MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR
1.0 INTRODUCCIÓN
Las vías respiratorias altas se extienden desde los orificios n...
FLUJOGRAMA Nº 1 : SECRECION FARINGEA
FARINGITIS
( S. GRUPO A )
DIFTERIA
( C. diphteriae)
FARINGITIS
GONOCOCICA
TORULA
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TABLA 1: OTRAS MUESTRAS TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR
MUESTRA S.PARANASAL
ES
SEC.OTICA MUCOSA
BUCAL
DIAGNÓSTICO Sinusitis O...
4.1.3 Cultivo para Neisseria meningitidis
Tomar la muestra con tórula por detrás de la úvula en la porción nasal de la
EO
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b.- La muestra del oído medio se toma mediante tímpanocentesis por un especialista, y
se debe cultivar para aerobios y ana...
5.2 DETECCIÓN DE PORTADORES DE Neisseria meningitidis
a.- Tomar muestra de la garganta y nasofaringe, con tórula por detrá...
MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR
piratorio inferior, es decir las que comprometen:
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TABL
INCIÓN DE GRAM
A 1: CLASIFICACIÓN DE LA MUESTRA DE EXPECTORACIÓN POR
T
GRUPO Nº de células por campo
Leucocitos Célul...
Estudiar solo si es predominante:
) LB = Lavado bronquial
CB = Cepillado bronquial
B = u al
LBA= Lavado broncoalveolar
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3.52 Procesamiento
Las muestras para estudios microbiológicos son consideradas en dos categorías:
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Si un microorganismo está solo presente en el sub cultivo del caldo informar
ción mecánica se define como la neumonia en u...
3.62 Toma de Muestra
Se debe tomar una muestra en forma estéril, utilizando sonda de aspiración
introducida por el tubo en...
5.0 REFERENCIAS
1.
2. Laboratorio de Infecciones del tracto respiratorio
ajo.Septiembre,1987
3. ical Microbiology Procedur...
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muestras del tracto respiratorio superior de vias respiratorias , flora normal del tracto superior , faringitis , cultivo de secrecion faringea, sinusitis, otitis media

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Secrecion faringea

  1. 1. MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR 1.0 INTRODUCCIÓN Las vías respiratorias altas se extienden desde los orificios nasales hacia la laringe y comprende la nasofaringe y la orofaringe,a, los senos paranasales, trompa de Eustaquio y el oído medio. Las infecciones del tracto respiratorio superior más frecuentes son: laringitis, faringitis, epiglotitis, sinusitis, otitis externa y media, difteria, tos ferina, angina de Vincent y candidiasis oral. Es fundamental conocer la flora comensal para la interpretación de los resultados de laboratorio. 2.0 FLORA NORMAL DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR -Streptococcus spp (alfa, beta, no hemolíticos) -Veillonella spp. -Neisseria spp. -Peptostreptococcus spp. -Haemophilus spp. -Actynomyces spp. -Corynebacterium spp. -Mycoplasma spp. -Staphylococcus spp -Bacteroides spp. -Micrococcus spp. -Fusobacterium spp. -Candida spp. 3.0 FARINGITIS La principal causa de faringitis es por Streptococcus pyogenes (grupo A). Otras bacterias que se incluyen son: Streptococcus grupo C, G, y Arcanobacterium (Corynebacterium) haemolyticum. El examen de rutina de laboratorio debe incluir métodos para el diagnóstico de Streptococcus grupo A que sean sensibles ya que un número bajo de esta bacteria puede indicar no solo colonización sino representar una infección, además es importante detectarlo por la reemergencia de la fiebre reumática aguda y la posibilidad de un shock tóxico like. El estudio de Neisseria meningitidis generalmente se hace con propósitos epidemiológicos. El estudio de faringitis gonocócica debe ser solicitada en forma específica por el médico. Corynebacterium diphtheriae se debe buscar sólo cuando se solicita expresamente.
