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HISTORIA: EL INVENTO

           Se inventó, hacia
           1610, por Galileo,
           según los italianos,
           o por Jansen, en
           opinión de los
           holandeses
EL NOMBRE
    • La palabra microscopio fue
      utilizada por primera vez
      por los componentes de la
      "Accademia dei Lincei“
    • Micro=pequeño
    • Scopein=ver
GALILEO GALILEI

• La “Accademia dei
  Linceii” era una
 sociedad científica a la
 que pertenecía Galileo
 y publicaron un trabajo
 sobre la observación
 microscópica del
 aspecto de una abeja
MALPIGHI

    Las primeras
    publicaciones
    importantes aparecen en
    1660 y 1665 cuando
    Malpighi observa los
    capilares sanguíneos y
    Hooke publica su obra
    Micrographia
ANTONY VAN LEENWENHOEK
En el siglo XVII un
comerciante holandés,
utilizando microscopios
simples de fabricación
propia describió por
primera vez protozoos,
bacterias,
espermatozoides y
glóbulos rojos
MICROSCOPIO DE
LEEUWENHOEK
MICROSCOPIO DE
LEEUWENHOEK
CARACTERÍSTICAS DEL MICROSCOPIO DE
            LEEUWENHOEK

El primitivo microscopio
de Leeuwenhoek tenía
dos lupas combinadas
con las que llegó a
alcanzar 260 aumentos,
lo cual le permitió
visualizar algunos
protozoos e infusorios
MICROSCOPIOS DEL SIGLO XVIII
ERNST ABBE

     Las mejoras mas
     importantes de la
     óptica surgieron en
     1877 cuando Abbe
     publica su teoría
     del microscopio
CALR ZEISS

Mejora la microscopía
de inmersión
sustituyendo el agua
por aceite de cedro lo
que permite obtener
2000 aumentos
FUNDAMENTO DE LA
   MICROSCOPÍA
        Cuando el observador se
        acerca el objeto se
        agranda
        Pero a menos de 25 cm
        no se ve con claridad
        Si se aumenta el ángulo
        visual se ve con claridad
EVOLUCIÓN DEL MICROSCOPIO
ESQUEMA DEL MICROSCOPIO
Un tubo cilíndrico aloja el
sistema óptico ocular/objetivo.

Una platina de original diseño
permite observar las
preparaciones, que son
iluminadas por un espejo
cóncavo que concentra la luz
sobre el objeto a estudiar.
PARÁMETROS ÓPTICOS

          Aumento
          Poder de
          resolución
          Nº de campo
          Profundidad de
          foco
          Contraste
AUMENTO

Se calcula
multiplicando el
aumento del
objetivo por el
aumento del
ocular
CALCULO AUMENTO




El aumento de este microscopio puede calcularse como:
D= delta*25/(fob*foc)
Donde delta es la distancia que hay entre el foco imagen
del objetivo y la posición donde se forma la imagen.
PODER DE RESOLUCIÓN
          Distancia si dos puntos
          se distinguen
          Mayor, cuando menor
          es la longitud de onda
          Mayor, cuanto mas
          grande es la apertura
          numérica
          Mayor, con aceite de
          cedro
Número de campo

        Es el diámetro
        de la imagen
        observada a
        través del ocular,
        expresado en
        milímetros
PROFUNDIDAD DE CAMPO
CONTRASTE

      Diferencia de
      absorción de luz
      entre el objeto y
      el medio
      Puede
      aumentarse con
      las tinciones
BUENOS PARÁMETROS
MICROSCOPIO ÓPTICO
    COMPUESTO
PARTE MECÁNICA QUE SE
        PUEDE DESMONTAR
                             Estativo




                             Tornillos
 Cabezal                       de la
                              platina



Oculares

                       Condensador
Objetivos
SISTEMA DE SOPORTE O
       ESTATIVO
                    Tubo


Platina              Brazo




Píe
SISTEMA DE AJUSTE
  Anillo de
ajuste de los
  oculares

                                Tornillo que
                                  permite
                                 mover el
                                  cabezal

Tornillos del
condensador



                                   Tornillos
  Palanca de                     reguladores
   cierre del                    de la platina
  diafragma
SISTEMA DE ENFOQUE

