Observación de Células

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
CURSO : BIOLOGÍA - PRÁCTICA
DOCENTE : RUIZ HUAPAYA, Joe Roberto
ALUMNO : Olivera Laureano, Enzo Ronaldo
CICLO : I CICLO
TEMA : OBSERVACIÓN DE CÉLULAS 1
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HUACHO – PERÚ

Asignatura: Biología Celular y molecular. Pág. 2
UniversidadNacional JoséFaustinoSánchez Carrión
Facultadde Medicina
E.A.P. MedicinaHumana
PRACTICA N° 03
OBSERVACIÓN DE CELULAS 1
I. OBJETIVO GENERAL
Diferenciar las células animales, vegetales y fúngicas
A. OBSERVACION DE CELULAS VEGETALES
I. OBJETIVO ESPECIFICO
Identificar partes principales de células vegetales.
II. MATERIALES
• Microscopio
• Portaobjetos
• Cubreobjetos
• Pinzas
• Escalpelo
• Verde de metilo acético o azul de metileno
• Cebolla
III. PROCEDIMIENTO
Con el la ayuda del escarpelo cortar en una forma triangular una parte de la
cebolla.
 Extraer una muestra de catafilo cuidadosamente con la ayuda de un bisturí.
Colocar sobre el portaobjetos.
Agregarle una gota de Lugol.
Colocar el cubreobjetos.
Llevar a la platina para poder observar a menor y mayor aumento.
IV. RESULTADOS
Epidermis De Cebolla En Fresco x150.
En esta muestra podemos distinguir la pared celular, núcleo y el citoplasma de una
célula vegetal, donde el Lugol tiñio la pared celular y el núcleo para una mejor
observación.

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N Epidermis De Cebolla Azul De Metileno x150.
En este aumento vemos la célula de la cebolla con azul de metileno
Núcleo x600.
En este aumento no se logra ver toda la
celula ya que el campo disminuye
Núcleo x1500.
Se puede lograr a ver el nucleo

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B. OBSERVACIÓN DE CÉLULAS FÚNGICAS
I. OBJETIVO ESPECIFICO
Observar la morfología de los hongos y distinguir entre hifas septadas y no
septadas y entre distintos tipos de esporas y las estructuras que las originan.
II. MATERIALES
• Microscopio
• Portaobjetos
Cubreobjetos muy limpios y desengrasados con alcohol
• Lanceta de estéril
Agua destilada
• Trozo enmohecido de fruta o pan o un cultivo de hongos
• Solución de lactofenol al azul algodón
Descripción del moho
Son hongos de pequeño tamaño que se desarrolla sobre materia orgánica en
descomposición. Se dividen en dos grupos, mohos mucilaginosos y mohos
acuáticos.
Estos hongos denominados zigomicéticos, tienen un aparato vegetativo que es un
micelio de aspecto blanquecino y sedoso, formando por hifas (cenocíticas).
Las hifas son filamentos tubulares que componen la estructura de los hongos
pluricelulares. Un conjunto de hifas, forman el micelio.
Estos organismos poseen reproducción tanto sexual, como asexual:
El hongo que ataca al pan es el moho del reino fungi (RHIZUPOS NIGRICANS)
Rhizopus es un género de mohos que incluyen especies
cosmopolitas de hongos filamentosos hallados en el suelo,
III. PROCEDIMIENTO

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De la muestra traída del pan descompuesta encontramos hongos RHIZOPUS NIGRICANS
(MOHO) lo extraemos con una pinza y lo colocamos en una lámina portaobjeto, agregamos
una gota de agua destilada lo removemos y lo cubrimos con el cubre objeto y observamos
en el microscopio en menor y mayor aumento.
IV. RESULTADOS DEL MOHO DE PAN
aumento de 4x
En el menor aumento la muestra no sale
bien los hongos RHIZOPUS. Aquí no
podemos diferenciar mucho, pero se
ve hifas y esporas claramente
aumento de 10x
en esta muestra mas enfocada y a
mayor aumento vemos un hongos
completo con su hifa , esporas lo
que nos da a diferenciar sobre una
célula vegetal .y se observa los
septos.

