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Control de calidad_en_laboratorio_clinico

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  1. 1. CONTROL DE CALIDAD EN BANCO DE SANGRE
  2. 2. GUIA CONTROL DE CALIDAD EQUIPOS •MANUAL DE INSTRUCCIONES Disposiciones de fabrica Calibración Mantenimiento preventivo Seguridad •EVALUACION DESEMPEÑO •REGISTROS Y ARCHIVOS
  3. 3. •MANUAL DE INSTRUCCIONES Instrucciones operativas Precauciones riesgos Programa Manto preventivo Detalle calibración Recalibracion Acceso del personal
  4. 4. •Directivas de Fabrica Instalación Calibrarse inicial Entrenamiento Ficha Técnica Fecha de instalación Nombre equipo Fecha fabricación Modelo y serie Nombre in house Fecha garantía y limites Dirección, nombre de servicio reparación Instrucciones de uso Medidas y precauciones de seguridad
  5. 5. •Directivas de Fabrica Evaluación de seguridad Cuidados en el uso del equipo Equipos eléctricos: Polo de tierra Evitar manejo equipos con altos conductores de energía Adherirse estrictamente a los limites del equipo Puertas y llaves equipo deben chequearse antes del uso Autorización de uso equipo No intentar parar equipos usando las manos
  6. 6. •DESEMPEÑO DEL EQUIPO Predeterminar los limites uso Limite variación Determinar la precisión equipo Monitorear y verificar resultados Investigar causas no cumplimiento Dar conformidad Acción correctiva
  7. 7. EQUIPO PROCEDIMIENTO FRECUENCIA LIMITE DE VARIACIÓN Balanzas para controlar volumen de sangre mecánica Control de pesado con peso conocido Diario Frecuencia, Bolsas con volumen bajo o alto Balanza de extracción de sangre automática Control de pesado con peso conocido Diario Bolsas con volumen bajo o alto Hemoglobinometro hemocue Determinación de hemoglobina con una muestra de concentración conocida Diario Dinamómetro (balanzas para controlar volumen de sangre en campaña extramural) Control de pesado con peso conocido Cada campaña Frecuencia, Bolsas con volumen bajo o alto
  8. 8. TERMÓMETROS • PRECISIÓN : Termómetros Certificados • PROMEDIO TRES LECTURAS • FRECUENCIA CALIBRACIÓN: ANUAL • REGISTROS Y ARCHIVOS
  9. 9. INCUBADOR / BAÑO MARIA • CONTROL DE TEMPERATURA: Diario, Intervalos 4 hrs. • RANGO ACEPTABLE : + 1C • AGUA DESTILADA : Nivel y Cambio • CALIBRACIÓN: Termómetro Certificado • Registros y Archivos
  10. 10. REFRIGERADORES Y CONGELADORES •Sistema Alarma Audible: mensual •Activar Alarma Alta y Baja Temperatura •Control diario: Superior e Inferior •Limites 1 a 6 C •Control diario Temperatura: –PFC: - 20C –GRC: - 65 C •NO USAR AGUA •USAR GLICEROL Grados 4.5 C Lim Sup 5.5 Lim Inf 4.5
  11. 11. CON CIRCULACIÓN POR AIRE FORZADO. PARA TEMPERATURA FIJA A +4 °C. ESTABILIDAD ±1,5 °C. RESOLUCIÓN 1 °C. REGISTRADOR GRÁFICO DE LA TEMPERATURA DE 7 DÍAS. CAPACIDADES DESDE 90 HASTA 480 BOLSAS. SEGURIDAD: TERMOSTATO LIMITADOR DE BAJA TEMPERATURA. INDICADORES LUMINOSOS Y ACÚSTICOS: DE LA TEMPERATURA EXCESIVAMENTE BAJA (+2 °C), DE LA TEMPERATURA EXCESIVAMENTE ALTA (+6 °C), DE LA PUERTA ABIERTA, DE FALLO DE RED Y DE FALLO DE BATERÍA. REGISTRADOR GRÁFICO DE LA TEMPERATURA. 7 DÍAS CON AUTONOMÍA DE 6 MESES. SEÑAL SONORA EN TODAS LAS CONDICIONES DE ALARMA. INDICADOR ACÚSTICO.
