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Resistencia bacteriana de enterobacterias y no fermentadores, antibioticos b-lactamicos, mecanismos de resistencia, clasificacion, test confirmatorio de BLEE.

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Enterobacterias

  1. 1. Resistencia Bacteriana En enterobacterias y no fermentadores
  2. 2. Antibióticos β-lactámicos Suárez C.(2009). Enferm Infecc Microbiol Clin. 27(2):116–129
  3. 3. Formación de la pared bacteriana Suárez C.(2009). Enferm Infecc Microbiol Clin. 27(2):116–129
  4. 4. Mecanismos de acción de los betalactámicos Suárez C.(2009). Enferm Infecc Microbiol Clin. 27(2):116–129
  5. 5. Mecanismo de resistencia a betalactámicos  Betalactamasas  Alteración de permeabilidad de la membrana externa (perdida o reducción de porinas).  Aumento de bombas de extrusión  Modificación de dianas de acción (Mutación en las proteínas de unión a la penicilina).
  6. 6. Betalactamasas IMIPENEM http://faculty.ccbcmd.edu/courses/bio141/lecguide/unit2/control/blactam.html
  7. 7. Clasificación de las Betalactamasas Los esquemas más ulizados para la clasificación de las betalactamasas son: Clasificación Funcional según Bush-Jacoby-Medeiros Clasificación molecular según Ambler (clases A, B, C y D). Bush K. et al (1995). AAC. 39(6): 1211–1233. Bush, K. (2010). AAC. 54 (3): 969 - 976
  8. 8. Clasificación funcional  Grupo 1: Cefalosporinasas que no son inhibidas por ácido clavulánico. Enzimas tipo serina (clase molecular C).  Grupo 2: Betalactamasas (con diferente perfil sustrato) que generalmente son inhibidas por ácido clavulánico Enzimas tipo serina (clase molecular A y D) .  Grupo 3: Metalo-betalactamasas, que son pobremente inhibidas ácido clavulánico de betalactamasas, pero son inhibidas por agentes quelantes (clase molecular B).  Grupo 4: Penicilinasas no inhibidas por ácido clavulánico (no están clasificadas molecularmente). Bush K. et al (1995). AAC. 39(6): 1211–1233. Bush, K. (2010). AAC. 54 (3): 969 - 976
  9. 9. Clasificación de las Betalactamasas INHIBIDO POR GRUPO BUSHJACOBY (2009) GRUPO BUSHJACOBY (2009) AMBLER 1 1 C 1e 2a C A 2b A 2be A 2br A 2ber A 2c 2ce 2d A A D 2de D 2df D Cloxacilina y carbapenemes 2e A Cefalosporinas de espectro extendido (no actúa sobre monobactámicos) 2f A 3a 3b 2 3 SUSTRATO REPRESENTANTE Ac. Clav. EDTA Cefalosporinas y cefamicinas No No AmpC, CMY-2, FOX, MIR, ACT, Cefalosporinas Penicilinas Penicilinas y cefalosporinas de primera generación Cefalosporinas de espectro extendido y monobactámicos Penicilinas Cefalosporinas de espectro extendido y monobactámicos Carbenicilinas Carbenicilina y cefepime Cloxacilina Cloxaxilina y cefalosporinas de espectro extendido No Si No No GCI, CMY-37 PC-1 Si No TEM-1, TEM-2, SHV-1 Si No TEM-3, SHV-2, CTX-M-15, PER-1 No No TEM-30, SHV-10 No No TEM-50 Si Si Variable No No No PSE-1, CARB-3 RTG-4 OXA-1, OXA-10 Variable No 0XA-11, OXA-15 Variable No OXA-23, OXA-24, OXA-48 Si No CepA Carbapenemes Variable No KPC, IMI, SME B Carbapenemes No Si IMP, VIM, GIM, SPM, SIM, NDM B Carbapenemes No Si CAU, GOB, FEZ Bush K. et al (1995). AAC. 39(6): 1211–1233. Bush, K. (2010). AAC. 54 (3): 969 - 976
