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Plant stress kit de ADC Bioscientific Caracteristicas Tecnicas

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El Plant Stress Kit de ADC Bioscientific incorpora dos fluorómetros: Y (II) y Fv/Fm. Es decir, combina el método PAM con la técnica de excitación continua.
Y (II) mide la eficiencia del Fotosistema II (PSII) como rendimiento cuántico en adaptación a la luz. Y también proporciona valores de tasa de transporte de electrones ETR, la radiación PAR, Temperatura de la hoja, Máxima fluorescencia en estado estacionario FMS (o FM’).
Con el fluorómetro Fv / Fm se obtienen medidas adaptadas a la oscuridad de Fo, Fm, Fv, Fv / Fm.

Publicado en: Educación
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Plant stress kit de ADC Bioscientific Caracteristicas Tecnicas

  1. 1. Plant Stress Kit de ADC Bioscientific Características Técnicas https://www.adc.co.uk/products/plant-stress-kit-2/
  2. 2. Plant Stress Kit El equipo está formado por • MedidorY(II) adaptado a la luz • Medidor Fv/Fm adaptado a la oscuridad • 10 pinzas de adaptación a la oscuridad • 2 USB baterías de iones de litio • 2 Cables de carga • Patrones de Absortancia • Cargador de batería de viaje • Manual de instrucciones (USB) 2 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  3. 3. Características principales • Ambos fluorómetros tienen 2Gb de memoria interna • La descarga de datos es vía USB • El formato de la descarga de datos es .csv • Equipo portátil, la batería se puede guardar en un bolsillo mientras el fluorómetro está midiendo 3 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  4. 4. ¿Cuándo usar cada fluorómetro? • Es recomendable leer Guía ‘Plant Stress’ antes de empezar a medir. Si no dispones de una puedes pedírsela al distribuidor local, es gratuita • La guía incluye puntos de verificación para que las medidas Fv/Fm yY(II) sean fiables • La guía explica porque los resultados varían entre especies, diferentes genomas dentro de una misma especie, o el tipo de planta (C3, C4, CAM). • También explica porque algunos protocolos son efectivos para algunas plantas o tipos de estrés mientras que para otros no • En la guía, se puede localizar el tipo de estrés específico para seguir los métodos y protocolos recomendados y medir de forma fiable el estrés vegetal 4 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  5. 5. Ejemplos de Investigación • Junto con la guía se proporciona una lista de referencias bibliográficas • Esta bibliografía referencia las técnicas de medida en las que se emplean los medidores Fv/Fm yY(II) • El desarrollo de ambos fluorómetros está basado en la investigación científica reciente 5 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  6. 6. Medidor Y(II) • Mide la eficiencia del Fotosistema II (PSII) como Rendimiento Cuántico mediante un ensayo de adaptación a la luz rápido • Se comercializa con estándares de calibración • Y se puede adquirir de forma separada del medidor Fv/Fm 6 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  7. 7. Medidor Fv/Fm • Mide Rendimiento Cuántico Máximo (todos los centros de reacción abiertos) • Se proporcionan 10 clips- pinzas de hoja para la Adaptación a la oscuridad antes de medir • Solo se comercializa con el medidor Y(II), o bien si ya se dispone de un medidorY(II) 7 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  8. 