  2. 2. FLUJOGRAMA Nº 1 : SECRECION FARINGEA FARINGITIS ( S. GRUPO A ) DIFTERIA ( C. diphteriae) FARINGITIS GONOCOCICA TORULA AMIES STUART O SILICA GEL PAS INCUBAR 35-37 ºC 18-24 HORAS OBS. β-HEMOLISIS T. GRAM CATALASA ( - )( - ) INCUBAR 18-24 HRS DIAG. PRESUNTIVO: -SUSCEPTIBILIDAD DIAG. DEFINITIVO: NHDM SEROLOGIA -PYR BACITRACINA 0,04µ TORULA (2) SILICA GEL LABORATORIO REFERENCIAPAS AGAR SANGRE TELURITO* AGAR TINSDALE INCUBAR 35ºC x 18-24-48 HORAS* OBS. COLONIAS T. GRAM DIAG. DEFINITIVO PRUEBAS BIOQUIMICAS LABORATORIO DE REFERENCIA TORULA AMIES STUART TRANSPORTE NUTRITIVO THAYER - MARTIN 35 ºC CO 2 x 72 HORAS OBS. COLONIAS DIAG. DEFINITIVO DIAG. PRESUNTIVO: T. GRAM T. OXIDASA -UTILIZAC.DE CARBOHIDRATOS -DET. DE B- LACTAMASA ANGINA DE VINCENT TORULA GRAM PAS: Placa agar sangre NHDM:No hubo desarrollo microbiano FLUJOGRAMA Nº2 : SECRECION NASOFARINGEA Bordetella pertusssis N. meningitidis (PORTADORES ) Haemophilus influenzae ASPIRADO NASOFARINGEO ASPIRACION SEMBRAR INMEDIATAMENTE AL LADO DEL PACIENTE REGAN-LOWE IFD 35 ºC ( HUMEDAD ) HASTA 7 DIAS OBS. COLONIAS T. DE GRAM DIAG. DEFINITIVO INMUNOFLUORESCENCIA SEROLOGIA NASOFARIANGEA SEMBRAR AL LADO DEL PACIENTE THAYER MARTIN 35ºC CO2 24-48 HRS. OBS. COLONIAS T. DE GRAM OXIDASA SEROLOGIA ACCION SOBRE CARBOHIDRATOS DIAG. DEFINITIVO ENVIO AL LAB. DE REFERENCIA PARA CONFIRMACIÓN SEMBRAR AL LADO DEL PACIENTE AMIES STURAT CHOCOLATE SUPLEMENTADO INCUBAR 35ºC CO2 18-24 HRS GRAM FACTORES X y V OXIDASA B LACTAMASA CULTIVO: IDENTIFICACIÓN DEFINITIVA: SEROLOGÍA ENVIO AL LAB. DE REFERENCIA PARA CONFIRMACIÓN
  3. 3. TABLA 1: OTRAS MUESTRAS TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR MUESTRA S.PARANASAL ES SEC.OTICA MUCOSA BUCAL DIAGNÓSTICO Sinusitis Otitis media Otitis externa Candidiasis oral TIPO MUESTRA Punción Timpanocente sis Tórula Tórula AGENTE ETIOLÓGICO S. pneumoniae H. influenzae Anaerobios Neisseria B. catarrhalis S. aureus S. pneumoniae S. aureus H. influenzae B.catarrhalis Bacilos G- Anaerobios P. aeruginosa Otras bacterias aerobias Candida albicans PROCEDIMIENTO T.Gram * PAS ACHO (CO2) Cult. Anaerobios 35ºC-48 hrs T.Gram * PAS ACHO (CO2) Cult. Anaerobios 35ºC-48 hrs T.Gram * PAS M.Conkey 35ºC-48 hrs T.Gram * Sabureaud 30ºC hasta 5 días PAS: Placa agar sangre cordero 5%, ACHO: Placa agar chocolate, * Anexo 1 (Tinciones). 4.0 TOMA DE MUESTRA 4.1. SECRECIÓN FARÍNGEA engu lengua. b.- Frotar con una tórula la pared p r de la f las a las tocando o. c.- Evitar tocar la lengua, úvula y pared de la boca. 4.1.2 Cu a.- Deprimir la lengua con bajalengua. Si se advierte la presencia de pseudomembrana, tomar dos muestras c bord la sin romper. b.- Poner ambas tóru st o muestras al laboratorio es superior a cuatro horas, se recomi s en un tubo con silica gel. Una de ellas debe ser usada para la tinción de Gram. En caso de sospecha de difteria cutánea, z iel afe ás de a fa c.- Hacer tinción d Si se bacil sitiv logía característica, el lab en rm ar q grampositivos diftero 4.1.1 Cultivo corriente a.- Deprimir la l a con baja osterio aringe y mígda cualquier exudad ltivo para Corynebacterium diphtheriae on tórula del e de la misma p nsp resionándo rte de laslas en un tubo e éril. Si el tra enda enviarla tomar muestra de la ona de la p am. ctada adem rvan una muestr ampo ríngea. e Gr oratorio debe s." obse tregar un info os gr o de morfo e prelimin ue diga “bacilos morfo
