Memorias 2014 - 6a Conferencia Científica Anual sobre Síndrome Metabólico - Presentación Tabajos Libres Orales - MÓDULO: GENÉTICA, EPIDEMIOLOGÍA Y SM - Análisis del perfil metabolómico durante el desarrollo de síndrome metabólico inducido por una dieta alta en grasa y fructosa Karla I. Lira de L.*, Rubén López L.*, Rosalía Reynoso C.**, Luis M. Salgado* * CICATA-QRO, Instituto Politécnico Nacional, ** Depto de Investigación y Posgrado en Alimentos, Facultad de Química, Universidad Autónoma de Queretaro

1. Autores: Karla Isabel Lira-De León1, Rubén López-López,
Rosalía Reynoso-Camacho, Luis Miguel Salgado
Presenta: Dra. Karla Isabel Lira De León
15 de Agosto de 2014
CICATA-Unidad Querétaro
Instituto Politécnico Nacional

2. Introducción
 Debido a los cambios socioeconómicos de
países desarrollados y en desarrollo, el estilo de
vida de la gente ha cambiado radicalmente.
 Que como resultado ha inducido graves
problemas de salud.
(Gacche et al., 2011)

3.  Actualmente en México, la Diabetes mellitus (DM) y el Síndrome
Metabólico (SM) son los principales problemas de salud (9.17% de
la población solo para DM).
 La diabetes tipo 2 (DMT2) es la causa más común de DM, con un
90% de los pacientes.
 Un factor predisponente para el desarrollo de DMT2 y SM es la
ingesta de una dieta rica en grasas saturadas y azúcares simples.
 Estos problemas de salud, tienen implicación a todos los niveles,
social, económico, familiar e individual y representan una carga
económica sumamente importante.
(Córdova-Villalobos et al., 2008)

4. Justifificación:
 Muchas características del SM, incluyendo la
obesidad, dislipidemia, y presión arterial alta, son
factores de riesgo para DMT2, por lo que un
diagnóstico temprano, podría facilitar su prevención.
Eso es posible mediante el uso de la
Metabolómica(análisis global de los metabolitos
celulares).
 Por lo anterior, es de gran importancia conocer el
perfil metabolómico que se presenta en el desarrollo
de estas enfermedades, con la finalidad de identificar
biomarcadores de diagnóstico temprano y así poder
prevenir la evolución de dichos padecimientos.

5. Objetivo
 Se elaboró un análisis no focalizado del Perfil
Metabolómico durante el desarrollo del SM inducido,
en un modelo animal a través de una dieta alta en
grasa y fructuosa.
DIETA ALTA
EN GRASA
DAG
DIETA
COMERCIAL
CONTROL
PROTEÍNAS 15% 22%
CARBOHIDR
45% 51%
ATOS
GRASAS 39% 5.5%
CALORÍAS 591 337

6. Metodología
400 μl
Plasma
1600 μl ACN
(80%)
Vortex 2 min,
incubación 4°C
por 2hrs
13,000 rpm
4°C, 20 min
1700 μl
Concentrar SpeedVac Sobrenadante
Temperatura ambiente
Toda la noche (24 hrs)
Transferir al vial y
Analizar por
60 μl
Disolución
ACN-AGUA
(50:50)
1° ACN- 1 min,vortex
2° AGUA- 1 min,vortex
HPLC
Vol Inyección 20 μl
13,000 rpm
TA, 2 min

7.  Condiciones de separación HPLC:
 Flujo 0.5 ml/min
 Temperatura 40 °C
 Gradiente lineal continuo
 C: Agua acidulada (0.1% Ác.Fórmico)
 D: ACN acidulado (0.1% Ác.Fórmico)
 Volumen inyección: 20 μL
 254 y 280 nm
 Tiempo de pos-run 5 min
 Preparada SpeedVac
Tiempo
(min)
%C %D
0 98 2
25,30,40 0 100
 Resuspensión en 60 l ACN/AGUA (50:50)= 130 l
del plasma original

9. 30
25
20
15
10
5
0
254nm MACHOS
0 5 10 15 20 25
mUABSORBANCIA
Tiempo (min)
OBESAS 254nm
CONTROL 254nm

10. 30
25
20
15
10
5
0
280nm MACHOS
0 5 10 15 20 25
mUABSORBANCIA
Tiempo (min)
OBESAS 280nm
CONTROL 280nm

11. 30
25
20
15
10
5
0
254nm HEMBRAS
0 5 10 15 20 25
mUABSORBANCIA
Tiempo (min)
OBESAS 254nm
CONTROL 254nm

12. 30
25
20
15
10
5
0
280nm HEMBRAS
0 5 10 15 20 25
mUABSORBANCIA
Tiempo (min)
OBESAS 280nm
CONTROL 280nm

13. MACHOS HEMBRAS
LONGITUD DE ONDA
(nm) 254 280 254 280
DIFERENCIAS 71 72 74 73
RANGO 1-14806 1-11962 1-17828 1-16835
VALORES MAYORES
OBESAS 33 35 34 37
VALORES MAYORES
CONTROL 38 37 40 36
Analísis Programa: ImageJ 1.46r

14. Conclusiones:
 La combinación de estas tecnologías, nos
permite describir un perfil de elución metabólico,
que puede ser utilizado para seguir el desarrollo
del SM. La caracterización de los picos
diferenciales, nos permitirá utilizar los metabolitos
como biomarcadores, para la detección precoz
de estas patologías.