  10. 10. Betalactamasas de Amplio espectro GRUPO BUSH- GRUPO BUSHAMBLER JACOBY (2009) JACOBY (2009) SUSTRATO INHIBIDO POR Ac. Clav. REPRESENTANTE EDTA C Cefalosporinas y cefamicinas No No AmpC, CMY-2, FOX, MIR, ACT, 1e 2a C A No No GCI, CMY-37 PC-1 A Si No TEM-1, TEM-2, SHV-1 A Si No TEM-3, SHV-2, CTX-M-15, PER-1 2br A No No TEM-30, SHV-10 2ber A No No TEM-50 2c 2ce 2d A A D Si Si Variable No No No PSE-1, CARB-3 RTG-4 OXA-1, OXA-10 2de D Cefalosporinas Penicilinas Penicilinas y cefalosporinas de primera generación Cefalosporinas de espectro extendido y monobactámicos Penicilinas Cefalosporinas de espectro extendido y monobactámicos Carbenicilinas Carbenicilina y cefepime Cloxacilina Cloxaxilina y cefalosporinas de espectro extendido No Si 2be Variable No 0XA-11, OXA-15 2df D Cloxacilina y carbapenemes Variable No OXA-23, OXA-24, OXA-48 2e 2 1 2b 1 A Cefalosporinas de espectro extendido (no actúa sobre monobactámicos) Si No CepA Variable No KPC, IMI, SME Carbapenemes Bush, K. 2f (2010).A AAC. 54 (3): 969 - 976 3 3a B Carbapenemes No Si IMP, VIM, GIM, SPM, SIM; NDM 3b B Carbapenemes No Si CAU, GOB, FEZ Bush K. et al (1995). AAC. 39(6): 1211–1233. Bush, K. (2010). AAC. 54 (3): 969 - 976
  11. 11. Betalactamasas de Espectro Extendido (BLEE) GRUPO BUSH- GRUPO BUSHAMBLER JACOBY (2009) JACOBY (2009) SUSTRATO INHIBIDO POR Ac. Clav. REPRESENTANTE EDTA C Cefalosporinas y cefamicinas No No AmpC, CMY-2, FOX, MIR, ACT, 1e 2a C A No No GCI, CMY-37 PC-1 A Si No TEM-1, TEM-2, SHV-1 A Si No TEM-3, SHV-2, CTX-M-15, PER-1 2br A No No TEM-30, SHV-10 2ber A No No TEM-50 2c 2ce 2d A A D Si Si Variable No No No PSE-1, CARB-3 RTG-4 OXA-1, OXA-10 2de D Cefalosporinas Penicilinas Penicilinas y cefalosporinas de primera generación Cefalosporinas de espectro extendido y monobactámicos Penicilinas Cefalosporinas de espectro extendido y monobactámicos Carbenicilinas Carbenicilina y cefepime Cloxacilina Cloxaxilina y cefalosporinas de espectro extendido No Si 2be Variable No 0XA-11, OXA-15 2df D Cloxacilina y carbapenemes Variable No OXA-23, OXA-24, OXA-48 2e 2 1 2b 1 A Cefalosporinas de espectro extendido (no actúa sobre monobactámicos) Si No CepA Variable No KPC, IMI, SME Carbapenemes Bush, K. 2f (2010).A AAC. 54 (3): 969 - 976 3 3a B Carbapenemes No Si IMP, VIM, GIM, SPM, SIM, NDM 3b B Carbapenemes No Si CAU, GOB, FEZ Bush K. et al (1995). AAC. 39(6): 1211–1233. Bush, K. (2010). AAC. 54 (3): 969 - 976