  4. 4. 4.1.3 Cultivo para Neisseria meningitidis Tomar la muestra con tórula por detrás de la úvula en la porción nasal de la EO a.- Lavarse s y luego colocarse guantes estériles. .- Romper el sobre que contiene el kit de aspiración y conectar el final del tubo con ón. da, sin aspirar, por una fosa nasal hasta la nasofaringe y retirarla .- Repetir el procedimiento en la otra fosa nasal. f.- Aspirar rastrar toda la secreción. .- Homogeneizar la muestra agitando el tubo con la mano. 4.4 EPIGLOTITIS a.- Causada habitualmente por Haemophilus influenzae tipo b, ocurre principalmente en niños de 2 a .- El diagnóstico de esta infección debe ser hecho clínicamente ya que está contra . .- Si se hace un procedimiento en la vía aérea, en ese momento se puede tomar mues .- En muchos casos hay una bacteriemia y esto puede apoyar el diagnóstico. da por organismos la Tabla 1. es el aspirado mediante jeringa de la o nasofaringe, ya que éstas erenciar el agente causal. 4.6 OTITIS MEDIA .- Es una infección común en niños. Agentes más comunes se muestran en la Tabla 1. faringe. 4.2. ASPIRADO NASOFARÍNG cuidadosamente las mano b diámetro menor a una sonda de aspiraci c.- Conectar el otro extremo de diámetro mayor a la bomba de vacío. d.- Introducir la son aspirando. e el suero fisiológico a través del tubo colector para ar g h.- Colocar la tapa al tubo que contiene la muestra. i.- Procesar según flujograma Nº 2. 4.3 LARINGITIS a.- Laringitis aguda habitualmente es de etiología viral. b.- Los cultivos bacterianos raramente son orientadores excepto para descartar difteria o infección estreptocócica basándose en la clínica. 6 años. b indicado tomar muestra de la epiglotis, pues puede provocar una oclusión de la vía aérea c tra. d 4.5 SINUSITIS a.- Sinusitis bacteriana frecuentemente es de origen endógeno, causa que están normalmente en el tracto respiratorio superior. Agentes más comunes se muestran en b.- La única muestra apropiada para el laboratorio cavidad sinusal. Se debe hacer cultivo aerobio y anaerobio. c.- Rechazar líquidos de lavado o tórulas de fosas nasales contendrán mucha flora normal y será muy difícil dif a
  5. 5. b.- La muestra del oído medio se toma mediante tímpanocentesis por un especialista, y se debe cultivar para aerobios y anaerobios. Si hay descarga en el canal externo se debe acer cultivo sólo para aerobios. 4.7 OTITIS EXTERNA ntacto, limpiar el conducto auditivo externo con solución jabonosa, monas aeruginosa es la causa más frecuente de otitis externa u “otitis del cer cultivo aerobio. deben ser mados en cuenta. IDIASIS ORAL rofaringe, habitualmente es .- El diagnóstico se hace fácilmente por observación directa de la muestra en KOH al 10% exo Tinciones). La muestra se toma con dos tórulas, una ara directo y la otra muestra para cultivo. .- Borrelia vincentii y Fusobacterium spp, están asociados con esta infección que se caracteriza por la ulceración de la faringe o encías. Es infrecuente en niños, pero sí se resenta en adultos que tienen una mala higiene bucal, stress o una enfermedad sistém , con fucsina diluida 1:10 en agua, o con E PORTADORES 5.1 DETECCIÓN DE PORTADORES DE Staphylococcus aureus .- Tomar muestra de fosas nasales, faringe, axila y periné y sembrarlas en medio selectivo co ol o agar sal manitol que permita recuperar oca cantidad de S aureus. ncia o ausencia de S. aureus en cada muestra. h Para tímpano i y recolectar la secreción con aspiración con jeringa. Para tímpano roto, colectar la secreción con tórula flexible usando espéculo. a.- Pseudo nadador” aún cuando hay otras bacterias aerobias que pueden causarla, por lo tanto sólo se debe ha b.- En estos cultivos pude haber contaminantes de la piel los cuales no to 4.8 OTRAS PATOLOGÍAS 4.8.1 CAND a.- La infección por levaduras de la mucosa bucal, lengua y o producida por Candida albicans y es común en recién nacidos y adultos inmunosuprimidos (Ej.VIH-SIDA). b o tinción de Gram (An p 4.8.2 ANGINA DE VINCENT a p ica grave. b.