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C. OBSERVACIÓN DE CÉLULAS SANGUÍNEAS
I. MATERIALES
• Microscopio
• Portaobjetos y cubreobjetos
• Mechero de alcohol
• Lanceta estéril
• Alcohol absoluto
• Wright
II. PROCEDIMIENTO
Con un algodón empapado de alcohol limpiar la porción terminal del dedo índice
Con la lanceta estéril realizar una punción.
Colocar un portaobjetos como indica el dibujo y deslizarlo sobre toda la superficie
de la porta de manera que se pueda obtener una fina película de sangre.
Colocar el frotis de sangre sobre la cubeta de tinción y añadir unas gotas de
alcohol absoluto y dejar que el alcohol se evapore para fijar la preparación.
Cubrir con unas gotas de hematoxilina y dejar actuar durante 15 minutos. Evitar la
desecación del colorante agregando más líquido.
Lavar la preparación y añadir unas gotas de eosina dejándola actuar 1 minuto.
Volver a lavar hasta que no queden restos de colorante.
Dejar secar aireando el porta o bien al calor muy lento de la llama del mechero.
Observar al microscopio a menor y mayor aumento.

III. RESULTADOS
Aumento 10X
En este aumento no se puede percibir lo
que buscamos.
Para eso agregamos aceite de
inmersión y cambiamos de objetivo un
mayor aumento

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AUMENTO A 40X
En esta imagen más amplia
si podemos hacer
diferenciación de células,
como vemos la tinción de
Wright tiñio a los glóbulos
blancos y los que tienen el
núcleo más grande y casi
cubriendo por completo son
los monocitos y los que
arriñonados son los
neutrófilos.
Tinción de Wright:
 Se utiliza para diferenciar los tipos de células sanguíneas y usado para el control de
glóbulos blancos cuando hay sospecha de infección.
 Principalmente para tinción de frotis de sangre y punciones medulares
 Es una modificación de la tinción de romanowsky
 La tinción de romanowsky consiste de azul de metileno y sus productos de oxidación,
así como eosina Y o eosina B, producción un efecto de coloración purpura en los
núcleos de los leucocitos y da un color rosado a los eritrocitos.
 El resultado de tinción depende como factores de PH.
 La eosina es inflamable y toxico por inhalación, contacto con la piel y en caso de
ingestión.
 Los que tienen carácter básico fijan la eosina ( azul)
 Los que tienen carácter acido fijan azul de metileno (rosado)
 Solo se observa con el objetivo de inmersión.
 Dejar secar hasta que aparezca un brillo metálico.
PREPARACION DE WRIGHT:
 Para para 100 ml se requiere de colorante de Wright(0,3 g), metanol (97.0 g) y
glicerol(3 .0ml)
 La solución amortiguadora o tapón para un litro de agua destilada se agregan 3,76 g
de hidrofosfato disodico (Na2HPO4H2O) Y 210 g de fosfato de
potasiomdihidrogenado ( KH2PO4)
 El pH que debe tener es de 7,2 igual a de la sangre.
 Si no se cuenta con el Wright se utiliza el giemsa
 Los glóbulos rojo eritrocitos o hematíes permanecen en el interior de los vasos
sanguíneos y transportan 02 y co2 unidos a la hemoglobina.
 Los leucocitos combaten infecciones.

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Hematoxilina: Se utiliza en histología para teñir los componentes aniónicos (ácidos) de
los tejidos, a los que da una coloración violeta. Tiñe intensamente losnúcleos de las células, dado que
estos contienen ácidos nucleicos ricos en radicales ácidos.
EOSINA: La eosina (del griego Eos, "amanecer"1
) es un colorante ácido, por lo cual se denomina
basófilo (ya que tiene afinidad por las sustancias alcalinas), en forma de polvo rojo cristalino, de uso
ampliamente extendido en el ámbito industrial, desde la industria textil hasta el estudio
biológico e histológico.
La eosina es un compuesto ácido cuya propiedad está basada en su polaridad negativa, lo que le
permite enlazarse con constituyentes celulares de carga positiva. Por ello colorea componentes y
orgánulos citoplasmáticos, colágeno y fibras musculares, pero no los núcleos (que son básicamente
ácidos nucleicos y están cargados negativamente). Aquellos componentes que se tiñen con eosina
son conocidos como acidófilos o eosinófilos.
La coloración resultante de la tinción con eosina es rosada-anaranjada para citoplasmas, y rojo
intenso en el caso de los eritrocitos. Es fuertementefluorescente, aunque esta característica es muy
poco utilizada.
La eosina es un colorante muy usado en tinciones de vitalidad. Al ser un colorante aniónico (carga
negativa) no penetra en el interior celular a no ser que la membrana sea permeable. Esto solo sucede
en células muertas. Por tanto, en una tinción con eosina encontraremos células con el interior teñido
(muertas) y células solo teñidas en su entorno (vivas).
Preparación:
Eosina Y alcohólica
1. A partir de polvo de eosina:
1. disolver 0,5 g de eosina Y en etanol 95%
2. añadir una gota de ácido acético glacial
2. A partir de eosina Y acuosa comercial
1. mezclar 100 cc de eosina Y acuosa 3% con 125cc de etanol 100%
2. añadir a la mezcla anterior a 375 cc de agua destilada
3. de modo opcional, añadir unas gotas de ácido acético glacial
Eosina Y acuosa (2%)
1. disolver 25 g de eosina Y hidrosoluble en 1250 cc de agua destilada
2. añadir unas gotas de ácido acético glacial