  12. 12. Test confirmatorio para detección de BLEE Prueba positiva: Un incremento ≥ 5 mm en la zona de diámetro para cualquiera de los agentes antimicrobianos probados en combinación con acido clavulánico vs la zona de diámetro cuando el antimicrobiano se prueba solo. Ejemplo: Ceftazidime (CAZ): 16 mm Ceftazidme + Ac. clavulánico (CAZ/CLA): 21
  13. 13. Test confirmatorio para detección de BLEE con método epsilométrico Prueba positiva: Un incremento en la CIM ≥ 3 diluciones dobles en la elipse de cefotaxime en combinación con acido clavulánico (CTL) vs la zona de elipse con cefotaxime solo. Ejemplo: Cefotaxime (CT): 16mg/mL Cefotaxime + Ac. clavulánico (CTL): 0,25mg/mL
  14. 14. CTX – M 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Villegas MV. et al. (2004). AAC. 48(2): 629 – 631. Mantilla JR et al. (2006). Biomédica. 26(3): 408 – 414, Pulido IY et al. (2011). Biomédica. 31(1): 15 - 20 Velandia DA. et al. (2006). JCM. 44(5): 1919 – 1920. Villegas MV. et al. (2011). JCM. 49(5): 1993 – 1996 Espinal PA. et al. (2004). Biomédica. 24(3): 252 – 261. Espinal PA. et al. (2010). J Chemother. 22(3):160-4. Leal Al et al (2012). Enferm Infecc Microbiol Clin. SHV
  15. 15. Carbapenemasas GRUPO BUSH- GRUPO BUSHAMBLER JACOBY (2009) JACOBY (2009) SUSTRATO INHIBIDO POR Ac. Clav. REPRESENTANTE EDTA C Cefalosporinas y cefamicinas No No AmpC, CMY-2, FOX, MIR, ACT, 1e 2a C A No No GCI, CMY-37 PC-1 A Si No TEM-1, TEM-2, SHV-1 A Si No TEM-3, SHV-2, CTX-M-15, PER-1 2br A No No TEM-30, SHV-10 2ber A No No TEM-50 2c 2ce 2d A A D Si Si Variable No No No PSE-1, CARB-3 RTG-4 OXA-1, OXA-10 2de D Cefalosporinas Penicilinas Penicilinas y cefalosporinas de primera generación Cefalosporinas de espectro extendido y monobactámicos Penicilinas Cefalosporinas de espectro extendido y monobactámicos Carbenicilinas Carbenicilina y cefepime Cloxacilina Cloxaxilina y cefalosporinas de espectro extendido No Si 2be Variable No 0XA-11, OXA-15 2df D Cloxacilina y carbapenemes Variable No OXA-23, OXA-24, OXA-48 2e 2 1 2b 1 A Cefalosporinas de espectro extendido (no actúa sobre monobactámicos) Si No CepA Variable No KPC, IMI, SME Carbapenemes Bush, K. 2f (2010). A AAC. 54 (3): 969 - 976 3 3a B Carbapenemes No Si IMP, VIM, GIM, SPM, SIM, NDM 3b B Carbapenemes No Si CAU, GOB, FEZ Bush K. et al (1995). AAC. 39(6): 1211–1233. Bush, K. (2010). AAC. 54 (3): 969 - 976
  16. 16. Carbapenemasas 1. Grupo más versátil de betalactamasas 2. Incremento en la complejidad (mas clases dentro de cada clase). 3. Diferentes patógenos y diferentes niveles de expresión. 4. Diferentes genes de resistencia asociados. 5. Detección en el laboratorio Nordmann P, Naas T, Poirel L. Global spread of Carbapenemase-producing Enterobacteriaceae. Emerg Infect Dis. 2011 Oct;17(10):1791-8.
  17. 17. Nordmann P, Naas T, Poirel L. Global spread of Carbapenemase-producing Enterobacteriaceae. Emerg Infect Dis. 2011 Oct;17(10):1791-8.
