Diagnóstico delDistemper CaninoClaudia López A., M.V., M.ScAlejandro Flores A., T.MSIMPOSIO DE ACTUALIZACION EN DISTEMPER ...
• CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS DE LAENFERMEDAD Y RESPUESTA INMUNE• CARACTERÍSTICAS DEL AGENTE• DIAGNÓSTICO:• EXAMEN CLÍNICO• E...
Enfermedad viral altamente contagiosa, producidapor un Morbillivirus de la familia Paramyxoviridae,pantrópico, que genera ...
Exámenes deLaboratorio1. HEMATOLOGÍA Y BIOQUÍMICA SANGUÍNEA INESPECÍFICOS ¡¡¡¡ Sólo tienen valor para elmonitoreo y el pr...
FORMAS DE PRESENTACIÓN• AGUDAP.I: 7-14 díasEntre los 3-7 primeros días  fiebre + leucopeniaSegunda fase febril va acompañ...
• SUBAGUDAEncefalomielitis• CRÓNICAEncefalomielitis mulfifocalEncefalitis crónica del perro viejoSIMPOSIODE ACTUALIZACIONE...
Características del agenteH y N:AdhesiónF: Fusión demembranasIgGIgMLa eliminación del virusdepende de la capacidaddel SI (...
Diagnóstico• HISTORIA CLÍNICA• EXAMEN FÍSICOEXÁMENES DE LABORATORIO‘ Todos los métodos usados puedendar falsos negativos ‘...
• Leucocitosis neutrófila con o sindesviación a la izquierda, en cuadros coninfección bacteriana secundaria.• Proteínas to...
2.- DETECCIÓN DE ANTÍGENO VIRALLas partículas virales (antígenos) se puedenencontrar en los leucocitos, eritrocitos ycélul...
La detección de antígenos virales de Distemper(acúmulos de cápsides intracitoplasmáticas) puederealizarse mediante métodos...
MICROSCOPÍA DE CUERPOS DE INCLUSIÓN CDV ENCÉLULAS SANGUÍNEAS Y CONJUNTIVALESSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
Exámenes deLaboratorio2.- SEROLOGÍADe todos los métodos diagnósticos paraDistemper, el serodiagnóstico es el másutilizado....
La IgM puede ser detectada en perros infectados novacunados, entre los 6 y 8 días post infección. LaIgG aparece entre los ...
0 5 10 15080160240320400480560640720Niveles de anticuerpos anti-CDV post vacunación (Warner T. et al)Ac IgGMATERNOSAc IgGA...
INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTASIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
[Ac]Ag- CDV purificadoControl positivo Formación del complejo[Ag CDV]-[Ac CDV]FAConjugado marcado anti IgM ó IgGcaninoFAUn...
La reacción coloreada positiva en la fase sólidapuede cuantificarse, comparando la intensidaddel color de la reacción en u...
Escala devalorResultado¿PreviamenteVacunado?Interpretación0 Negativo Sí o NoNo hubo respuesta humoral (anticuerpos).Puede ...
3.- DIAGNÓSTICO MOLECULARReación de la Polimerasa en Cadena portranscripción reversa (RT-PCR)  métododiagnóstico antemort...
Generalmente se amplifican fragmentos delgen que codifica la nucleoproteina (NP), unaregión conservada dentro del genoma v...
MUESTRA: SANGRE CON EDTA >0,7 mLSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
ELECTROFORESIS EN GEL DE AGAROSA(CDV 287 pb)SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
En animales enfermos, CDV se excreta por laorina hasta por 50 días post-infecciónSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
Toma de muestra para PCR segúnlos síntomas.Síntomas Muestra a analizarFiebre (Viremia) Sangre (EDTA) o SueroConjuntivitisH...
Exámenes deLaboratorio4.- INMUNOHISTOQUÍMICATécnica que se aplica en tejidos. Se basa en ladetección del antígeno viral me...
Técnica deInmunohistoquímicaAc. Primario Anti CDV Ac. SecundarioBiotiniladoComplejo Streptavidina-PeroxidasaDiaminobenzidi...
SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
MUESTRAS LABORATORIO DE PATOLOGÍA• PULMÓN• HÍGADO• LINFONÓDULOS• CEREBRO• VEJIGA• BAZO• PIEL• INTESTINOEncefalitis desmiel...
DISTEMPERSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
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Actualizacion diagnostico distemper canino 2012

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Distemper Canino
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Actualizacion diagnostico distemper canino 2012

  1. 1. Diagnóstico delDistemper CaninoClaudia López A., M.V., M.ScAlejandro Flores A., T.MSIMPOSIO DE ACTUALIZACION EN DISTEMPER 2012
  2. 2. • CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS DE LAENFERMEDAD Y RESPUESTA INMUNE• CARACTERÍSTICAS DEL AGENTE• DIAGNÓSTICO:• EXAMEN CLÍNICO• EXÁMENES DE LABORATORIOSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  3. 3. Enfermedad viral altamente contagiosa, producidapor un Morbillivirus de la familia Paramyxoviridae,pantrópico, que genera por lo usual un cuadroneumoentérico y nervioso.VIRUSTej linfoidefocalTej linfoide sistémico(Desarrollo R.I)Tractos respiratorio, alimentario,urogenital(Signos clínicos)EncefalitisRecuperación01 semana1-2semanas2-3semanas2-12semanasViremiaViremiaSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  4. 4. Exámenes deLaboratorio1. HEMATOLOGÍA Y BIOQUÍMICA SANGUÍNEA INESPECÍFICOS ¡¡¡¡ Sólo tienen valor para elmonitoreo y el pronóstico de la enfermedad.• Anemia normocítica –normocrómica,regenerativa• La linfopenia absoluta x necrosis del tejidolinfoide.• Trombocitopenia moderadaMonocitosis relativa o absoluta es el cambiomás constante en el leucograma.SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  5. 5. FORMAS DE PRESENTACIÓN• AGUDAP.I: 7-14 díasEntre los 3-7 primeros días  fiebre + leucopeniaSegunda fase febril va acompañada de rinitis,conjuntivitis, anorexia y cuadro neumoentéricoagravado si hay infección secundariaSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  6. 6. • SUBAGUDAEncefalomielitis• CRÓNICAEncefalomielitis mulfifocalEncefalitis crónica del perro viejoSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  7. 7. Características del agenteH y N:AdhesiónF: Fusión demembranasIgGIgMLa eliminación del virusdepende de la capacidaddel SI (Ig) para reconocerlas proteínas de laenvoltura viral,especialmente H y NSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  8. 8. Diagnóstico• HISTORIA CLÍNICA• EXAMEN FÍSICOEXÁMENES DE LABORATORIO‘ Todos los métodos usados puedendar falsos negativos ‘SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  9. 9. • Leucocitosis neutrófila con o sindesviación a la izquierda, en cuadros coninfección bacteriana secundaria.• Proteínas totales normales. Puedenaumentar en cuadros que cursan condeshidratación (↑ albúminas)• Las globulinas suelen estar aumentadasen pacientes inmunocompetentes. SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  10. 10. 2.- DETECCIÓN DE ANTÍGENO VIRALLas partículas virales (antígenos) se puedenencontrar en los leucocitos, eritrocitos ycélulas epiteliales tempranamente en el cursode la infección, a menudo antes de laaparición de los signos clínicos.Luego de la aparición de estos signos, elantígeno CDV puede desaparecer de lasangre, conjuntiva y epitelio genital antes deuna semanaSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  11. 11. La detección de antígenos virales de Distemper(acúmulos de cápsides intracitoplasmáticas) puederealizarse mediante métodos serológicos ocitológicosINMUNOCROMATOGRAFIASIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  12. 12. MICROSCOPÍA DE CUERPOS DE INCLUSIÓN CDV ENCÉLULAS SANGUÍNEAS Y CONJUNTIVALESSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  13. 13. Exámenes deLaboratorio2.- SEROLOGÍADe todos los métodos diagnósticos paraDistemper, el serodiagnóstico es el másutilizado.Si bien las pruebas son confiables ELPROBLEMA SE PRODUCE AL INTERPRETARLOS RESULTADOSSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  14. 14. La IgM puede ser detectada en perros infectados novacunados, entre los 6 y 8 días post infección. LaIgG aparece entre los 10 y 20 días. la IgM en perros infectados persiste por 5 semanasa 3 meses dependiendo de la cepa y la respuestadel huésped. En perros vacunados la IgMpersiste por aprox. 3 semanas.La IgG se produce en forma local en SNC enperros con encefalitisNingún examen serológico en la actualidadpermite discernir entre los anticuerposmaternales, vaccinales y por infecciónSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  15. 15. 