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¿Cómo actúa el Lugolen el catafilo de la cebolla?
El catafilo de la cebollaes rico en almidón es por eso que el Lugol
coloreade azul la muestra por la presenciade almidón.
EOSINOFILOS: son células de actividad fagocitaria, presentan un color morado
Cada una de las partes, a manera de ondas, que sobresalen en el borde de una cosa.
Núcleo bilobulado
Función: Fagocitosis de complejos antígeno-anticuerpo, destrucción de parásitos
El citoplasma en aspecto de "arenilla" con gránulos
Basófilos:

contiene un núcleo en forma de lóbulos con varios gránulos, presenta un color
azul. se encarga de modular la inflamación.
 núcleo en forma de s
 citoplasma con gruesas granulaciones basófilas, en su mayoría ubicadas en
el borde interno de la membrana citoplasmática, con frecuencia cubre el
núcleo haciéndolo poco visible.

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 es el leucocito más escaso de sangre periférica.
 Segregan histamina que actúa en las reacciones inflamatorias.
LINFOCITOS

Son células que tiene un núcleo muy grande que se tiñe de color morado, con
un citoplasma de color azul muy claro.
 Núcleo esférico
 Citoplasma escaso.
 Existe dos tipos de linfocito. Los linfocitos B que fabrican anticuerpos mientras
que los linfocitos T que eliminan células infectadas por virus y regulan la
actividad de otros glóbulos blancos.

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NEUTRÓFILOS:
Son células que se tiñen de un color morado claro, su núcleo, puede estar en banda o
segmentado Se encargan de ayudar a defender el organismo de bacterias.
Neutrófilo bastonado: Núcleo alargado, de grosor uniforme,
Citoplasma con finos gránulos neutrófilos
Neutrófilo segmentado: Núcleo lobulado (2 – 5 lóbulos) unidos por puentes de
cromatina densa
Es el leucocito más abundante de sangre circulante.
Función: Fagocitosis y destrucción de microorganismos, ayuda a iniciar el proceso
inflamatorio.

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MONOCITOS:
Núcleo arriñonado de aspecto cerebroide,
Citoplasma abundante, con prolongaciones a manera de seudópodos, con finas
granulaciones azurófilas (lisosomas).
Función: Fagocitosis de restos celulares, de microorganismos, presentación de antígenos y
origina macrófagos tisulares.

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Leucocitos al microscopio óptico.A) Neutrófilo, B) Monocito/Macrófago, C)Eosinófilo, D) Linfocito, E) Basófilo
OBSERVACION DE EPITELIO BUCAL
Para este experimento sacamos una muestra de nuestro compañeros del laboratorio, mediante una
espátula que es sumergida en la cavidad bucal , luego lo extendemos en una lámina porta objeto y
dejas secar al ambiente , agregamos azul de metileno y pasamos a observar el en el microscopio.
400X
Observamos células planas
poligonales irregulares, como el
epitelio es superficial en su mayoría
son células muertas donde el azul de
metileno tiñe el núcleo y con menos
color el citoplasma.

