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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE BAJA CALIFORNIA 
Técnicas de tinción en histología 
Barrera Briseño Nancy Karina 
Laboratiorio de Biolocia Celular 
Medicina 1er. Semestre | Dr. Horacio 
Facultad de Medicina y Psicología
Introducción 
Tinción de Gram; Permite 
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Imagen tomada de: BIOLOGÍA (2º BACHILLERATO A DISTANCIA): 
TUTORÍAS EN LA WEB Paloma Román Gómez 2008 
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Para poner de manifiesto las diferentes estructuras que 
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Los colorantes suelen ser moléculas 
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aromático ++ 
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cromóforo 
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Tinción simple con cristal violeta de Staphylococcus aureus, nos proporciona información sobre la forma y la agrupación en racimos 
Capacidad de unirse 
Para que el colorante pueda teñi r un 
tej ido ha de ser capaz de uni rse a 
las est ructuras celulares. El 
elemento químico que le conf iere 
esta capacidad se denomina grupo 
Auxocromo
COLORANTE 
Cromógeno 
Gpo. Cromóforo 
Gpo. Auxocromo
Principales grupos 
Gpo. Auxocromo 
Básicos 
Aminas primarias NH2 
Aminas secundarias NHR 
Aminas terciaciarias NR2 
Ácidos 
Hidroxilo –OH 
Carboxilo –COOH 
Sulfhidrilo SH2 
Gpo. Cromóforo 
El grupo nitro -NO2 
El grupo nitroso –N=O 
El grupo indamina (imino) >C=N-El 
grupo azo –N=N-Configuración 
quinonica
Clasificación 
de colorantes 
Por origen Por grupos 
Por 
incorporación
Clasificación 
De los colorantes por grupo 
SEGÚN EL GRUPO 
CROMOFORO 
SEGÚN EL GRUPO AUXOCROMO 
Básicos o 
catiónicos 
Azul de 
metileno 
Nitrados Acido pícrico 
Ácidos o 
aniónicos 
Eosina Colorantes azoicos Orange G, Sudan negro, etc 
Sin carga 
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óseo 
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Se pueden clasificar, en función de su origen, en naturales y artificiales. Por 
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Naturales Artificiales 
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Tinción de hematoxilina-eosina. Esclerosis segmentaria con formación de sinequias. Intersticio con infiltrado linfocitario. Fibrosis y atrofia tubular (x 400). 
Fibras elásticas teñidas con orceína nítrica (flechas) x 400. 
CELULAS EPITELIO BUCAL: 400X
¿Como se unen los 
colorantes al tejido? 
 
¿Cuáles son los 
fenómenos fisicoquímicos 
implicados?
MECANISMOS DE UNIÓN Tinción-Sustrato 
Relaciones electrostáticas Acido-Base 
Enlaces coordinados, mordientes y 
quelantes 
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estableciendo una interacción 
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Enlaces covalentes Isiotiocianatos - Sustrato 
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Interacciones hidrófobas en la 
disolución diferencial: coloraciones 
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Fuerzas de Van der Waals 
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El colorante forma agregados 
metálicos insolubles que quedan 
retenidos en el tejido gracias a la 
malla molecular creada en el 
proceso de fijación.
Metacromasia 
Si es azul ¿Por qué tiñe de rojo? 
Esto ocurre porque los iones del colorante unidos 
al sustrato cambian la longitud de onda de 
absorción de luz y, por lo tanto, el color observado 
del objeto teñido es distinto al del colorante libre. 
Cromotrópicos
Antes de continuar 
debemos definir algunos 
conceptos
Glosario de términos relacionados 
con las tinciones 
Término Definición 
Mordiente Reactivo que aumenta la reactividad del 
tejido estableciendo una interacción 
tejido colorante 
Alumbre Modifica el colorante añadiéndole grupos 
auxocromos y confiriéndole un carácter 
muy básico 
Coloración indirecta en un tiempo Aquella en la que el tratamiento del tejido 
con el colorante y el mordiente se realiza 
simultáneamente en una misma solución 
Coloración indirecta en dos tiempos Cuando colorante y mordiente actúan 
separadamente
Glosario de términos relacionados 
con las tinciones 
Término Definición 
Tinción progresiva Tinciones en las que los colorantes y 
mordientes se aplican siguiendo una 
secuencia definida y bajo estricto control 
de los tiempos para lograr una intensidad 
determinada. 
Tinción regresiva Primero se sobre colorea y 
posteriormente se elimina el exceso de 
colorante por diferenciación 
Diferenciacion Consiste en eliminar el exceso de 
colorante mediante agentes 
diferenciadores (disoluciones alcoholicas 
de acidos o alcalis, etanol, acetona, etc.)
