GUÍA DE PRÁCTICAS
 Practica Nº 1. Morfología y procedencia tisular de frutas y hortalizas.
 Practica Nº 2. Perecibilidad...
PRACTICA Nº 1
MORFOLOGÍA Y PROCEDENCIA TISULAR DE FRUTAS Y
HORTALIZAS.
Introducción
Las frutas que consumimos comúnmente p...
Procedimiento
Se clasificara todo el material vegetal presente en frutas y hortalizas,
procediendo a realizar cortes trans...
CUESTIONARIO
1. ¿Qué influencia tiene la procedencia tisular en la conservación pos
cosecha?
2. El estudiante hará un repo...
Practica Nº 2
PERECIBILIDAD DE PRODUCTOS HORTÍCOLAS
INTRODUCCIÓN
La pérdida de calidad de los productos hortícolas es el r...
 En cada producto mide individualmente los siguientes parámetros:
 Peso
 Manchas
 Pudriciones
 Textura
Para estas med...
PRACTICA Nº 3
PARÁMETROS DE MADUREZ Y CALIDAD
(FÍSICOS: NO DESTRUCTIVOS).
INTRODUCCIÓN
Los parámetros de madurez fiscos so...
 Cámara fotográfica
 Toallas de papel
 Libreta de apuntes
 Balanza analítica
Métodos
Según el material vegetal que se ...
PRACTICA Nº 4
PARÁMETROS DE MADUREZ Y CALIDAD
(Físicos: destructivos)
INTRODUCCIÓN
Los parámetros de madurez y calidad fís...
 Color de pulpa
 Porcentaje de jugo
 Volumen
El porcentaje de jugo se determinara por la diferencia de peso seco y peso...
PRACTICA Nº 6
PARÁMETROS DE MADUREZ Y CALIDAD
Químicos (Solidos Solubles)
Introducción
El estado de madurez que posean los...
MATERIALES Y MÉTODOS
Materiales
 Frutas y hortalizas en diferentes estados de maduración
 1 tabla de madera
 1 cuchillo...
del campo visual. En elcampo visual, se verá una transición de un campo claro
a uno oscuro.
Leer el número correspondiente...
PRACTICA Nº 5
PARÁMETROS DE MADUREZ Y CALIDAD
Químicos (pH)
INTRODUCCIÓN
La maduración de las frutas está ligada a complej...
Método
Obtención de jugo de frutas
Si el fruto a evaluar no contiene bastante jugo se puede usar un mortero para
chancar l...
PRACTICA Nº 7
PARÁMETROS DE MADUREZ Y CALIDAD
QUÍMICOS(Acidez Total Titulable)
INTRODUCCIÓN
Los ácidos orgánicos presentes...
 Marcador indeleble
 Cámara fotográfica
 Toallas de papel
 Libreta de apuntes
 Equipo de Titulación
 Ácido Clorhídri...
PROCEDIMIENTO:
1. Pipetear una alícuota conocida de
jugo de fruta en un vaso de
precipitado de un tamaño adecuado y
añada ...
CUESTIONARIO
1. Hacer un esquema de la evolución de los cambios químicos que se dan
en la maduración.
2. Determinar el rat...
PRACTICA Nº 8
ACTIVIDAD RESPIRATORIA EN LA MADURACIÓN.
INTRODUCCIÓN
La intensidad respiratoria de un fruto depende de su g...
 agua destilada
 termómetro
 NaOH 5N
 KOH puro
 BaCl saturada
 fenolftaleína (0,5% en etanol)
 HCl
 anaranjado de ...
Un recipiente con KOH: puro para evitar contaminación de lasolución con CO2
atmosférico.
CUIDADOS A TENER EN EL SISTEMA DE...
 Después de un tiempo determinado se retira el recipiente encargado de
capturar el CO2 y se tapa inmediatamente para evit...
Los valores constantes de las ecuaciones corresponden a los pesos
moleculares y factores de conversión involucrados.
Las r...
PRACTICA Nº 9
PIGMENTOS EN FRUTAS Y HORTALIZAS.
INTRODUCCIÓN
Los pigmentos carotenoides son los compuestos responsables de...
1º. Extracción de la mezcla de pigmentos presentes
en las hojas.
Sumerge hojas en agua muy caliente, para inactivar las
en...
2º) Con un cuentagotas pasa la fase inferior (amarilla) a otro tubo de ensayo y
añade 1cc. de hexano. Agita y deja reposar...
PRACTICA Nº 10
CUANTIFICACIÓN DE CLOROFILA
Introducción
En las plantas, la clorofila a es el pigmento involucrado directam...
Materiales
 Material Vegetal
 Morteros
 Etanol al 90 % (Q.P. grado del reactivo: 99.7 %)
 Espectofómetro
 Pipetas
 P...
Cuestionario
1. ¿Por qué se toman las lecturas a esa absorbancia?
2. ¿Cuál es el principio de funcionamiento del espectofó...
PRACTICA Nº 11
DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE ALMIDÓN EN FRUTAS Y USO
DE ADITIVOS
INTRODUCCIÓN
Algunas frutas suelen alm...
A. DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE ALMIDÓN
Hacer cortes transversales en frutas y aplicar el Yodo o Lugol sobre la
superf...
PRACTICA N12
CUANTIFICACIÓN DE ACEITE EN PALTO
Metodo (Soxhlet)
OBJETIVO
Determinar la concentración de la materia grasa c...
PROCEDIMIENTO
Preparación de la muestra:
En muestras con mucha humedad homogeneizar y pesar.
- Secar a 65ºC en estufa por ...
Practica Nº 13
DESTILACIÓN POR ARRASTRE CON VAPOR
INTRODUCCIÓN
La destilación por arrastre con vapor también se emplea con...
MATERIALES
- Matraz Erlenmeyer de 125 ml * 2
- Matraz Erlenmeyer de 250 ml * 2
- Refrigerante para agua c/mangueras 1
- Eq...
volumen del destilado sea de 100 o 150 mL aproximadamente. De este estilado
extraiga totalmente el aceite esencial, coloca...
PRACTICA Nº 14
ENFERMEDADES EN POST COSECHA.
INTRODUCCIÓN
Los hongos constituyen un grupo de organismos distintos de los v...
CUESTIONARIO
1. ¿Se utilizan umbrales de daño económico que se usan en postcosecha?
¿Cuáles son?
2. Realice un esquema de ...
ANEXOS
PRINCIPALES PARÁMETROS QUÍMICOS EN POST COSECHA (GRADOS
BRIX,pH Y ACIDEZ TITULABLE)
¿Qué son los BRIX?