8. Para usar el medidorY(II) .... Primero, seleccionar un archivo de registro: Seleccionar ‘Test’ usando los botones con forma de flecha < > y apretar el botón verde 1. Seleccionar ‘Logging’ apretando el botón > y a continuación apretar el botón verde 2. Usar > para seleccionar ‘File:’ y apretar el botón verde para editar el nombre 3. Se pueden usar 8 caracteres [_ _ _ _ _ _ _ _] 4. Para editar un carácter, usar ↑ para moverse entre los números 0-9 y las letras A-Z. 5. Apretar ↓ desde cero (o) para dejar un espacio en blanco 6. Apretar el botón verde cuando esté listo SatPwr: Intensidad de la luz de saturación, intervalo 0-7000 µmol m-2 s-1. Representada por niveles 1-8 de 1000 µmol (8 es la máxima intensidad, 1 cercano a 0). SatW: Ancho del flash de saturación, ajustado automáticamente por el fluorometro. Ajustable de 0,5 s a 2,0 s SatMd: Método de Saturación; tanto por square flash ‘Sqr’ o variable multi-level-variable ‘MLv’. Ir al manual para más información. Nota: en modo MLv , SatPwr y SatMd no fucnionan. ModPwr and Gain: Intensidad de la luz modulada y aumento. No deberían editarse. Se recomienda usar AutoSet. F: Seleccionar ‘Y’, si, para facilitar el filtrado electrónico. AutoSet: Proporciona automáticamente la modulación de la intensidad correcta. Colocar una hoja similar a las del estudio en la cámara antes de seleccionar AutoSet.Apretar ↑ ↓ para habilitar AutoSet. Alpha Mode: Seleccionar ‘Automatic’ (o Manual, con la flecha ↓). En modo automático, el siguiente paso es calibrar para absortancia o transmitancia. Ir a la siguiente diapositiva. En modo Manual, el valor ‘a’ que aparece en la formula para calcular ETR se puede modificar usando ↑ ↓. 8 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  9. 9. Tercero, calibrar la absortancia: 1. Seleccionar ‘Test’ usando los botones triangulares derecho-izquierdo y el botón verde 2. Seleccionar ‘Sample’ usando el triangulo izquierdo y aceptar apretando el botón verde 3. Apretar el triangulo derecho hasta que aparezca la siguiente página. Continuar usando este botón hasta que la opción ‘Calibrate Absorptance’ aparezca subrayada. 4. Apretar el botón Ʌ hasta que aparezca ‘Reflectance Sensor Cal’ 5. Coger la tarjeta Blanca y Negra, sacarla del envoltorio y colocarla en la cámara. Debe quedar dentro de la cámara y con el lado de color negro orientado hacia arriba (que puedas verlo) 6. Apretar el botón verde 7. Girar la tarjeta de manera que el lado blanco quede ahora hacia arriba, que este lado sea el que veas.Apretar el botón verde 8. Quitar la tarjeta y apretar el botón verde de nuevo 9 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific Cómo usar el medidorY(II)
  10. 10. Hacer una medidaY(II) Rendimiento Cuántico Opciones: 1) Medidas instantáneas 2) Modo supervisión - Monitorización Medida instantánea: 1. Elegir una hoja, tanto al aire libre como protegido. La planta para el análisis debe preadaptarse a las condiciones de luz deseadas. 2. Colocar la hoja dentro de la cubeta – cámara 3. Apretar el botón negro de grabación que está en la parte inferior del fluorómetro (se puede hacer con el dedo índice de la mano que sujeta el equipo) 4. Ver el gráfico generado en el display 10 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  11. 11. Medidor Y(II) para adaptación-luz, medidas rápidas 11 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific Sensores PAR / Temperatura Hoja Sensor HR (%) Orificios que permiten el intercambio gaseoso en el envés de la hoja Comprobación del pulso saturante del blanco, luz actínica
  12. 12. Registro con el medidorY(II) Para muchas medias durante bastante tiempo, es mejor colocar el fluorómetro en un trípode 12 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific 1. Seleccionar ‘Test’ usando < > y apretar el botón verde 2. Seleccionar ‘Logging’ usando > y apretar el botón verde 3. Usar > para seleccionar ‘File:’ y apretar el botón verde para editar el nombre del archivo 4. Tienes 8 caracteres para usar [_ _ _ _ _ _ _ _] 5. Para editar en carácter, usar ↑ para moverse entre los números 0-9 y las letras A-Z. 6. Usar ↓ desde el número cero (0) para dejar el carácter en blanco. 7. Apretar el botón verde cuando esté listo.
