"Las aplicaciones mas utilizadas de la PCR"

1. APLICACIONES DE:
“REACCION EN CADENA DE LA
POLIMERASA”
Paulina Campos Gómez

2. Huella digital genética
• Es una técnica forense que permite identificar
a una persona comparando su DNA con el de
una muestra obtenida, por ejemplo, de la
escena de un crimen. Como la muestra puede
ser muy escasa, la PCR permite aumentar la
cantidad de DNA amplificando ciertos
segmentos polimórficos (variables en la
población), para luego separarlos mediante
electroforesis, lo que se conoce como DNA
fingerprint o huella digital.

3. HUELLA DIGITAL

4. Test de Paternidad
• Amplificando por PCR fragmentos
polimórficos de DNA de la madre, del niño y
de él o los presuntos padres, y separándolo
mediante electroforesis, se puede visualizar
una serie de segmentos que tiene el niño, que
debe compartir con la madre y padre
biológicos.

6. Detección de Enfermedades
Hereditarias
• Cada gen en estudio puede ser amplificado
fácilmente por PCR, con los partidores
adecuados, y luego ser secuenciado, para así
determinar si un individuo porta alguna
mutación que explica la presencia de una
enfermedad o su aparición en el futuro, la que
puede ser heredada a sus hijos.

7. Comparación de la expresión génica
• Al introducir una modificación en la PCR clásica se
puede estimar la cantidad de mRNA de un gen
determinado en ciertas condiciones
experimentales. Al extraer el RNA total de una
célula y con el uso de la transcriptasa inversa, se
puede producir un DNA complementario (cDNA)
de todos los mRNA o de alguno en particular. Con
este cDNA se puede hacer una PCR para
amplificarlo y facilitar su cuantificación. Esto se
conoce como RT-PCR y permite estimar cuanto se
expresa uno o varios genes en una célula en una
condición de cultivo determinada.

8. COMPARACION DE LA EXPRESION GENICA
*Imágenes editadas digitalmente

9. Clonamiento de Genes
• La PCR es habitualmente usada para
amplificar un determinado gen o un mRNA
(representado por un cDNA), que puede
introducirse en un vector y luego en un
organismo, que al duplicarse también
duplicará el gen que nos interesa. Así
podemos tener una cantidad suficiente de un
gen o cDNA, por ejemplo, para secuenciarlo o
producir a gran escala la proteína que este gen
codifica.

10. Mutagénesis
• Con variaciones en la secuencia de los
partidores, se puede producir un segmento de
DNA que presente diferencia en una o mas
bases respecto al DNA original. Así se puede
alterar una proteína para estudiar o anular su
función. Esta mutación puede ser en un sitio
determinado de un gen (sitio dirigida) o en un
lugar al azar de un gen o genoma.

11. Análisis de DNA antiguo
• Con la PCR se puede analizar DNA que tiene
miles de años de antigüedad, lo que ha
permitido estudiar muestras obtenidas desde
momias y de restos de animales
extintos, como algunos ejemplos.

13. Genotipificacion de polimorfismos
• Mediante el uso de la PCR se puede determinar el
genotipo de un individuo para un polimorfismo
dado, como un microsatélite o un SNP (single
nucleotide polymorphism). En este último caso
necesitamos dos partidores para un mismo extremo
del segmento, los cuales varían en sólo una base en el
extremo 3', lo que generará una amplificación alelo-
específica, de acuerdo al alelo del SNP que tenga el
individuo en estudio. Estos polimorfismos son muy
útiles para estudios poblacionales y para relacionar un
gen o una región cromosómica con una
enfermedad, ya sea mediante estudios de asociación o
ligamiento.