Un grado BRI...
Cuando los iones de hidrógeno superan los iones hidróxido, la solución es ácida. Si
ocurre lo contrario, entonces la soluc...
Tablas de Colores en Algunas Frutas
Escala de Colores de maduración en Plátano
Fuente: Red Internacional para el Mejoramie...
Escala de Colores de maduración en Naranja
Escala de Colores de maduración en Limón
BIBLIOGRAFÍA
 DETERMINACIÓN DE CARACTERÍSTICAS QUÍMICAS DE FRUTAS Y
HORTALIZAS. Ing. Sandra Blandón Navarro. Universidad ...
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  1. 1. GUÍA DE PRÁCTICAS  Practica Nº 1. Morfología y procedencia tisular de frutas y hortalizas.  Practica Nº 2. Perecibilidad de productos hortícolas  Practica Nº 3. Parámetros de madurez y calidad (físicos: no destructivos).  Practica Nº 4.Parámetros de madurez y calidad (físicos: destructivos)  Practica Nº 5.Parámetros de madurez y calidad químicos (solidos solubles)  Practica Nº 6.Parámetros de madurez y calidad químicos (ph)  Practica Nº 7.Parámetros de madurez y calidad químicos (acidez total titulable)  Practica Nº 8.Actividad respiratoria en la maduración.  Practica Nº 9.Pigmentos en frutas y hortalizas.  Practica Nº 10.Cuantificación de clorofila  Practica Nº 11.Determinación de la presencia de almidón en frutas y uso De aditivos  Practica Nº 12.Cuantificación de aceite en palto  Practica Nº 13.Destilación por arrastre con vapor  Practica Nº 14.Enfermedades en post cosecha.
  2. 2. PRACTICA Nº 1 MORFOLOGÍA Y PROCEDENCIA TISULAR DE FRUTAS Y HORTALIZAS. Introducción Las frutas que consumimos comúnmente pueden ser maduras o inmaduras y están constituidas por diferentes tejidos vegetales los que determinaran las características organolépticas de estas así como la vida postcosecha que puedan tener. Objetivos El estudiante reconocerá las diferentes partes de una flor determinando el tejido que origina algunas frutas. El estudiante reconocerá las partes de una planta, y las partes de estas que dan origen a algunas hortalizas. Materiales y métodos Materiales  Frutas y hortalizas  1 tabla de madera  1 cuchillo con filo por equipo  Marcador indeleble  Cámara fotográfica  Toallas de papel  Libreta de apuntes Métodos Según el material vegetal que se disponga, se reunirán en uno o dos grupos dentro del laboratorio para la identificación de los tejidos que dieron origen a las frutas y hortalizas que están en análisis.
  3. 3. Procedimiento Se clasificara todo el material vegetal presente en frutas y hortalizas, procediendo a realizar cortes transversales y longitudinales con el fin de apreciar la estructura interna de estas y determinar su origen tisular. ESQUEMA DE PROCEDENCIA TISULAR
  4. 4. CUESTIONARIO 1. ¿Qué influencia tiene la procedencia tisular en la conservación pos cosecha? 2. El estudiante hará un reporte de todas las muestras vistas en clase y otras más, en un total de 50 (frutas y hortalizas) indicando el nombre común y científico, la morfología e histología así como la procedencia tisular de cada uno.
  5. 5. Practica Nº 2 PERECIBILIDAD DE PRODUCTOS HORTÍCOLAS INTRODUCCIÓN La pérdida de calidad de los productos hortícolas es el resultado de un proceso derivado cuya velocidad depende principalmente del tiempo y de la temperatura, la cual nos da como resultado la existencia de productos perecederos y no perecederos. Por tal motivo es importante que el estudiante realice reconozca que mecanismos permiten a los frutos no perecederos mantenerse por mas tiempo. OBJETIVO  El estudiante demostrara de cierto grupo de productos hortícolas cuales son perecederos y cuáles no.  El estudiante reconocerá los mecanismos de resistencia a la deshidratación y otros mecanismos que permiten a los frutos mantenerse. MATERIALES Y MÉTODO - Frutas y hortalizas - Libreta de apuntes - Cámara fotográfica - Bandejas - Marcador indeleble - Balanza. MÉTODO  Separa las frutas y las hortalizas en bandejas diferentes (de ser el caso usar más de dos bandejas).
  6. 6.  En cada producto mide individualmente los siguientes parámetros:  Peso  Manchas  Pudriciones  Textura Para estas mediciones el estudiante desarrollara su propia escala.  Coloca las bandejas con los productos en un lugar seguro y temperatura ambiente.  Realizar evaluaciones por 15 días. CUESTIONARIO 1. ¿Qué productos hortícolas son más perecederos? ¿por qué? 2. ¿Cuáles son las características más resaltantes en productos perecederos y no perecederos? 3. ¿Qué factores externos e internos determinan el tiempo de vida de un producto?
  7. 7. PRACTICA Nº 3 PARÁMETROS DE MADUREZ Y CALIDAD (FÍSICOS: NO DESTRUCTIVOS). INTRODUCCIÓN Los parámetros de madurez fiscos son de suma importancia puesto que son los que determinaran que un producto sea o no atractivo para el consumidor. La mayoría de parámetros físicos no son destructivos por lo cual muchos consumidores los evalúan al momento de la compra de un producto. Tronstad, 1995 OBJETIVOS  Conocer las técnicas más comunes empleadas para determinar parámetros de calidad en productos vegetales.  Determinar los índices de madurez en diferentes estados fisiológicos. MATERIALES Y MÉTODOS Materiales  Frutas y hortalizas en diferentes estados de maduracion  Marcador indeleble
  8. 8.  Cámara fotográfica  Toallas de papel  Libreta de apuntes  Balanza analítica Métodos Según el material vegetal que se disponga, se reunirán en dos o más grupos dentro del laboratorio para la identificación de parámetros de madurez y calidad. Procedimiento Se evaluara:  Estado de madurez  Color de piel  Aroma  Sabor  Textura  brillantes Para estas evaluaciones el estudiante deberá desarrollar escalas para cada uno de los parámetros a evaluar, clasificando a las frutas dentro de estas. El estudiante deberá buscar escalas colores de las frutas en evaluación para su adecuada clasificación. CUESTIONARIO  ¿Qué normas de calidad debe cumplir un producto para entrar al mercado nacional o al mercado internacional?  ¿Qué compuestos han determinado los cambios observados en las frutas?  ¿Qué características debe tener un producto para destinarse al consumo humano?  ¿Qué métodos utilizan los agricultores y/o empresas para evaluar la calidad de sus productos?
