¿Qué es más importante, la carga genética con la que se nace o la nutrición? (primera parte), INFO,JULIO1947@GMAIL.COM El Suero Intra Metabólico, auxiliar en enfermedades patológicas... Por Ana Cecilia Becerril* El pescado contiene lisina y cloruro de magnesioDurante mucho tiempo se ha venido sospechando que determinadas patologías tenían su origen en procesos relacionados con el sistema inmunitario. Sin embargo, hasta tiempos muy recientes no ha sido posible definir con exactitud ciertos mecanismos patogénicos, si bien esa definición, en la mayoría de los casos no implicó contemporáneamente el diseño de una terapia eficaz para los mismos. El llegar a la conclusión científica que el asmático, el artrítico, el alérgico y determinada clase de cirróticos, por poner algunos ejemplos significativos, todos ellos eran víctimas de un proceso de desbordamiento de su capacidad inmunitaria, sólo significó llegar al umbral del problema, observarlo y tener que confesar la impotencia para abordarlo. Sólo ha sido posible aliviar esas patologías mediante maniobras terapéuticas sintomáticas, dejando el problema de fondo sin resolver. Un ejemplo emblemático de todo ello es sin duda el Síndrome de Inmuno Deficiencia Adquirida (SIDA), patología moderna con gran eco social y científico, el cual ha permitido estudiar en profundidad los mecanismos del sistema inmunológico humano. Pero como tantas veces ha sucedido en medicina, lo que tiene apariencia de modernidad y novedad, no es más que nueva forma de acercamiento y definición de problemas muy antiguos, cuando no arcaicos. Los grandes médicos de la antigüedad vislumbraron, sin los grandes medios, diagnósticos de los que hoy disponemos, que muchas patologías degenerativas eran resultantes de un proceso autoinmune. Esto ha llevado a muchos especialistas a volver sus ojos hacia terapias tradicionales, en ocasiones no sólo alternativas a la ciencia oficial sino subversivas de los postulados científicos, buscando en esas fuentes soluciones a problemas de gran envergadura en los órdenes humano, económico y social; ese tipo de patologías son insidiosas para el individuo, cuestan fortunas sus tratamientos y significan una carga social importante. Sin embargo, la experiencia ha demostrado que esas terapias, no han mejorado la situación de los pacientes y no constituyen una verdadera alternativa al arsenal terapéutico de la moderna farmacopea,

1. ESTUDIO TOXICOLOGICO
NUTRISIM
• Div. Neurociencias. Lab. Desarrollo -
Envejecimiento, Enfermedades
Neurodegenerativas.
• CIBO-IMSS. Guadalajara, México
• Dr. en Ciencias. Genaro G. Ortiz.

2. NUTRISIM
• Arginina
• Lisina
• Colina
• Cloruro de Amonio
• Cloruro de Calcio
• Cloruro de Magnesio

3. ESTUDIO TOXICOLOGICO
NUTRISIM
• 100 ratas (250 g. de peso) de la cepa
Wistar
• Grupos de 10 ratas por dosis administrada
• La administración será por vía
intraperitoneal

4. ESTUDIO TOXICOLOGICO
NUTRISIM
• Curvas de Kaplan Meyer
• Análisis histopatológico y Macroscópico
post- morten
– Hígado
– Riñón
– Pulmón
• Análisis Bioquímico

5. ESTUDIO TOXICOLOGICO
NUTRISIM
Dosis Administrada
• 0.1 ml
• 0.2 ml
• 0.3 ml
• 0.4 ml
• 0.5 ml
• 1 ml
• 2 ml
• 3 ml
• 4 ml
• 5 ml

6. Resultados
Por Observación
• No se presentó ninguna muerte.
• Ninguna alteración en su patrón de conducta

7. Resultados
Hematología y Bioquímica
• En todos los animales estudiados no se
apreció ninguna modificación de los valores
normales tanto de la citología hemática
como de la química sanguínea.

8. Citología hemática y química
sanguínea
• Eritrocitos 6.000.000
• Hemoglobina de 13.6 g/dl
• Hematocrito 40.9 %
• VEM 60 fl
• CMHC 30/dl
• Leucocitos 10,000
• Glucosa 97.2 mg.%
• Urea 29.6 mg
• Creatinina 0.41
• Colesterol 87.3 mg %
• Albúmina 4.3 mg%
• Globulina 2.8 mg%

9. Resultados
Análisis Morfológico
• No se apreció ninguna alteración en la
laparotomía y toracotomía; no encontramos
líquidos en cavidades ni datos de
degeneración, congestión o edema en
ninguno de los grupos estudiados.

