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LOS SISTEMAS DE SEMILLAS EN AMÉRICA LATINA Y
  EL CARIBE, EXPERIENCIAS EXITOSAS, RETOS
            ACTUALES Y FUTUROS

       CIAT, Palmira, Colombia, diciembre 5-7, 2011
UNIVERSIDAD DE CALDAS

 FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

PROGRAMA DE MAESTRÍA EN FITOPATOLOGÍA



 CIAT, Palmira, Colombia, diciembre 7, 2011
MICROORGANISMOS ASOCIADOS CON
GRANOS DE FRIJOL (Phaseolus vulgaris L.),
  VARIEDAD CARGAMANTO BLANCO



              Claudia Nohemy Montoya Estrada, M.Sc.,
                                 &
                   Jairo Castaño Zapata, Ph.D.*


 Fuente: Revista AGRONOMÌA, Vol. 18(1):25-35. Enero-Junio, 2010.
http://www.infoagro.net




                          Principal método de propagación de las plantas

                                                                                         beybies.blogspot.com




                                El 70% de los alimentos
                              consumidos en el mundo son
                           provistos directamente por granos.




                                                                           educima.com
http://www.infoagro.net                   http://www.infoagro.net




                          200 patógenos
SOBREVIVENCIA DE HONGOS Y BACTERIAS EN LA SEMILLA DE FRIJOL COMÚN. 2006.


                                             UBICACIÓN EN LA SEMILLA                                              SOBREVIVIENCIA EN EL
             PATÓGENO                                                              SOBREVIVIENCIA EN LA
                                                                                                                         SUELO
                                                                                        SEMILLA


                                              INTERNA             EXTERNA

        Phaeoisariopsis griseola                  X                   X                 Al menos un año*             Dos años en residuos de
                                                                                                                            cosecha*

      Glomerella lindemuthiana                    X                   X                     Tres años*              Tres años en residuos de
    Colletotrichum lindemuthianum                                                                                          cosecha*

       Thanatephorus cucumeris                    X                   X                                           Al menos tres años en el suelo
          Rhizoctonia solani                                                           Al menos dos años**         y más de un año en residuos
                                                                                                                          de cosecha*

 Pseudomonas syringae pv. phaseolicola.           X                   X                     Dos años*                Dos años en residuos de
                                                                                                                            cosecha*

  Xanthomonas campestris pv. phaseoli             X                   X                     Dos años*                Dos años en residuos de
                                                                                                                            cosecha*



*/ Jara, Carlos. 2006. Programa de fitopatología del Centro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT). Cali, Colombia.
**/Godoy, Graciela. 2007. Sobrevivencia de Thanatephorus cucumeris en semilla de frijol y en el suelo. Centro de Investigaciones
Agrícolas del Suroeste (CIAS). San Juan de la Maguana. República Dominicana.
•   OBJETIVO GENERAL

•   Identificar hongos, bacterias y nematodos presentes en granos de frijol
    (Phaseolus vulgaris), variedad Cargamanto blanco.

•   OBJETIVOS ESPECÍFICOS

•   Identificar los diferentes géneros de hongos presentes en granos de fríjol.
•   Diagnosticar los principales géneros de bacterias presentes en granos de
    fríjol.
•   Determinar la población de nematodos presentes en granos de fríjol.
Muestra: semillas de frijol variedad
Localización: laboratorio de
                                                                                                             Cargamanto blanco, procedentes
       Fitopatología                                                                                         de un supermercado tipo A y
                                                                                                             supermercado tipo B
                                                   125 granos de Centro comercial
                                                   125 granos de Plaza de mercado




                                Aislamiento: Las semillas se trataron con hipoclorito de sodio al 1%
                               durante 2 min y luego se sembraron 5 semillas por caja Petri con agar-
                                 agua al 2%, luego se incubaron a 20-25 C durante 4-8 días para la
                                                       posterior identificación




                               Identificación de hongos. La identificación de géneros se realizó con
                               base en claves taxonómicas de Streets (1972), Barnett y Hunter (1987) y
                               Castaño-Zapata y Salazar (1998).




                                Identificación de bacterias. Se realizó pruebas morfológicas, fisiológicas
                                y bioquímicas de los géneros encontrados, siguiendo esquema de
                                Schaad (1968).




                                     Identificación de nematodos: Se siguió el método de licuado,
                                     centrifugación y flotación en azúcar, según Meredith (1973) y
                                                          Araya et al.. (1995).
Centro comercial




Plaza de mercado
•   SE IDENTIFICARON :

•   Cinco géneros de hongos.

