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Paramixoviridae

Virus respiratorio Sincicial (hRSV)

Metapneumovirus humano (hMPV)
T23 respiratorios ii_2008
Clasificación taxonómica de los miembros de la Familia Paramyxoviridae que
                            infectan a humanos.




        Respirovirus


                                                           Subgrupo A y B




                Genus Henipavirus      Genus Metapneumovirus
                Hendra virus               human Metapneumovirus
                Nipah virus                    Subgrupo A y B
T23 respiratorios ii_2008
Estructura y organización genómica
T23 respiratorios ii_2008
T23 respiratorios ii_2008
Glicoproteínas de la envoltura
T23 respiratorios ii_2008
Glicoproteína G
T23 respiratorios ii_2008
T23 respiratorios ii_2008
Características antigénicas.

RSV     1 serotipo y 2 subgrupos A y B (líneas de evolución divergente).
81% identidad nt entre secuencias completas de A y B.
25-50% en F y 1-7% en G.
Divergencia intragrupo de aa a nivel de G > 20%.
> divergencia ectodominios de SH y G.
Subgrupo A : enfermedad más severa
Distintos linajes de cada subgrupo que cocirculan durante los períodos
epidémicos.
Amplia distribución geográfica.
Epidemiología

•Principal causa de hospitalización por infección respiratoria
en niños
•Infecta a niños de corta edad y neonatos
•Reinfecciones son comunes a toda edad (menor
enfermedad) SIN NECESIDAD DE DRIFT ANTIGENICO.
•Produce grandes epidemias anuales, y generalmente se
alternan A y B aunque hay cocirculación.
• Es la causa más importante de bronquiolitis y neumonías
en niños de corta edad que requieren hospitalización.
Epidemiología
   Es la mayor causa de infección intrahospitalaria durante
    la temporada epidémica.
   Es un patógeno importante en personas mayores de
    edad (geriátricos) similar al virus de influenza.
   Es estacional (fines del invierno, comienzos de
    primavera). Desaparece en los meses de verano.
   Mortalidad se asocia a otras patologías acompañantes.
   Se disemina rápidamente por secreciones infectadas en
    contacto con la conjuntiva o mucosa nasal.
Distribution of hMPV and other respiratory viruses in
New Haven, Connecticut. (Top panel) Weekly
distribution of hMPV genotypes from 1 November
2001 to 31 October 2002.
T23 respiratorios ii_2008
PATOGENIA I
PERIODO DE INCUBACION: 4-5 días.
Replicación en células del epitelio respiratorio, monocitos y
macrófagos. Inicialmente en tracto respiratorio superior, luego 2-3
dias de la rinorrea tracto respiratorio inferior.
Títulos de virus : 105 TCID50/ml de secreción.
Puede diseminarse célula- célula (sincicios)
Neumotrópico pero en casos severos (inmunodeficiencias) puede
replicar en células de riñón, hígado, miocardio, aunque no es esta
diseminación, la causa de muerte.
Patología: bronquiolitis. Necrosis y proliferación del epitelio
bronquioalveolar y destrucción de células ciliadas del epitelio.
Infiltrado de linfocitos, células plasmáticas, macrófagos. Edema,
secreción de mucus excesivo, restos celulares y células
inflamatorias que obstruyen los bronquiolos y alveólos, con colapso
de entrada de aire. Sincicios y antígenos virales en células del
epitelio de bronquios, bronquiolos, alveólos.
T23 respiratorios ii_2008
T23 respiratorios ii_2008
T23 respiratorios ii_2008
T23 respiratorios ii_2008
T23 respiratorios ii_2008
T23 respiratorios ii_2008
T23 respiratorios ii_2008
Clínica


Niños: bronquiolitis y neumonía. Rinorrea, tos, disminución del
apetito, broncoespasmo, fiebre intermitente, otitis media.
Adultos: rinorrea, faringitis, tos, bronquitis, dolor de cabeza,
fatiga. Aprox. 5 días.
Ancianos: (con otra enfermedad de base), neumonía severa
con hospitalización con ventilación asistida.
Inmunocomprometidos: comienza tracto respiratorio superior,
5-6 días, mayor % de infecciones respiratorias bajas que
progresan en un 50% a neumonías con células gigantes.
Mortalidad del 80-100% en inmunodeficientes severos como
leucemia y transplante de médula ósea.
PATOGENIA II