  9. 9. PRACTICA Nº 4 PARÁMETROS DE MADUREZ Y CALIDAD (Físicos: destructivos) INTRODUCCIÓN Los parámetros de madurez y calidad físicos son evaluados por algunos agricultores y algunas empresas de manera artesanal; sin embargo existen parámetros físicos que requieren destruir el fruto para su evaluación OBJETIVOS  Conocer las técnicas más comunes empleadas para determinar parámetros de calidad en productos vegetales.  Determinar los índices de madurez en diferentes estados fisiológicos. MATERIALES Y MÉTODOS Materiales  Frutas y hortalizas en diferentes estados de maduración  Marcador indeleble  Cámara fotográfica  Toallas de papel  Libreta de apuntes  Balanza analítica  Cuchillo con filo  Tabla de madera Método Se evaluara:  Consistencia  Peso de materia seca
  10. 10.  Color de pulpa  Porcentaje de jugo  Volumen El porcentaje de jugo se determinara por la diferencia de peso seco y peso fresco de la pulpa. El volumen se medirá en un vaso de precipitado o un vaso calibrado por desplazamiento del agua al sumergir el fruto. Para la medición de consistencia se hara un corte en la fruta para evitar medir consistencia de la cascara y no de la pulpa, se utilizara el penetrometro, y cuya medida resultante será masa/superficie. Masa = kg Superficie = π x r2= Área CUESTIONARIO 1. ¿Qué compuestos determinan la consistencia de un fruto? 2. ¿De que otras formas se pueden medir el volumen? 3. Hacer curvas de variación de consistencia de acuerdo al estado de madurez del fruto.
  11. 11. PRACTICA Nº 6 PARÁMETROS DE MADUREZ Y CALIDAD Químicos (Solidos Solubles) Introducción El estado de madurez que posean los productos hortofrutícolas al ser cosechados, es especialmente importante para su manejo, transportación y comercialización ya que repercute directamente en su calidad y potencial de almacenamiento. De aquí que el estudio de los conceptos de madurez y calidad, lo que significan y cómo se miden sean aspectos centrales para la tecnología postcosecha. La concentración en sólidos solubles de los zumos se expresa en grados Brix. Originariamente, los grados Brix son una medida de densidad. Un grado Brix es la densidad que tiene, a 20° C, una solución de sacarosa al 1 %, y a esta concentración corresponde también un determinado índice de refrácción. Así pues, se dice que un zumo tiene una concentración de sólidos solubles disueltos de un grado Brix, cuando su índice de refracción es igual al de una solución de sacarosa al 1 % (p/v). Como los sólidos no son solamente sacarosa, sino que hay otros azúcares, ácidos y sales, un grado Brix no equivale a una concentración de sólidos disueltos de 1g/10ml. Los grados Brix son, por tanto, un índice comercial, aproximado, de esta concentración que se acepta convencionalmente como si todos los sólidos disueltos fueran sacarosa. Objetivos  Evidenciar los cambios químicos en la madurez a través de la medición de los grados Brix  Conocer la variación de grados Brix según el estado de madurez del fruto.  Conocer los principales azucares que predominan en las frutas.
  12. 12. MATERIALES Y MÉTODOS Materiales  Frutas y hortalizas en diferentes estados de maduración  1 tabla de madera  1 cuchillo con filo por equipo  Marcador indeleble  Cámara fotográfica  Toallas de papel  Libreta de apuntes  Refractómetro  Balanza analítica  Agua destilada.  Termómetro ambiental Método Obtención de jugo de frutas Si el fruto a evaluar no contiene bastante jugo se puede usar un mortero para chancar la pulpa y colar posteriormente en una tela de organza Medición de solidos solubles El contenido de sólidos solubles se determina con el índice de refracción. Este método se emplea mucho para determinar la concentración de sacarosa en frutas y hortalizas, se procede de la siguiente manera: Poner una o dos gotas de la muestra de jugo sobre el prisma. Cubrir el prisma con la tapa con cuidado. Al cerrar, la muestra debe distribuirse sobre la superficie del prisma. Orientando el aparato hacia una fuente de luz, mirar a través
  13. 13. del campo visual. En elcampo visual, se verá una transición de un campo claro a uno oscuro. Leer el número correspondiente en la escala. Este corresponde al porcentaje en sacarosa de la muestra. Luego abrir la tapa y limpiar la muestra del prisma con un pedazo de algodón limpio y mojado. Cuidar de no limpiar el prisma con algún material que pueda causar ralladuras al prisma CUESTIONARIO 1. ¿Cómo cuantificarías cada uno de los azucares presentes en una fruta? 2. ¿Cuál es el principio de funcionamiento del refractómetro? 3. ¿Qué compuestos originan la variación de los grados brix en la maduración?
  14. 14. PRACTICA Nº 5 PARÁMETROS DE MADUREZ Y CALIDAD Químicos (pH) INTRODUCCIÓN La maduración de las frutas está ligada a complejos procesos de transformación de sus componentes. Las frutas, al ser recolectadas, quedan separadas de su fuente natural de nutrientes, pero sus tejidos todavía respiran y siguen activos. Para evidenciar cada uno de los cambios producidos en las frutas a causa de su maduración se realizan pruebas químicas. OBJETIVOS  Evidenciar los cambios químicos en la madurez a través de la medición del pH.  Conocer la variación de pH según el estado de madurez del fruto. MATERIALES Y MÉTODOS Materiales  Frutas y hortalizas en diferentes estados de maduración  1 tabla de madera  1 cuchillo con filo por equipo  Marcador indeleble  Cámara fotográfica  Toallas de papel  Libreta de apuntes  pH metro  Balanza analítica  Agua destilada.
  15. 15. Método Obtención de jugo de frutas Si el fruto a evaluar no contiene bastante jugo se puede usar un mortero para chancar la pulpa y colar posteriormente en una tela de organza Medición de pH Se tomara una alícuota del jugo obtenido del fruto y se llevara a lectura directa con el pH metro en un vaso. Después de cada medición el sensor del pH metro será llevado a una vaso con agua destilada con el fin de lavarlo para no perder precisión en una posterior medición. CUESTIONARIO 1. ¿Cuál es el principio de funcionamiento del pH metro? 2. ¿Que representa el valor del pH metro? 3. ¿Por qué varia el pH en la maduración del fruto?