•   Dos géneros de bacterias.

•   No se detectaron nematodos.
Alternaria
• Filum: Deuteromycota

• Clase: Deuteromycetes

• Orden: Moniliales

• Familia: Dematiaceae


 Características:    Conidias       oscuras
  típicamente con septas longitudinales y
  transversales; con forma variada elíptico
  u ovoide (Barnett y Hunter, 1987;
  Castaño-Zapata y Salazar 1998).
Fusarium
   Filum: Deuteromycota

   Clase: Deuteromycetes

   Orden: Moniliales

   Familia: Tuberculariaceae


   Características: Macroconidias hialinas, en forma
    de canoa; microconidias unicelulares, bicelulares o
    tricelulares, (Barnett y Hunter, 1987; Castaño-
    Zapata y Salazar 1998) y; micelio extensivo,
    algodonoso, con algún matiz de color       rosado,
    púrpura o amarillo, sobre agar
Rhizopus
 Filum: Zygomycota

 Clase: Zygomycetes

 Orden: Mucorales

 Familia: Mucoraceae


 Carácterísticas: Rizoides numerosos con esporangióforos en
  grupo; esporangios globosos     grises o negros; zigosporas
  negras (Castaño-Zapata y Salazar,1998).

   Macroscópicamente sus colonias son de crecimiento rápido
  (cubren prácticamente toda la superficie de la placa en 3 días
  a 25 °C), de aspecto consistente, con micelio aéreo denso,
  algodonoso, al principio blanco, después gris oscuro (Revista
  Iberoamericana de Micología,(2002).
Penicillium
•   Filum: Deuteromycota

•   Clase: Deuteromycetes

•   Orden: Moniliales

•   Familia: Moniliaceae


•   Características:    Conidióforos      producidos
    libremente con mono o bi ramas verticiladas.
    Conidias producidas en cadenas en abundancia,
    esféricas, a menudo se colorean brillantemente
    y hialinas (Castaño-Zapata y Salazar,1998)
Rhizoctonia
•   Filum: Deuteromycota

•   Clase: Deuteromycetes

•   Orden: Agonomycetales

•   Familia: Agonomycetaceae


•   Características: Hifas de color marrón
    con ramificaciones en ángulo recto
    (Castaño-Zapata y Salazar,1998)
PRUEBAS MORFOLÓGICAS,
         FISIOLÓGICAS Y BIOQUÍMICAS
Prueba                               Reacción       Reacción
Gram                                 Positivo       Negativo
Reconfirmación del Gram con KOH 3%   Negativo       Positivo
Catalasa                             Positiva       Positiva
Oxidasa                              Variable       Débilmente positiva
Crecimiento en agar Cetrimide        Negativo       Negativo
Crecimiento en Hugh-Leifson          Fermentativo   Oxidativo
Crecimiento en agar YDC              Positivo       Positivo
Crecimiento en agar Pseudomonas      Positivo       Positivo
Índol                                Negativo       Negativo
Movilidad                            Positivo       Positivo
Ácido sulfhídrico                    Negativo       Positivo
Agar triple azúcar hierro (TSI)      A/A            K/A
RESULTADO                            Bacillus       Xanthomonas
Gram +                   KOH -           Oxidasa V




                     Crecimiento en           Crecimiento
   Catalasa +        Hugh-Leifson +           en agar YDC +




  Crecimiento en
agar Pseudomonas +   Indol -     Movilidad + Fermentación de
                                            gucosa, sacarosa
                                                & lactosa +




                                                               Schanathorst (1954) B. subtilis, B. cereus y B. megatherium
Gram -           KOH +         Oxidasa D+




     Catalasa +    Crecimiento en    Crecimiento
                   Hugh-Leifson +   en agar YDC +




  Crecimiento en Indol - Movilidad + Fermentación
agar Pseudomonas +                   de glucosa &
                                      Sacarosa +




                                                    (Sutton y Wallen ,1970).: 1 de cada 1.000 semillas.
FRECUENCIA DE HONGOS Y BACTERIAS EN
                       GRANOS DE FRÍJOL
                                         90

                                         80

                                         70                                                 Fusarium
                                         60                                                 Penicillium
                                                                                            Alternaria
                            Frecuencia




                                         50
                                                                                            Rhizoctonia
                                         40                                                 Rhizopus
                                         30                                                 Xanthomonas
                                                                                            Bacillus
                                         20