  12. 12. EQUIPO PROCEDIMIENTO FRECUENCIA LIMITE DE VARIACIÓN NEVERAS 1. Control de temperatura Diario 1 -6 ª C 2. Control circuito y alarma Diario 3. Sistema de alarma Cuatro meses CONGELADORES 1. Control de Temperatura Diario Inferior a – 18ª C 2. Control del circuito de alarma Diario 3. Sistema de alarma Cuatro meses 4. Limpieza y desinfección Cuatro meses
  13. 13. CENTRIFUGAS • VELOCIDAD RPM : Tacómetro • TIEMPO: Cronometro • CALIBRACIÓN : Comportamiento de GR en diferentes medios y viscosidades Serofuge
  14. 14. CENTRIFUGAS SEROFUGE • MÉTODOS – CENTRIFUGACIÓN INMEDIATA – LAVADOS Y ANTIGLOBULINA HUMANA • PARÁMETROS – TIEMPO OPTIMO: tiempo menor , sobrenadante transparente, botón cels definido y fácil resuspensión – REACTIVIDAD 1+ – REGISTRAR Serofuge
  15. 15. CALIBRACIÓN CARACTERISTICAS 10 15 20 25 1. Boton formado x x x 2. Fondo claro x x x 3. Facil suspension x x x x 4. Aglutinacion 1+ x x C. POSITIVO C. NEGATIVO 5 tubos 5 tubos GR 5% A GR 5% A Anti -A 1/20 ClNa 0.9%
  16. 16. CENTRIFUGA PARA PREPARACIÓN COMPONENTES • NIVELACIÓN Y BALANCEO • CALIBRACIÓN: T°, V y Tiempo • FRECUENCIA : 3 - 4 Meses • MÉTODO: PLASMA RICO PLAQUETAS • DOCUMENTAR Y REGISTRAR
  17. 17. – Balanzas de precisión: control de peso semestral (pesa 500 gr calibrada y certificada). Servicio técnico: anual. – Centrífuga 6000i: Servicio técnico: semestral (RPM, aceleración y frenado). – Fraccionadores (Compomat®): Servicio técnico: anual. - Selladoras estériles: Servicio técnico: anual. - Iluminador: Servicio técnico: bisemestral. - Envasado al vacío: Servicio técnico: anual. - pH METROS: al realizar medición con solución control alta y baja.
  18. 18. EQUIPO PROCEDIMIENTO FRECUENCIA LIMITE DE VARIACIÓN CENTRIFUGAS REFRIGERADAS 1. Control de calidad de componentes Mensualmente 2. RPM Cada cuatro meses 3. Tiempo Diario 4. Temperatura Diario 5. Limpieza con detergente suave Diario 6. Desinfección Mensualmente y siempre después de un rompimiento 7. Ajuste rotor Diario ROTADOR DE PLAQUETAS 1. Control de temperatura Diario 2. Frecuencia de agitación Diario 3. Limpieza Mensual SELLADOR DEL TUBO PILOTO 1. Presión sobre el tubo Diario 2. Limpieza Diario 3. Desinfección Después de un rompimiento T-ACE I 1. Limpieza Externa Diaria 2. Calibración balanzas MENSUAL
  19. 19. DOCUMENTACIÓN Y REGISTROS •Mantenimiento preventivo •Ficha técnica del equipo •Cartilla de seguridad •Registro Calibración o recalibración •Acciones correctivas – preventivas •Personal autorizado •Manuales
  20. 20. 21
  21. 21. Hospital HNGAI. Du _____ Fenotipo CDE. Nombre donante: Iniciales. Tipo y Nº documento:______ Fecha y hora de extracción. Fecha y hora de vencimiento. Volumen: 300 mL. Temperatura de almacén.1- 6ºC Registro sanitario. Numero de licencia. Dirección y telefono. Hemoclasificaci ón. O+ Hemoglobina: 15 g/dl. Sello de Calidad Numero: 451223. Esta unidad esta analizada para Acs HIV, ag superficie hepatitis B, Acs hepatitis C, Acs Chagas y Acs sífilis. Con resultados No reactivos.