  18. 18. Carbapenemasas adquiridas Diapositiva de Fernando Pasteran Metalobetalactamasas MBL –clase B VIM, NDM, IMP, SPM. GIM, SIM, AIM, KHM, DIM, FIM BGNNF >> Enterob. R a C3G y C4G S a AZT Enzimas tipo serina clase A KPC, GES, Sme, IMI/NMC Enterob>>BGNNF KPC y GES: R a C3G, C4G y AZT Inh. por EDTA Inh. por APB Grupo 3 Grupo 2f Enzimas tipo serina clase D Oxacilinasas OXA-23, OXA-24, OXA-51, OXA-58, OXA-143, OXA-48 Acinetob>> Enterob. No perfil típico hidrólisis variable Sin inhibidores Grupo 2d
  19. 19. Carbapenemasas Fuente: Emerg Infect Dis 2011 Centers for Disease Control and Prevention (CDC)
  20. 20. Carbapenemasas http://new.paho.org/hq/index.php
  21. 21. Carbapenemasas KPC KPC REPORTADAS EN COLOMBIA en Colombia 1. Carbapenemasas tipo KPC: variantes KPC-2 y KPC-3 (1, 2, 3, 4, 5) 2. Detectadas en enterobacterias (principalmente K, pneumoniae, E coli) y no fermentadores como P. aeruginosa. 3. Diseminación de KPC-3 en hospitales de diferenctes ciudades de Colombia (3, 4, 5). 1. 2. 3. 4. 5. Villegas MV (2006). AAC. 50:2880-2882. Villegas MV (2007). AAC. 51:2001-2004. Saavedra SY (2009). CMI. 15: 19th ECCMID. P791. S481-S482 Saavedra SY (2010). CMI. 16: 20th ECCMID. P1281. S361 López J. (2010). CMI. 54:1354-1357
  22. 22. Carbapenemasas MBL en colombia 1. Carbapenemasas VIM por primera vez detectadas en Verona Italia (Imipenemasa Veronesa), en 1997 en P. aeruginosa. De las 37 variantes en Colombia se han detectado VIM-8 (1) y VIM-2 (3) en P. aeruginosa y VIM-24 (3) en K. pneumoniae. 1. 2. 3. Crespo MP. et al (2004). JCM. 42(11): 5094-5101 Villegas MV. et al (2006). AAC. 50(1): 226 - 229 Villegas MV. et al (2011). AAC. 55(5): 2428-2830
  23. 23. Distribución por departamento de carbapenemasas tipo NDM Departamento y/o distrito Microoganismo Bogotá K. pneumoniae Santander Providencia rettgeri Valle Acinetobacter Bogotá Providencia rettgeri Departamentos donde se ha identificado NDM
  24. 24. Carbapenemasas tipo MBL en KPC REPORTADAS EN COLOMBIA Colombia 1. De las carbapenemasas tipo VIM en Colombia se han reportado las variantes VIM-8 (1), VIM-2 (2) y VIM-24 (3). 2. Carbapenemasa NDM (New Delhi Metallo-B-lactamase), detectada por primera vez en Suecia en 2008 en un paciente transferido de un hospital de Nueva Deli. Aislada principalmente en enterobacterias pero también se ha detectado en no fermentadores. 3. Circular 0056 del Instituto Nacional de Salud del 14 de agosto de 2012 primera detección de aislamientos de K. pneumoniae de origen intrahospitalarios portadores de NDM-1 1. 2. 3. Crespo MP. et al (2004). JCM. 42: 5094-5101 Villegas MV. et al (2006). AAC. 50: 226 - 229 Villegas MV. et al (2011). AAC. 55: 2428-2830
