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Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA8MicroscopioMÉTODO1. Tomar sangre con la pipeta,hasta la marca 0.52...
Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA94. Eliminar las primeras dos gotas, la tercera depositar en la cám...
Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA10Los eritrocitos o glóbulos rojos son células de color amarillento...
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Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA12Significado clínico.El valor de referencia relativo y las alterac...
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Recuento de cel.sanquineas fisioanimal

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Recuento de cel.sanquineas fisioanimal

  1. 1. Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA1PRÁCTICA Nº 02PRÁCTICA 2.1RECUENTO TOTAL DE BLANCOSINTRODUCCIÓNLos leucocitos o glóbulos blancos son células que están principalmente en la sangre ycirculan por ella con la función de combatir las infecciones o cuerpos extraños; pero enocasiones pueden atacar los tejidos normales del propio cuerpo.Se llaman glóbulos blancos, ya que éste color es el de su aspecto al microscopio.Hay diferentes grupos de glóbulos blancos: los llamados polimorfonucleares(neutrófilos, eosinófilos y los basófilos) y los mononucleares (los linfocitos y losmonocitos).El origen de todas las formas de leucocitos es a partir de células madres de la médulaósea.La modificación de la cantidad de leucocitos puede orientar al diagnóstico deenfermedades infecciosas, inflamatorias, cáncer y leucemias, y otros procesos. Por elloel recuento es muy orientativo en diferentes enfermedades.OBJETIVOAplicar la metodología para un recuento de Leucocitos por milímetro cúbico desangre e interpretar el resultado.Identificar la utilidad clínica del recuento de leucocitos.Describir el fundamento del método.FUNDAMENTOPara el conteo de leucocitos, se usan métodos sistemáticos que son más rápidos yprecisos, y los métodos manuales.Todo método manual de recuento celular incluye 3 fases:o Dilución de la sangreo Muestreo de la sangre diluida en un volumeno Recuento de células en ese volumeno Para el recuento de leucocitos se cuentan los 4 cuadrados de las esquinas.
  2. 2. Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA2Para su dilución, utiliza la pipeta de blancos, se utiliza como diluyente el líquido deTounk. El líquido de Tounk es hipotónico de modo que se destruyen los hematíes y asíno entorpecen en el recuento.El líquido de Tounk consta de ácido acético glaciar 2ml, violeta de genciana disoluciónde 1% 1ml y agua destilada en cantidad suficiente para 1000ml. Deberá filtrarse amenudo para evitar levaduras y hongos.En un principio es un poco difícil distinguir los leucocitos de los restos de membranasde los hematíes hemolizados. Se debe tener en cuenta que los leucocitos son másrefringentes (más brillantes) al moverlo con el microscopio que los restos de hematíes.Se debe observar la presencia de la membrana citoplasmática y de la membrana nuclear(a veces más) como líneas finas y brillantes. Esto se observa fácilmente moviendo elmicroscopio hacia delante y hacia atrásEsta prueba sencilla y rápida se solicita para detectar o diagnosticar procesos queafectan a las células de la serie blanca de la sangre o leucocitos, como infecciones,inflamaciones o cualquier otra enfermedad que repercuta sobre los leucocitos o glóbulosblancos; para monitorizar el tratamiento de algún transtorno sanguíneo o en lamonitorización de tratamientos que pueden rener repercusiones sobre los leucocitos.MATERIALESo Sangre ml
  3. 3. Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA3o Cámara de Neubauero Pipeta cuenta glóbulos blancoso Solución de Tounko MicroscopioMÉTODO1. Con la pipeta tomar sangre hasta la marca 0.52. Completar con solución de Tounk hasta la marca 113. Dejar reposar 3`4. Eliminar las primeras dos gotas y latercera depositar en la cámara de Neubauer
  4. 4. Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA45. Contar con objetivo de 40XRESULTADOSSe observó los leucocitos, pero también los restos de eritrocitosLos recuentos de leucocitos, se expresan como concentraciones, que en este caso seríannúmero de células por unidad de volumen de sangre, que es 1mm3Después de contar los glóbulos blancos de los 4 cuadrados angulares, se suman el totalde ellos y con dicha cantidad de hace el siguiente cálculo:N° de leucocitos x mm3= altura x dilución x áreaN° de leucocitos x mm3= 1/10 x 1/20 x 4 = 1/10 000N° de leucocitos x mm3= 4/200 = 1/50N° de leucocitos x mm3= N° de leucocitos contados x 50En el análisis hecho, los resultados de la cuenta de células quedaron así por casilla:50+41+48+45=(184)50=9200 x mm3
  5. 5. Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA5CONCLUSIONESEl recuento leucocitario representa el número de leucocitos en un litro de sangrecompleta. La cuantificación o recuento de leucocitos es muy importante para eldiagnóstico de enfermedades.Un bajo número de glóbulos blancos se denomina leucopenia y puede deberse a:o Insuficiencia de la médula ósea (por ejemplo: debido a infección, tumor ocicatrización anormal).o Enfermedades vasculares del colágeno (como el lupus eritematoso sistémico).o Enfermedad del hígado o el bazo.o Radioterapia o exposición a la radiación.Un alto número de glóbulos blancos se denomina leucocitosis y puede deberse a:o Anemia.o Tumores de la médula ósea.o Enfermedades infecciosas.o Enfermedad inflamatoria (como artritis reumatoide o alergia).o Leucemia.o Estrés emocional o físico intensos.o Daño tisular (por ejemplo, quemaduras).