 CITOPATOLOGIA POR REPLICACION DEL VIRUS ES MUY
IMPORTANTE EN LA PATOLOGIA.
La inmunopatología no parece ser importante.
- pacientes inmunosuprimidos
- Ac maternos.
- Sistema inmune inmaduro.
-Desbalance de las células T CD4+ Th2
-DISMINUCIÓN DE SURFACTANTES.
- BACKGROUND GENÉTICO DEL HOSPEDADOR.
DIAGNÓSTICO

Menores de 6 meses:
   Diagn. diferencial RSV/PI3, ADV,INF, Rinovirus, Enterovirus.
Menores de 4 meses:
      - considerar también Chlamydea trachomatis.
En niños inmunodeficientes:
     - Pneumocystis carinii.
     - Descartar infecciones bacterianas.
Ancianos con bronquitis o neumonía y poca fiebre  RSV.
Grupo familiar con infección respiratoria y un menor de 2 años
tiene enfermedad más severa  RSV.
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO

Muestra: aspirado bronquioalveolar o lavado nasofaríngeo.
Preservación a 4 ºC y rápida inoculación. 3-7 días ECP, menor
tiempo por IF (shell vial).
Gold Standard: aislamiento del virus en cultivo de células.

aislamiento de hMPV:
    -cultivo de células de riñón de mono LLC-MK2 (10-14 dias
     post- inoculación)
     El ECP es variable, y algunas cepas forman sincicios con
redondamiento
    y lisis celular (figure 3)
      replicación en human laryngeal carcinoma (HEp-2) cells.
Ausencia de ECP

   •Confirmación del ECP de hMPV
Metapneumovirus
Fig. 1. Cells from a nasopharyngeal secretion stained
with the hMPV monoclonal
antibody pool.
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO
  Diagnóstico rápido: detección de antígenos virales o RNAv en secreciones.

 IF directa en células exfoliadas.

 ELISA de captura de Ag.


 RT-PCR testeando sobrenadante de cultivo.

                  (Protocolos de PCR amplificación de genes L, N, o F con primers
  derivados de secuencia de cepa prototipo strain 001 from The Netherlands (GenBank
  accession numberAF371337).

    RT-PCR para genes N y L genes, es la major para el diagnóstico de hMPV Real-
  time PCR, esta metodología está disponible para detectare este virus en 2 h

  RT-PCR (COMERCIAL). Multiplex. Detección de varios patógenos simultáneamente.
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO


 Serología: solo permite el diagnóstico retrospectivo.
     Seroconversión en el título de Ac en niños confirma infección reciente.

    - Detección de anticuerpos:

       IFI utilizando células infectadas con hPMV

    - ELISA utilizando lisado de células infectadas con hPMV.
    - ELISA utilizando proteínas virales derivadas de los 2 grupos hacen
      falta para grandes estudios de relevamiento epidemiológico.
TRATAMIENTO
 TERAPIA SOPORTE: remoción mecánica de secreciones, O2,
 asistencia respiratoria.
 Ribavirina (VIRAZOLE). 1986 Aprobada para tratamiento RSV.
 Aerosol 3-7 días.
 Inmunoprofilaxis: Ac neutralizantes combinados con Rib.

PREVENCIÓN Y CONTROL

Inmunoprofilaxis:
RSV-IVIG o Respigam. Igs fraccionadas a partir de sueros humanos
con alto tit. Ac a RSV.
SYNAGIS(MED-493). Monoclonal de ratón humanizado contra prot. F.
50-100 veces más efectiva que RSV-IVIG.
VACUNAS
- NO HAY VACUNAS APROBADAS.
Experimentales
- Inactivadas: (1960’). Desbalance de subpoblación Th2 CD4+ T cells.
Exagerada proliferación de estas células ante el desafío con virus
salvaje.
- Péptidos: igual que inactivadas
- Atenuadas: para ser administradas por via oral. Que estimulen la
respuesta de IgA secretoria mucosa tracto respiratorio superior.
- Quimera con epitopes de Subgrupo A y B.
Mutágenesis dirigida, ts, genética reversa, atenuación in vivo (cotton rat
y chimpanzé.