  25. 25. KPC REPORTADAS ENOxacilinasas en Colombia Carbapenemasas tipo COLOMBIA 1. En Colombia, la carbapenemasa tipo OXA más prevalente es la enzima OXA-23 detectada en A. baumannii de hospitales de diferentes ciudades (1, 2, 3, 4) 2. También se reportó la presencia de la enzima OXA-72 (enzima del subgrupo OXA-24), la cual se presentó en un aislamiento de A. baumannii de Bogotá (5) y en un aislamiento de A. Pittii (6). 1. 2. 3. 4. 5. 6. Villegas MV. et al. (2007) AAC. 51(6):2001-2004. Saavedra SY. et al. (2008). Int J Antimicrob Agents. 31(4):389-391. Pinzíon JO. et al (2006). Infectio 2006;10(2):78-85 Saavedra SY. et al. (2008) CMI. 14(S7) 18th ECCMID P1673: S485 Saavedra et al. (2010) CMI. 14(S7) 20th ECCMID P791: S202- S203. Montealegre MC (2012). Antimicrob Agents Chemother. 56:3996-3998
  26. 26. Protocolos Antibiograma Enterobacterias Ampicilina (10 ug) Ampicilina (10 ug) Amoxicilina- Ac clavulánico (20/10ug) Amoxicilina- Ac clavulánico (20/10ug) Piperacilina //Tazobactam (100/10 ug) Piperacilina Tazobactam (100/10 ug) Cefalotina (30 ug) Cefalotina (30 ug) Cefotaxima (30 ug) Cefotaxima (30 ug) Ceftazidima (30 ug) Ceftazidima (30 ug) Cefepime (30 µg) Cefepime (30 µg) Aztreonam (30ug) Aztreonam (30ug) Imipenem (10 ug) Imipenem (10 ug) Meropenem (10µg) Meropenem (10µg) Gentamicina 10 ug) Gentamicina 10 ug) Amikacina (30 ug) Amikacina (30 ug) Ciprofloxacina (5 ug) Ciprofloxacina (5 ug) Trimetropin sulfa (25 ug) Trimetropin sulfa (25 ug) Cefoxitina (30 ug) Cefoxitina (30 ug) Acido Nalidíxico (30 ug) Acido Nalidíxico (30 ug) Colistin (10 ug) Colistin (10 ug)
  27. 27. Protocolos Antibiograma Pseudomonas Piperacilina //Tazobactam (100/10 ug) Piperacilina Tazobactam (100/10 ug) Ceftazidima (30 ug) Ceftazidima (30 ug) Cefoperazona (30 ug) Cefoperazona (30 ug) Cefepime (30 ug) Cefepime (30 ug) Aztreonam (30 ug) Aztreonam (30 ug) Imipenem (10 ug) Imipenem (10 ug) Meropenem (10 ug) Meropenem (10 ug) Ciprofloxacina (5 ug) Ciprofloxacina (5 ug) Gentamicina (10 ug) Gentamicina (10 ug) Amikacina (30 ug) Amikacina (30 ug) Colistin (10 ug) (no informar si no se Colistin (10 ug) (no informar si no se hace CIM) hace CIM) Acinetobacter Ampicilina/ Sulbactam (10/10 ug) Piperacilina / Tazobactam (100/10 ug) Ceftazidima (30 ug) Cefepime (30 ug) Imipenem (10 ug) Meropenem (10 ug) Ciprofloxacina (5 ug) Gentamicina (10 ug) Amikacina (30 ug) Trimetropin sulfa (25 ug) Doxiciclina (30 ug) Colistin (10 ug) (no informar si no se hace CIM)
  28. 28. Test Modificado de Hodge (TMH) A partir de la suspensión 0,5 Mac Farland realizar una dilución 1/10 con solución salina
  29. 29. Cuando realizar el TMH Recomendada por CLSI, para enterobacterias, se debe realizar cuando se cumplan los siguientes criterios (únicamente para enterobacterias):  Resistencia a una o más cefalosporinas de la subclase III. (ceftriaxone, cefotaxime, ceftazidime, cefoperazone, ceftizoxime) 1. Control negativo para producción de carbapenemasas 2. Control positivo para producción de carbapenemasas 3. Aislamiento positivo para producción de carbapenemasas Foto archivo laboratorio de microbiología – Facultad de medicina - Universidad Nacional de Colombia Resistencia o susceptibilidad intermedia a por lo menos un carbapenémico:  Difusión de disco: Ertapenem (19-21 mm) y meropenem ( 16-21mm), no imipenem.