  6. 6. Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA6PRÁCTICA 2.2RECUENTO DE EITROCITOSINTRODUCCIÓNEl eritrocito maduro no es una verdadera célula: no posee núcleo, no se reproduce yconsume una cantidad mínima de oxígeno. Su membrana está compuesta de unacombinación de lípidos y proteínas, que le confieren propiedades especiales depermeabilidad.La función principal de la célula roja es transportar oxígeno hacia los tejidos y traer devuelta dióxido de carbono de éstos hacia los pulmones.Contiene alrededor de un 60% de agua, el ión predominante en su interior es el potasioy el 34% de su peso corresponde a la hemoglobinaOBJETIVOAprender a realizar un recuento de eritrocitos por milímetro cúbico de sangre,interpretar el resultado, así como adiestrarse en el manejo de la cámara de Neubauer y lapipeta de tomaFUNDAMENTOPara el conteo de eritrocitos, se usan métodos sistemáticos que son más rápidos yprecisos, y los métodos manuales.Como todo método manual de recuento celular incluye 3 fases:o Dilución de la sangreo Muestreo de la sangre diluida en un volumeno Recuento de células en ese volumenUna suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículasmicroscópicas dispersas en un fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto ladensidad de las células en la suspensión como el porcentaje de éstas que son viables.Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, desde larelativamente simple cámara de contaje celular de la que existen numerosas variantes,entre ellas la que utiliza la cámara de NeubauerPara el conteo de eritrocitos, es necesario diluir la sangre con el líquido de Hayem, enuna proporción exacta. Luego se examina en el microscopio con una cantidad pequeñacolocada en la cámara de Neubauer, contando el número de elementos que seencuentran en el retículo de la cámara y mediante una operación se obtiene el númerototal.Para la realización del conteo manual se necesita un líquido de dilución, una cámara derecuento, una pipeta diluidora y un microscopio.
  7. 7. Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA7MATERIALESSangre 3 mlCámara de NeubauerPipeta cuenta glóbulos rojosSolución de Hayem(líquido de disolución)
  8. 8. Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA8MicroscopioMÉTODO1. Tomar sangre con la pipeta,hasta la marca 0.52. Completar en la solución de Hayem hasta la marca 101 y mezclar.3. Dejar en reposo 3`
  9. 9. Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA94. Eliminar las primeras dos gotas, la tercera depositar en la cámara de Neubauer5. Contar con objetivos de 40XRESULTADOSLos recuentos de eritrocitos se expresan como concentraciones, que en este caso seríannúmero de células por unidad de volumen de sangre, que es 1mm3Después de contar los hematíes de los 5 cuadrados pequeños, se suman y con dichacantidad de hace el siguiente cálculo:N° de hematíes x mm3= altura x dilución x áreaN° de hematíes x mm3= 1/10 x 1/200 x 1/5 = 1/10 000N° de hematíes x mm3= hematíes contados x 10 000El recuento de eritrocitos fue de 1 350, entonces 1350 x 10 000 = 13 500 000Siendo los valores normales: 14 000 000 x mm3CONCLUSIÓN
  10. 10. Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA10Los eritrocitos o glóbulos rojos son células de color amarillento, con la forma de undisco bicóncavo, sin núcleo y contienen un pigmento llamado hemoglobina que lesotorga su característico color.Estos se forman constantemente en la medula ósea, en el cráneo, las costillas, lasvértebras y el esternón, en un proceso conocido como eritropoyesis. Vivenaproximadamente 120 días y al envejecer son destruidos por las célulasreticuloendoteliales del hígado, la medula ósea y el bazo.La falta de núcleo le confiere la virtud de acarrear oxigeno sin consumir nada de él.La pipeta de toma para glóbulos rojos está constituida por dos porciones capilares y unbulbo central. El tubo capilar inferior está dividido en 10 partes iguales con marcas de0.5 y 1.0. En el interior del bulbo existe una perlita de plástico roja para favorecer lamezcla de sangre con el líquido y en el capilar superior hay una marca de 101.El líquido de dilución no solamente debe de diluir los eritrocitos hasta cifras legibles,sino que también permita identificarlos y que destruya otros elementos celulares que noson de interés en este momento. En general se puede usar cualquier solución isotónicacomo diluyente y pueden ser:o Soluciones de Gowero Soluciones de Daceo Solución salina de NaCl al 0.9%o Liquido de Hayem, el cual está formado de 5g de NaCl, 2.5g de Na2SO4, 2.5g deMgCl2 y agua destilada para un litro. Este último es el más usado.Es muy importante observar que en la cámara de Neubauer las áreas de recuento deeritrocitos y linfocitos son diferentes.Los glóbulos rojos se cuentan en las áreas coloreadas de rojo, mientras que los glóbulosblancos se cuentan en las áreas coloreadas de azul.Para realizar el conteo se enfoca con el objetivo 40x, y se localiza el cuadro central conel condensador bajo y luz débil.Para proceder al recuento, que se lleva a cabo en los cuadrados pequeños del retículomarcado en color rojo, contando las células en cada cuadro, en barrido o fila.