  13. 13. Seguimos … 8. Seleccionar ‘Day’ (el intervalo es ‘Trig-Run’ y no se puede editar). 9. Usar ↑ ↓ para seleccionar un valor. El tiempo por defecto y recomendado es de 15 minutos durante el día, para evitar la fotoinhibición o daño a la hoja. Los intervalos disponibles van de 0 – 60 minutos. 10. Apretar el botón verde para ajustar. Seleccionar el valor ‘Night’. Este es un valor defecto de 60 minutos. Por la noche, la hoja necesita un intervalo superior entre medidas, ya que los centros de reacción están abiertos y son más propensos a daños repentinos, irradiancia concentrada 11. Volver a comprobar la estabilidad del fluorómetro en el trípode y que la hoja está en el interior de la cámara de medida. 12. Apretar el botón negro de registro “record” de la parte inferior del fluorómetro. 13. La pantalla cambiará a “next measurement in 13:22…’ (la próxima medida empezará en 13:22 ...) y empezará una cuenta atrás hasta que se realice la próxima medida 14. Apretando ↓ aparecerá el gráfico de las últimas medidas realizadas. 15. Salir y parar las medidas de forma manual volviendo al fluorómetro después del tiempo deseado. Para hacer esto apretar el botón verde (mostrado en la pantalla como OK). 16. Los datos pueden descargarse a través del cable y puerto USB, conectado al portátil o al ordenador 13 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  14. 14. Medidor Fv/Fm • Mide Rendimiento Cuántico Máximo del PSII (todos los centros de reacción abiertos) • Se proporcionan 10 clips- pinzas de hoja para la Adaptación a la oscuridad antes de medir • Solo se comercializa con el medidor Y(II), o bien si ya se dispone de un medidorY(II) 14 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  15. 15. Como usar el medidor Fv/Fm … 1. Colocar la batería cargada y encender el medidor. Seleccionar fecha y hora usando la opción ‘Set’. 2. Seleccionar el menú ‘Test’. Comprobar que el sensor de medida está limpio. Apretar el botón verde y el Fv/Fm se autocalibrará a la intensidad de luz 3. Elige un nombre y selecciona un archivo de datos (como en el equipoY(II), diapositiva 12) 15 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific 4. Editar los siguientes parámetros para adaptar tu aplicación (en el manual y la guía Desktop Plant Stress aparece más información): SatPwr, SatW, SatMd, ModPwr & Gain, F, Autoset, alpha Mode, Automatic/Manual. Estas configuraciones tienen valores predeterminados. En las páginas 30 - 32 del manual aparece información de cada una. También hay información disponible en la Guía Plant Stress
  16. 16. 5. Colocar los clips de hoja en las hojas elegidas 6. Dejar los clips durante el tiempo recomendado (ver la guía del manual ‘Dark Adaption’). 7. Una vez transcurrido el tiempo establecido, colocar el sensor Fv/Fm en el clip de hoja, deslizando hacia atrás el obturador negro cuando la sonda este bien colocada. 8. Medir con la ayuda del botón negro inferior 9. Para la misma planta, se recomienda ensayar diferentes tiempos de exposición para la adaptación a la oscuridad. Una vez establecido el período óptimo, el muestreo puede redefinirse y repetirse para una precisión óptima, y eliminar todos los efectos NPQ. 16 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific Preparativos para usar el medidor Fv/Fm