- El diagnóstico de laboratorio se hace mediante tinción de un extendido directo obtenido mediante lo descrito en el punto 4.1.b violeta de genciana. La presencia de muchas espiroquetas y fusiformes además de polimorfonucleares confirma la infección. 5.0 DETECCIÓN D a mo agar sangre, feniletilalcoh p b.- Incubar, aislar e identificar S. aureus de acuerdo a los procedimientos de rutina. c.- Guardar las cepas aisladas por si solicitan estudios posteriores. d.- En el informe sólo se indica prese
  6. 6. 5.2 DETECCIÓN DE PORTADORES DE Neisseria meningitidis a.- Tomar muestra de la garganta y nasofaringe, con tórula por detrás de la úvula en la orción nasal de la faringe. Habitualmente en la muestra de nasofaringe se obtiene ayor número de organismos. Sembrar en un medio selectivo como Thayer Martin. b.- Emplear ra toma de muestra, transporte, incubación, islamiento e identificación de N. meningitidis. (ver capítulo correspondiente). .- En caso de búsqueda de faringitis gonocócica, se debe informar como “Hubo o no esarrollo de Neisseria gonorrhoeae”. Si hay sobre desarrollo de flora normal o cultivo uestra. .- La investigación dirigida a otros patógenos específicos, debe ser informando como prese H. J. eds. Manual of Clinical Microbiology. 5th de. , 1993. 6th de . Murray, Baron, Pfaller, Tenover, Yolken. Manual of Clinical Microbiology. 7th ed. p m los procedimientos habituales pa a c.- Guardar las cepas de N. meningitidis por si solicitan estudios posteriores. d.- Informar sólo la presencia o ausencia de N. meningitidis y el grupo serológico. 6.0 INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS a.- En una secreción faríngea corriente se debe informar la presencia o ausencia de Streptococcus β hemolítico. b d invadido por levaduras, solicitar nueva m c ncia o ausencia de los mismos 7.0 REFERENCIAS 1. Ballows A, Shadomy Washington D.C.ASM, 1991. 2. Isenberg H. Clinical Microbiology Procedures Handbook. Vol 1 3. Murray, Baron, Pfaller, Tenover, Yolken. Manual of Clinical Microbiology. .Washington D.C.ASM, 1995. 4 Washington D.C. ASM, 1999. 5. Vandepitte, K. Engback, P. Piot y C. C. Henck Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. WHO 1991.
  7. 7. MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR piratorio inferior, es decir las que comprometen: Chi dad infantil tardía y una de las primeras causas de s infecciones no es fácil debido a que la muestra clínica necesariamente pasa a través de la orofaringe, lugar donde se puede contaminar con numerosas especies bacterianas, salvo aquellas muestras que se obtienen directamente desde el sitio de la lesión. 2.0 TIPOS DE MUESTRAS -Expectoración -Aspirado traqueal -Lavado bronquial -Boncoscopía (cepillado bronquial, lavado broncoalveolar) -Biopsia bronquial -Biopsia pulmonar 3.0 PROCEDIMIENTO 3.1 EXAMEN MICROSCÓPICO Preparar un extendido de la muestra y hacer tinción de Gram (Anexo Tinciones) para e élulas scamosas; si la secreción es del tracto respiratorio inferior, indicada por la presencia de btenidas de pacientes transplantados de Médula Osea u otro acientes inmunosuprimido puede no contener leucocitos) y la presencia del patógeno probab a.- Cua n microorganismo predominante, si no hay icroorganismos predominantes o si hay ausencia de microorganismos. nción de Gram para guiarse en la interpretación de las lacas de cultivo. 1.0 GENERALIDADES Las infecciones del tracto res tráquea, bronquios, bronquiolos, alvéolos y/o parénquima pulmonar, constituyen en le la primera causa de mortali muerte por infección nosocomial. El diagnóstico etiológico de esta valuar si hay contaminación orofaríngea, indicada por la presencia de c e leucocitos ( las muestras o p le indicado por el organismo predominante asociado con leucocitos. 3.2 INTERPRETACIÓN DE LA TINCIÓN DE GRAM ntificar el número de células escamosas examinando 10 campos con objetivo 10x. b.- Interpretar la calidad de la muestra de acuerdo a Tabla 1. c.- Informar: si hay presencia de u m d- Use los resultados de la ti p