  22. 22. 23
  23. 23. 24
  24. 24. 25
  25. 25. 26
  26. 26. 27
  27. 27. 28
  28. 28. CONTROL CALIDAD REACTIVOS •ANTISUEROS •ANTIGLOBULINA •HEMATÍES REACTIVOS •POTENCIADORES •PBAS SEROLOGICAS •SULFATO COBRE •DIARIO •REACTIVIDAD ESPERADA •M A P R O •INSTRUCCIONES FABRICANTE •PROTOCOLOS •REGISTROS
  29. 29. Control de Calidad de antisuero ABOControl de Calidad de antisuero ABO Parámetros a revisar Requerimientos de calidad Frecuencia de control Control Ejecutado por • Apariencia No hemólisis ni precipitado partícula gel por inspección visual Diario Grupos de Laboratorios • Reactividad y especificidad No hemólisis inmune, formación de Rouleaux o fenómeno prozona. Reacciones claras con GR que contengan los antígenos correspondientes, no falsas Cada lote nuevo Grupos de Laboratorios • Potencia reacciones (ver también control de calidad Rh) Suero no diluído debe dar una reacción 3 - 4 (+) usando tubos de ensayo salino con 3% de GR suspendidos a temperatura ambiental. Los títulos deben ser 128 para anti-A, anti -B y anti -AB con A1- y células B; 64 con A2 y A2B Cada lote nuevo Grupos de Laboratorios
  30. 30. Control de Calidad de Glóbulos RojosControl de Calidad de Glóbulos Rojos Parámetros a revisar Requerimientos de calidad Frecuencia de control Control Ejecutados por • Apariencia No hemólisis ni turbidez en el sobrenadante por inspección visual Diario Grupos de Laboratorio • Reactividad y especificidad Reacciones claras con antisueros selectivos contra antígenos de glóbulos rojos específicos Cada lote en el primer y último día de la vida específica de almacenamiento Grupos de laboratorio
  31. 31. Control de Calidad de antisuero RhControl de Calidad de antisuero Rh Parámetros a revisar Requerimientos de calidad Frecuencia de control Control Ejecutados por • Apariencia Similar a antisuero ABO Diario Laboratorios agrupados • Reactividad y especificidad Similar a antisuero- ABO Cada lote nuevo Laboratorios agrupados • Potencia Suero no diluído debe dar una reacción de 3 a 4 (+) en la prueba designada para cada suero y un título de 16 para anti-D, anti-C, anti-E, anti-c, anti-e y anti-CDE usando GR heterocigotes apropiados Cada lote nuevo Laboratorios agrupados
  32. 32. Control de Calidad de antiglobulina séricaControl de Calidad de antiglobulina sérica utilizada para Prueba de Antiglobulinautilizada para Prueba de Antiglobulina Parámetros a revisar Requerimientos de calidad Frecuencia de control Control Ejecutado por • Apariencia No precipitados, partículas o formación de gel para inspección visual Diario Grupos de Laboratorios • Reactividad y especificidad a. No actividad hemolítica; no aglutinación de GR desensibilizados de cualquier grupo ABO luego de incubación como en pruebas cruzadas con suero compatible b. Aglutinación de GR sensibilizados con suero anti-D. c. Aglutinación de GR sensibilizados con aloanticuerpos unidos a complemento (ej.: anti-Jka ) a un título mayor más en presencia que en la ausencia del complemento o de aglutinación de GR cubiertos de C3b y C3d. Diario Grupos de Laboratorios Diario Cada lote nuevo
  33. 33. Control de Calidad deControl de Calidad de albúmina sérica bovina (BSA)albúmina sérica bovina (BSA) Parámetros a revisar Requerimientos de calidad Frecuencia de control Control Ejecutado por • Apariencia No precipitados, partículas o formación de gel a la inspección visual Diario Grupos de Laboratorios • Pureza Más de 98% en albúmina por determinación electroforética. Cada lote nuevo Grupos de Laboratorios • Reactividad No aglutinación de GR desensibilizados; no actividad hemolítica; ni interferencias. Diario Grupos de Laboratorios
