi ini pada
tahun 1909.
• Metode kimia. Pada tahun 1960, Cocking
menggunakan metode isolasi protoplas
dengan reaksi enzimatis.
10. METODE MEKANIK
Pada awal 1892, Klercker mencoba melakukan
isolasi protoplas menggunakan metode mekanik
Prinsip dasar dari metode mekanik ini adalah
memotong jaringan tanaman yang plasmolisis
karena adanya induksi osmotik untuk mengambil
protoplas
Jumlah protoplas yang didapat dengan metode
ini terbatas dan prosedur ini hanya bisa
diterapkan pada beberapa tipe jaringan
11. METODE KIMIA
Cocking menggunakan selulase kasar dari
Myrothecium verrucaria untuk mengisolasi
protoplas dari akar tomat
Prinsip dari metode isolasi menggunakan
enzim adalah digesti dinding sel tanaman
dengan menggunakan enzim selulase dan
macerozim untuk menghasilkan protoplas.
12. KELEBIHAN KULTUR PROTOPLAS
• dapat dilakukan hibridisasi antara spesies
tanaman yang secara seksual tidak
kompatibel
• protoplas dapat menyerap molekul dan
organel asing dengan cara fagositosis.
13. KEKURANGAN KULTUR PROTOPLAS
• Biaya prosedur yang lumayan mahal
• rendahnya regenerasi tanaman dari protoplas.
• Jarang sekali terjadinya pembentukan kalus
dari protoplas hasil hibridisasi