Tinciones más 
utilizadas
Tinción de hematoxilina-eosina. 
Esclerosis 
segmentaria con formación de 
sinequias. Intersticio con 
infiltrado linfocitario. 
Fibrosis y atrofia tubular 
(x 400). 
Hematoxilina-eosina 
Tinción general, contiene un colorante básico para las 
estructuras acidas como (ADN Y ARN) y otro acido para el 
citoplasma y estructuras extracelulares. 
Hematoxilina: C.I. 75290) es un compuesto que se obtiene 
de la planta leguminosa Haematoxylum campechianum , 
conocida también con el nombre de palo de Campeche. 
Requiere ser oxidada para convertirse en una molécula 
coloreada. AZUL 
Eosina: Derivado halogenado del xanteno. Molécula 
autofluorescente por sus átomos halógenos y es soluble 
en agua y en alcoholes lo que le confiere mucha 
versatilidad para la tinción histológica. Presenta un cierto 
carácter ácido. ROSA
Ejemplos de tinciones 
tricrómicas: 
El tricrómico de Masson 
El tricrómico de Van Gieson 
Tricrómicos 
Es una técnica para la coloración de fibras 
colágenas y elásticas. Se observan colores 
distintos; tejido conjuntivo de verde, tejido 
muscular de verde pardo, eritrocitos de 
rojizo, núcleos azul negro y citoplasma y 
fibras musculares rosa.
Extensión de sangre 
periférica (Tinción May 
Grünwald- Giemsa): 
eritrocitos de tamaño y 
contenido de hemoglobina 
inferior al normal 
característicos de la Anemia 
de Cooley 
Giemsa 
Es una tinción general que se emplea mucho 
en hematología, permite distinguir, por su 
coloración, los gránulos de los diferentes 
leucocitos polimorfonucleares. Contiene una 
mezcla de colorantes catiónicos (azul de 
metileno) y aniónicos (eosina)
Citología ginecológica 
Tinción de Papanicolaou 
Papanicolau 
Coloración histológica empleada 
principalmente para extensiones citológicas, 
sirve para la detección precoz del carcinoma 
de cérvix. Contiene una mezcla de 
colorantes que no produce sobre coloración. 
Normalmente tiene 4 colorantes: uno nuclear 
(hematoxilina), eosina Y, que tiñe de rosa el 
citoplasma, verde brillante que tiñe el moco 
y Orange G que tiñe la queratina.
Tinciones aplicables a 
tejidos concretos 
Algunas tinciones nos sirven para teñir ciertos tejidos específicos, a 
continuación veremos los ejemplos mas relevantes. 
TINCIONES APLICABLES A TEJIDOS 
CONCRETOS 
Tejido nervioso Impregnaciones argénticas 
Tejido conjuntivo 
Técnica de reticulina, de Wigert de 
resorcina-fucsina, etc. 
Musculo estriado 
Tinción de hematoxilina 
fosfotúngstica ácida PTAH 
Hueso 
Exigen descalcificación o desgaste. 
Coloración con tionina o tinción 
negativa 
Higado 
H-E, Tinción tricrómico, reticulina, 
PAS y PAS-distasa, azul de Pearls. 
Neurona
TINCIONES APLICABLES A TEJIDOS 
CONCRETOS 
Riñón 
H-E, PAS, tricrómico y técnica de 
metenamina de plata. 
Piel 
PAS, Técnica de argentafinidad de 
Masson Fontana, Tricrómico de 
Gallego 
Microorganismos en diversos 
órganos 
Hongos – PAS o meteanina de plata 
de Grocott 
Bacterias: Gram, Ziehl Neelsen, 
Giemsa 
Riñon H-E 
Piel 
Tricrómico de Gallego 
Gram
Tinciones 
En microscopia subcelulares óptica también podemos resaltar e identificar determinados 
orgánulos mediante tinciones mas o menos especificas y diferenciales. A 
continuación se citan ejemplos de métodos de tinción mas utilizados:
TINCIONES SUBCELULARES 
Núcleo 
EN CORTES. Hematoxilina férrica, safranina-light 
green o verde metilo. 
EXTENSIONES CROMOSOMICAS. Carmín acético u Orceína 
acética. 
Nucléolo 
Grumos de Nissil: azul toluidina, violeta de 
cresilo y verde metilo-pronina 
Mitocondria EN CELULAS VIVAS. Verde Janus 
EN CORTES. Fucsina de Altmann 
Aparato de Golgi Impregnaciones argénticas 
Gránulos de secreción 
y cuerpos de inclusión 
Método de Mann, con eosina amarillenta y 
azul de metileno, posterior diferenciación en 
Orange G. 
Vacuolas de los 
fagocitos 
Se inyecta al animal una suspensión de 
partículas de carbón antes de obtener el tejido. 