  34. 34. Control de Calidad del Suero SalinoControl de Calidad del Suero Salino Parámetros a revisar Requerimientos de calidad Frecuencia de control Control Ejecutado por • Apariencia No turbidez o partículas a la inspección visual Diario Grupos de Laboratorio • Contenido de NaCl 0.154 mol/L (9 g/L) Cada lote nuevo Grupos de Laboratorio • pH 6.0 - 8.0 a. Cada lote nuevo de suero salino buffer b. Diario para suero salino no buffer Grupos de Laboratorio
  35. 35. Control de Calidad de LISSControl de Calidad de LISS Parámetros a revisar Requerimientos de calidad Frecuencia de control Control Ejecutados por • Apariencia No turbidez o partículas a la inspección visual Diario Grupos de Laboratorio • pH 7 (rango 6.5 - 6.7) Cada lote nuevo Grupos de Laboratorio • Conductividad 3.7 ms/cm a más de 23°C (rango: 3.44 - 3.75 ms/cm) Cada lote nuevo Grupos de Laboratorio o contratados
  36. 36. C.C ANTISUEROS I.CARACTERÍSTICAS GENERALES 1.Tipo de Antisuero : Monoclonal ( ) Humano ( ) Animal ( ) 2.Marca : 3.Lote : 4.Fecha de Vencimiento: 5.Aspecto : 6.Proveedor:
  37. 37. ANTISUEROS II. CARACTERÍSTICAS ESPECIFICAS 1. ESPECIFICIDAD A. G.ROJOS A1, A2, B, A1B, A2B, O B. T.D.I CIS TA ALB 37º CI I 0 0 0 0 0 II 0 0 0 0 0
  38. 38. ANTISUEROS 2. POTENCIA A. AVIDEZ seg 1 2 3 4 5 G ROJOS 40% B. TITULO 1/2 1/4 1/8 16 32 64 128
  39. 39. ANTISUEROS III. CULTIVO MICROBIOLÓGICO VALORES REFERENCIALES ANTISUERO CÉLULAS POTENCIA TITULO AVIDEZ ANTI - A A1 256 dils 15 seg A2 128 30 ANTI- AB A1B 128 30 A2B 64 45 ANTI- B B 256 15 ANTI- Rho ( D )R1R1/DCe. 32 60 R2R2/DcE. 32 60
  40. 40. PARÁMETRO QUE SE DEBE CONTROLAR REQUISITOS DE CALIDAD FRECUENCIA DEL CONTROL ASPECTO Ausencia de hemolisis, precipitado, partículas o formación de gel a la inspección visual Diario REACTIVIDAD Y ESPECIFICIDAD Ausencia de hemolisis, formación de rouleax o fenómeno de prozona, reacciones netas con los hematíes que llevan el antigeno correspondiente. Reacciones netas con los antisueros seleccionados frente a hematíes conocidos. Ausencia de reacciones falsas. Cada nuevo lote el primer y ultimo periodo de caducidad POTENCIA El suero no diluido debe dar una reacción de 4 en tubo utilizando una suspensión salina de hematíes a temperatura ambiente. Los títulos deben ser de 128 para anti-A, anti-B y anti-AB con células A y B; de 64 con célenlas A y AB. Para el anti-D, el suero no diluido debe dar una reacción de 4 en la prueba designada para cada suero y un titulo de 16 para anti-D, utilizando hematíes R r-R r-Rr o R Cada nuevo lote AVIDEZ Aglutinación macroscópica con una suspensión de hematíes al 50% en suero homologo, en la prueba en porta: 5 seg para anti-A, anti-B y antia b con celulas A y B; y de 64 con celulas A y AB. Cada nuevo lote
  41. 41. Pagina 1 de 45CONTROL DE CALIDAD REVISION EDICION MC – GEN-1 Fecha de Aprobación MANUAL DE LA CALIDAD HNGAI Documento controlado por el Sistema de Gestión de la Calidad.- Prohibida su reproducción parcial o total Actualizo Reviso Preparo ComentariosFechaNombre TITULO: MANUAL DE CALIDAD RESUMEN: Este manual plantea el desarrollo permanente y ordenado de las actividades que deben cumplirse en Laboratorio de Inmunoserologia del Servicio de Hemoterapia y Banco de Sangre para asegurar la calidad de sus resultados.