                                         10

                                          0
                                              Microorganismos
Pachón y Castaño-Zapata (1999)

Groenewold et al., (2003)


Fusarium : 85%, Penicillium y Rhizopus : 8%, Rhizoctonia: 7%, Alternaria: 4% , Xanthomonas y Bacillus : 1 %
MICOTOXINAS PRODUCIDAS POR ESPECIES DE
                Fusarium
Especie                     Micotoxina       Síntomas
F. sporotrichoides          Micotoxina T-2   Hamaturia
F. poae                                      Vómitos
                                             Anorexia
                                             Leucopenia
                                             Necrosis hepática y renal
                                             Hemorragias múltiples
F. proliferatum             Moniliformina    Cardiopatías
F. avenacearum                               Supresión del sistema inmunológico
F. subglutinans
F. graminearum
F. chlamydosporium
F. sporotrichoides
F. culmorum
F. equiseti                 Tricoticenos     Anorexia
F. lateritium                                Inmunosupresión
F. tricinctum                                Irritación de la piel y mucosas
                                             Vómitos


F. culmorum                 Zearalenona      Anorexia
F. graminearum                               Problemas de reproducción
F. moniliforme
F. roseum f.sp. cerealis
F. semitectum
F. tricinctum
F. roseum f, sp. cerealis   Vomitoxina       Abortos
F. graminearum                               Inmunosupresióm
Hematuria        Anorexia            Leucopenia




                                  Supresión del sistema
Cardiopatía   Necrosis hepática
                                      inmunológico
MICOTOXINAS PRODUCIDAS POR ESPECIES DE
                         PENICILLIUM

Especie                      Micotoxina      Síntomas
P. griseofulvum (=patulum)   Patulina        Agitaciones
P. expansum                                  Convulsiones
P. gladioli                                  Congestión pulmonar
P. sclerotigenum                             Edema
P. carneum                                   Distensión del tracto gastrointestinal
P. concentricum                              Náuseas
P. coprobium                                 Degeneración de las células del epitelio
P. dipodomycola                              Hemorragia
P. formosanum                                Inflamación intestinal
P. glandicola
P. marinum
P. paneum
P. vulpinum
P. urticae
P. claviforme
P. viridicatum               Citrinina       Nefropatía
P. citrinin                  Ocratoxina A
                             Xanthomegnina
P. rubrum                    Rubratoxina     Daños al hígado
Edema
             Inflamación intestinal




                Daños al hígado
Nefropatía
MICOTOXINAS PRODUCIDAS POR ESPECIES DE
                     Rhizopus

Especie          Micotoxina   Síntoma
R. microsporus   Rizonin A    Gastroenteritis
Gastroenterítis
acenologia.com
“COMPRENDER QUE LA DETERIORACIÓN OCURRE EN
TODAS LAS FORMAS DE VIDA Y CONDUCE FINALMENTE
   A LA MUERTE, NO ES DEL TODO CONFORTABLE”
                BAKL & ANDERSON




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Taller semillas 2011 Jairo Castaño