                  Freno




               Tornillo
             macrométrico



                 Tornillo
               micrométric
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SISTEMA DE ILUMINACIÓN:
              FUENTE DE LUZ
                     Suele ser una lámpara
                     halógena de intensidad
                     graduable
                     Se enciende y apaga
                     con un interruptor
Filtro
                     En el exterior puede
                     tener un filtro

                            Interruptor y
                         graduación de la luz
         Lámpara
CONDENSADOR Y
               DIAFRAGMA
Condensado
Concentra la luz de la
lámpara en un punto
de la preparación

Diafragma o iris
Está dentro del
condensador, si se
cierra mejora el
contraste, pero
empeora la resolución
LENTES: OBJETIVOS
          Están colocados en el
          revolver
          Tienen un sistema de
          amortiguación
          Un anillo coloreado
          indica los aumentos
          Son de 4, 10, 40 y 100
          (inmersión) aumentos
OBJETIVOS


    Rojo
     4x
                             Amarillo
                              10x




Blanco
 100x                        Azul
                             40x
           Amortiguación
LENTES: OCULARES


                                    Oculares
     Ajuste de la
distancia interpupilar
OCULARES: 10x; 15x; 20x
TETRAOCULARES
MATERIAL NECESARIO:
  PORTAS Y CUBRES
ACEITE DE INMERSIÓN

Hoy no son de madera de
cedro, sino sintéticos
Los hay de baja, media y
alta viscosidad
Su empleo es
imprescindible con el
objetivo de inmersión
(100x)
Por Qué ?
Para controlar la refracción de la luz…




Video Explicativo…..
http://www.youtube.com/watch?v=zWlz7SJFQz8
MANEJO DEL MICROSCOPIO
No poner la preparación al    Mirando por fuera subir la
revés                         platina
Regular la luz a intensidad   Enfocar y ajustar
media                         Pasar al siguiente
Ajustar condensador y         aumento y enfocar
diafragma al medio            Al acabar retirar la
Empezar por poco              preparación
aumento                       Apagar la luz
CONSERVACIÓN DEL
          MICROSCOPIO
Ponerle su funda al
guardarlo
Limpieza de lentes con
papel de gafas
El exceso de xilol al
limpiar las lentes
desgasta el cemento
Usar pincel y pera de
aire
TIPOS DE MICROSCOPIOS
                             Microscopio
                             Óptico Simple         Lupa

              Microscopio
              óptico                         M.O. Normal
                             Microscopio
                                             Campo oscuro
                             Óptico
                                             Contraste de fases
                             Compuesto
                                             Fluorescencia
Tipos de
microscopio
s

                             Transmisión
               Microscopio   Barrido
               electrónico   Digital
                             Efecto túnel o cuántico
PODER DE OBSERVACIÓN
  DEL MICROSCOPIO
MICROSCOPÍA DE CAMPO
       OSCURO




             Treponema pallidum
MICROSCOPÍA DE CAMPO
         OSCURO
La microscopia de campo oscuro es una
técnica de iluminación especial que se
caracteriza en la iluminación oblicua para
realzar el contraste en las muestras que no
son reflejadas bien bajo condiciones normales
de la iluminación del campo claro,
observándose partículas que aparecen como
puntos brillantes sobre un fondo oscuro.
MICROSCOPÍA DE CONTRASTE
        DE FASES




              Células epiteliales 20 x
MICROSCOPÍA DE CONTRASTE
        DE FASES

El ojo humano es capaz de observar diferencias de color y
de intensidades de color, no así diferencias de fases
(producidas por distintos índices de refracción que tienen
los objetos), por eso se recurre al microscopio de
contraste de fase. La microscopia de contraste de fases
hace posible observar células en estado vivo más
fácilmente, ayudando así a evitar la creación de
condiciones artificiales tales como las introducidas por la
tinción
MICROSCOPIA DE
        FLUORESCENCIA




Células epiteliales 200 x
MICROSCOPIA DE
          FLUORESCENCIA
La fluorescencia es la propiedad que tienen ciertas
sustancias de emitir luz de longitudes de onda larga,
cuando son expuestas a una radiación de longitud de
onda corta. Esta capacidad de fluorescencia puede ser
débil o alta o que no la tengan; pero este último puede
ser corregido con el coloreado con sustancias
fluorescentes llamada fluorocromo que inducen
fluorescencia que facilitan diferenciarlos. La microscopía
de fluorescencia utiliza dispositivos especiales que
permiten aprovechar este fenómeno para visualizar
estructuras que con otro tipo de microscopía no se puede
realizar.
ERNST RUSKA
     El microscopio
     electrónico de
     transmisión (T.E.M.)
     consiguió aumentos de
     100.000 X. Fue
     desarrollado por Max
     Knoll y Ernst Ruska en
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Utilizó un haz de
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Microscopia