10. Resultados
Análisis Estructural
• Los órganos estudiados: hígado, pulmón y
riñón; no mostraron ninguna modificación
en el patrón citoestructural como
citoarquitectónico

11. HIGADO
Fotomicrografía de hígado en la cual no se
aprecia ninguna alteración

12. PULMON
Fotomicrografía de pulmón en la cual
no se aprecia ningún daño

13. RIÑON
Fotomicrografía de riñón en la cual no se
aprecia ningún daño

14. Estudio Estructural y
Bioquímico del posible efecto
protector del Nutri-Sim en
cerebros de Gerbos (Mongolian
gerbils - Meriones unguiculatus)
sometidos a isquemia-reperfusión.

15. Dr. Rolando Romero Dávalos
Lic. Luis Alfredo Romero Tirado.
BIO-SIM S. A. de C. V., México
Div. Neurociencias. Lab. Desarrollo -
Envejecimiento, Enfermedades
Neurodegenerativas.
CIBO-IMSS. Guadalajara, México
Coordinador Dr. Genaro G. Ortiz.

16. La Enfermedad Isquémica
Cerebrovascular ( EVC )
• Patología que surge como resultado de
la alteración de los vasos sanguíneos
que suministran su flujo al cerebro.
• 3° causa de muerte en el mundo.

17. FACTORES
• Hipertensión
• Cardiopatías
• Tabaquismo
• Diabetes mellitus
• Consumo de alcohol
• La vida sedentaria
• La obesidad
• Anticonceptivos orales.

18. ISQUEMIA
• La isquemia es la ausencia o disminución del
aporte sanguíneo por un determinado tiempo,
que lleva a un daño celular, en ocasiones no
muy específico y delimitado.

19. REPERFUSION
• Por otro lado, la reperfusión, es el período
que sigue a la isquemia, y que se caracteriza
por una reoxigenación cerebral acompañada
del restablecimiento del aporte sanguíneo.
Así pues, durante la isquemia se genera un
daño al producirse radicales libres y en la
reperfusión el daño puede ser mayor cuando
se distribuyen estos radicales libres a través de
la sangre.

20. FALLA DE ENERGÍA POR
LA ISQUEMIA CEREBRAL
• En condiciones normales, el 95% del ATP
cerebral es producido en condiciones
aerobias, por cada mol de glucosa y 6 moles
de oxígeno se obtienen teóricamente 36
moles de ATP. (Hochachka y Somero1984)

21. FALLA DE ENERGÍA POR
LA ISQUEMIA CEREBRAL
• En contraste, en la glicólisis anaerobia,
donde la glucosa se metaboliza a piruvato o
lactato, sólo se obtienen 2 moles de ATP
por cada mol de glucosa. (Hochachka y
Somero1984)

22. La falla energética conduce a lo
siguiente:
• Se detiene la producción de ATP, como
resultado caen los niveles de ATP,
• La utilización de ATP por la bomba Na+ / K+
cae,
• La salida neta de K+ conduce a una
progresiva despolarización,
• La despolarización se generaliza. Existe una
rápida salida de K+ y un influjo de Ca+ y Na+

23. La falla energética conduce a lo
siguiente: (2)
• Muerte neuronal causada por:
A) Activación de procesos líticos por Ca+ (proteasas, lipasas
y endonucleasas),
B) Hinchamiento celular y lisis debido al agua acompañada
del influjo de iones que se traduce en un aumento en la
presión cerebral y a su vez en una isquemia permanente,
C) Elevación de los niveles de ácidos grasos libres y otros
lípidos causantes de daño a nivel de membrana,
D) Producción de radicales libres citotóxicos y aldehídos
especialmente en la reperfusión. (Lutz y Nilsson, 1997)

24. RADICALES LIBRES
• Los radicales libres son definidos como
entidades químicas (átomos, moléculas,
iones) que poseen uno o más electrones
desapareados
• Los radicales pueden formarse a partir de
una molécula neutra a la que le han quitado
o donado un electrón.

25. Efectos biológicos de los
radicales libres
• La toxicidad particular de los radicales libres es
una consecuencia de su alta reactividad. En
principio, los radicales libres pueden reaccionar
con moléculas vivientes virtualmente importantes.
Esto puede dirigir a alteraciones estructurales, las
cuales, bajo ciertas condiciones, conducen a la
muerte celular.

