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Cultivo faríngeo

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Procedimiento para realizar un cultivo Faríngeo

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Cultivo faríngeo

  1. 1. Manual de Procedimientos Normalizado de Operación. ELABORACION DE CULTIVO FARINGEO MPNO-PRO-BACTER-065 1.0 Objetivo Establecer los controles, actividades y materiales que se deben de emplear de forma correcta para la marcha de cultivos faríngeos. 2.0 Alcance Aplica a toda aquella persona que en la empresa realice actividades en el área de proceso.. 3.0 Función, Responsabilidad y Autoridad Técnico y/o químico: Tiene la responsabilidad de llevar a cabo el procedimiento de la prueba como está establecido y solicitar el material requerido. Jefe de Laboratorio Es su responsabilidad evaluar de forma técnica y funcional que la persona encarga del área de proceso este llevando a cabo el estudio de manera correcta. Director General. Tiene la responsabilidad y autoridad para exigir al técnico y jefe de Laboratorio, para que este procedimiento se cumpla, se mejore y de tomar las acciones pertinentes para hacerlo cumplir cuando por alguna causa no sea respetado 4.0 Definiciones. • Exudado: • Exudado faríngeo • Estria • Estria cruzadaç • Picadura • Inoculo • Órgano • Amígdala • Uvula • Mejilla • Mejilla interna • Lengua • Paladar • Diente • Agar gelosa sangre • Agar eosina azul de metileno • Agar biggy • Agar saburo • Agar sal manitol • Prueba bioquímica • Identificación • Bacteria • Hongo • Levadura • Tsi • Mio Conformidad Proveedor Cliente Fecha Revisión Fecha revisión Laboratorio Proceso 29 de junio de 2013 00 30 de Mayo del 2014 Elaboró Revisó Autorizó T.L.Q. Oscar Colín Ramírez QBP Omar Armando García Ayala M.C.P. Feliciano García Muñiz
  2. 2. Manual de Procedimientos Normalizado de Operación. ELABORACION DE CULTIVO FARINGEO MPNO-PRO- • LIA • Caldo urea • Citrato de Simmons • Tinción • Tinción de gran • Gram positivo • Gram negativo • Antibiograma • Disco • Sensidisco • Agar miuller hinton • Hemolisis • Alfa hemolisis • Beta hemolisis • Gama hemolisis • Frotis 5.0 Fundamento. El sistema respiratorio se divide en vías altas o superiores, que comprenden las áreas anteriores a la laringe, incluyendo la nasofaringe, orofaringe, laringe, epiglotis, oído externo y medio, y los senos paranásales, y vías bajas o inferiores que incluyen todas las estructuras posteriores a la laringe. El tracto respiratorio habitual (la faringe) está formado por distintos microorganismos entre los que destacan los siguientes grupos y especies: estreptococos, estafilococos, micrococos, neisserias, Moraxella catarrhalis, corinebacterias, Haemophilus spp, Sin embargo, cuando encontramos una patología en la faringe, el agente etiológico más frecuentemente aislado es el Streptococcus pyogenes, pero también, otros microorganismos patógenos que podemos hallar son: Streptococcus pneumoniae, Streptococcus beta hemolítico . Para poder hacer la identificación del agente patológico, se procederá a la siembra de la muestra mismo en diferentes medios de cultivo, selectivos y diferenciales así como ricos observar si hay o no crecimiento en cada uno de ellos. Además se procederá a realizar diferentes pruebas, como la tinción de Gram, la catalasa… 6.0 Desarrollo de actividades Inicio de diagrama Temperación de los medios de cultivo y pruebas bioquímicas Final de diagrama Identificación del agente patológico. Documentar No Conformidades mejora de proceso Vista preeliminar Descripción Act. • Temperación de la muestra La persona encargada del area de proceso deberá de sacar a que se temperen las muestras referentes a cultivos faríngeos aproximadamente 20 minutos antes de su procesamiento, de igual forma verificar que los datos del paciente se encuentren registrados en la bitácora de bacteriología y verificar que los datos de la muestra concuerden con los datos del expediente, cada caja deberá ser etiquetada con el folio del Área propietaria Estado actual y fecha Archivo Revisión Página Proceso- inmunología Vigente 29 de junio 2014 MPNO-PRO-INMUNO- 00 2 de 5
  3. 3. Manual de Procedimientos Normalizado de Operación. ELABORACION DE CULTIVO FARINGEO MPNO-PRO- paciente y las siglas: “FAR” y sus iniciales. • Elaboración de un frotis por técnica de Gram mediante la utilización del isopo del cual contiene la muestra del paciente colocar un pequeño frote en un porta-objetos, dicho frote deberá de ser delgado con dimensiones aproximadas de 1 cm por 0.1 cm. Una vez realizado el frote se deberá secar al aire cerca del mechero el cual deberá de estar prendido, para que el frote se seque será aproximadamente 5 minutos. Una vez que se seque el frotis fijarlo con calor, esto es pasando el frotis por la llama del mechero tres veces. Una vez que se fijo la preparación con ayuda de un puente de tinción. El cual se encontrara en una tarja realizar la técnica de Gram • Inoculación de las muestras en los medios correspondientes: se deberá de colar de forma circular el inoculo de la muestra en la superficie de los siguientes medios de cultivo, siendo este no mayor a un centímetro de diámetro. 1.- gelosa sangre: se deberá de estriar el inoculo de muestra por el método de la estría cruzada esto es con la finalidad de que la muestra se diluya y asi obtener colonias aisladas, al finalizar dicha estracion se realizara picadura en la estria, dichas picaduras serán de 4 a 6; lo anteriormente mencionado tiene la finalidad de demostrar una beta hemolisis. 