  8. 8. TABL INCIÓN DE GRAM A 1: CLASIFICACIÓN DE LA MUESTRA DE EXPECTORACIÓN POR T GRUPO Nº de células por campo Leucocitos Células Epiteliales 6 < 25 < 25 5 > 25 < 10 4 > 25 10 – 25 3 > 25 > 25 2 10 – 25 > 25 1 < 10 > 25 Se recomienda no cultivar los Grupo 1,2,3 3.3 FLUJOGRAMA PARA EL EXAMEN DE MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR SEGÚN OBSERVACIÓN DE TINCIÓN DE GRAM Cantidad de células epiteliales (C.E.)y polimorfonucleares(PMN) MUESTRAS DE ESPUTO LB, CP, BB,LBA;BP (*) in importar cantidad C.E 10-25 C.E > 25 por campo e células epiteliales) PMN>25 por campo PMN 10-25 por campo A NO CULTIVO (solicitar nueva muestra). CULTIVAR E INVESTIGAR Streptococcus α hemolítico: investigar pneumoniae treptococcus β hemolítico: investigar Streptococcus Grupo A us vaduras ocardia. (s d MUESTR APTA PARA S. S bacilos gramnegativos Staphylococc le hongos Micobacterias N
  9. 9. Estudiar solo si es predominante: ) LB = Lavado bronquial CB = Cepillado bronquial B = u al LBA= Lavado broncoalveolar AP = Aspirado pulmonar LBA y orma cuantitativa y establecer niveles de corte. 3.4 SIEMBRA DE LAS MUESTRAS onkey .- Incubar agar sangre y agar chocolate a 35ªC en atmósfera con 5-7% de CO2. Agar olato ( solo en muestras no contaminadas con flora oral) en l. ar las placas a las 24 hrs. de incubación, si no hay desarrollo visible, incubar rs. adicionales. El tioglicolato incubarlo hasta 5 días antes de descartar. rollo, hacer identificación del microorganismo patógeno. 3.5 CEPILLADO BRONQUIAL Y LAVADO BRONQUIOALVEOLAR epillado Bronquial son muestras tomadas por l cual es un método seguro para obtener secreciones directamente de los alvéolos, pero debe ser realizado por personal entrenado, es un método caro e obtención de muestras, que se contamina con flora de la porción superior del aparato licaciones. Por lo anterior es poco realista utilizar este étodo de rutina en todo paciente con infección de las vías respiratorias inferiores y ebe re ionados, tales como pacientes con patología crónica o fracta ntes inmunocomprometidos en los cuales el iagnó a establecerse con muestras de expectoración. Los dos por broncoscopía para agentes bacterianos habituales causantes de eumonias son considerados comparables, pero no mejor que los cultivos obtenidos de 3.51 Toma de Muestra La broncoscopía se realiza con el paciente sentado o recostado y el instrumento o aplicación tópica con xilocaína u otro equivalente. Los anestésicos Haemophilus Moraxella (* B Biopsia bronq i CB sembrar en f a.- Sembrar muestras en agar sangre, agar chocolate suplementado, agar Mac C (opcional). b Mac Conkey y tioglic atmósfera norma c.- Examin por 24 h d.- Si hay desar Lavado Bronquial y C broncoscopía, e bronquios y d respiratorio y no exento de comp m d servarse para casos selecc re ria o aquellos casos de pacie d stico etiológico no pued cultivos obteni n expectoración obtenida con criterios citológicos aceptables. se pasa a través de las fosas nasales o por vía oral. Se aplica antestesia local por nebulización tópicos tienen propiedades antibacterianas, pero los estudios disponibles muestran que esto no afecta el recobrar microorganismos si la muestra es procesada dentro de dos horas de obtenida.