  • 1.
  • 2. HISTORIA: EL INVENTO Se inventó, hacia 1610, por Galileo, según los italianos, o por Jansen, en opinión de los holandeses
  • 3. EL NOMBRE • La palabra microscopio fue utilizada por primera vez por los componentes de la "Accademia dei Lincei“ • Micro=pequeño • Scopein=ver
  • 4. GALILEO GALILEI • La “Accademia dei Linceii” era una sociedad científica a la que pertenecía Galileo y publicaron un trabajo sobre la observación microscópica del aspecto de una abeja
  • 5. MALPIGHI Las primeras publicaciones importantes aparecen en 1660 y 1665 cuando Malpighi observa los capilares sanguíneos y Hooke publica su obra Micrographia
  • 6. ANTONY VAN LEENWENHOEK En el siglo XVII un comerciante holandés, utilizando microscopios simples de fabricación propia describió por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos
  • 9. CARACTERÍSTICAS DEL MICROSCOPIO DE LEEUWENHOEK El primitivo microscopio de Leeuwenhoek tenía dos lupas combinadas con las que llegó a alcanzar 260 aumentos, lo cual le permitió visualizar algunos protozoos e infusorios
  • 11. ERNST ABBE Las mejoras mas importantes de la óptica surgieron en 1877 cuando Abbe publica su teoría del microscopio
  • 12. CALR ZEISS Mejora la microscopía de inmersión sustituyendo el agua por aceite de cedro lo que permite obtener 2000 aumentos
  • 13. FUNDAMENTO DE LA MICROSCOPÍA Cuando el observador se acerca el objeto se agranda Pero a menos de 25 cm no se ve con claridad Si se aumenta el ángulo visual se ve con claridad
  • 15. ESQUEMA DEL MICROSCOPIO Un tubo cilíndrico aloja el sistema óptico ocular/objetivo. Una platina de original diseño permite observar las preparaciones, que son iluminadas por un espejo cóncavo que concentra la luz sobre el objeto a estudiar.
  • 16.
  • 17. PARÁMETROS ÓPTICOS Aumento Poder de resolución Nº de campo Profundidad de foco Contraste
  • 18. AUMENTO Se calcula multiplicando el aumento del objetivo por el aumento del ocular
  • 19. CALCULO AUMENTO El aumento de este microscopio puede calcularse como: D= delta*25/(fob*foc) Donde delta es la distancia que hay entre el foco imagen del objetivo y la posición donde se forma la imagen.
  • 20. PODER DE RESOLUCIÓN Distancia si dos puntos se distinguen Mayor, cuando menor es la longitud de onda Mayor, cuanto mas grande es la apertura numérica Mayor, con aceite de cedro
  • 21. Número de campo Es el diámetro de la imagen observada a través del ocular, expresado en milímetros
  • 23. CONTRASTE Diferencia de absorción de luz entre el objeto y el medio Puede aumentarse con las tinciones
  • 25. MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO
  • 26. PARTE MECÁNICA QUE SE PUEDE DESMONTAR Estativo Tornillos Cabezal de la platina Oculares Condensador Objetivos
  • 27. SISTEMA DE SOPORTE O ESTATIVO Tubo Platina Brazo Píe
  • 28. SISTEMA DE AJUSTE Anillo de ajuste de los oculares Tornillo que permite mover el cabezal Tornillos del condensador Tornillos Palanca de reguladores cierre del de la platina diafragma
  • 29. SISTEMA DE ENFOQUE Freno Tornillo macrométrico Tornillo micrométric o
  • 30. PLATINA Pinza Escala
  • 31. PARTE ÓPTICA Lentes: Oculares Objetivos Sistema de iluminación: Condensador Diafragma Fuente de luz
  • 32. SISTEMA DE ILUMINACIÓN: FUENTE DE LUZ Suele ser una lámpara halógena de intensidad graduable Se enciende y apaga con un interruptor Filtro En el exterior puede tener un filtro Interruptor y graduación de la luz Lámpara
  • 33. CONDENSADOR Y DIAFRAGMA Condensado Concentra la luz de la lámpara en un punto de la preparación Diafragma o iris Está dentro del condensador, si se cierra mejora el contraste, pero empeora la resolución