  16. 16. PRACTICA Nº 7 PARÁMETROS DE MADUREZ Y CALIDAD QUÍMICOS(Acidez Total Titulable) INTRODUCCIÓN Los ácidos orgánicos presentes en los alimentos influyenen el sabor, color y la estabilidad de los mismos. Los valores de acidezpueden ser muy variables, por ejemplo, en el caso de las frutas, varían desde0,2 a 0,3 %, en manzanas de poca acidez hasta de 6 % en el limón (al ácidocítrico puede constituir hasta 60 % de los sólidos solubles totales de laporción comestible). Los ácidos predominantes en frutas son: el cítrico (en lamayoría de las frutas tropicales), el málico (Ej. manzana), el tartárico (Ej.uvas y tamarindo). Los productos pesqueros, aves y productos cárnicos sonde acidez muy baja y el ácido predominante es el láctico y no los di o tricarboxílicos característicos de los tejidos vegetales. Esta determinaciónpuede ser también importante en grasas y aceites, jugos de frutas yvegetales, etc. Por ejemplo, el deterioro de granos y productos de moliendava acompañado de un incremento de la acidez. OBJETIVOS  Evidenciar los cambios químicos en la madurez a través de la medición de la acidez de las frutas  Conocer la variación de la acidez titulable según el estado de madurez del fruto.  Conocer los principales ácidos que predominan en las frutas. MATERIALES Y MÉTODOS Materiales  Frutas y hortalizas en diferentes estados de maduración  1 tabla de madera  1 cuchillo con filo por equipo
  17. 17.  Marcador indeleble  Cámara fotográfica  Toallas de papel  Libreta de apuntes  Equipo de Titulación  Ácido Clorhídrico  Balanza analítica  Agua destilada.  Termómetro ambiental MÉTODO Obtención de jugo de frutas Si el fruto a evaluar no contiene bastante jugo se puede usar un mortero para chancar la pulpa y colar posteriormente en una tela de organza Acidez Titulable El método se basa en titular la muestra con solución de hidróxido de sodio (NaOH;0.1N). FUNDAMENTO: En el procedimiento usual para determinar laconcentración total de ácidos, una alícuota de la solución que contiene elácido se titula con una solución base hasta el punto en el cual estas se neutralizan. La siguiente formula se aplica para determinar el porcentaje de acidez de la fruta evaluada; los meq. De ácido serán de acuerdo al acido principal del fruto. % 𝑑𝑒 𝑎𝑐𝑖𝑑𝑒𝑧 = 𝑚𝑙 𝑁𝑎𝑂𝐻 𝑥 𝑁 𝑁𝑎𝑂𝐻 𝑥 𝑚𝑒𝑞. 𝑎𝑐𝑖𝑑𝑜 𝑥 𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑖𝑙. 𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑡𝑖𝑡𝑢𝑙𝑎𝑑𝑎 𝑥 100
  18. 18. PROCEDIMIENTO: 1. Pipetear una alícuota conocida de jugo de fruta en un vaso de precipitado de un tamaño adecuado y añada agua destilada para obtener un mayor volumen. 2. Determinar el pH. 3. Agregar 4 o 5 gotas de fenoltaleina u otro indicador y homogenizar. 4. Llevar a titulación agregando NaOH;0.1N hasta que la solución cambie de color lo que indicara que el ácido presente ha sido neutralizado. 5. Medir nuevamente el ph para determinar a qué pH se neutralizaron los ácidos. Principales ácidos presentes en las frutas
  19. 19. CUESTIONARIO 1. Hacer un esquema de la evolución de los cambios químicos que se dan en la maduración. 2. Determinar el ratio de las frutas evaluadas y hacer las curvas correspondientes según el estado de madurez de la fruta. 3. ¿Cuál es el fundamento del proceso de titulación? 4. ¿Cómo determinaría la cantidad de cada uno de los ácidos presentes en las frutas?
  20. 20. PRACTICA Nº 8 ACTIVIDAD RESPIRATORIA EN LA MADURACIÓN. INTRODUCCIÓN La intensidad respiratoria de un fruto depende de su grado de desarrollo y se mide como la cantidad de CO2 (miligramos) que desprende un kilogramo de fruta en una hora. A lo largo del crecimiento se produce, en primer lugar, un incremento de la respiración, que va disminuyendo lentamente hasta el estado de maduración. Sin embargo, en determinadas frutas después de alcanzarse el mínimo se produce un nuevo aumento de la intensidad respiratoria hasta alcanzar unvalor máximo, llamado pico climatérico, después del cual la intensidad respiratoria disminuye de nuevo; estas frutas son llamadas "frutas climatéricas". OBJETIVOS  Comprender la respiración como un parámetro cambiante en la maduración de las frutas.  Determinar los cambios en los niveles de la respiración de un fruto en diferentes estados de maduración. MATERIALES Y MÉTODOS Materiales  Frutas y hortalizas en diferentes estados de maduración  Marcador indeleble  Cámara fotográfica  Toallas de papel  Libreta de apuntes  Equipo de respiración.  Balanza  Cronómetro  Equipo de Titulación  KOH  gel de sílice azul granulado
  21. 21.  agua destilada  termómetro  NaOH 5N  KOH puro  BaCl saturada  fenolftaleína (0,5% en etanol)  HCl  anaranjado de metilo 0,5% en agua Método El equipo utilizado consta de las siguientes partes: Compresor de aire: es el que suministra un flujo de aire por todoel sistema, a través de mangueras de goma, para la remoción de los gases metabólicos producidos en larespiración y para proporcionar el O2 necesario para ésta. Tres columnas de mangueras de goma rellenas de gel de sílice azul granulado (1-3mm)que eliminan el vapor de aguacontenido en el aire, evitando su reacción con el KOH. Un recipiente de KOH: que suprime por adsorción el CO2 contenido naturalmente en el aire. Un recipiente con agua destilada libre de CO2 que hidrata por burbujeo el aire libre de CO2 proveniente del recipiente anterior, reponiendo así la humedad relativa eliminada por la sílica gel y reduciendo las pérdidas de peso por desecación de las frutas. Una cámara: lo suficientemente grande para colocar los frutos a evaluar, con un termómetro en su interior para medir la temperatura. Un recipiente con 80ml de solución 5N de NaOH: donde burbujea y es absorbido el CO2 desprendido en el proceso de respiración.