  11. 11. Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA11PRÁCTICA 2.3RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOSINTRODUCCIÓN:La fórmula leucocitaria o el recuento diferencial cuenta seis tipos de glóbulos blancos oleucocitos: los llamados polimorfonucleares (neutrófilos, eosinófilos y los basófilos) ylos mononucleares (los linfocitos y los monocitos). Estos son reportados como elporcentaje presente de cada tipo de glóbulo blanco en el total de los mismos. Al ser unporcentaje el aumento de un grupo de glóbulo blanco disminuye otro, aunque en a vecessolo existe un aumento o disminución de un tipo específico de glóbulo blanco y por elloel porcentaje ofrecería solo una valoración orientativa por lo que se debe conocer elnúmero total de cada grupo para conocer cuál es en realidad la variable a considerar.El procedimiento consta de una toma de sangre, la misma se disemina en unportaobjetos de vidrio y luego se tiñe. A continuación se determina el porcentaje decada tipo de leucocitos.Este examen se hace para diagnosticar una infección, anemia y leucemia e igualmentese utiliza para ver si el tratamiento para cualquiera de estas afecciones está funcionando.Cualquier infección o estrés agudo ocasiona un aumento en la producción de GB. Losconteos altos de glóbulos blancos pueden deberse a inflamación, una respuestainmunitaria o hemopatías como la leucemia.Es importante saber que el aumento anormal de un tipo de leucocito puede causar unadisminución en los porcentajes de otros tipos de glóbulos blancos.
  12. 12. Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA12Significado clínico.El valor de referencia relativo y las alteraciones comunes de lascélulas leucocitarias sonlas siguientes:Neutrófilos segmentados = 45 a 60%; la neutrofilia se observa duranteprocesosinflamatorios agudos e infecciosos; la neutropenia se presenta en ladepresión de lamédula ósea, inmunodeficiencia o inmunosupresión.Linfocitos = 20 a 40%; la linfocitosis se manifiesta en alteraciones virales y enrespuestaa procesos infecciosos; la linfopenia se observa en procesossimilares a la neutropenia.Monocitos = 0 a 7%; la monocitosisNeutrófilos en banda = 0 a 5 %; su número se observa incrementado cuandolosneutrófilos segmentados disminuyen por reaccionar ante el agenteinfeccioso.Eosinófilos = 0 a 4%; la eosinofilia se presenta principalmente en respuesta acuadrosalérgicos y durante las parasitosis.Basófilos = 0 a 1%; la basofilia se manifiesta cuando los eosinófilos aumentan,pues setrata de células que controlan la respuesta alérgicaOBJETIVO:Identificación de tipos celulares en la sangre.Identificación de la morfología leucocitaria.Cuantificación de cada tipo de células encontradas.Determinación de normalidades o anormalidades después de la cuantificaciónFUNDAMENTO DE LA TÉCNICA:Los leucocitos son teñidos con un colorante especial (Wright) este permitirá queestas células puedan ser diferenciadas en cuanto a su morfología, ya que permite teñirtanto el núcleo, los granos que contengan y su citoplasma entre otras cosasMATERIALSangre 3ml
  13. 13. Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA13Lámina portaobjetoColorante Wright o GiemsaMicroscopios con objetivo de inmersión.MÉTODO1. Limpiar la lámina porta obejto con algodón empapado en alcohol al 70%(desgarsar)2. Colocar una gota de sangre en un extremo delporta objeto y realizar con otra laextensión sanguíneaFrotis sanguíneo:Este método nos permite, mediante una técnica de fácil realización y bajo coste, obtenerrápidamente contajes de células de la serie roja y blanca y, lo que es más importante,identificar anomalías morfológicas o lesiones específicas de ambas series que suelen seruno de los signos más tempranos en numerosas enfermedades (linfomas, anemiasinmunomediadas, procesos parasitarios, etc.).
  14. 14. Fisiología AnimalRecuento de células sanguineasPRÁCTICA143. Dejar secar, luego cubrir toda la lámina con wright o giemsa por un minuto,agregar la solución tampón por un minuto y lavar la lámina4. Dejar secar5. Observa y contar con objetivo de inmersión.Se ira observando en la dirección señaladaRESULTADOSPor campo se observó alrededor de cuatro leucocitos, por campo.CONCLUSIONESCon la técnica del frotis sanguíneo se puede observar la morfología de las diferentesleucocitos. A diferencia de los humanos que lo general es encontrar entre uno o dos porcampo notamos que en la sangre caprina el número de células es mayor por campo.

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