  • 34. LENTES: OBJETIVOS Están colocados en el revolver Tienen un sistema de amortiguación Un anillo coloreado indica los aumentos Son de 4, 10, 40 y 100 (inmersión) aumentos
  • 35. OBJETIVOS Rojo 4x Amarillo 10x Blanco 100x Azul 40x Amortiguación
  • 36. LENTES: OCULARES Oculares Ajuste de la distancia interpupilar
  • 39. MATERIAL NECESARIO: PORTAS Y CUBRES
  • 40. ACEITE DE INMERSIÓN Hoy no son de madera de cedro, sino sintéticos Los hay de baja, media y alta viscosidad Su empleo es imprescindible con el objetivo de inmersión (100x)
  • 41. Por Qué ? Para controlar la refracción de la luz… Video Explicativo….. http://www.youtube.com/watch?v=zWlz7SJFQz8
  • 42.
  • 43.
  • 44.
  • 45.
  • 46. MANEJO DEL MICROSCOPIO No poner la preparación al Mirando por fuera subir la revés platina Regular la luz a intensidad Enfocar y ajustar media Pasar al siguiente Ajustar condensador y aumento y enfocar diafragma al medio Al acabar retirar la Empezar por poco preparación aumento Apagar la luz
  • 47. CONSERVACIÓN DEL MICROSCOPIO Ponerle su funda al guardarlo Limpieza de lentes con papel de gafas El exceso de xilol al limpiar las lentes desgasta el cemento Usar pincel y pera de aire
  • 48. TIPOS DE MICROSCOPIOS Microscopio Óptico Simple Lupa Microscopio óptico M.O. Normal Microscopio Campo oscuro Óptico Contraste de fases Compuesto Fluorescencia Tipos de microscopio s Transmisión Microscopio Barrido electrónico Digital Efecto túnel o cuántico
  • 49. PODER DE OBSERVACIÓN DEL MICROSCOPIO
  • 50. MICROSCOPÍA DE CAMPO OSCURO Treponema pallidum
  • 51. MICROSCOPÍA DE CAMPO OSCURO La microscopia de campo oscuro es una técnica de iluminación especial que se caracteriza en la iluminación oblicua para realzar el contraste en las muestras que no son reflejadas bien bajo condiciones normales de la iluminación del campo claro, observándose partículas que aparecen como puntos brillantes sobre un fondo oscuro.
  • 52. MICROSCOPÍA DE CONTRASTE DE FASES Células epiteliales 20 x
  • 53. MICROSCOPÍA DE CONTRASTE DE FASES El ojo humano es capaz de observar diferencias de color y de intensidades de color, no así diferencias de fases (producidas por distintos índices de refracción que tienen los objetos), por eso se recurre al microscopio de contraste de fase. La microscopia de contraste de fases hace posible observar células en estado vivo más fácilmente, ayudando así a evitar la creación de condiciones artificiales tales como las introducidas por la tinción
  • 54. MICROSCOPIA DE FLUORESCENCIA Células epiteliales 200 x
  • 55. MICROSCOPIA DE FLUORESCENCIA La fluorescencia es la propiedad que tienen ciertas sustancias de emitir luz de longitudes de onda larga, cuando son expuestas a una radiación de longitud de onda corta. Esta capacidad de fluorescencia puede ser débil o alta o que no la tengan; pero este último puede ser corregido con el coloreado con sustancias fluorescentes llamada fluorocromo que inducen fluorescencia que facilitan diferenciarlos. La microscopía de fluorescencia utiliza dispositivos especiales que permiten aprovechar este fenómeno para visualizar estructuras que con otro tipo de microscopía no se puede realizar.
  • 56. ERNST RUSKA El microscopio electrónico de transmisión (T.E.M.) consiguió aumentos de 100.000 X. Fue desarrollado por Max Knoll y Ernst Ruska en Alemania en 1931
  • 57. PRIMER MICROSCOPIO ELECTRONICO Utilizó un haz de electrones en lugar de luz para enfocar la muestra. Posteriormente, en 1942 se desarrolla el microscopio electrónico de barrido (SEM).
  • 60. M.E. DE TRASMISIÓN Bacilos en división
  • 61. M.E DE BARRIDO Glóbulo rojo
  • 62. M.E. DE BARRIDO Glóbulo blanco