laboratorio biocel

1. MARCO TEORICO
Célula Procariota
Las células procariotas carecen de membrana nuclear y su material hereditario está
contenido en una sola molécula de ADN desnuda libre de proteínas .Los únicos organismos
procarioticos que se conocen son las bacterias y las cianobacterias (denominadas antes algas
azul verdosas) todos los demás organismos son eucariotas.
Las bacterias son seres unicelulares microscópicos cuyo tamaño varia de 1 a 10 micrómetros
de largo por 0,5 a 2 micrómetros de ancho. Estas tienen diferente forma ,las células esféricas
se denominan cocos y presentan un ordenamiento en cadena llamada estreptococos cuando
el plano de división celular es uno solo; también pueden estar en racimos denominados
estafilococos o también en parejas llamados diplococos. Las células de forma cilíndrica y
abastonada se denominan bacilos y en algunas especies presentan un ordenamiento en
pares (diplobacilos) o en cadenas (estreptobacilos). Las células espiraladas se denominan
espirilos y se presentan predominantemente en forma individual. Las espiraladas
incompletas se denominan vibriones (bacterias en forma de coma)
Presentan las siguientes partes:
Pared Celular: Responsable de la forma de la célula bacteriana .Se distinguen dos tipos los
gramnegativo y grampositivos, en ambos casos la pared está constituida por una capa basal
rígida formada por peptidoglucano. En los grampositivos el peptidoglucano es muy grueso y
a él se asocian proteínas. En los gramnegativos la pared celular es delgada y sobre el existe
otra capa de lípidos asociados a polisacáridos y proteínas
Membrana Celular: Bicapa lipoproteica que presenta repliegues internos llamados
mesosomas que sirven de punto de unión del ADN y poseen una serie de sistemas
enzimáticos relacionados a la síntesis de compuestos y la respiración
Citoplasma : Carecen de mitocondrias y otras organelas membranosas propias de la célula
eucariota
Región Nuclear (Nucleoide): Formado por un ADN circular de doble hebra, desprovisto de
proteínas
Algunas poseen:
Capsula: Formado de polisacáridos que forman una capa protectora adicional
Flagelos: Medios de locomoción
Pili o Fimbrias: Adherencia al sustrato y intercambio de material genético durante la
conjugación

2. OBJETIVOS
 Identificar y diferenciar las bacterias por el método de tinción
Gram
 Reconocer las diferentes morfologías que presentan las
bacterias
 Reconocer las características de las cianobacterias

3. MATERIALES
Cubreobjetos Porta Objetos Mondadientes
Lugol Cristal violeta Alcohol acetona
Safranina
Nostoc

4. PROCEDIMIENTO
OBSERVACION DE CIANOBACTERIAS:
 Primeramente se disgrego un trozo de nostoc
 Luego se colocó una gota de agua en el portaobjetos
 Después se le agrego el nostoc colocándolo sobre la gota de agua
 Se cubre con un cubreobjetos procurando que no quede burbujas de
aire
 La muestra se coloca al microscopio para observarla y se le enfoca con
el objetivo 10x
 Luego se observa con los objetivos 10x y 40x
 Se identificó las células vegetativas y los heterocistes

5. METODO DE TINCION GRAM PARA LAS BACTERIAS
 Primero en una lámina limpia se echó una gota de suero fisiológico
 Con el mondadientes se procedió al raspado del sarro dentario
 Con la gota de suero y el mondadientes se expandió la muestra sobre la
lámina lo más uniformemente posible y se dejó secar completamente al
aire libre
 Una vez seco se tiñó la muestra con cristal violeta y se lo dejo durante
aproximadamente 2 minutos
 Después se procedió a lavar la muestra con agua procurando que la
lámina este con un ángulo inclinado al pasar por la corriente de agua
 Una vez lavado se colocó lugol ,el cual ayuda más a fijar la muestra, por
aproximadamente 1 minuto
 Se volvió a lavar la muestra de la misma manera que antes
 Se procede a decolorar la muestra con alcohol acetona
 Se volvió a lavar muestra como antes
 Posteriormente se tiño con fucsina básica(safranina) y se lo dejo por
aproximadamente 1 minuto
 Se lavó de la misma manera que en los anteriores y se dejó secar
 Se enfoca la muestra con el objetivo x
 Una vez enfocada se agrega una gota de aceite de inmersión y se
observa con el objetivo 100x(objetivo de inmersión)
El mecanismo de
coloreado de las bacterias
en cada proceso