Las células que fagocitan el carbón las 
acumulan en sus vacuolas de fagocitosis.
Impregnaciones 
Argénticas 
Se le denomina así a toda coloración histológica en la que se emplean sales 
metálicas para generar precipitados metálicos sobre estructuras que se pretenden 
destacar. 
Impresiones Argénticas 
Implica 2 pasos 
1. IMPREGANCION PRIMARIA 
Los tejidos don expuestos a una solución ligeramente alcalina en 
la que hay una concentración no muy alta de AgNO3 que proporciona 
iones de plata en exceso 
2. SEGUNDA FASE 
Los cortes son tratados con una solución (hidroquinona y sulfito) 
que captura parte de los iones de plata que se han unido débilmente al 
tejido
Tinción negativa 
No todos los colorantes se unen a las 
estructuras tisulares. Algunas tinciones se 
basan en la exclusión de la coloración. El 
contraste negativo consiste en teñir todo 
menos la estructura que queremos visualizar. 

Referencias 
ATLAS de HISTOLOGÍA VEGETAL y ANIMAL, Departamento de Biología Funcional y Ciencias de la Salud. Facultad de 
Biología. Universidad de Vigo. España Recuperado el 25 de Agosto del 2014 de: 
http://webs.uvigo.es/mmegias/inicio.html 
TÉCNICAS DE TINCIÓN HISTOLÓGICA, Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina. Departamento de Anatomía 
Patológica. Recuperado el 25 de Agosto del 2014 de: 
http://www.uam.es/departamentos/medicina/patologia/Tecnicas.htm 
Técnica de Tinción de Gram, Paloma Román Gómez 2008. Consejería de educación comunidad de Madrid. Recuperado el 07 
de Septiembre del 2014 de: 
http://perso.ya.com/geopal/biologia_2b/ 
"Spunic". (s.f.). COLORACIÓN. 27 de Septiembre del 2014, de Rincón del vago Sitio web: 
http://html.rincondelvago.com/coloracion.html 
Ilarraza Aleida. (4 de junio de 2011). HEMATOXILINA-EOSINA. 27 de Septiembre del 2014, de Blogspot Sitio web: 
http://hematoxilina-eosina-uc.blogspot.mx 
Gracias 
Preguntas 
información extra 
¿Que es un cuanto? 
¿Qué es la radiación electromagnética? 
Molécula orgánica 
Espectro visible 
Enlaces conjugados 
Resonancia 
Cromóforos 
Mordiente 
Fuerzas de Van der Waals 
Metacromasia 
Alumbre 
Tinción Argéntica
¿Que es un cuanto? 
• Un quantum o cuanto es la menor cantidad de 
energía que puede transmitirse en cualquier 
longitud de onda. 
• Considerado el creador de la teoría cuántica, el 
físico alemán Max Planck enunció que la radiación 
electromagnética se emite en unidades discretas de 
energía denominadas quantum o quantos. 
http://www.astromia.com/glosario/quantum.htm
¿Qué es la radiación electromagnética? 
• La radiación electromagnética es un tipo de campo 
electromagnético variable, es decir, una 
combinación de campos eléctricos y magnéticos 
oscilantes, que se propagan a través del espacio 
transportando energía de un lugar a otro 
http://blog.educastur.es/proyectosiesvegadeo/files/2010/01/la-radiacion.pdf
Molécula orgánica 
• Compuesto orgánico o molécula orgánica es una 
sustancia química que contiene carbono, formando 
enlaces carbono-carbono y carbono-hidrógeno 
http://es.wikipedia.org/wiki/Compuesto_org%C3%A1nico
Espectro visible 
• Se llama espectro visible a la región del espectro electromagnético 
que el ojo humano es capaz de percibir. A la radiación 
electromagnética en este rango de longitudes de onda se le llama 
luz visible o simplemente luz. No hay límites exactos en el espectro 
visible: un típico ojo humano responderá a longitudes de onda de 
400 a 700 nm, aunque algunas personas pueden ser capaces de 
percibir longitudes de onda desde 380 hasta 780 nm. 
http://es.wikipedia.org/wiki/Espectro_visible
Enlaces conjugados 
• Un sistema conjugado se da cuando en un compuesto 
químico con enlaces simples y dobles alternados, los 
electrones que forman los enlaces dobles se deslocalizan, 
es decir, se sitúan de manera uniforme alrededor del 
compuesto. Estos electrones deslocalizados no forman en 
realidad enlaces dobles entre dos átomos en particular, 
sino que pertenecen a todo el grupo de átomos, y le dan 
más estabilidad y fuerza al enlace simple, sin llegar a ser 
un doble enlace. 
http://es.wikipedia.org/wiki/Compuesto_org%C3%A1nico
Resonancia 
• La Resonancia (denominado también Mesomería) en 
química es una herramienta empleada 
(predominantemente en química orgánica) para 
representar ciertos tipos de estructuras moleculares. La 
resonancia consiste en la combinación lineal de estructuras 
de una molécula (estructuras resonantes) que no coinciden 
con la estructura real, pero que mediante su combinación, 
nos acerca más a su estructura real. 
http://www.ecured.cu/index.php/Resonancia_qu%C3%ADmica
Cromóforos 
Radical químico incorporado a una molécula orgánica y responsable del 
color. 