26. Efectos biológicos de los
radicales libres (2)
• Los radicales libres, también han sido asociados
con procesos tóxicos más complejos, incluyendo
reproducción en la toxicidad y tumorogénesis.
• Debido a la diversidad de la generación biológica
de radicales libres, y sus diferentes propiedades, es
difícil generalizar acerca de sus efectos biológicos.

27. Efectos biológicos de los
radicales libres (3)
• Tales efectos pueden variar dependiendo del sitio
de formación del radical, la vida media del mismo
y la naturaleza de la célula blanco con la que
interactúa.

28. HIPOTESIS
• El Nutri-Sim protegerá del daño oxidativo
al cerebro de gerbos después de la isquemia
reperfusión.

29. HIPOTESIS NULA
• El Nutri-Sim no protegerá al cerebro
del daño oxidativo generado al realizar
isquemia-reperfusión en gerbos.

30. OBJETIVO GENERAL
• Estudiar el efecto antioxidante del
Nutri-Sim en cerebros de gerbos
(Mongolian gerbils: Meriones
unguiculatus) despues de realizar
isquemia-reperfusión.

31. Objetivos particulares
• Demostrar que existe daño neuronal (agudo
y crónico) al realizar el modelo de
isquemia-reperfusión en gerbos.
• Demostrar que existe estrés oxidativo en el
modelo de isquemia-reperfusión en gerbos.
• Estudiar el papel Nutri-Sim como
protector, en los procesos de isquemia-reperfusión
cerebral.

32. VARIABLES
• Independientes
– Nutri-Sim
• Dependientes
– Peroxidación de Lípidos de Membrana
– Oxido Nítrico (Nitratos y Nitritos)
– Glutatión Peroxidasa
– Estructura celular

33. MATERIAL
• 78 animales de la especie Meriones
unguiculatus (Gerbos)
• Anestésicos
– Droperidol
– Ketamina

34. DETERMINACIONES
• Concentración de proteínas totales:
Método Bradford.
• Peroxidación de lípidos de membrana, 4-
Hidroxialquenos (HA) y malonaldehídos
(MDA)
• Oxido Nítrico, método de Griess
• Glutatión Peroxidasa

35. GRUPOS A ESTUDIAR
• Testigo
• Testigo Manipulado
• Isquemia-Reperfusión
• Isquemia Reperfusión mas Nutri-Sim
• Nutri-Sim

36. Testigo
• A este grupo de animales se les mantuvo en
condiciones de bioterio. Se decapitaron para
la extracción de cerebro. (n=10)

37. Testigo Manipulado
• A este grupo se le mantuvo en sus jaulas
con alimentación propia para animales de
laboratorio y bajo condiciones de bioterio.
Después se manipularon bajo anestesia. Se
incidieron de cuello simulando el proceso
de isquemia-reperfusión cerebral. Al final
se sacrificaron para obtener la muestra de
tejido. (n=10)

38. NUTRISIM
• Estos animales fueron manipulados bajo
anestesia. Se incidieron de cuello, al igual
que el grupo 1, pero con la diferencia de
que a éstos se les aplicó una dosis de
Nutrisim® 30 minutos antes del sacrificio.
(n=10)

39. Isquemia-Reperfusión
• Se incidieron de cuello bajo anestesia,
después se les realizo la isquemia bilateral
en carótidas por 5 minutos seguida de
reperfusión por 90, 120 minutos y 7días.
(n=8 por cada tiempo)

40. Isquemia-Reperfusión más
NUTRISIM
• Se procedió igual que con el grupo anterior
con la diferencia de que a este grupo se le
aplico una dosis de NutriSim® 30 minutos
antes de realizar la isquemia. (n=8 por cada
tiempo)

41. RESULTADOS
• PEROXIDACIÓN DE LÍPIDOS
• ÓXIDO NÍTRICO
• GLUTATIÓN PEROXIDASA
• MORFOLOGÍA
– ANÁLISIS MACROSCÓPICO
– ANÁLISIS MICROSCÓPICO

42. Peroxidación lipídica
• Los lípidos contienen una gran cantidad de dobles
enlaces como los ácidos grasos poliinsaturados y
el colesterol, que pueden ser sujetos a un daño
oxidativo.
• En el caso de los fosfolípidos de membrana cuya
destrucción peroxidativa de sus ácidos grasos
poliinsaturados, generalmente resulta en un
debilitamiento de la función celular y las
membranas subcelulares. Este debilitamiento
puede llevar a la muerte celular. (toxicology)

43. Peroxidación lipídica (2)
• La peroxidación (autooxidación) de los
lípidos expuestos al oxígeno es la
responsable del daño a los tejidos, ya que se
puede producir cáncer, enfermedades
inflamatorias, envejecimiento, etc.