  17. 17. Medir con el Fv/Fm: 1. Colocar una pinza de adaptación a la oscuridad en la hoja y cerrar el obturador 2. Dejar la pinza durante el tiempo requerido/deseado. Consultar el manual para más información, por lo general el tiempo suele ser 15- 20 minutos. 3. Insertar el extremo del medidor Fv/Fm en la guía. 4. Abrir el obturador para exponer la hoja a la luz modulada. 5. Apretar el botón negro de registro para producir un pulso de saturación. 6. Se medirá la Fluorescencia procedente de la muestra. 7. Los datos de seguimiento y las variables calculadas se graban de forma interna. 8. Se puede acceder a los datos vía USB. Es recomendable comparar las medidas iniciales usando diferentes períodos de oscuridad para determinar el valor óptimo para la aplicación deseada. 17 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  18. 18. Menú de enlaces de ambos medidores 1. Conectar el ordenador o el portátil colocando el cable azul en el puerto USB 2. Seleccionar ‘Link’ 3. Cualquiera de los dos medidores Y(II) o Fv/Fm se detectará como un dispositivo de almacenamiento masivo.Abrir de forma normal para ver los archivos de datos almacenados. 4. Se mostrarán los archivos TEST y LOG, si se han grabado. Todos se pueden abrir con Microsoft ExcelTM. 5. Este es un ejemplo archivoTEST1 que contiene 2 medidas realizadas con Y(II) Meter: 6. El archivo LOGF.. muestra las mismas medidas, pero registrados en modo logging con el equipo Y(II) Meter. 7. Este es un ejemplo archivoTEST1 que contiene 2 medidas realizadas con FV/FM Meter: 18 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific Sample Number Date Time SatI SatW ModI Gain Fo Fv Fm Fv/Fm Fv/Fo 1Dec/04/2017 13:34:11 6 1 2 4 385 1773 2158 0.821 4.605 2Dec/04/2017 15:38:53 6 1 2 4 359 1912 2271 0.841 5.325 Sample Number Date Time SatI SatW ModI Gain PAR T_Leaf T_Env H_Env Type L_D Fs_Fo Fms_Fv Y_Fm ETR_Fv/Fm alpha_Fv/Fo 1Dec/04/2017 12:28:25 6 1 4 4 83 21.5 21.9 33L 182 498 0.634 22 0.84 2Dec/04/2017 12:29:12 6 1 4 4 64 21.5 22 33L 209 670 0.688 18.4 0.84
  19. 19. ¿Qué significan los datos? Y(II) Las siguientes medidas aparecen en el archivo de datosY(II) Nota Importante: para cada parámetro se proporcionan 2 opciones. Solo se muestra y calcula una, dependiendo del modo de medida (aquí se explica): El medidor Y(II) también puede usarse en modo “monitoring” (continuo) para hacer medidas por ejemplo de noche o en oscuridad. En ese caso, las medidas realizadas en una planta en condiciones de adaptación a la oscuridad se muestran los valores ‘Dark’ en vez de los valores ‘Light’. Fs_Fo: Fs en Luz o Fo en Oscuridad Fms_Fv: Fm’ en Luz/Dia o Fv en Oscuridad Y_Fm: Y(II) en Luz o Fm en Oscuridad ETR_Fv/Fm: ETR en Luz o Fv/Fm en Oscuridad Alpha_Fv/Fo:Absortancia en Luz o Fv/Fo en Oscuridad En la página 18 del manual aparece más información de cada parámetro 19 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  20. 20. ¿Qué significan los datos? Fv/FM Los datos calculados con un medidor Fv/Fm que aparecen en un archivo de datos: Fo: Fluorescencia mínima después de adaptación a la oscuridad. La luz modulada solo detecta la fluorescencia de los complejos antenas "pre-fotosintéticas", sin provocar la fotosíntesis en esta etapa. Fv: Fluorescencia variable Fm: Fluorescencia máxima medida durante le primer pulso de saturación después de la adaptación a la oscuridad. Los centros de reacción están cerrados y, por eso, toda la energía se destina a fluorescencia Fv/Fm: El parámetro clave para determinar el rendimiento cuántico máximo del PSII. Es decir, cuantos de los cuantos absorbidos por una hoja pueden potencialmente usarse en los centros de reacción del PSII. Igual a (Fm-Fo) / Fm. A valores más bajos (por lo general 0,85 en plantas no estresadas), mayor el nivel de estrés de la planta. Fv/Fo: Tasa normalizada para mejorar la detección de estrés solo con Fv / Fm. Un valor inferior indica mayor estrés en la planta. Por lo general el intervalo es 0 – 4 20 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  21. 