Los Cromóforos mas abundantes en colorantes biológicos son: 
El grupo nitro -NO2 
El grupo nitroso –N=O 
El grupo indamina (imino) >C=N-El 
• Un cromóforo es la parte o conjunto de átomos de una 
molécula responsable de su color. También se puede 
definir como una sustancia que tiene muchos electrones 
capaces de absorber energía o luz visible, y excitarse para 
así emitir diversos colores, dependiendo de las longitudes 
de onda de la energía emitida por el cambio de nivel 
energético de los electrones, de estado excitado a estado 
fundamental o basal. 
grupo azo –N=N-Configuración 
quinonica 
http://es.wikipedia.org/wiki/Crom%C3%B3foro
Mordiente 
• Aquella sustancia que sirve para unir un colorante a un 
sustrato. // Reactivo que aumenta la reactividad del tejido 
estableciendo una interacción tejido-colorante// Reactivos 
mordientes. Son los reactivos o sustancias que preparan al 
tejido para la coloración 
http://www.ecured.cu/index.php/Reactivos_mordientes
Fuerzas de Van der Waals 
• En fisicoquímica, las fuerzas de Van der Waals, o 
interacciones de Van der Waals, es la fuerza atractiva o 
repulsiva entre moléculas (o entre partes de una misma 
molécula) distintas a aquellas debidas al enlace covalente 
o a la interacción electrostática de iones con otros o con 
moléculas neutras. 
http://es.wikipedia.org/wiki/Fuerzas_de_Van_der_Waals
Metacromasia 
• Ocurre porque en la reacción del colorante con 
determinadas estructuras las moléculas de colorante se 
aproximan mucho entre ellas, de modo que se produce un 
cambio en su rango de absorción lumínica lo que hace que 
eras estructuras se vean de diferente color.
Alumbre 
• Se trata de un tipo de reactivo utilizado en los procesos de 
tinción. Esta constituido por una sal doble de sulfato de un 
metal trivalente y otro monovalente. Generalmente, los 
metales son aluminio y potasio o amonio (NH4). El alumbre 
modifica el colorante añadiéndole grupos auxocromos y 
confiriéndole un carácter muy básico.
Tinción Argéntica 
• La tinción argéntica es el uso de plata (en latín, Argentum) 
para modificar selectivamente el color o la apariencia de un 
objeto. Es una técnica frecuente de tinción en histología 
donde se utiliza para revelar detalles extremadamente 
finos. 
http://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_arg%C3%A9ntica
Tinción Negativa 
• Tinción negativa es una técnica de microscopía que permite 
contrastar las muestras mediante una sustancia opaca a los fotones 
(microscopía óptica) o a los electrones (microscopía electrónica). En 
el primer caso, se emplea nigrosina o tinta china; para el caso de 
bacterias que esporulan, esta técnica permite visualizar las esporas 
como entes refringentes sobre un campo de fondo oscuro.1 En caso 
de microscopía electrónica de transmisión, se emplean sustancias 
de alto número atómico que, por tanto, resultan opacas a los 
electrones transmitidos. Típicamente, estas sustancias son acetato 
de uranilo, citrato de plomo o molibdato de amonio. Al electrónico, 
esta técnica permite visualizar virus, flagelos, bacterias y otros entes 
de escaso tamaño. 
http://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_negativa

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Generalidades de Tecnicas de tincion en histologia

  • 1. UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE BAJA CALIFORNIA Técnicas de tinción en histología Barrera Briseño Nancy Karina Laboratiorio de Biolocia Celular Medicina 1er. Semestre | Dr. Horacio Facultad de Medicina y Psicología
  • 2. Introducción Tinción de Gram; Permite diferenciar entre dos grupos de bacterias: - Bacterias Gram positivas - Bacterias Gram negativas Imagen tomada de: BIOLOGÍA (2º BACHILLERATO A DISTANCIA): TUTORÍAS EN LA WEB Paloma Román Gómez 2008 http://perso.ya.com/geopal/biologia_2b/unidades/ejercicios/act5bact ema7.htm Para poner de manifiesto las diferentes estructuras que integran una sección histológica, es necesario crear artificialmente un contraste diferencial entre los diversos elementos del tejido. Por ello se desarrollaron unas técnicas conocidas como tinciones
  • 3. ¿Que es una tinción? Una tinción es un procedimiento para visualizar un tejido que puede implicar el uso de uno o varios colorantes de modo simultáneo o sucesivo. Citología cervicovaginal teñida con Papanicolau
  • 4. Colorantes Primero, debemos definir qué son estas sustancias, su conformación, clasificación y otros aspectos importantes
  • 5. Naturaleza química de los colorantes Un compuesto químico es coloreado porque sus moléculas absorben cuantos de radiación electromagnética en la parte visible del espectro.