  10. 10. 3.52 Procesamiento Las muestras para estudios microbiológicos son consideradas en dos categorías: ) Ca en problemas de interpretación, a pesar de contaminación con flora de la vía aérea sup o pipeta de 10 Ul. 5° C con 5-7% CO2 hasta por 48 horas. El tioglicolato incubar hasta 5 día Recuentos de bacterias de > a tegoría N° 1: Incluye estudios para detectar microorganismos que no tien erior. Esto inlcuye agentes micóticos oportunistas, parásitos, Legionella spp. y Mycobacterias. Para lavado bronquioalveolar: Se instilan 20 ml de suero fisiológico, luego se aspiran a 50-100 mm de Hg para recolectar el líquido de lavado. El procedimiento se repite 5 veces con un total de 100 ml de suero instilado, del cual se recupera alrededor de 40-70 ml. Aproximadamente 15 ml se necesitan para cultivo de bacterias aerobias, Legionella spp., Nocardia spp., hongos, mycobacterias y virus. Para estudio de bacterias habituales, las muestras de LBA son enviadas al laboratorio en cantidad mínima de 1 ml de solución salina estéril. Mezclar con vortex para resuspender previo a la siembra y sembrar en PAS, ACHO, Mac Conkey y tioglicolato usando un asa calibrada de 0.01 ml Incubar a 3 s. 104 son considerados significativos. lizar estudios para bacterias anaerobias. Se pueden lograr mejor rendimiento utilizando un cepillo protegido, el cual es ona en que hay secreción purulenta, el cual cuando s puesto en un tubo que contiene 1 ml de ringer lactato estéril, el cual es key y tioglicolato, permite el estudio para bacterias anaerobias. b) Categoría N° 2: Esta incluye el estudio de microorganismos que pueden ser parte de la flora oral. Los cultivos de rutina se le pueden realizar de manera similar a la expectoración, y estos también tienen el problema de contaminación con flora bucal. No se deben rea dirigido directamente hacia la z es retirado e mezclado con un vórtex. Se inocula 0.01 ml en PAS; ACHO, Mac Con Incubar durante 48 horas. El tioglicolato incubar hasta 5 días. Recuentos de colonias de >103 son considerados significativos, dado que estos representan alrededor de 106 /ml de la solución original. 3.5 Informe Semicuantitativo - Si no hay crecimiento: No hubo desarrollo microbiano. -Si hay crecimiento de 1-2 colonias: Muy escaso desarrollo microbiano. ado desarrollo microbiano. no sub ente por tinción del caldo). -Si hay crecimiento de 3-10 colonias: Escaso desarrollo microbiano. -Si hay crecimiento mayor a 10 colonias Moder -Si hay colonias presentes: Abundante desarrollo microbiano. en un área 1° y 2° de inoculación. Si un organismo es observado en la tinción de Gram del caldo (caldo cultivado o sin desarrollo en el sub cultivo), informar microorganismo observado solam
  11. 11. Si un microorganismo está solo presente en el sub cultivo del caldo informar ción mecánica se define como la neumonia en un paciente en ventilación mecánica luego de 48 horas. Durante años se utilizó para su e Joh nson al de 1972, el cual incluye criterios no ienda el onia Asociada a Ventilación Mecánica ivo d na diag óstica comp s basadas en estudios fibrobroncoscópicos y tiene la ventaja de la universalidad de su plicación, bajo costo independencia de equipos humanos y técnicos restringidos. Se y > microorganismo aislado de caldo solamente. 3.54 Informe Cuantitativo -N° de colonias (<10)= <103 -N° de colonias (10-100)=103 -104 -N° de colonias (100-1000)=104 -105 -N° de colonias(>1000)=>105 3.6 Cultivo cuantitativo de aspirados endotraqueales en paciente en Ventilación Mecánica La neumonia asociada a ventila diagnóstico los criterios d a et específicos, por lo que se recom uso de criterios microbiológicos cuantitativos para el diagnóstico de Neum (NAVM). El uso del cultivo cuantitat el aspirado endotraqueal tiene u sensibilidad y especificidad n s arables a las estrategias diagnóstica a recomienda informar los recuentos microbiológicos de todas las especies bacterianas potencialmente patógenas y que su lectura sea interpretada utilizando al menos dos puntos de corte ( <103 106 ufc/ml). Este enfoque permite dar mayor flexibilidad al grupo tratante sobre interpretación de la etiología polimicrobiana pre tibiótico cuando el recuento sea muy bajo. tud cuando se ha realizado un cambio en la terapia ntimicrobiana en la últimas 72 horas, por cuanto el estudio cuantitativo puede verse as bacterianas. sobre estudios diagnósticos invasivos y no de la NAVM en pediatría. El cultivo cuantitativo del pirado endotraqueal puede ser aplicado, aunque su lectura sólo puede ser realizada or extrapolación, utilizando los puntos de corte descritos para los adultos. ltivo de AET sente en algunos casos y sobre la decisión de dirigir el estudio hacia causas potenciales y/o suspender el tratamiento an No se recomienda su solici a afectado. Esta dirigido hacia algunas etiologí No existe experiencia significativa invasivos en el reconocimiento as p 3.61 Indicaciones de cu Se recomienda realizar cultivo cuantitativo de AET a todo paciente con sospecha de NAVM, conectado en un tiempo mayor de 48 horas y que presente criterios clínicos y radiológicos y en el que no se haya realizado un cambio en el tratamiento antimicrobiano en las últimas 72 horas.