2.- Agar sal maintol: se deberá de estriar el inoculo de muestra por el método de la estria cruzada esto es con la finalidad de que la muestrab se diluya y asi obtener colonias aisladas. 3.- Agar EMB: se deberá de estriar el inoculo de muestra por el método de la estria cruzada esto es con la finalidad de que la muestrab se diluya y asi obtener colonias aisladas. 4.- Agar Biggy: se deberá de estriar el inoculo de muestra por el método de la estria cruzada esto es con la finalidad de que la muestra se diluya y asi obtener colonias aisladas. • Incubación de los medios de cultivo Una vez de que se hallan estriado todos los medios de cultivo se introducirán en la incubadora con la tapa hacia abajo tanto los medios de gelosa sangre, emb y sal manitol se incubaran 24 horas a 37º c en conciones de aerobiosis; la caja de Biggy se incubara a temperatura ambiente por 72 horas de igual forma con la tapa hacia abajo en condiciones de aerobiosis Interpretación de los medios de cultivo y registro en la bitácora de bacteriología : • Gelosa sangre: una vez transcurrido el tiempo de incubación se deberá de leer dicha caja a contra luz esto es con la finalidad de observar a los de hemolisis en el medio de cultivo los cuales se encontraran alrededor de la UFC ( unidad formadora de colonia); al tratarse de un medio rico y al ser una cavidad no estéril la boca habrá crecimiento bacteriano considerado “ biota normal”. Dichos resultados deberán de registrarse en la bitácora de bacteriología medica • Sal manitol: al considerarse un medio selectivo y diferencial en donde solamente crecen bacterias Gram positivas se deberá de verificar si hay mas de 5 UFC de haber menos este cultivo se considerara contaminación. Si hay mas de 5 UFC se deberá de dar seguimiento al cultivo ya que este es positivo. Se deberá de interpretar y registrar en la bitácora de bacteriología medica las colonias manitol positivas, las cuales serán de color amarillo, cuando las colonias sean rosas serán manitol negativo. • EMB: al considerarse un medio selectivo y diferencial en donde solamente crecen bacterias Gram negativas se deberá de interpretar y registrar en la bitácora de bactereologia clínica las colonias lactosa positivas las cuales son de color rosa y las lactosa negativa son transparentes ambas son consideradas enterobacterias • Biggy: al considerarse un medio selectivo y diferencial en donde solamente crecen levaduras en 72 horas cuando se observen colonias pequeñas blanquecinas se sospecha de que el paciente esta generando una candidiasis. Si presenta colonias pequeñas color café o Marrón será considerada Candida albicas Seguimiento de la identificación bacteriana • Gelosa sangre: si hay presencia de hemolisis y esta es beta se deberá de montar la prueba de bacitracina ver anexo si esta prueba da como sensible ( sin crecimiento bacteriano) se reporta como Streptococcu beta hemitico del grupo A sin la bacitracina es resistente ( con crecimiento bacteriano) se reporta como Streptococcus agalactiae, asi mismo se monta la prueba de optoquina ver anexo si es sensible, que no hay crecimiento bacteriano se reporta Streptococcu pneomuniae. • Sal manitol cuando las colonias son amarillas o manitol positivas se montara la prueba de coagulasa ver anexo si esta prueba es negativa ( coagulación del plasma) se reporta como Staphylococcus aureous; si la prueba de coagulasa es negativa se reporta como Staphylococcus coagulasa negativa o en su defecto Staphylococcus saprophyticus, cuando se tratata de una colonia manitol negativa se reporta como Staphylococcus epidermidis Área propietaria Estado actual y fecha Archivo Revisión Página Proceso- inmunología Vigente 29 de junio 2014 MPNO-PRO-INMUNO- 00 3 de 5
  4. 4. Manual de Procedimientos Normalizado de Operación. ELABORACION DE CULTIVO FARINGEO MPNO-PRO- • EMB: al tratarse de un medio en donde crecen enterobacterias las cuales son Gram negativas se deberán de montar las pruebas bioquímicas siguientes para su identificación como son: TSI LIA MIO UREA Citrato de Simmons Boguer proscaguer oxidasa y catalasa, para ver como se realizan dichas pruebas bioquímicas ver anexo 1. Almacenamiento de la prueba. . Parámetros de medición del : estimado en promedio. ACCIÓN A EJECUTAR TIEMPO DE EJECUCIÓN (ESTÁNDAR) Elaboración de cultivo faringeo El “correcto” proceso de cultivo faringeo • Correcta verificación de datos. • Correcto registro de datos. • Elaboración de la prueba como indica presente procedimiento. • Certera interpretación de resultados. • Procurar que sea en el tiempo establecido. En nuestro mantenimiento preventivo debemos realizar: Mantenimiento diario: • Portar la bata. • Limpiar o solicitar la limpieza del área de proceso. • Mantener el área ordenada. • Tener a la mano todo el material necesario. Área propietaria Estado actual y fecha Archivo Revisión Página Proceso- inmunología Vigente 29 de junio 2014 MPNO-PRO-INMUNO- 00 4 de 5
  5. 5. Manual de Procedimientos Normalizado de Operación. ELABORACION DE CULTIVO FARINGEO MPNO-PRO- Anexos 7.0 FIRMA DE ENTERADOS. Área propietaria Estado actual y fecha Archivo Revisión Página Proceso- inmunología Vigente 29 de junio 2014 MPNO-PRO-INMUNO- 00 5 de 5
  6. 6. Manual de Procedimientos Normalizado de Operación. ELABORACION DE CULTIVO FARINGEO MPNO-PRO- Anexos 7.0 FIRMA DE ENTERADOS. Área propietaria Estado actual y fecha Archivo Revisión Página Proceso- inmunología Vigente 29 de junio 2014 MPNO-PRO-INMUNO- 00 5 de 5

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