  42. 42. POE : Encabezado PROCEDIMIENTO Nombre de la Institución Departamento Nº de procedimiento Página TITULO:
  43. 43. POE : Pautas Generales 1. OBJETIVO 2. ALCANCE 3. RESPONSABILIDAD 4. DEFINICIONES
  44. 44. POE : Instrucciones de trabajo 5. PROCEDIMIENTO
  45. 45. POE :Aprobación REDACTADO POR FECHA REDACCIÓN VERSION FECHA VIGENCIA REVISION Nº FECHA DE VIGENCIA FECHA APROBACIÓNFECHA REVISACION REVISADO POR APROBADO POR ORIGINAL
  46. 46. POE : EJEMPLO TITULO POEN° Revision N° EGO5/POEH8/01 01/01/04 DIRECCIONGENERALDESALUDDELASPERSONAS ProgramaNacionaldeHemoterapiayBancos deSangre POE MAESTRO DirecciónEjecutivadeServicios deSalud TEST DECOOMBS INDIRECTO (PANTALLA) Página 01 de 01Fecha de aplicaciónFecha de Revisión
  47. 47. POE : EJEMPLO OBJETIVO ALCANCE MUESTRA Sangre entera anticoagulada, suero Antiglobulina Humana IgG-C3d ( Suero de Coombs Poliespecifico) Antiglobulina Monoespecifica IgG , Antiglobulina Monoespecifica C3c,C3d Celulas detectoras de Anticuerpos de Fenotipos conocidos del 3% a 5% Albumina Bovina al 22% Equipos: Centrífuga de inmunohematología, incubadora, aglutinoscopio, tubos 12 x 75 , pipetas pasteur. Bancos de Sangre y Servicios de Hemoterapia y Medicina Transfusional MATERIALES Y EQUIPOS Determinar la presencia de Anticuerpos circulantes dirigidos contra Antigenos Hematicos.
  48. 48. 1 2 Dispensar una gota de Globulos rojos en cada uno de los tubos debidamente rotulados. 3 Agregar 02 gotas del suero problema a cada tubo. 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Agregar 01 gota de celulas Contol de Coombs en aquelos tubos sin aglutinación Repetir pasos 4 y 5 4 Agregar 02 gotas de Albumina Bovina al 22% Repetir paso 4 y 5 Incubar a 37º C por 15 min. Repetir pasos 4 y 5 Lavar los G.R. con solución Salina 0.9% x cuatro veces decantando totalmente en el ultimo lavado Agregar 02 gotas de Suero de Coombs Poliespecifico Repetir pasos 4 y 5 Leer, aglutinación y/o hemolisis , resuspender completamente el boton celular y anotar resultado. Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi siempre por 15 seg a 3,400 rpm ó por 1 min. a 1,000 rpm. PROCEDIMIENTO Enumerar los tubos como I. II. III según sea el caso de 2 ó 3 celulas
  49. 49. 1 2 NOTA Cent. Inmediat Albumina 37ºC Coombs Cont. Coombs Cel I Cel II Cel III ADJUNTO INTERPRETACION La aglutinacion de los glóbulos rojos en estudio constituyen resultados positivos. La resuspension de las células constituye un resultado negativo. De ser positivo ver Poe N°: EG05/POEH9/01 Test de Coombs Indirecto-Panel Todos los reactivos deben usarse de acuerdo a las instrucciones del fabricante.
  50. 50. ManualTécnicoAsociaciónAmericanadeBancos deSangre 13avaEdicion REFERENCIAS
  51. 51. POE : EJEMPLO Director del Banco de Sangre REVISIONES Coordinador Supervisor de Calidad
  52. 52. Control de Calidad InmunoserologicoControl de Calidad Inmunoserologico Los Laboratorios que realizen tamizajeLos Laboratorios que realizen tamizaje serológico deben:serológico deben: Participar de, por lo menos, un Programa deParticipar de, por lo menos, un Programa de Control de Calidad Externo.Control de Calidad Externo. Realizar Control de Calidad Interno.Realizar Control de Calidad Interno. Disponer de un Sistema de Garantia de laDisponer de un Sistema de Garantia de la Calidad en la realización de los tests.Calidad en la realización de los tests.
