RECUENTO BACTERIANO<br />Dra. Natalia Izurieta Cergneux<br />PRÁCTICA No. 4 – LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA Y MICOLOGIA<br />
GENERALIDADES<br /><ul><li>Replicación bacteriana: fisión binaria o bipartición.
De una célula madre se originan dos células hijas idénticas.
Crecimiento ordenado de todos los constituyentes y estructuras celulares.
Aumento exponencial en el número de células.</li></li></ul><li>TIPOS DE CRECIMIENTO<br />CRECIMIENTO INDIVIDUAL<br /><ul><...
CONTEO DE CÉLULAS VIABLES<br />ALIMENTO<br />CAJA PETRI<br />MICROSCOPIO<br /><ul><li>La célula viable es aquella capaz de...
Se basa en que cada colonia surge de una simple célula.
Cada colonia contiene una sola especie bacteriana.</li></li></ul><li>CONTEO DE CÉLULAS VIABLES<br />El número de bacterias...
CONTEO DE CÉLULAS VIABLES<br />MÉTODO DE EXTENDIDO EN PLACA<br /><ul><li>Es el método de elección para anaerobios facultat...
CONTEO DE CÉLULAS VIABLES<br />Útil para la técnica de vertido en placa o extensión en placa.<br />Se siembran volúmenes c...
TÉCNICAS DE RECUENTO<br />Finalizado el tiempo de incubación, se realiza el recuento. <br />Se toman en cuenta únicamente ...
TÉCNICAS DE RECUENTO<br />Para el recuento bacteriano se puede usar cuentacolonias.<br />
RECUENTO CON CUENTACOLONIAS<br />Puede ser contada toda la placa o por cuadrantes. <br />Cuando la carga bacteriana es alt...
CA = 32<br />CM = 19<br />CB = 10<br />Sumatoria<br />Σ = 61<br />Promedio<br />61/3 = 20.33<br />Factor<br />= 20.33*65<b...
OBTENCIÓN DE RESULTADOS<br />Terminado el conteo por cualquier método, se debe aplicar la siguiente fórmula para obtener e...
EJEMPLOS<br />EJEMPLO 2<br />No. de colonias: 56<br />Dilución: 10 -4<br />Volumen de siembra: 0.2 ml<br />UFC/ ml = 56 X ...
Cuando se realiza más de una dilución para cada uno de los parámetros se garantiza los resultados obtenidos. <br />Este mé...
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Laboratorio no. 4 recuento bacteriano

  1. 1. RECUENTO BACTERIANO<br />Dra. Natalia Izurieta Cergneux<br />PRÁCTICA No. 4 – LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA Y MICOLOGIA<br />
  2. 2. GENERALIDADES<br /><ul><li>Replicación bacteriana: fisión binaria o bipartición.
  3. 3. De una célula madre se originan dos células hijas idénticas.
  4. 4. Crecimiento ordenado de todos los constituyentes y estructuras celulares.
  5. 5. Aumento exponencial en el número de células.</li></li></ul><li>TIPOS DE CRECIMIENTO<br />CRECIMIENTO INDIVIDUAL<br /><ul><li>La bacteria alcanza un tamaño y peso fijo. Constituye el paso previo a la división celular.</li></ul>CRECIMIENTO POBLACIONAL<br /><ul><li>Es el incremento en el número de células como consecuencia del crecimiento y división celular.</li></li></ul><li>RECUENTO BACTERIANO<br />
  6. 6. CONTEO DE CÉLULAS VIABLES<br />ALIMENTO<br />CAJA PETRI<br />MICROSCOPIO<br /><ul><li>La célula viable es aquella capaz de dividirse y formar una colonia en el medio de cultivo.
  7. 7. Se basa en que cada colonia surge de una simple célula.
  8. 8. Cada colonia contiene una sola especie bacteriana.</li></li></ul><li>CONTEO DE CÉLULAS VIABLES<br />El número de bacterias viables por muestra se expresa en:<br />UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS (UFC)<br />Representa cada colonia contada y su número total representa el número total de bacterias viables en la muestra.<br />
  9. 9.