  • 6. En las moléculas orgánicas Los dobles enlaces se alternan con sencillos provocando que los electrones del enlace se muevan de un átomo al otro cambiando las posiciones de los enlaces. Generalmente, los colorantes presentan anillos aromáticos en su estructura.
  • 7. Características de los colorantes Un colorante debe ser capaz de realizar dos cosas: 1.- Teñir o colorear 2.- Unirse a las estructuras celulares Teñir Molécula orgánica Unirse COLORANTE
  • 8. Espécimen histológico de tejido pulmonar humano teñido con hematoxilina y eosina. Capacidad de teñir Los colorantes suelen ser moléculas orgánicas que presentan anillos aromáticos y que absorben la luz visible por efecto de los electrones asociados a combinaciones de átomos llamados Cromóforos.
  • 9. Anillo aromático ++ Grupo cromóforo Cromógenos
  • 10. Tinción simple con cristal violeta de Staphylococcus aureus, nos proporciona información sobre la forma y la agrupación en racimos Capacidad de unirse Para que el colorante pueda teñi r un tej ido ha de ser capaz de uni rse a las est ructuras celulares. El elemento químico que le conf iere esta capacidad se denomina grupo Auxocromo
  • 11. COLORANTE Cromógeno Gpo. Cromóforo Gpo. Auxocromo
  • 12. Principales grupos Gpo. Auxocromo Básicos Aminas primarias NH2 Aminas secundarias NHR Aminas terciaciarias NR2 Ácidos Hidroxilo –OH Carboxilo –COOH Sulfhidrilo SH2 Gpo. Cromóforo El grupo nitro -NO2 El grupo nitroso –N=O El grupo indamina (imino) >C=N-El grupo azo –N=N-Configuración quinonica
  • 13. Clasificación de colorantes Por origen Por grupos Por incorporación
  • 14. Clasificación De los colorantes por grupo SEGÚN EL GRUPO CROMOFORO SEGÚN EL GRUPO AUXOCROMO Básicos o catiónicos Azul de metileno Nitrados Acido pícrico Ácidos o aniónicos Eosina Colorantes azoicos Orange G, Sudan negro, etc Sin carga (neutros) Isiotiocianatos Ácido + Básico Derivados del xanteno Eosina Y, Fluoresceína sódica Derivados de la acridina Acriflavina Derivados de las iminas quinónicas Orceína Derivados de diarilmetanos y triarilmetanos Amino-triarilmetanos Derivados de la antraquinona Rojo nuclear rápido Derivados de las ftalocianinas Azul alcián Flavonoides Hematoxilina
  • 15. Clasificación De los colorantes por incorporación COLORANTES VITALES COLORANTES DE EXCLUSIÓN Aquellos que son captados únicamente por células vivas Solo son incorporados por células muertas presentes en cultivo Son a los que se les permite la entrada a través de la membrana. Se basa en que la membrana de las células muertas no es capaz de funcionar como barrera de entrada para ese colorante. Ej. Rojo neutro y verde Janus Ej. Azul tripán La tinciones mas habituales son: Tetraciclinas, Alizarina, Colorantes de tipo Procion. - Permiten estudiar el crecimiento del tejido óseo Cuantificar la proporción de células vivas (no teñidas) o detectar mortalidad en cultivos celulares.
  • 16. Clasificación Se pueden clasificar, en función de su origen, en naturales y artificiales. Por ejemplo: Naturales Artificiales Hematoxilina Azul de metileno Carmín Safranina Azafrán Azul de anilina Orceína Naranja G Tinción de hematoxilina-eosina. Esclerosis segmentaria con formación de sinequias. Intersticio con infiltrado linfocitario. Fibrosis y atrofia tubular (x 400). Fibras elásticas teñidas con orceína nítrica (flechas) x 400. CELULAS EPITELIO BUCAL: 400X
  • 17. ¿Como se unen los colorantes al tejido?  ¿Cuáles son los fenómenos fisicoquímicos implicados?