  22. 22. Un recipiente con KOH: puro para evitar contaminación de lasolución con CO2 atmosférico. CUIDADOS A TENER EN EL SISTEMA DE RESPIRACIÓN  Todo el sistema debe quedar herméticamente cerrado para evitar la fuga de CO2.  Las mangueras que se utilizaron fueron de 7mm de diámetro interior, 25mm de diámetro superior y450mm de largo  Antes de conectar la manguera de suministro de aire proveniente del compresor al sistema, se debe asegurar que lapresión sea la adecuada, de manera que los tapones degoma que éstas poseen no sedesprendan.  El gel de sílice debe ser sustituido por reactivonuevo o regenerado cada vezque su color haya virado de azul a rosa; la observación dehumedad en las perlas deKOH en el recipiente encargado de la adsorción del CO2 indica que éstas deben ser reemplazadas, de manera tal que se evite la formación de un conglomerado que cierre los intersticios por los que circula la corriente de aire  La normalidad (5N) de la solución de NaOH, necesaria para la recolección del CO2 proveniente de la respiración, se estimó a partir de datos de tasas de respiración señalados en ASHRAE (1970), Ryall y Pentzer (1974), Pantastico (1975) y Ryall y Lipton (1979).
  23. 23.  Después de un tiempo determinado se retira el recipiente encargado de capturar el CO2 y se tapa inmediatamente para evitar contaminación con el CO2 ambiental.  Se toma una alícuota de 20ml de la solución, a la cual se añade 5ml de solución de BaCl saturada y 5 gotas de indicador fenolftaleína (0,5% en etanol) para ser sometida a titulación con una solución de HCl estándar (2,3824N; volumen VF) hasta la desaparición del color, obteniéndose de esta forma la concentración en ppm de BaCO3 o alcalinidad fenolftaleínica (AF).  Inmediatamente después se agrega tres gotas de anaranjado de metilo 0,5% en agua y se titula con HCl 2,3824N (volumen VT) hasta observar la aparición de un color rubí anaranjado transparente.  Con la suma de los volúmenes de HCl gastados en ambas titulaciones se obtuvo la alcalinidad total (AT). A partir de estos valores, mediante las ecuaciones (1) a (4), se calcularon el BaCO3 (ppmCar) y el CO2 (mgCO2) presentes en la solución. ECUACIONES 𝑝𝑝𝑚𝐶𝑎𝑟 = 2 𝑥 ( 𝐴 𝑇 − 𝐴 𝐹) (1) 𝑚𝑔𝐶𝑂2 = 𝑝𝑝𝑚𝐶𝑎𝑟 𝑥 𝑉𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑥 (44 197,34⁄ ) (2) Donde 𝐴 𝑇 = 𝑉 𝑇 𝑥 𝑁 𝐻𝐶𝐿 𝑥 98,67 𝑥 1000 𝑉 𝑎𝑙𝑖𝑐𝑢𝑜𝑡𝑎 (3) 𝐴 𝐹 = 𝑉 𝐹 𝑥 𝑁 𝐻𝐶𝐿 𝑥 98,67 𝑥 1000 𝑉 𝑎 𝑙𝑖𝑐𝑢𝑜𝑡𝑎 (4)  NHCl= 2,3824N  Valícuota= 20ml  Vmuestra= 0,08l.
  24. 24. Los valores constantes de las ecuaciones corresponden a los pesos moleculares y factores de conversión involucrados. Las reacciones que tienen lugar son 2NaOH + CO2 ® Na2CO3 + H2O Na2CO3 + BaCl2 ® BaCO3 + 2NaCl BaCO3 + 2HCl ® CO2 + BaCl2 + H2O CUESTIONARIO 1. ¿Por qué se incrementa la respiración con la maduración? 2. De un comentario acerca de la precisión del método usado para medir la respiración. 3. Realice las curvas de variación de respiración en varios frutos.
  25. 25. PRACTICA Nº 9 PIGMENTOS EN FRUTAS Y HORTALIZAS. INTRODUCCIÓN Los pigmentos carotenoides son los compuestos responsables de la coloración de gran número de alimentos vegetales, su pérdida, además de producir cambios de color en el alimento, conlleva una disminución de su valor nutritivo. La inestabilidad de los carotenoides se debe al hecho de que son compuestos altamente insaturados, degradándose fundamentalmente debido a procesos oxidativos. Otros factores como la temperatura, la luz o el pH también pueden producir importantes cambios cualitativos en estos compuestos debido a reacciones de isomerización OBJETIVOS Conocer los pigmentos presentes en diferentes muestras vegetales, así como su variación en el proceso de madurez. MATERIALES Y MÉTODOS Materiales  Materiales vegetales  Cuchillo con filo  cuentagotas  Tubos de ensayo  Recipiente para agua caliente  Alcohol etílico 96º  Hexano  Metanol Métodos
  26. 26. 1º. Extracción de la mezcla de pigmentos presentes en las hojas. Sumerge hojas en agua muy caliente, para inactivar las enzimas oxidantes que podrían alterar los pigmentos Pon en un tubo de ensayo hojas troceadas y cúbrelas con alcohol etílico de 96º. Coloca el tubo en un baño de agua caliente y macéralo, obteniendo una disolución de color verde oscuro. Filtra el contenido del tubo y tendrás la solución que contiene los pigmentos. 2º. Separación de los pigmentos por solubilidad diferencial. Vierte en un tubo de ensayo 5cc. de solución de pigmentos y añade hexano, agítalo y seguidamente añade otros 5cc. de agua y agita de nuevo. Al dejar reposar el tubo se aprecian dos fases: verde (clorofilas) y amarillo (carotenoides). 3º. Separación de clorofilas y carotenoides. 1º) Con un cuentagotas pasa la fase superior (verde) a otro tubo de ensayo y añade 2cc. de metanol. Agita y deja reposar el tubo.
  27. 27. 2º) Con un cuentagotas pasa la fase inferior (amarilla) a otro tubo de ensayo y añade 1cc. de hexano. Agita y deja reposar el tubo. 4º. Separación de los pigmentos vegetales mediante cromatografía en papel. Vierte en una placa petri la solución de pigmentos vegetales e introduce un papel de filtro doblado; al cabo de media hora se observan bandas de colores, de los pigmentos. CUESTIONARIO 1. ¿Por cuál de los disolventes muestra mayor afinidad cada uno de los dos pigmentos, teniendo en cuenta que el metanol es más denso que el hexano? 2. ¿Por qué unos pigmentos recorren mayor distancia que otros? 3. ¿Se realizan pruebas de pigmentos fotosintéticos para evaluar la madurez de frutos? ¿Por qué?