  30. 30.  Microdilución (CIM): CIM de Ertapenem CIM de Imipenem y/o Meropenem 2µg/mL 2 – 4 µg/mL.  Las especies Proteus sp, Providencia sp y Morganella sp, pueden presentar CIMs elevados a imipenem por mecanismos no relacionados a la producción de carbapenemasas, por lo cual sugiere iniciar la búsqueda de carbapenemasas en estos géneros a partir de una CIM de 4µg/mL para imipenem y 2µg/mL para ertapenem y meropenem  Reporte en caso de prueba positiva: “Organismo con posible producción de carbapenemasas” y no cambie la interpretación de susceptibilidad a carbapenémicos. Nota : No todos los aislamientos de Enterobacteriacea productores de Carbapenemasas son TMH (+) y resultados de MHT (+) pueden encontrarse en aislamientos con mecanismos de resistencia a carbapenémicos diferentes a la producción de carbapenemasas .
  31. 31. Resultados TMH CLSI, 2012
  32. 32. Que dice la literatura • Test modificado de Hodge es útil en la detección de carbapenemasas KPC y OXA-48 (1). • Especificidad: Se pueden presentar falsos positivos en hiperproductores de AmpC o de CTX-M que prreesente alteraciones de impermeabilidad (2) 1. 2. Girlich G (2012). JCM 50: 447 Pasteran F. (2010) JCM 48: 1323-32 • Sensibilidad: Limitaciones en la detección de MBL tipo NDM, por resultados de difícil interpretación (débil detección de NDM o resultado falso negativo) (1). Algunos autores proponen el uso de Sulfato de Zinc (ZnSO4) en el agar. .
  33. 33. TEST DE HODGE EN NO FERMENTADORES EN INVESTIGACIÓN Para detección de carbapenemasas MBL en Pseudomonas sp y Acinetobacter sp se recomienda adición de sulfato de Zinc (ZnSO4) en el Mueller- Hinton (1). 1. Lee K. (2003). JCM. 41: 4623-9
  34. 34. Pruebas de sinergismo para carbapenemasas tipo serina clase A con Acido fenil borónico (APB) IMP 15mm APB CAZ 15mm  Sensibilidad (100%) y especificidad (aprox. 98.8%), sin embargo aquellos aislamientos con sobreproducción de AmpC y pérdida de porinas pueden presentar sinergia a APB. Útil para enterobacterias y no fermentadores
  35. 35. K. pneumon iae E. cloacae APB g 300 µ APB 300 µ g Diapositiva de Fernando Pasteran o oro o: ergias conciaAcidajustaBs (centrnaicntro) Sin o ce da optima Distan
  36. 36. S. marcescens Sme-1b E. cloacae wild type E. coli ATCC 25922. Pasteran F, J. Clin. Microbiol. 2009 June47(6):1631-163 Detección por laboratorio K. pneumoniae KPC -2
  37. 37. APB Ecl M 951 IMP 15 APB mm IMP 25mm Ecl p99 Huevo IMPOS TOR! interfer en Enterob cia: ↑↑↑↑ Amp C acter, C Pastera .freund n F., en ii, P.aer viado a J Clin. uginos Micro a biol,
  38. 38. Pruebas de sinergismo para carbapenemasas MBL con agentes quelantes Lee K. (2003). JCM. 41: 4623-9  Uso de agentes quelantes: EDTA, EDTA+SMA “mercaptoacetato de sodio” y ácido dipicolínico.  EDTA resultados falsos positivos en no fermentadores.  EDTA+ SMA útil en enterobacterias como en no fermentadores
  39. 39. P. aeruginosa A. baumannii Detección de Metalobetalactamasa Inhibidor EDTA /SMA en diferentes aislamientos S. marscenses A. xylosoxidans A. baumannii