  12. 12. 3.62 Toma de Muestra Se debe tomar una muestra en forma estéril, utilizando sonda de aspiración introducida por el tubo endotraqueal (TET), conectado en el otro extemo a un colector o trampa estéril. Debe ser realizado por un profesional entrenado. La muestra no se debe diluir y debe ser enviada de inmediato al laboratorio. 3.62 Procesamiento -Diluir la muestra a la mitad con suero fisiológico estéril(dilución1:2). nte 2 minutos. ósfera aeróbica hasta 72 horas. a muestra puede también ser sembrada en ACHO para la detección de .63 Informe de Laboratorio a emisión del informe debe incluir un detalle de cada microorganismo aislado, con recuento y antibiograma correspondiente. La presentación de los potenciales gentes identificados es necesaria debido a que cerca de un tercio de los casos tienen nos. colonia: equivale a 20.000 ufc/ml (2x104 ). 4.0 ente patógeno en forma predominante, asociado a una buena calidad de muestra tiene valor diagnóstico cuando el c -Homogeneizar con perlas de vidrio y agitador dura -Extraer 100 Ul y diluir en 9,9 ml de suero fisiológico y agitar ( dilución 1:100). -Rotular una placa de agar sangre y Mac conkey como A y el otro set como B. -Sembrar 100 Ul (0,1 ml) en el set de placas A ( dilución final 1:2000). -Sembrar 10 Ul (0,01 ml ) en el set de placas B ( Dilución final 1:20.000). -Incubar a 35° C en atm L Haemophilus influenzae en caso de NAVM de inicio precoz. La tinción de Gram de este tipo de muestras tiene un rendimiento limitado, ya que no permite predecir que tipo de microorganismos tendrá un recuento significativo. 3 L su a aislamientos polimicrobia - Set Placas A: 1 colonia: equivale a 2000 ufc/ml (2x103 ). 5 colonias: equivale a 10.000 ufc/ml (1x104 ). 50 colonias equivale a 100.000 ufc/ml ( 1x105 ). -Set de placas B: 1 5 colonias : equivale a 100.000 ufc/ml ( 1x105 ). 50 colonias equivale: 1.000.000 (>1x106 ). INTERPRETACIÓN DE LOS CULTIVOS El desarrollo de un microorganismo potencialm uadro clínico es compatible.
  13. 13. 5.0 REFERENCIAS 1. 2. Laboratorio de Infecciones del tracto respiratorio ajo.Septiembre,1987 3. ical Microbiology Procedures Handbook. Vol 1, 1993. 4. 5. al of Clinical Microbiology. 7th ed. ashington D.C. ASM, 1999. 6. gback, P. Piot y C. C. Henck Basic Laboratory Procedures in 7. eumonia Asociada a Ventilación . Clinical Micobiology procedures Handbook. Isemberg H. Volumen N° 1. 1.15. . Ventilator- Associated Pneumonia or Not? Contemporay Diangosis. Mayhall Glen. rzo- Abril 2001. Ballows A, Shadomy H. J. eds. Manual of Clinical Microbiology. 5th de. Washington D.C.ASM, 1991. Cumitech 7A. Diagnóstico de b Isenberg.H. Clin Murray, Baron, Pfaller, Tenover, Yolken. Manual of Clinical Microbiology. 6th de. Washington D.C.ASM, 1995. Murray, Baron, Pfaller, Tenover, Yolken. Manu W Vandepitte, K. En Clinical Bacteriology. WHO 1991. Documento "Consenso diagnóstico de la N Mecánica". Sochinf 8 9 Emerging Iinfectious Diseases. Vol 7;, N° 2 Ma

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