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II. CUESTIONARIO
1. ¿Qué es un frotis?
También llamado extendido, consiste en la expansión de una gota de
sangre sobre un portaobjeto empleando el canto biselado de otro
portaobjeto de igual dimensión, con un Angulo de 45° se desliza
suavemente a velocidad moderada hasta que quede la gota de sangre bien
extendida, el grosor y dimensión deben estar equilibrado.(ni grueso ,ni
muy delgado)
2. ¿Qué diferencia hay entre la célula vegetal de la cebolla y la
fúngica?
Vegetal
Las células de la epidermis de cebolla son de forma alargada y bastante
grande.
Su membrana es rigida,generalmente tiene forma hexaédrica
Presencia de los cloroplastos de grandes vacuolas.
su pared celular está compuesto por celulosa.
Contiene un núcleo q esta al costado por la presión de las vacuolas.
Fúngica
Se distinguen micro fibrillas formadas por polisacáridos.
Básicamente todos tienen quitina (polímero de N-acetil-glucosamina).
formado por filamentos que se llaman hifas y el conjunto de hifas se llama
micelio.
Su reproducción asexual por esporas.
Son heterótrofos eso significa q son incapaces de fijar carbono a través de
la fotosíntesis, pero usa el carbono fijado por otros organismos para su
metabolismo.
CONCLUSIÓN:
 En el catafilo de la cebolla podemos distinguir la pared celular el citoplasma
el núcleo q se encuentra muy cerca a la pared celular por la presión que
ejerce la vacuola sobre ella
 La tinción de Lugol actúa sobre el dándole un color azulino por la presencia
de almidón
 El moho del pan es un hongo de tipo RHIZUPOS que se reproduce
asexualmente.
 El moho tiene hifas que son muy sólidas por la presencia de quitina a
diferencia de la vegetal que tiene celulosa.
 La tinción de Wright Se utiliza para diferenciar los tipos de células sanguíneas y
usado para el control de glóbulos blancos cuando hay sospecha de infección.
 eosinofilos: son células de actividad fagocitaria, presentan un color morado
Núcleo bilobulado el citoplasma en aspecto de "arenilla" con gránulos

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 los basófilos son el leucocito más escaso de sangre periférica. Segregan
histamina que actúa en las reacciones inflamatorias, con núcleo en forma de
s.
 los linfocitos Son células que tiene un núcleo muy grande que se tiñe de color
morado, con un citoplasma de color azul muy claro,Núcleo esférico,
Citoplasma escaso.
 Existe dos tipos de linfocito. Los linfocitos B que fabrican anticuerpos mientras
que los linfocitos T que eliminan células infectadas por virus y regulan la
actividad de otros glóbulos blancos.
 los neutrófilos Son células que se tiñen de un color morado claro, su núcleo,
puede estar en banda o segmentado Se encargan de ayudar a defender el
organismo de bacterias. Se clasifican en:
 Neutrófilo bastonado: Núcleo alargado, de grosor uniforme,
 Citoplasma con finos gránulos neutrófilos
 Neutrófilo segmentado: Núcleo lobulado (2 – 5 lóbulos) unidos por puentes
de cromatina densa. Es el leucocito más abundante de sangre circulante.
Función: Fagocitosis y destrucción de microorganismos, ayuda a iniciar el
proceso inflamatorio
 Los monocitos: Núcleo arriñonado de aspecto cerebroide, Citoplasma
abundante, con prolongaciones a manera de seudópodos, con finas
granulaciones azurófilas (lisosomas). Función: Fagocitosis de restos
celulares, de microorganismos, presentación de antígenos y origina
macrófagos tisulares.
 Epitelio bucal se aprecia células planas poligonales irregulares , donde el azul
de metileno tiñe el núcleo y con menos color el citoplasma.
 El azul de metileno reacciona con el núcleo por se basófilo.
BIBLIOGRAFIA:
Bilogíamolecular de la celular de bruce alberts, quinta edición,2010
ediciones omega,capitulo 23 pagina ,1451-1460
http://es.wikipedia.org/wiki/Verde_de_metilo
http://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_hematoxilina-eosina
http://sosbiologiacelularytisular.blogspot.com/2012/01/sangre-leucocitos-blood-
leukocytes.html
http://www.google.com.pe/imgres?q=tipos+de+leucocitos&hl=es&sa=X&noj=1&tbm=i
sch&prmd=imvnsbfd&tbnid=ccOJEX-
bAriE8M:&imgrefurl=http://members.tripod.com/~sides_escom/Notas/anemias.htm&d
ocid=fO-qnY5JTQ4UNM&imgurl
http://www.google.com.pe/search?hl=es&noj=1&site=webhp&source=hp&q=tipos+de
+leucocitos&oq=tipos+de+leucocitos&gs_l=hp.1.0.0l10.2481.9584.0.12531.19.12.0.7
.7.1.255.1852.3j6j3.12.0...0.0...1c.1.U8IWuW7CgTc

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