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  • 2. Importante • Recordar siempre anotar los lotes de los reactivos, fechas de vencimiento y marca de los mismos. • Preguntar los datos del paciente si es que no se han entregado y registrarlos. • Ordenar el mesón con el material y dejar 2 demás de todo. • Organizar los tiempos para tratar de que no hayan tiempos muertos. • Esto solo ayuda a recordar, antes hay que estudiar. • No agregue las técnicas en geles puesto que su protocolo es el más simple y fácil de recordar.
  • 3. Clasificación ABO-RhD en Tubo 1 2 3 D 4 5 6 Antisuero A Antisuero B Antisuero AB Antisuero D Glóbulos Rojos TA Glóbulos Rojos TB Prueba Autólogo Sueros GR 4% AS A + GR P Centrifugar 15’’ a 3000 RPM Evaluar 4+ 3+ 2+ 1+ +/- - AS B + GR P AS AB + GR P AS D + GR P AS P + GR TA AS P + GR TB AS P + GR P
  • 5. Clasificación ABO-RhD RN en Tubo Parte 1 Lavar por Centrifugación 60’’ a 3000 RPM 4 veces al menos con PBS Eliminar el exceso por inversión fuertemente para eliminar la Gelatina de Wharton.
  • 6. Clasificación ABO-RhD RN en Tubo Parte 2 1 2 3 D Antisuero A Antisuero B Antisuero AB Antisuero D Sueros GR 4% 15’’ a 3000 RPM Evaluar 4+ 3+ 2+ 1+ +/- - AS A + GR P Centrifugar AS B + GR P AS AB + GR P AS D + GR P
  • 7. Clasificación ABO-RhD RN en Tubo Parte 3 Coombs Directo o TAD Búsqueda de GR sensibilizados 1 Resuspender GR en PBS al 4% Suero GR 4% SAGH + GR P Centrifugar 15’’ a 3000 RPM Evaluar 4+ 3+ 2+ 1+ +/- -
  • 8. TAI o Coombs Indirecto parte 1 I II Agregar 2 gotas de suero del paciente y una gota de células panel I o II Pesquisa de Ig M 37°C I II 45 – 60 minutos con PBS 10 – 15 Minutos con LISS PASO 1 PASO 3 PASO 2
  • 9. TAI o Coombs Indirecto parte 2 PASO 4 Pesquisa de Ig M de amplio espectro térmico PASO 5 Lavar por Centrifugación 60’’ a 3000 RPM 4 veces al menos con PBS
  • 10. TAI o Coombs Indirecto parte 3 I II Agregar 2 gotas de SAGH a cada tubo Pesquisa de Ig G PASO 6 PASO 7
  • 11. Identificación de Anticuerpos Irregulares parte 1 I II III IV V VI VII VIII IX X XI Antisueros para detección de anticuerpos irregulares Agregar 3 gotas de suero y 2 gotas de cada panel y realizar un TAI a todas las muestras
  • 12. Identificación de Anticuerpos Irregulares parte 2
  • 13. Titulación de Anticuerpos Irregulares Parte 1 300 μL PBS 300 μL 300 μL PBS 300 μL PBS 300 μL PBS 300 μL PBS 300 μL PBS 300 μL PBS 300 μL PBS 300 μL PBS 300 μL PBS 300 μL PBS Suero 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512 1:1024 1:2048 en estudio
  • 14. Titulación de Anticuerpos Irregulares Parte 2 } Colocar 50 μL de las Células de fenotipo conocido al 4% } Traspasar 100 μL de la dilución madre a otros 11 tubos. } Realizar TAI
  • 15. Titulación de Anticuerpos Irregulares Parte 3 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 4+ 3+ 2+ 1+ +/- - 12 10 8 6 4 0 Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6 Tubo 7 Tubo 8 Tubo 9 SCORE 12 12 12 12 10 8 6 6 0 78 Tabla de Score Se suman los score y se obtiene un resultado que nos habla de la fuerza de los anticuerpos irregulares.