  53. 53. Control de Calidad Interno Se utilizan sueros control de baja reactividad para monitorear las acciones realizadas en el laboratorio Son “pools”de sueros positivos o negativos. Deben ser límpidos y estables. En cantidad suficiente para ser usados por largos períodos. Se pueden usar conservantes: Azida sódica, bronidox-L5.
  54. 54. SUEROS CONTROL INTERNO • Son distintos de los controles internos de los kits. • Deben ser utilizados diariamente en la rutina del laboratorio, para monitorear el comportamiento de cada prueba. • Sirven para validar las reacciones y detectar alteraciones lote a lote. • Sirve para evaluar el desempeño y todos los procesos que comprende el tamizaje. • Se pueden preparar en el laboratorio o pueden ser comprados.
  55. 55. Uso de controles positivos de bajaUso de controles positivos de baja reactividadreactividad Producción de SuerosProducción de Sueros Material de origen Unidades de plasma (donantes de sangre) Transformar en suero Muestras de pacientes Suero
  56. 56. PRODUCCIÓN DE PANELES DE SUEROSPRODUCCIÓN DE PANELES DE SUEROS Unidades de Plasma Unidades de Plasma PRODUCCIÓN CaCl2 Centrif. + Filtrac + Dialisis + Centrif. Preservativo: Bronidox-L5 PRODUCCIÓN CaCl2 Centrif. + Filtrac + Dialisis + Centrif. Preservativo: Bronidox-L5 Unidades de Suero Unidades de Suero CaracterizarCaracterizar Almacenar -20º C Almacenar -20º C
  57. 57. Diferentes testes usados para confirmación del marcador serológico SífilisSífilis HIVHIV HTLVHTLV AgHBAgHB ss CoreCore HCVHCV ChagasChagas ELISA 3 3 4 4 3 4 6 VDRL 3 - - - - - - CONF. 3 FTA 1 1 2 2 2 2 IFI (INS)
  58. 58. Sueros EspecíficosSueros Específicos Paneles de sueros Negativos Paneles de sueros Positivos Reactividad baja Paneles de sueros Heterólogos
  59. 59. Preparación de los Sueros para Uso en el Control de Calidad Interno • Llevar en consideración las distintas marcas de kits, para cada test, que existen en el mercado. – Gran número de kits para cada parámetro – Diferencias significativas entre la reatividad de los kits – Amplia distribución de marcas entre los laboratorios
  60. 60. Aplicación del Control Interno Estandardización Realizar 20 determinaciones de cada SCI, en 3 o 4 dias distintos. Al final, calcular la média y el desvio estándar, correspondiente al total de las determinaciones efectuadas, para la relación DO/CO. Construir un gráfico para cada método y para cada control interno positivo y negativo. Adoptar un intérvalo de confianza al rededor de la média de la relación DO/CO: Média +/- 3 desvios estándar.
  61. 61. Gráfico de Levey-Gráfico de Levey- JenningsJennings Media + 1DS + 2DS + 3DS - 1DS - 2DS - 3DS Dias DO/CO
  62. 62. Gráfico de CCI Ejemplo de comportamiento ideal 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5 5,5 0 5 10 15 20 25 30 Dias (corridas) DO/CO + 2ds - 2ds Media
  63. 63. Gráfico de CCI Ejemplo Control Interno - anti-HIV Positivo 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0 5,5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 Dias DO/CO + 3DS - 3DS
  64. 64. Uso Diario de Sueros Control Interno (SCI) Control Interno - anti-T.cruzi Positivo 1,3 1,5 1,7 1,9 2,1 2,3 2,5 2,7 2,9 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 Periodo de 24/6 a 01/7/2004 DO/CO
  65. 65. Uso Diario de Sueros Control Interno (SCI) Controle Interno - anti-HBc Negativo 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0 5,5 6,0 6,5 7,0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 Dias DO/CO
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