0 5 10 15080160240320400480560640720Niveles de anticuerpos anti-CDV post vacunación (Warner T. et al)Ac IgGMATERNOSAc IgGAc IgMDías post vacunaciónTítulos aproximados (1:)SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  16. 16. INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTASIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  17. 17. [Ac]Ag- CDV purificadoControl positivo Formación del complejo[Ag CDV]-[Ac CDV]FAConjugado marcado anti IgM ó IgGcaninoFAUnión del conjugado anti IgMó IgG caninoFAReacción enzimática de colorELISA EN FASE SÓLIDA(INMUNOCOMB)SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  18. 18. La reacción coloreada positiva en la fase sólidapuede cuantificarse, comparando la intensidaddel color de la reacción en una escala cromáticaincluida en el kit (Comb Scale) e interpolando en elgráfico adjunto para estimar los títulos deanticuerpos anti-CDV.SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  19. 19. Escala devalorResultado¿PreviamenteVacunado?Interpretación0 Negativo Sí o NoNo hubo respuesta humoral (anticuerpos).Puede indicar estado agudo de la infección.Retestear en 10-14 días, si el perro sobrevive.1-2LevementepositivoSíNoTitulo de anticuerpos no protector; retestear en10-14 días. Poca respuesta humoral a lainfección o vacunación. Puede perdurar eltítulo en perros maduros.Poca respuesta humoral a la infección opuede haber anticuerpos maternales encachorros de no mas de 4 meses.3-4 o MayorMedio-altopositivoSíNoProtector – alto titulo protector de anticuerpos.Respuesta a la vacunación o infección.Respuesta a la infección.INTERPRETACIÓN DERESULTADOSIgG (+) en FCE permite establecer undiagnóstico definitivo  los Ac. se producen in situSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  20. 20. 3.- DIAGNÓSTICO MOLECULARReación de la Polimerasa en Cadena portranscripción reversa (RT-PCR)  métododiagnóstico antemortem, altamente sensible yespecífico, temprano y seguroUtiliza muestras de sangre, suero y fluidocerebroespinal, independiente de los hallazgosclínicos, histopatológicos; de los títulos deanticuerpos y de la distribución del antígenoviral, en casos agudos y crónicos.SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  21. 21. Generalmente se amplifican fragmentos delgen que codifica la nucleoproteina (NP), unaregión conservada dentro del genoma viral.SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  22. 22. MUESTRA: SANGRE CON EDTA >0,7 mLSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  23. 23. SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  24. 24. ELECTROFORESIS EN GEL DE AGAROSA(CDV 287 pb)SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  25. 25. En animales enfermos, CDV se excreta por laorina hasta por 50 días post-infecciónSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  26. 26. Toma de muestra para PCR segúnlos síntomas.Síntomas Muestra a analizarFiebre (Viremia) Sangre (EDTA) o SueroConjuntivitisHisopado o escobilladoconjuntivalRinitis con catarro Escobillado nasalProblemasneurológicos LCRProblemas digestivos HecesTraqueo bronquitis, tos,bronconeumopatía Secreciones respiratoriasSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  27. 27. Exámenes deLaboratorio4.- INMUNOHISTOQUÍMICATécnica que se aplica en tejidos. Se basa en ladetección del antígeno viral mediante un sistemaespecializado de inmunocomplejosSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  28. 28. Técnica deInmunohistoquímicaAc. Primario Anti CDV Ac. SecundarioBiotiniladoComplejo Streptavidina-PeroxidasaDiaminobenzidinaSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  29. 29. SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  30. 30. SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  31. 31. SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  32. 32. SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  33. 33. MUESTRAS LABORATORIO DE PATOLOGÍA• PULMÓN• HÍGADO• LINFONÓDULOS• CEREBRO• VEJIGA• BAZO• PIEL• INTESTINOEncefalitis desmielinizante nosupurativaCuerpos de Inclusiónintracitoplasmáticos ointranucleares eosinofílicosSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  34. 34. DISTEMPERSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012SIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012
  35. 35. Diagnóstico delDistemper CaninoClaudia López A., M.V., M.ScAlejandro Flores A., T.MSIMPOSIODE ACTUALIZACIONENDISTEMPER2012

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