21. Menú ‘File’ de ambos Medidores • Seleccionar la pantalla File Management, en la que aparecen las opciones: View Select • Seleccionar el archivo a revisar. Ahora aparecen las opciones: Exit Erase y More • Se muestra la memoria completa ejemplo #1 of 3 files [ LOGF12 ] • Apretar cualquier botón con forma de flecha para ver los datos, mostrado como ‘S’ para muestra: 1, 2, 3 • Aparecerán los siguientes valores calculados: Fs: (también conocida como F’) es el nivel de fluorescencia creado por la luz actínica. Fs también se usa para designar las condiciones de estado estacionario F’. Fms: (tanto la Fm’ en condiciones de Luz, o la Fv en condiciones de Oscuridad) Y: (Rendimiento del Fotosistema II) ETR: (Tasa deTransporte de Electrones) También aparece la hora y fecha de la recogida de los datos • Apretar la flecha derecha para mostrar más registros. • Apretar el botón verde (OK) para salir del menú principal. 21 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  22. 22. Menú ‘Set’ Menu en ambos medidores • En cada fluorómetro, ‘Set’ es para las Settings options (Opciones de Configuración). • Es posible apagar el sonido ‘off’ o encenderlo ‘on’ para avisar que se ha apretado un botón. • También se puede ajustar la hora (09:27:05) Usar el botón con forma de flecha para seleccionar (subrayado) la hora o minutos. Usar las flechas arriba y abajo para aumentar o disminuir el valor. Apretar el verde para aceptar • También se puede ajustar la fecha: (Dec 05 2017) con los botones derecho e izquierdo. Cambiar los valores con los botones de flecha arriba y abajo. Los meses giran de Jan-Dec (enero – Diciembre). El año aumentará o disminuirá en una unidad cada vez. • Apretar el botón verde para aceptar y salir. 22 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  23. 23. Menú ‘Diag’ en ambos medidores • El menú Diagnostic es para calibrar el valor cero. Se recomienda utilizar esta pantalla si se sospecha que la unidad necesita recalibración. Los equipos están calibrados de fábrica, por lo que bajo circunstancias normales esto no sería necesario. Ante la duda, contactar con el servicio técnico. • En cualquiera de los equipos, en la pantalla Diagnostics (diagnóstico) aparecerá: 1. Retirar cualquier muestra del sensor y apretar botón verde para llevar a cero el fluorómetro. 2. Aparecerá una gráfica. Los valores fluctúan cerca del valor cero (0). A continuación apretar ‘OK’ cuando el valor sea o esté muy cercano a cero (0). 3. Haciendo esto se grabará el nuevo valor cero (0) y se sale del menú Diagnostic 23 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  24. 24. Menú ‘Rtm’ en ambos medidores Este menú no es necesario. Representa la posibilidad del medidor Y(II) para conectarse de forma remota mientras se usa en el campo para medir Si por casualidad se entra en este menú, aparecerá el valor Ft en tiempo real. 24 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  25. 25. Comparación con OS 30p+ Similitudes El sistema operativo del OS 30p+ funciona como el medidor Fv/Fm, un fluorómetro adaptado para medidas en oscuridad. • El OS30p+ solo, lleva a cabo análisisOJIP Strasser, un análisis en profundidad de las primeras etapas de la fluorescencia. • Tanto Fv/Fm como OS30p+ tienen una fuente de luz actínica roja • La duración de las baterías es similar en todos los equipos. Ventajas del Plant Stress Kit • Únicamente el Plant Stress Kit proporciona una fuente de luz actínica para las medidas conY(II). • Y(II) mide la temperatura de la hoja, el PAR y la Humedad • Solo el medidorY(II) permite trabajo en modo supervisión • El PSK es una forma efectiva de adquirir 2 equipos de medida, con una capacidad superior 25 Características técnicas del Plant Stress Kit de ADC Bioscientific
  26. 26. Para más información contacta con el distribuidor local de ADC BioScientific info@lab-ferrer.com blog.biofisicaambiental.com www.lab-ferrer.com 973532110

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