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T23 respiratorios ii_2008

  • 1. Paramixoviridae Virus respiratorio Sincicial (hRSV) Metapneumovirus humano (hMPV)
  • 3. Clasificación taxonómica de los miembros de la Familia Paramyxoviridae que infectan a humanos. Respirovirus Subgrupo A y B Genus Henipavirus Genus Metapneumovirus Hendra virus human Metapneumovirus Nipah virus Subgrupo A y B
  • 13. Características antigénicas. RSV 1 serotipo y 2 subgrupos A y B (líneas de evolución divergente). 81% identidad nt entre secuencias completas de A y B. 25-50% en F y 1-7% en G. Divergencia intragrupo de aa a nivel de G > 20%. > divergencia ectodominios de SH y G. Subgrupo A : enfermedad más severa Distintos linajes de cada subgrupo que cocirculan durante los períodos epidémicos. Amplia distribución geográfica.
  • 14. Epidemiología •Principal causa de hospitalización por infección respiratoria en niños •Infecta a niños de corta edad y neonatos •Reinfecciones son comunes a toda edad (menor enfermedad) SIN NECESIDAD DE DRIFT ANTIGENICO. •Produce grandes epidemias anuales, y generalmente se alternan A y B aunque hay cocirculación. • Es la causa más importante de bronquiolitis y neumonías en niños de corta edad que requieren hospitalización.
  • 15. Epidemiología  Es la mayor causa de infección intrahospitalaria durante la temporada epidémica.  Es un patógeno importante en personas mayores de edad (geriátricos) similar al virus de influenza.  Es estacional (fines del invierno, comienzos de primavera). Desaparece en los meses de verano.  Mortalidad se asocia a otras patologías acompañantes.  Se disemina rápidamente por secreciones infectadas en contacto con la conjuntiva o mucosa nasal.
  • 16. Distribution of hMPV and other respiratory viruses in New Haven, Connecticut. (Top panel) Weekly distribution of hMPV genotypes from 1 November 2001 to 31 October 2002.
  • 18. PATOGENIA I PERIODO DE INCUBACION: 4-5 días. Replicación en células del epitelio respiratorio, monocitos y macrófagos. Inicialmente en tracto respiratorio superior, luego 2-3 dias de la rinorrea tracto respiratorio inferior. Títulos de virus : 105 TCID50/ml de secreción. Puede diseminarse célula- célula (sincicios) Neumotrópico pero en casos severos (inmunodeficiencias) puede replicar en células de riñón, hígado, miocardio, aunque no es esta diseminación, la causa de muerte. Patología: bronquiolitis. Necrosis y proliferación del epitelio bronquioalveolar y destrucción de células ciliadas del epitelio. Infiltrado de linfocitos, células plasmáticas, macrófagos. Edema, secreción de mucus excesivo, restos celulares y células inflamatorias que obstruyen los bronquiolos y alveólos, con colapso de entrada de aire. Sincicios y antígenos virales en células del epitelio de bronquios, bronquiolos, alveólos.
  • 26. Clínica Niños: bronquiolitis y neumonía. Rinorrea, tos, disminución del apetito, broncoespasmo, fiebre intermitente, otitis media. Adultos: rinorrea, faringitis, tos, bronquitis, dolor de cabeza, fatiga. Aprox. 5 días. Ancianos: (con otra enfermedad de base), neumonía severa con hospitalización con ventilación asistida. Inmunocomprometidos: comienza tracto respiratorio superior, 5-6 días, mayor % de infecciones respiratorias bajas que progresan en un 50% a neumonías con células gigantes. Mortalidad del 80-100% en inmunodeficientes severos como leucemia y transplante de médula ósea.