6. RESULTADOS
Cianobacterias : Nostoc
100x
400x
Se puede observar pequeñas
cadenas de cianobacterias de un
color verde claro disgregadas por
todo el campo de visión
Se observa a más detalle las
cianobacterias en el cual se
puede distinguir los
heterocistes (las células mas
grandes) y las células
vegetativas. También se
observa que los heterocistes
están en forma terminal o
intercaladas

7. Bacterias: Gram positivas y Gram negativas
100x
Con el objetivo de inmersión
1000x
Se puede observar la zona en el cual
presenta coloración para poder
observarlo con el objetivo de
inmersión.
Se observa las bacterias
coloreadas y de diferentes
formas ; una de color rojo el
cual vendrían a ser las gran
negativas y en forma de bacillos.
Otras que tienen forma de coco
y de color violeta las cuales
serían las grampositivos y
forman pares(diplococos),
racimos(estafilococos) y
cadenas(estreptococos)

8. CUESTIONARIO
1. Mencione las características de la célula procariota
 No presentan un sistema de endomembranas
 No presentan núcleo verdadero y el ADN bacteriano es circular de
doble hebra desprovisto de proteínas
 Presentan mesosomas en su membrana celular que cumplen la función
de síntesis de compuestos y respiración
 Algunas poseen capsulas que es una capa de polisacáridos el cual
proporciona una protección adicional
 Poseen pili o fimbrias el cual sirven para la conjugación bacteriana y
adherencia
 Forman esporas el cual son muy resistentes a agentes químicos y físicos
 Presentan flagelos que les proporcionan motilidad
 Sus ribosomas son más pequeños que las de los eucariotas
 Presentan pared celular que da la forma a la bacteria y el cual clasifica a
las bacterias de acuerdo a la tinción gram el cual pueden ser gram
negativas y gram positivas

9. 2. Importancia de las cianobacterias
 Económicas: Son útiles en el sistema agropecuario debido a que
fijan nitrógeno especialmente en el cultivo de arroz y algunas son
estudiadas para la producción de biocombustibles
 Son las formas más antiguas de vida el cual aportaron oxígeno a la
atmosfera y es por eso que tienen una gran importancia en el
evolución del planeta
 Generan materia orgánica para otros seres vivos
 Fijan nitrógeno para las pantas y ciertos organismos
 Intervino en la evolución de las plantas
3. Fundamente el método de tinción Gram.
Las bacterias fijadas al portaobjetos son teñidas con cristal violeta tanto las
grampositivas como las gramnegativas se tiñen.
Luego al cubrir con lugol forma un complejo insoluble en agua con el cristal
violeta; siguen en la misma situación las bacterias gramnegativas y
grampositivas.
Al decolorar la muestra con alcohol acetona las gran positivas no se
decoloran mientras que las gramnegativas si lo hacen. La resistencia a la
decoloración se debe en el caso de las gran negativas la delgada capa de
peptidoglucano es incapaz de retener el complejo insoluble y la bacteria se
decolora, en cambio en las grampositivas al tener su peptidoglucano más
grueso logran retener el complejo insoluble.
Al final al poner la safranina ,el cual es un colorante de contraste de color
rojo, colorean las gramnegativas que quedaron descoloreadas y las
grampositivas permanecen azules.
4.
Esquema que
muestra la diferencia
de espesor de
peptidoglucano
entre las
grampositivas y las
gramnegativas

10. CONCLUSIONES
Al observar el nostoc se pudo identificar 2 tipos de células: las células
vegetativas ,las cuales son las responsables de realizar fotosíntesis, y los
heterocistos ,que se pueden encontrar de forma terminal o intercalada entre
las células vegetativas, cuya función principal es la fijación del nitrógeno de la
atmosfera.
La técnica de tinción Gram resulto de gran ayuda a la hora de hacer las
observaciones y diferenciación de las bacterias del sarro dentario en el cual se
pudo identificar dos tipos de bacterias las grampositivas(violetas) y las
gramnegativas(rojas) el cuales presentaban diferentes formas

11. BIBLIOGRAFIA