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  • 1. LOS SISTEMAS DE SEMILLAS EN AMÉRICA LATINA Y EL CARIBE, EXPERIENCIAS EXITOSAS, RETOS ACTUALES Y FUTUROS CIAT, Palmira, Colombia, diciembre 5-7, 2011
  • 2. UNIVERSIDAD DE CALDAS FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS PROGRAMA DE MAESTRÍA EN FITOPATOLOGÍA CIAT, Palmira, Colombia, diciembre 7, 2011
  • 3. MICROORGANISMOS ASOCIADOS CON GRANOS DE FRIJOL (Phaseolus vulgaris L.), VARIEDAD CARGAMANTO BLANCO Claudia Nohemy Montoya Estrada, M.Sc., & Jairo Castaño Zapata, Ph.D.* Fuente: Revista AGRONOMÌA, Vol. 18(1):25-35. Enero-Junio, 2010.
  • 4. http://www.infoagro.net Principal método de propagación de las plantas beybies.blogspot.com El 70% de los alimentos consumidos en el mundo son provistos directamente por granos. educima.com
  • 5. http://www.infoagro.net http://www.infoagro.net 200 patógenos
  • 6. SOBREVIVENCIA DE HONGOS Y BACTERIAS EN LA SEMILLA DE FRIJOL COMÚN. 2006. UBICACIÓN EN LA SEMILLA SOBREVIVIENCIA EN EL PATÓGENO SOBREVIVIENCIA EN LA SUELO SEMILLA INTERNA EXTERNA Phaeoisariopsis griseola X X Al menos un año* Dos años en residuos de cosecha* Glomerella lindemuthiana X X Tres años* Tres años en residuos de Colletotrichum lindemuthianum cosecha* Thanatephorus cucumeris X X Al menos tres años en el suelo Rhizoctonia solani Al menos dos años** y más de un año en residuos de cosecha* Pseudomonas syringae pv. phaseolicola. X X Dos años* Dos años en residuos de cosecha* Xanthomonas campestris pv. phaseoli X X Dos años* Dos años en residuos de cosecha* */ Jara, Carlos. 2006. Programa de fitopatología del Centro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT). Cali, Colombia. **/Godoy, Graciela. 2007. Sobrevivencia de Thanatephorus cucumeris en semilla de frijol y en el suelo. Centro de Investigaciones Agrícolas del Suroeste (CIAS). San Juan de la Maguana. República Dominicana.
  • 7. OBJETIVO GENERAL • Identificar hongos, bacterias y nematodos presentes en granos de frijol (Phaseolus vulgaris), variedad Cargamanto blanco. • OBJETIVOS ESPECÍFICOS • Identificar los diferentes géneros de hongos presentes en granos de fríjol. • Diagnosticar los principales géneros de bacterias presentes en granos de fríjol. • Determinar la población de nematodos presentes en granos de fríjol.
  • 8. Muestra: semillas de frijol variedad Localización: laboratorio de Cargamanto blanco, procedentes Fitopatología de un supermercado tipo A y supermercado tipo B 125 granos de Centro comercial 125 granos de Plaza de mercado Aislamiento: Las semillas se trataron con hipoclorito de sodio al 1% durante 2 min y luego se sembraron 5 semillas por caja Petri con agar- agua al 2%, luego se incubaron a 20-25 C durante 4-8 días para la posterior identificación Identificación de hongos. La identificación de géneros se realizó con base en claves taxonómicas de Streets (1972), Barnett y Hunter (1987) y Castaño-Zapata y Salazar (1998). Identificación de bacterias. Se realizó pruebas morfológicas, fisiológicas y bioquímicas de los géneros encontrados, siguiendo esquema de Schaad (1968). Identificación de nematodos: Se siguió el método de licuado, centrifugación y flotación en azúcar, según Meredith (1973) y Araya et al.. (1995).
  • 9.
  • 10.
  • 12. SE IDENTIFICARON : • Cinco géneros de hongos. • Dos géneros de bacterias. • No se detectaron nematodos.
  • 13.
  • 14. Alternaria • Filum: Deuteromycota • Clase: Deuteromycetes • Orden: Moniliales • Familia: Dematiaceae Características: Conidias oscuras típicamente con septas longitudinales y transversales; con forma variada elíptico u ovoide (Barnett y Hunter, 1987; Castaño-Zapata y Salazar 1998).
  • 15. Fusarium  Filum: Deuteromycota  Clase: Deuteromycetes  Orden: Moniliales  Familia: Tuberculariaceae  Características: Macroconidias hialinas, en forma de canoa; microconidias unicelulares, bicelulares o tricelulares, (Barnett y Hunter, 1987; Castaño- Zapata y Salazar 1998) y; micelio extensivo, algodonoso, con algún matiz de color rosado, púrpura o amarillo, sobre agar