  • 27. PATOGENIA II  CITOPATOLOGIA POR REPLICACION DEL VIRUS ES MUY IMPORTANTE EN LA PATOLOGIA. La inmunopatología no parece ser importante. - pacientes inmunosuprimidos - Ac maternos. - Sistema inmune inmaduro. -Desbalance de las células T CD4+ Th2 -DISMINUCIÓN DE SURFACTANTES. - BACKGROUND GENÉTICO DEL HOSPEDADOR.
  • 28. DIAGNÓSTICO Menores de 6 meses: Diagn. diferencial RSV/PI3, ADV,INF, Rinovirus, Enterovirus. Menores de 4 meses: - considerar también Chlamydea trachomatis. En niños inmunodeficientes: - Pneumocystis carinii. - Descartar infecciones bacterianas. Ancianos con bronquitis o neumonía y poca fiebre  RSV. Grupo familiar con infección respiratoria y un menor de 2 años tiene enfermedad más severa  RSV.
  • 29. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO Muestra: aspirado bronquioalveolar o lavado nasofaríngeo. Preservación a 4 ºC y rápida inoculación. 3-7 días ECP, menor tiempo por IF (shell vial). Gold Standard: aislamiento del virus en cultivo de células. aislamiento de hMPV: -cultivo de células de riñón de mono LLC-MK2 (10-14 dias post- inoculación) El ECP es variable, y algunas cepas forman sincicios con redondamiento y lisis celular (figure 3) replicación en human laryngeal carcinoma (HEp-2) cells. Ausencia de ECP •Confirmación del ECP de hMPV
  • 31. Fig. 1. Cells from a nasopharyngeal secretion stained with the hMPV monoclonal antibody pool.
  • 32. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO Diagnóstico rápido: detección de antígenos virales o RNAv en secreciones.  IF directa en células exfoliadas.  ELISA de captura de Ag.  RT-PCR testeando sobrenadante de cultivo. (Protocolos de PCR amplificación de genes L, N, o F con primers derivados de secuencia de cepa prototipo strain 001 from The Netherlands (GenBank accession numberAF371337). RT-PCR para genes N y L genes, es la major para el diagnóstico de hMPV Real- time PCR, esta metodología está disponible para detectare este virus en 2 h RT-PCR (COMERCIAL). Multiplex. Detección de varios patógenos simultáneamente.
  • 33. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO  Serología: solo permite el diagnóstico retrospectivo. Seroconversión en el título de Ac en niños confirma infección reciente. - Detección de anticuerpos: IFI utilizando células infectadas con hPMV - ELISA utilizando lisado de células infectadas con hPMV. - ELISA utilizando proteínas virales derivadas de los 2 grupos hacen falta para grandes estudios de relevamiento epidemiológico.
  • 34. TRATAMIENTO TERAPIA SOPORTE: remoción mecánica de secreciones, O2, asistencia respiratoria. Ribavirina (VIRAZOLE). 1986 Aprobada para tratamiento RSV. Aerosol 3-7 días. Inmunoprofilaxis: Ac neutralizantes combinados con Rib. PREVENCIÓN Y CONTROL Inmunoprofilaxis: RSV-IVIG o Respigam. Igs fraccionadas a partir de sueros humanos con alto tit. Ac a RSV. SYNAGIS(MED-493). Monoclonal de ratón humanizado contra prot. F. 50-100 veces más efectiva que RSV-IVIG.
  • 35. VACUNAS - NO HAY VACUNAS APROBADAS. Experimentales - Inactivadas: (1960’). Desbalance de subpoblación Th2 CD4+ T cells. Exagerada proliferación de estas células ante el desafío con virus salvaje. - Péptidos: igual que inactivadas - Atenuadas: para ser administradas por via oral. Que estimulen la respuesta de IgA secretoria mucosa tracto respiratorio superior. - Quimera con epitopes de Subgrupo A y B. Mutágenesis dirigida, ts, genética reversa, atenuación in vivo (cotton rat y chimpanzé.