  28. 28. PRACTICA Nº 10 CUANTIFICACIÓN DE CLOROFILA Introducción En las plantas, la clorofila a es el pigmento involucrado directamente en la transformación de la energía lumínica en energía química, las células fotosintéticas casi siempre contienen un segundo tipo de clorofila, la clorofila b y otro grupo de pigmentos llamados carotenoides. Uno de los carotenoides que se encuentran en las plantas es el ß-caroteno; los carotenoides son pigmentos rojos, anaranjados o amarillos, que en las hojas verdes están enmascarados por las clorofilas, que son más abundantes; sin embargo en algunos tejidos, como los del tomate maduro, predominan los colores reflejados por los carotenoides. Las otras clorofilas y los carotenoides pueden absorber luz de longitudes de onda diferentes de las que absorbe la clorofila a. Estos pigmentos actúan como pantallas que transfieren la energía a la clorofila a, extendiendo así la gama de luz disponible para la fotosíntesis. La clorofila puede convertir energía lumínica en energía química solamente cuando está asociada con ciertas proteínas e incluida en una membrana especializada, y sin embargo, sólo una fracción muy pequeña de la luz dentro del espectro visible que incide en las hojas de las plantas es finalmente transformada en energía química. OBJETIVOS  Conocer la variación de la Clorofila a según el estado de madurez del fruto. MATERIALES Y MÉTODO
  29. 29. Materiales  Material Vegetal  Morteros  Etanol al 90 % (Q.P. grado del reactivo: 99.7 %)  Espectofómetro  Pipetas  Probetas y tubos de prueba MÉTODO Colocar 0.5g de tejido vegetal cortado en pequeños trozitos en vasos de precipitación con agua destilada y un poco de carbonato de calcio de manera que se cubra la muestra vegetal Se lleva a hervir por un minuto, para luego ser llevado a un mortero con ayuda de una pinza y se macero con un poco de etanol al 96%, se llevó el extracto a una probeta y se enraso a 5 ml con el mismo etanol. Se agito y dejo reposar por 10 minutos. Después se centrifugo a 3000 rpm por 5 minutos Determinación del contenido de clorofila: Las lecturas de absorbancia del extracto diluido se toman a longitudes de onda de 649 nm y 665 nm, previo calibrado del espectofómetro antes de cada lectura se con el solvente puro (etanol 96 %) a una longitud de onda entre 649 nm y 665 nm. Estas lecturas permiten estimar el contenido de las clorofilas a y b; haciendo uso de las ecuaciones de Wintermans y De Mots. Clorofila a = (13.7 x A665) – (5.76 x A649) = g/ml Clorofila b = (25.8 x A649) – (7.6 x A 6659 = g/ml Clorofila a + b = (6.1 x A665) – (20.04 x A649) = g/ml Con los datos obtenidos: Calcular la cantidad en miligramos de clorofilas a, b y a + b por gramo de peso fresco de tejido.
  30. 30. Cuestionario 1. ¿Por qué se toman las lecturas a esa absorbancia? 2. ¿Cuál es el principio de funcionamiento del espectofómetro? 3. Haga las curvas de variación de clorofila a y b con la madurez
  31. 31. PRACTICA Nº 11 DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE ALMIDÓN EN FRUTAS Y USO DE ADITIVOS INTRODUCCIÓN Algunas frutas suelen almacenar almidón como hidrato de carbono de reserva durante su crecimiento. El almidón puede hidrolizarse durante la maduración dando lugar a azúcares simples que otorgan sabor a la fruta. Este proceso sucede aunque la fruta sea separada de la planta inmediatamente antes de madurar (estado preclimatérico). Por ello, se suele aprovechar este carácter para recolectar ese tipo de fruta en estado preclimatérico, para almacenarla en condiciones controladas de forma que la maduración no tenga lugar hasta el momento de la comercialización. OBJETIVOS  Comprobar la presencia de almidón en frutas en diferentes estados de maduración.  Determinar la acción del ácido cítrico y ácido ascórbico en las frutas MATERIALES Y MÉTODO Materiales  Material vegetal  Cuchillo con filo  Yodo o Lugol  Cámara fotográfica  Toallas de papel  Libreta de apuntes Métodos
  32. 32. A. DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE ALMIDÓN Hacer cortes transversales en frutas y aplicar el Yodo o Lugol sobre la superficie de la pulpa y esperar unos 10 minutos. Hacer escalas para dar un valor de almidón a todas las muestras presentes. B. ACCIÓN DE ADITIVOS EN FRUTAS 1. Corte la manzana en 9 partes, de tamaño aproximadamente igual. 2. Coloque 3 trozos en 1 hoja, enumere cada trozo como T1, T2 y T3, haga lo mismo en la hoja 2 y la hoja 3. 3. Los T1 no recibirán ningún tratamiento. 4. Sumerja el cepillo dentro del ácido cítrico y aplique esto a los T2. Después enjuague el cepillo e introdúzcalo en ácido ascórbico y aplíquelo a los T3. Observe los cambios que ocurren durante 1 hora. Explique lo que ocurre aquí. CUESTIONARIO 1. ¿Qué técnicas se pueden usar para cuantificar almidón? 2. ¿Qué reacción se da en la fruta al aplicar ácido cítrico o ácido ascórbico? 3. Explique los resultados de la adición de ácido cítrico y ácido ascórbico.
  33. 33. PRACTICA N12 CUANTIFICACIÓN DE ACEITE EN PALTO Metodo (Soxhlet) OBJETIVO Determinar la concentración de la materia grasa cruda o extracto etéreo libre. CAMPO DE APLICACIÓN El método es aplicable en muestras de alimentos en general y en alimentos que no han sido sometidos a tratamiento térmico. (carnes, cereales, granos de semilla, sopas, etc ) FUNDAMENTO Una cantidad previamente homogeneizada y seca, medida o pesada del alimento se somete a una extracción con éter de petróleo o éter etílico o hexano libre de peróxidos. Posteriormente, se realiza la extracción total de la materia grasa libre por soxhlet. REFERENCIAS Official Methods of Analysis A.O.A.C. 15th Edition, USA (1990) MATERIAL Y EQUIPO  Sistema Extractor Soxhlet  Balanza  Papel filtro o papel crack  Estufa  Tamiz  Piedra pómez procesada  Equipo Soxhlet  Material usal de laboratorio Reactivos  Hexano
  34. 34. PROCEDIMIENTO Preparación de la muestra: En muestras con mucha humedad homogeneizar y pesar. - Secar a 65ºC en estufa por un lapso de 24 horas, siempre considerando el tipo de muestra. - Pesar la muestra luego de haber sido sometida a estufa - Poner el matraz de extracción en el sistema soxhlet junto con la muestra en el tubo de extracción y adicionar el solvente al matraz. - Extraer la muestra con el solvente por 6 a 8 horas a una velocidad de condensación de 3 – 6 gotas / segundo. - Extraer la muestra y someterla a estufa por 30 minutos. A una temperatura de 30ºC. - Pesar la muestra una vez salida de la estufa. CALCULO El cálculo se hallara por muestra de peso CUESTIONARIO 1. ¿Cuál es el principio de funcionamiento del Soxhlet? 2. ¿Qué compuestos originan la acumulación de aceites en las plantas? 3. ¿Cómo variara la concentr4acion de aceites en las plantas con la madurez?