44. Peroxidación lipídica (3)
• Los efectos deletéreos se consideran debidos a los
radicales libres (ROO·, RO·, OH·) producidos
durante la formación de peróxido a partir de los
ácidos grasos con enlaces dobles interrumpidos
por metileno; es decir, los enlaces presentes en los
ácidos grasos poliinsaturados naturales.
• La peroxidación lipídica consiste en una reacción
en cadena, la cual proporciona un suministro
continuo de radicales libres, los que inician la
peroxidación subsecuente. (Harper)

45. PEROXIDACIÓN DE LÍPIDOS

46. PEROXIDACIÓN DE LÍPIDOS

47. PEROXIDACIÓN DE LÍPIDOS

48. ÓXIDO NÍTRICO
• A bajas concentraciones, el NO media muchos procesos
fisiológicos, por ejemplo neurotransmisión, vasodilatación
y respuesta inmune;
• A concentraciones elevadas, muestra un efecto citotóxico y
genotóxico (efectos dañinos en el DNA).

49. ÓXIDO NÍTRICO

50. ÓXIDO NÍTRICO
OXIDO NITRICO, 120 MIN (Nitratos y Nitritos)
300
250
200
150
100
50
0
nM/mg/Pr
TESTIGO MANIPULADO ISQUEMIA ISQUEMIA + NS NUTRI-SIM

51. ÓXIDO NÍTRICO

52. Glutatión peroxidasa
• El peróxido de hidrógeno también es
reducido por la glutatión peroxidasa, que es
abundante en la mayoría de las células, y
gracias a su grupo tiol libre, constituye un
importante mecanismo de protección frente
al estrés oxidativo.

53. Glutatión peroxidasa (2)
• Este enzima juega un papel clave en la
destoxificación porque reacciona con el peróxido
de hidrógeno y los peróxidos orgánicos, que son
los subproductos dañinos de la vida aeróbica. (S),
y los reduce a H2O, junto con la oxidación del
glutatión.
• 2GSH + H2O2 GSSG + 2H2O

54. GLUTATIÓN PEROXIDASA

55. GLUTATIÓN PEROXIDASA

56. GLUTATIÓN PEROXIDASA

57. TESTIGO

58. ISQUEMIA
REPERFUSIÓN 90´

59. ISQUEMIA
REPERFUSIÓN 120´

60. ISQUEMIA
REPERFUSIÓN 7 DIAS

61. ISQUEMIA
REPERFUSIÓN + NS 7 DIAS

62. MORFOLOGÍA
30
25
20
15
10
5
0
TESTIGO NUTRI-SIM ISQUEMIA
5´Perfusion 90´
ISQUEMIA
5´Perfusion 120´
ISQUEMIA
5´Perfusion 7
días
NUTRI-SIM
ISQUEMIA
5´Perfusion 90´
NUTRI-SIM
ISQUEMIA
5´Perfusion 120´
NUTRI-SIM
ISQUEMIA
5´Perfusion 7
días
Células Piramidales

63. MORFOLOGÍA
25
20
15
10
5
0
TESTIGO NUTRI-SIM ISQUEMIA
5´Perfusion 90´
ISQUEMIA
5´Perfusion 120´
ISQUEMIA
5´Perfusion 7
días
NUTRI-SIM
ISQUEMIA
5´Perfusion 90´
NUTRI-SIM
ISQUEMIA
5´Perfusion 120´
NUTRI-SIM
ISQUEMIA
5´Perfusion 7
días
Células Hipercromáticas

64. MORFOLOGÍA
20
18
16
14
12
10
8
6
4
2
0
TESTIGO NUTRI-SIM ISQUEMIA
5´Perfusion 90´
ISQUEMIA
5´Perfusion 120´
ISQUEMIA
5´Perfusion 7
días
NUTRI-SIM
ISQUEMIA
5´Perfusion 90´
NUTRI-SIM
ISQUEMIA
5´Perfusion 120´
NUTRI-SIM
ISQUEMIA
5´Perfusion 7
días
Células Gliales

65. Protección en Apoptosis
T SS B I-90 IB-90 I-120 IB-120 I-7D IB-7D
Grupos
20
Apoptosis
en 1000 μ2
10
0

66. EFECTO PROTECTOR DE
NUTRI-SIM
ISQUEMIA + NS 7 DIAS
TESTIGO
ISQUEMIA 7 DIAS