  40. 40. PRUEBAS DE DOBLE DISCO Aislamiento productor de MBL Aislamiento productor de KPC Aislamientos positivos aquellos que presentan un aumento ≥5mm en el halo de inhibición del disco del carbapenémico + Acido borónico y ≥7mm carbapenémico + EDTA Tsakris A. (2010) JAC. 65: 1664-71
  41. 41. E-test MBL Prueba positiva: Un incremento en la CIM ≥ 3 diluciones dobles en la elipse de imipenem en combinación con EDTA (IPI) vs la zona de elipse con imipenem solo. Ejemplo: Imipenem (IP): 64mg/mL Imipenen / EDTA (IPI): ≤1mg/mL Walsh T. (2005). CMR. 18: 306-25 Se han reportado falsos positivos en P. aeruginosa y A. baumannii
  42. 42. Enterobacterias GEN ERTA SXT IMP 1,5cm CTX CIP AMK PTZ AMC FOX CTX / CLA 1,5cm CAZ 1,5cm CAZ / CLA EDTA FEP APB 1,5cm MER TIGE
  43. 43. 1, 5c m Pseudomonas APB 1,5cm IMP CIP DORI PTZ CAZ/ CLA EDTA AMK 1,5 cm AZT FEP GEN 2, 0c m Acinetobacter CAZ IMP CAZ/ CLA SXT MINO TIGE FEP EDTA CIP AMK cm AMS 1,5 MER 1,5cm 1,5cm PIP CAZ MER PTZ GEN
  44. 44. Resistencias naturales a carbapenémicos…
  45. 45. Posibles resultados con pruebas de tamizaje para carbapenemasas en enterobacterias  TMH (+), APB (+) EDTA-SMA (-) : sugiere presencia carbapenemasa tipo serina grupo 2f (KPC, Sme, NMC-A) “confirmar con PCR”  TMH (+), APB (-) EDTA-SMA (+) : sugiere presencia carbapenemasa tipo MBL (confirmar con PCR)  TMH (-), APB (-) EDTA-SMA (+) : sugiere presencia carbapenemasa tipo MBL posiblemente NDM, confirmar con PCR  TMH (-), APB (+) EDTA-SMA (-) : sugiere presencia de cefalosporinasas AmpC, confirmar con otras pruebas de tamizaje o con PCR.  TMH (+), APB (+) EDTA-SMA (+) : sugiere presencia carbapenemasa tipo serina y MBL, o presencia de carbapenemasas MBL y AmpC, realizar otras pruebas de tamizaje para AmpC. Confirmar por PCR
  46. 46. Posibles resultados con pruebas de tamizaje para carbapenemasas en Pseudomonas spp. y Acinetobacter spp.  EDTA-SMA (+) : sugiere presencia carbapenemasa tipo MBL (confirmar con PCR)  EDTA-SMA (-) : sugiere presencia de carbapenemasa no MBL como KPC o en Acinetobacter spp. presencia de carbapenemasas tipo oxacilinasas adquiridas “OXA-23, OXA-24, OXA-58” (confirmar con PCR). Sugiere pressencia de otro mecanismo no enzimatico.
  47. 47. Para recordar…  Realizar el test modificado de Hodge, y las pruebas con inhibidores (APB) y (EDTA-SMA), el mismo día.  Todo perfil sospechoso de carbapenemasas debe ser enviado al laboratorio de referencia para ser confirmado a través de pruebas de biología molecular.
  48. 48. Resistencia intrínseca
  49. 49. Resistencia intrínseca
  50. 50. Gracias Grupo de Microbiología Subdirección Red Nacional de Laboratorios Instituto Nacional de Salud Correo electrónico cduarte@ins.gov.co Teléfono (57-1) 220 77 00 Extensión 1423 Bogotá, COLOMBIA www.ins.gov.co Línea gratuita nacional: 01 8000 113 400

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