  35. 35. Practica Nº 13 DESTILACIÓN POR ARRASTRE CON VAPOR INTRODUCCIÓN La destilación por arrastre con vapor también se emplea con frecuencia para separar aceites esenciales de tejidos vegetales. Los aceites esenciales son mezclas complejas de hidrocarburos, terpenos, alcoholes, compuestos carbonílicos, aldehídos aromáticos y fenoles y se encuentran en hojas, cáscaras o semillas de algunas plantas. En el vegetal, los aceites esenciales están almacenados en glándulas, conductos, sacos, o simplemente reservorios dentro del vegetal, por lo que es conveniente desmenuzar el material para exponer esos reservorios a la acción del vapor de agua. Los aceites esenciales son productos naturales aplicados en diferentes industrias, como son la farmacéutica, alimenticia, en perfumería, entre otros usos. Actualmente, se constituyen en productos alternativos para la elaboración de biopesticidas o bioherbicidas. La obtención de los aceites esenciales es realizada comúnmente por la tecnología llamada de destilación por arrastre con vapor, en sus diferentes modalidades. La pureza y el rendimiento del aceite esencial dependerán de la técnica que se utilice para el aislamiento. OBJETIVOS a) Conocer las características y modificaciones de esta técnica, así como los factores que intervienen en ellas. b) Aislar el aceite esencial de un producto natural utilizando la destilación por arrastre con vapor. c) Comparar la eficiencia y selectividad de cada una de éstas técnicas en el aislamiento del aceite esencial.
  36. 36. MATERIALES - Matraz Erlenmeyer de 125 ml * 2 - Matraz Erlenmeyer de 250 ml * 2 - Refrigerante para agua c/mangueras 1 - Equipo adecuado para arrastre con vapor (armado; tubos y tapones) 1 - Colector 1 - Embudo de vidrio 1 - Probeta de 25 ml * 1 - Vaso de pp. de 250 ml * 2 - Tubo capilar 1 - Frasco “vial” 1 - Frasco para cromatografía 1 - Portaobjetos 2 - Embudo de separación de 250 ml con tapón 1 - Espátula 1 - Anillo de hierro 1 - Mechero con manguera 1 - Tela de alambre con asbesto 1 - Pinza de tres dedos con nuez 4 - Recipiente de peltre 1 PROCEDIMIENTO Coloque el agua destilada en el matraz no. 1: generador de vapor y agregue cuerpos porosos. En el matraz no. 2 coloque el té limón cortado en trozos pequeños. Al tapar este matraz, cuide que la conexión de vidrio no se obstruya con los trozos de té limón; pues de ser así, no habrá paso de la corriente de vapor. Caliente con el mechero el matraz no. 1 hasta ebullición, con el fin de generar el vapor que pasará al matraz no. 2, extrayéndose de esta manera el aceite esencial de té limón; el cual es inmediatamente arrastrado por el vapor de agua en un proceso de codestilación (Nota 1). Suspenda el calentamiento cuando el
  37. 37. volumen del destilado sea de 100 o 150 mL aproximadamente. De este estilado extraiga totalmente el aceite esencial, colocando en el embudo de separación el destilado y separando la mayor parte de la fracción acuosa. Al aceite sobrenadante (unas cuantas gotas), agregue 5 mL. de acetato de etilo para facilitar su separación. La fase acuosa se desecha y el extracto orgánico se colecta en un matraz Erlenmeyer o un vaso de precipitados, agregue entonces la cantidad necesaria de sulfato de sodio anhidro para eliminar el agua remanente. Filtre o decante el extracto seco y colóquelo en un vial. Finalmente, realice una c.c.f. para comprobar el grado de pureza del aceite obtenido. (Ver el inciso D). CUESTIONARIO a) ¿A qué se le llama destilación por arrastre con vapor? b) ¿Qué son los aceites esenciales? Dé tres ejemplos. c) Explique qué material usó y qué resultados obtuvo en su destilación por arrastre con vapor.
  38. 38. PRACTICA Nº 14 ENFERMEDADES EN POST COSECHA. INTRODUCCIÓN Los hongos constituyen un grupo de organismos distintos de los vegetales y de los animales. Aunque sus células poseen una pared que en algunos casos puede ser celulosa, como la de los vegetales, generalmente está compuesta de quitina. Además, no tienen clorofila, con lo que no pueden realizar la fotosíntesis, y para vivir necesitan nutrirse de materia orgánica, como ocurre con las células de los animales. OBJETIVOS  Identificar los patógenos que pueden causar enfermedades en postcosecha  Conocer las enfermedades más comunes producidas por hongos en postcosecha MATERIALES Y MÉTODOS Materiales  Material vegetal enfermo  Cuchillo con filo  Porta y cubre objetos  Microscopio  Libreta de apuntes  cámara Método Visualización directa y a través de microscopios Se separara el material vegetal de acuerdo a signos visibles que presenten anotando las observaciones.
  39. 39. CUESTIONARIO 1. ¿Se utilizan umbrales de daño económico que se usan en postcosecha? ¿Cuáles son? 2. Realice un esquema de las muestras observadas determinando el tipo de daño y agente causal. 3. Comente sobre problemas fitosanitarios en postcosecha en nuestra región.