  10. 10. CONTEO DE CÉLULAS VIABLES<br />MÉTODO DE EXTENDIDO EN PLACA<br /><ul><li>Es el método de elección para anaerobios facultativos y cultivo de microaerófilos.</li></li></ul><li>CONTEO DE CÉLULAS VIABLES<br />MÉTODO DE VERTIDO EN PLACA.<br />Esta técnica se usa generalmente para bacterias aerobias obligatorias.<br />
  11. 11. CONTEO DE CÉLULAS VIABLES<br />Útil para la técnica de vertido en placa o extensión en placa.<br />Se siembran volúmenes conocidos de cada dilución<br />Luego se incuba a 35 – 37 0C durante 24 – 48 horas.<br />
  12. 12. TÉCNICAS DE RECUENTO<br />Finalizado el tiempo de incubación, se realiza el recuento. <br />Se toman en cuenta únicamente aquellas cajas Petri que tengan entre 30 y 300 colonias. <br />Este número de colonias es estadísticamente representativo. <br />Aquellas placas que tengan más de 300 colonias se reportan como “INCONTABLES”.<br />
  13. 13. TÉCNICAS DE RECUENTO<br />Para el recuento bacteriano se puede usar cuentacolonias.<br />
  14. 14. RECUENTO CON CUENTACOLONIAS<br />Puede ser contada toda la placa o por cuadrantes. <br />Cuando la carga bacteriana es alta, se toma en cuenta un cuadrante con carga alta, un cuadrante con carga media y un cuadrante con carga baja. <br />Se realiza la sumatoria de los tres cuadrantes y se saca el promedio.<br />Finalmente el promedio se multiplica por 65<br />No. Colonias = (CA + CM + CB /3) * 65<br />
  15. 15. CA = 32<br />CM = 19<br />CB = 10<br />Sumatoria<br />Σ = 61<br />Promedio<br />61/3 = 20.33<br />Factor<br />= 20.33*65<br />= 1322<br />
  16. 16. OBTENCIÓN DE RESULTADOS<br />Terminado el conteo por cualquier método, se debe aplicar la siguiente fórmula para obtener el No. de UFC/ ml o UFC/g.<br />UFC/ml ó UFC/g = No. de colonias por placa X el factor de dilución *<br /> ml de la muestra sembrada<br />*Factor de dilución: inversa de la dilución.<br />
  17. 17. EJEMPLOS<br />EJEMPLO 2<br />No. de colonias: 56<br />Dilución: 10 -4<br />Volumen de siembra: 0.2 ml<br />UFC/ ml = 56 X 10000 /0.2<br />UFC/ ml= 2 800.000<br />EJEMPLO 1<br />No. de colonias: 280<br />Dilución: 10 -3<br />Volumen de siembra: 1 ml<br />UFC/ ml = 280 X 1000 /1<br />UFC/ ml= 280.000<br />
  18. 18. Cuando se realiza más de una dilución para cada uno de los parámetros se garantiza los resultados obtenidos. <br />Este método disminuye el margen de error y abaliza la calidad de las pruebas. <br />Para obtener los resultados por duplicado se aplica la siguiente fórmula:<br />UFC / ml parámetro = UFC / ml dilución A + UFC / ml dilución B<br /> 2<br />
  19. 19. EJEMPLOS<br />Ejemplo 1<br />Dilución A: 5 600.0000<br />Dilución B: 6 000.000<br />Resultado : 5 600.000 + 6 000.000 / 2 = 5 800.000 UFC / ml FLORA TOTAL<br />Ejemplo 2<br />Dilución A: 1 245.647<br />Dilución B: 2 340.500<br />Resultado: 1 245.647 + 2 340.500 / 2 = 1 793.074 UFC / ml FLORA COLIFORME<br />

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