  • 18. MECANISMOS DE UNIÓN Tinción-Sustrato Relaciones electrostáticas Acido-Base Enlaces coordinados, mordientes y quelantes Aumentan la reactividad del tejido estableciendo una interacción tejido colorante. Enlaces covalentes Isiotiocianatos - Sustrato Puentes de hidrógeno Colorante-sustrato en soluciones no acuosas Interacciones hidrófobas en la disolución diferencial: coloraciones de lípidos Fuerzas de Van der Waals Impregnaciones El colorante forma agregados metálicos insolubles que quedan retenidos en el tejido gracias a la malla molecular creada en el proceso de fijación.
  • 19. Metacromasia Si es azul ¿Por qué tiñe de rojo? Esto ocurre porque los iones del colorante unidos al sustrato cambian la longitud de onda de absorción de luz y, por lo tanto, el color observado del objeto teñido es distinto al del colorante libre. Cromotrópicos
  • 20. Antes de continuar debemos definir algunos conceptos
  • 21. Glosario de términos relacionados con las tinciones Término Definición Mordiente Reactivo que aumenta la reactividad del tejido estableciendo una interacción tejido colorante Alumbre Modifica el colorante añadiéndole grupos auxocromos y confiriéndole un carácter muy básico Coloración indirecta en un tiempo Aquella en la que el tratamiento del tejido con el colorante y el mordiente se realiza simultáneamente en una misma solución Coloración indirecta en dos tiempos Cuando colorante y mordiente actúan separadamente
  • 22. Glosario de términos relacionados con las tinciones Término Definición Tinción progresiva Tinciones en las que los colorantes y mordientes se aplican siguiendo una secuencia definida y bajo estricto control de los tiempos para lograr una intensidad determinada. Tinción regresiva Primero se sobre colorea y posteriormente se elimina el exceso de colorante por diferenciación Diferenciacion Consiste en eliminar el exceso de colorante mediante agentes diferenciadores (disoluciones alcoholicas de acidos o alcalis, etanol, acetona, etc.)
  • 24. Tinción de hematoxilina-eosina. Esclerosis segmentaria con formación de sinequias. Intersticio con infiltrado linfocitario. Fibrosis y atrofia tubular (x 400). Hematoxilina-eosina Tinción general, contiene un colorante básico para las estructuras acidas como (ADN Y ARN) y otro acido para el citoplasma y estructuras extracelulares. Hematoxilina: C.I. 75290) es un compuesto que se obtiene de la planta leguminosa Haematoxylum campechianum , conocida también con el nombre de palo de Campeche. Requiere ser oxidada para convertirse en una molécula coloreada. AZUL Eosina: Derivado halogenado del xanteno. Molécula autofluorescente por sus átomos halógenos y es soluble en agua y en alcoholes lo que le confiere mucha versatilidad para la tinción histológica. Presenta un cierto carácter ácido. ROSA
  • 25. Ejemplos de tinciones tricrómicas: El tricrómico de Masson El tricrómico de Van Gieson Tricrómicos Es una técnica para la coloración de fibras colágenas y elásticas. Se observan colores distintos; tejido conjuntivo de verde, tejido muscular de verde pardo, eritrocitos de rojizo, núcleos azul negro y citoplasma y fibras musculares rosa.
  • 26. Extensión de sangre periférica (Tinción May Grünwald- Giemsa): eritrocitos de tamaño y contenido de hemoglobina inferior al normal característicos de la Anemia de Cooley Giemsa Es una tinción general que se emplea mucho en hematología, permite distinguir, por su coloración, los gránulos de los diferentes leucocitos polimorfonucleares. Contiene una mezcla de colorantes catiónicos (azul de metileno) y aniónicos (eosina)
  • 27. Citología ginecológica Tinción de Papanicolaou Papanicolau Coloración histológica empleada principalmente para extensiones citológicas, sirve para la detección precoz del carcinoma de cérvix. Contiene una mezcla de colorantes que no produce sobre coloración. Normalmente tiene 4 colorantes: uno nuclear (hematoxilina), eosina Y, que tiñe de rosa el citoplasma, verde brillante que tiñe el moco y Orange G que tiñe la queratina.
  • 28. Tinciones aplicables a tejidos concretos Algunas tinciones nos sirven para teñir ciertos tejidos específicos, a continuación veremos los ejemplos mas relevantes. 