  40. 40. ANEXOS PRINCIPALES PARÁMETROS QUÍMICOS EN POST COSECHA (GRADOS BRIX,pH Y ACIDEZ TITULABLE) ¿Qué son los BRIX? Un grado BRIX es 1 gramo de sacarosa disuelto en 100 gramos de solución, asi se representa la densidad de la solución como porcentaje del peso. En el caso de las frutas y verduras que contienen solidos disueltos otros a la sacarosa los BRIX representaran el porcentaje de estos en la solución. A menudo BRIX se conoce como el "azúcar" o contenido de sacarosa de la planta, pero esta es una visión muy simplista e incompleta. Aunque un alto valor BRIX ciertamente indica el contenido de azúcar, en realidad se refiere a los sólidos solubles totales en el jugo o la savia de la planta. El total sólidos solubles en frutas y verduras se refiere no sólo a la sacarosa (azúcar), sino también a la fructuosa, vitaminas, minerales, aminoácidos, proteínas, hormonas y otros sólidos. Cuanto mayor sea el valor BRIX más valor nutritivo tiene el fruto. Refractometría La refractometría se basa en los cambios del índice de refracción que sufre una sustancia cuando otra es disuelta en ella. Si consideramos el jugo de fruta como una sustancia constituida por agua, su índice de refracción será mayor cuanto mayor sea la cantidad de azúcar presente en ella. Existen diversos instrumentos que miden esta variación, pero el más útil para nuestros fines es el refractómetro de mano. Éste consiste de un tubo con un prisma en su interior que dirige el rayo de luz incidente hacia una escala observable en un ocular. Al colocar una muestra líquida sobre el prisma (dos o tres gotas) , ésta ocasiona una desviación proporcional a la cantidad de sólidos disueltos. Esta desviación es leida en la escala como porcentaje de azúcar, conocida también como grados Brix. ¿Qué es el pH? La fórmula del agua es H2O. La mayoría de las moléculas en el agua son en esa forma extremadamente estable; sin embargo, un porcentaje muy pequeño de estas moléculas se fragmenta en iones de hidrógeno (H +) e iones hidróxido, OH (-), como se ilustra en la figura. En realidad, este equilibrio de los iones hidrógeno e iones hidróxido determina el pH del agua.
  41. 41. Cuando los iones de hidrógeno superan los iones hidróxido, la solución es ácida. Si ocurre lo contrario, entonces la solución es alcalina. La estabilidad de las proteínas es influida por la actividad del Ion hidrógeno por lo cual es importante tener en cuenta el pH en la conservación de frutas. Como se Mide Un medidor de pH típico consta de una sonda de medición especial (un electrodo de vidrio ) conectado a un medidor electrónico que mide y muestra la lectura del pH. La sonda de pH mide el pH como la actividad de los cationes de hidrógeno que rodean un bulbo de vidrio de paredes delgadas en su punta. La sonda produce un pequeño voltaje (aproximadamente 0,06 voltios por unidad de pH) que se mide y se muestra como unidades de pH por el medidor. ¿QUÉ ES LA ACIDEZ TOTAL TITULABLE? La Acidez Total Titulable es una medida de todos los iones hidrógeno presentes en una muestra. Muchos factores pueden contribuir a la acidez deuna muestra, incluyendo los ácidos fuertes (clorhídrico, sulfúrico, nítrico, etc.), ácidos débiles (ácidos orgánicos) y otras especies (aluminio,hierro, etc.). La acidez total puede ser medida por titulación con un álcali hasta un punto final que depende del indicador seleccionado y el resultado se puede expresar en términos de un ácido en particular. El valor de la titulación no indica si los ácidos que están presentes son fuertes o débiles (Reyna, 2009). En muchos casos, el conocer la actividad el Ion hidrógeno es de mayor utilidad que la acidez titulable. Durante la conservación de alimentos y en el deterioro de éstos, pueden presentarse cambios debidos a la acción enzimática y al desarrollo de microorganismos. La intensidad de estos cambios es influida marcadamente por la concentración del ion hidrógeno, más que por la acidez titulable.
  42. 42. Tablas de Colores en Algunas Frutas Escala de Colores de maduración en Plátano Fuente: Red Internacional para el Mejoramiento del Banano y el Plátano
  43. 43. Escala de Colores de maduración en Naranja
  44. 44. Escala de Colores de maduración en Limón
  45. 45. BIBLIOGRAFÍA  DETERMINACIÓN DE CARACTERÍSTICAS QUÍMICAS DE FRUTAS Y HORTALIZAS. Ing. Sandra Blandón Navarro. Universidad Nacional de Ingeniería. UNI-Norte. Nicaragua. Disponible en: http://www.google.com.pe/url?sa=t&rct=j&q=determinaci%C3%B3n%20d e%20caracter%C3%ADsticas%20qu%C3%ADmicas%20de%20frutas%2 0y%20hortalizas&source=web&cd=3&ved=0CFoQFjAC&url=http%3A%2 F%2Fslbn.files.wordpress.com%2F2008%2F08%2Fpractica-de- laboratorio_determinacion-de-la-composicion-de- frutas.doc&ei=6TuvT6WTA4jq6gG83qitCQ&usg=AFQjCNFUFJXik4F8Qa w0Fk0fY_v5XpaWIQ&cad=rja  APLICACIÓN DE PARÁMETROS DE MADUREZ Y CALIDAD Dra. Elsa Bosquez M. Práctica de Laboratorio NUM. 2 Universidad Autónoma Metropolitana – Mexico. Disponible en: http://docencia.izt.uam.mx/elbm/233248/practicas/practica2.pdf  EXTRACCIONES CON SOXHLET. Carlos Eduardo Núñez. 2008. Disponible en: http://www.cenunez.com.ar/archivos/39- ExtraccinconequipoSoxhlet.pdf  ELECTRODOS PARA MEDIR PH. Ing. Quim. Juan Bussi - XIII Seminario de Ing. Biomédica 2004. Facultades de Medicina e Ingeniería – Univ. de la República Oriental del Uruguay. Disponible en: http://www.nib.fmed.edu.uy/Ciganda.pdf  MÉTODOS DE SEPARACIÓN POR EXTRACCIÓN CON SOLVENTES. Laboratorio De Química Analítica E Instrumental. Universidad de Bogotá. Jorge Tadeo Lozano. Disponible en: http://www.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/an alitica_instrumental/guia_2_1.pdf  EXTRACCIÓN Y SEPARACIÓN DE PIGMENTOS VEGETALES MANCILLA, C. G. E.; CASTREJÓN, C. R.; ROSAS, T. M; BLANCO, E. Z. y PÉREZ, S. L. J. Universidad del Valle de México. Disponible en: http://es.scribd.com/doc/16675209/6-EXTRACCION-Y-SEPARACION- DE-PIGMENTOS-VEGETALES

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