  • 16. Rhizopus  Filum: Zygomycota  Clase: Zygomycetes  Orden: Mucorales   Familia: Mucoraceae  Carácterísticas: Rizoides numerosos con esporangióforos en grupo; esporangios globosos grises o negros; zigosporas negras (Castaño-Zapata y Salazar,1998). Macroscópicamente sus colonias son de crecimiento rápido (cubren prácticamente toda la superficie de la placa en 3 días a 25 °C), de aspecto consistente, con micelio aéreo denso, algodonoso, al principio blanco, después gris oscuro (Revista Iberoamericana de Micología,(2002).
  • 17. Penicillium • Filum: Deuteromycota • Clase: Deuteromycetes • Orden: Moniliales • Familia: Moniliaceae • Características: Conidióforos producidos libremente con mono o bi ramas verticiladas. Conidias producidas en cadenas en abundancia, esféricas, a menudo se colorean brillantemente y hialinas (Castaño-Zapata y Salazar,1998)
  • 18. Rhizoctonia • Filum: Deuteromycota • Clase: Deuteromycetes • Orden: Agonomycetales • Familia: Agonomycetaceae • Características: Hifas de color marrón con ramificaciones en ángulo recto (Castaño-Zapata y Salazar,1998)
  • 19.
  • 20.
  • 21. PRUEBAS MORFOLÓGICAS, FISIOLÓGICAS Y BIOQUÍMICAS Prueba Reacción Reacción Gram Positivo Negativo Reconfirmación del Gram con KOH 3% Negativo Positivo Catalasa Positiva Positiva Oxidasa Variable Débilmente positiva Crecimiento en agar Cetrimide Negativo Negativo Crecimiento en Hugh-Leifson Fermentativo Oxidativo Crecimiento en agar YDC Positivo Positivo Crecimiento en agar Pseudomonas Positivo Positivo Índol Negativo Negativo Movilidad Positivo Positivo Ácido sulfhídrico Negativo Positivo Agar triple azúcar hierro (TSI) A/A K/A RESULTADO Bacillus Xanthomonas
  • 22. Gram + KOH - Oxidasa V Crecimiento en Crecimiento Catalasa + Hugh-Leifson + en agar YDC + Crecimiento en agar Pseudomonas + Indol - Movilidad + Fermentación de gucosa, sacarosa & lactosa + Schanathorst (1954) B. subtilis, B. cereus y B. megatherium
  • 23. Gram - KOH + Oxidasa D+ Catalasa + Crecimiento en Crecimiento Hugh-Leifson + en agar YDC + Crecimiento en Indol - Movilidad + Fermentación agar Pseudomonas + de glucosa & Sacarosa + (Sutton y Wallen ,1970).: 1 de cada 1.000 semillas.
  • 24.
  • 25.
  • 26. FRECUENCIA DE HONGOS Y BACTERIAS EN GRANOS DE FRÍJOL 90 80 70 Fusarium 60 Penicillium Alternaria Frecuencia 50 Rhizoctonia 40 Rhizopus 30 Xanthomonas Bacillus 20 10 0 Microorganismos Pachón y Castaño-Zapata (1999) Groenewold et al., (2003) Fusarium : 85%, Penicillium y Rhizopus : 8%, Rhizoctonia: 7%, Alternaria: 4% , Xanthomonas y Bacillus : 1 %
  • 27.
  • 28.
  • 29. MICOTOXINAS PRODUCIDAS POR ESPECIES DE Fusarium Especie Micotoxina Síntomas F. sporotrichoides Micotoxina T-2 Hamaturia F. poae Vómitos Anorexia Leucopenia Necrosis hepática y renal Hemorragias múltiples F. proliferatum Moniliformina Cardiopatías F. avenacearum Supresión del sistema inmunológico F. subglutinans F. graminearum F. chlamydosporium F. sporotrichoides F. culmorum F. equiseti Tricoticenos Anorexia F. lateritium Inmunosupresión F. tricinctum Irritación de la piel y mucosas Vómitos F. culmorum Zearalenona Anorexia F. graminearum Problemas de reproducción F. moniliforme F. roseum f.sp. cerealis F. semitectum F. tricinctum F. roseum f, sp. cerealis Vomitoxina Abortos F. graminearum Inmunosupresióm
  • 30. Hematuria Anorexia Leucopenia Supresión del sistema Cardiopatía Necrosis hepática inmunológico
  • 31. MICOTOXINAS PRODUCIDAS POR ESPECIES DE PENICILLIUM Especie Micotoxina Síntomas P. griseofulvum (=patulum) Patulina Agitaciones P. expansum Convulsiones P. gladioli Congestión pulmonar P. sclerotigenum Edema P. carneum Distensión del tracto gastrointestinal P. concentricum Náuseas P. coprobium Degeneración de las células del epitelio P. dipodomycola Hemorragia P. formosanum Inflamación intestinal P. glandicola P. marinum P. paneum P. vulpinum P. urticae P. claviforme P. viridicatum Citrinina Nefropatía P. citrinin Ocratoxina A Xanthomegnina P. rubrum Rubratoxina Daños al hígado
  • 32. Edema Inflamación intestinal Daños al hígado Nefropatía
  • 33. MICOTOXINAS PRODUCIDAS POR ESPECIES DE Rhizopus Especie Micotoxina Síntoma R. microsporus Rizonin A Gastroenteritis
  • 35.
  • 37. “COMPRENDER QUE LA DETERIORACIÓN OCURRE EN TODAS LAS FORMAS DE VIDA Y CONDUCE FINALMENTE A LA MUERTE, NO ES DEL TODO CONFORTABLE” BAKL & ANDERSON sebuscaimagenes.com