  • 29. TINCIONES APLICABLES A TEJIDOS CONCRETOS Tejido nervioso Impregnaciones argénticas Tejido conjuntivo Técnica de reticulina, de Wigert de resorcina-fucsina, etc. Musculo estriado Tinción de hematoxilina fosfotúngstica ácida PTAH Hueso Exigen descalcificación o desgaste. Coloración con tionina o tinción negativa Higado H-E, Tinción tricrómico, reticulina, PAS y PAS-distasa, azul de Pearls. Neurona
  • 30. TINCIONES APLICABLES A TEJIDOS CONCRETOS Riñón H-E, PAS, tricrómico y técnica de metenamina de plata. Piel PAS, Técnica de argentafinidad de Masson Fontana, Tricrómico de Gallego Microorganismos en diversos órganos Hongos – PAS o meteanina de plata de Grocott Bacterias: Gram, Ziehl Neelsen, Giemsa Riñon H-E Piel Tricrómico de Gallego Gram
  • 31. Tinciones En microscopia subcelulares óptica también podemos resaltar e identificar determinados orgánulos mediante tinciones mas o menos especificas y diferenciales. A continuación se citan ejemplos de métodos de tinción mas utilizados:
  • 32. TINCIONES SUBCELULARES Núcleo EN CORTES. Hematoxilina férrica, safranina-light green o verde metilo. EXTENSIONES CROMOSOMICAS. Carmín acético u Orceína acética. Nucléolo Grumos de Nissil: azul toluidina, violeta de cresilo y verde metilo-pronina Mitocondria EN CELULAS VIVAS. Verde Janus EN CORTES. Fucsina de Altmann Aparato de Golgi Impregnaciones argénticas Gránulos de secreción y cuerpos de inclusión Método de Mann, con eosina amarillenta y azul de metileno, posterior diferenciación en Orange G. Vacuolas de los fagocitos Se inyecta al animal una suspensión de partículas de carbón antes de obtener el tejido. Las células que fagocitan el carbón las acumulan en sus vacuolas de fagocitosis.
  • 33. Impregnaciones Argénticas Se le denomina así a toda coloración histológica en la que se emplean sales metálicas para generar precipitados metálicos sobre estructuras que se pretenden destacar. 
  • 34. Impresiones Argénticas Implica 2 pasos 1. IMPREGANCION PRIMARIA Los tejidos don expuestos a una solución ligeramente alcalina en la que hay una concentración no muy alta de AgNO3 que proporciona iones de plata en exceso 2. SEGUNDA FASE Los cortes son tratados con una solución (hidroquinona y sulfito) que captura parte de los iones de plata que se han unido débilmente al tejido
  • 35. Tinción negativa No todos los colorantes se unen a las estructuras tisulares. Algunas tinciones se basan en la exclusión de la coloración. El contraste negativo consiste en teñir todo menos la estructura que queremos visualizar. 
  • 36. Referencias ATLAS de HISTOLOGÍA VEGETAL y ANIMAL, Departamento de Biología Funcional y Ciencias de la Salud. Facultad de Biología. Universidad de Vigo. España Recuperado el 25 de Agosto del 2014 de: http://webs.uvigo.es/mmegias/inicio.html TÉCNICAS DE TINCIÓN HISTOLÓGICA, Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina. Departamento de Anatomía Patológica. Recuperado el 25 de Agosto del 2014 de: http://www.uam.es/departamentos/medicina/patologia/Tecnicas.htm Técnica de Tinción de Gram, Paloma Román Gómez 2008. Consejería de educación comunidad de Madrid. Recuperado el 07 de Septiembre del 2014 de: http://perso.ya.com/geopal/biologia_2b/ "Spunic". (s.f.). COLORACIÓN. 27 de Septiembre del 2014, de Rincón del vago Sitio web: http://html.rincondelvago.com/coloracion.html Ilarraza Aleida. (4 de junio de 2011). HEMATOXILINA-EOSINA. 27 de Septiembre del 2014, de Blogspot Sitio web: http://hematoxilina-eosina-uc.blogspot.mx Gracias 
  • 37. Preguntas información extra ¿Que es un cuanto? ¿Qué es la radiación electromagnética? Molécula orgánica Espectro visible Enlaces conjugados Resonancia Cromóforos Mordiente Fuerzas de Van der Waals Metacromasia Alumbre Tinción Argéntica
  • 38. ¿Que es un cuanto? • Un quantum o cuanto es la menor cantidad de energía que puede transmitirse en cualquier longitud de onda. • Considerado el creador de la teoría cuántica, el físico alemán Max Planck enunció que la radiación electromagnética se emite en unidades discretas de energía denominadas quantum o quantos. http://www.astromia.com/glosario/quantum.htm
  • 39. ¿Qué es la radiación electromagnética? • La radiación electromagnética es un tipo de campo electromagnético variable, es decir, una combinación de campos eléctricos y magnéticos oscilantes, que se propagan a través del espacio transportando energía de un lugar a otro http://blog.educastur.es/proyectosiesvegadeo/files/2010/01/la-radiacion.pdf
  • 40. Molécula orgánica • Compuesto orgánico o molécula orgánica es una sustancia química que contiene carbono, formando enlaces carbono-carbono y carbono-hidrógeno http://es.wikipedia.org/wiki/Compuesto_org%C3%A1nico
  • 41. Espectro visible • Se llama espectro visible a la región del espectro electromagnético que el ojo humano es capaz de percibir. A la radiación electromagnética en este rango de longitudes de onda se le llama luz visible o simplemente luz. No hay límites exactos en el espectro visible: un típico ojo humano responderá a longitudes de onda de 400 a 700 nm, aunque algunas personas pueden ser capaces de percibir longitudes de onda desde 380 hasta 780 nm. http://es.wikipedia.org/wiki/Espectro_visible
  • 42. Enlaces conjugados • Un sistema conjugado se da cuando en un compuesto químico con enlaces simples y dobles alternados, los electrones que forman los enlaces dobles se deslocalizan, es decir, se sitúan de manera uniforme alrededor del compuesto. Estos electrones deslocalizados no forman en realidad enlaces dobles entre dos átomos en particular, sino que pertenecen a todo el grupo de átomos, y le dan más estabilidad y fuerza al enlace simple, sin llegar a ser un doble enlace. http://es.wikipedia.org/wiki/Compuesto_org%C3%A1nico
  • 43. Resonancia • La Resonancia (denominado también Mesomería) en química es una herramienta empleada (predominantemente en química orgánica) para representar ciertos tipos de estructuras moleculares. La resonancia consiste en la combinación lineal de estructuras de una molécula (estructuras resonantes) que no coinciden con la estructura real, pero que mediante su combinación, nos acerca más a su estructura real. http://www.ecured.cu/index.php/Resonancia_qu%C3%ADmica
  • 44. Cromóforos Radical químico incorporado a una molécula orgánica y responsable del color. Los Cromóforos mas abundantes en colorantes biológicos son: El grupo nitro -NO2 El grupo nitroso –N=O El grupo indamina (imino) >C=N-El • Un cromóforo es la parte o conjunto de átomos de una molécula responsable de su color. También se puede definir como una sustancia que tiene muchos electrones capaces de absorber energía o luz visible, y excitarse para así emitir diversos colores, dependiendo de las longitudes de onda de la energía emitida por el cambio de nivel energético de los electrones, de estado excitado a estado fundamental o basal. grupo azo –N=N-Configuración quinonica http://es.wikipedia.org/wiki/Crom%C3%B3foro
  • 45. Mordiente • Aquella sustancia que sirve para unir un colorante a un sustrato. // Reactivo que aumenta la reactividad del tejido estableciendo una interacción tejido-colorante// Reactivos mordientes. Son los reactivos o sustancias que preparan al tejido para la coloración http://www.ecured.cu/index.php/Reactivos_mordientes
  • 46. Fuerzas de Van der Waals • En fisicoquímica, las fuerzas de Van der Waals, o interacciones de Van der Waals, es la fuerza atractiva o repulsiva entre moléculas (o entre partes de una misma molécula) distintas a aquellas debidas al enlace covalente o a la interacción electrostática de iones con otros o con moléculas neutras. http://es.wikipedia.org/wiki/Fuerzas_de_Van_der_Waals
  • 47. Metacromasia • Ocurre porque en la reacción del colorante con determinadas estructuras las moléculas de colorante se aproximan mucho entre ellas, de modo que se produce un cambio en su rango de absorción lumínica lo que hace que eras estructuras se vean de diferente color.
  • 48. Alumbre • Se trata de un tipo de reactivo utilizado en los procesos de tinción. Esta constituido por una sal doble de sulfato de un metal trivalente y otro monovalente. Generalmente, los metales son aluminio y potasio o amonio (NH4). El alumbre modifica el colorante añadiéndole grupos auxocromos y confiriéndole un carácter muy básico.
  • 49. Tinción Argéntica • La tinción argéntica es el uso de plata (en latín, Argentum) para modificar selectivamente el color o la apariencia de un objeto. Es una técnica frecuente de tinción en histología donde se utiliza para revelar detalles extremadamente finos. http://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_arg%C3%A9ntica
  • 50. Tinción Negativa • Tinción negativa es una técnica de microscopía que permite contrastar las muestras mediante una sustancia opaca a los fotones (microscopía óptica) o a los electrones (microscopía electrónica). En el primer caso, se emplea nigrosina o tinta china; para el caso de bacterias que esporulan, esta técnica permite visualizar las esporas como entes refringentes sobre un campo de fondo oscuro.1 En caso de microscopía electrónica de transmisión, se emplean sustancias de alto número atómico que, por tanto, resultan opacas a los electrones transmitidos. Típicamente, estas sustancias son acetato de uranilo, citrato de plomo o molibdato de amonio. Al electrónico, esta técnica permite visualizar virus, flagelos, bacterias y otros entes de escaso tamaño. http://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_negativa