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1. MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS Y PRODUCTOS
PARA ALIMENTACIÓN ANIMAL. REQUISITOS
GENERALES Y DIRECTRICES PARA ANÁLISIS
MICROBIOLÓGICOS
NTC 4092

2. 10.3 CÁLCULO Y EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS
OBTENIDOS CON EL MEDIO SÓLIDO
 Después del periodo de incubación establecido en la norma específica, cuente
las colonias (colonias totales, colonias típicas o colonias presuntivas) para
cada caja que contenga menos de 300 colonias (o cualquier otra cantidad
establecida en la norma específica).
 Si menos de un cuarto de la caja está saturada por dispersión, cuente las
colonias en la parte no afectada de la caja y calcule a partir de ésta la
cantidad para la caja completa.
 Considere las colonias dispersas en forma de cadenas como una colonia.

3. Expresión de los resultados
 Método de cálculo: caso general (recuento de colonias totales o colonias típicas)
Para que un resultado sea válido, por lo general se considera necesario contar las colonias por
lo menos en una caja que contenga 10 colonias como mínimo
Calcule la cantidad N de microorganismos presentes en la muestra de ensayo como un
promedio ponderado a partir de dos diluciones sucesivas utilizando la Ecuación (1):
en donde :
∑C es la suma de colonias contadas en las dos cajas conservadas provenientes de dos diluciones sucesivas, por lo
menos una de las cuales contiene un mínimo de 10 colonias;
V es el volumen de inóculo puesto en cada caja, en mililitros;
d es la dilución correspondiente a la primera dilución retenida o seleccionada [d=1 cuando se retiene el producto
líquido sin diluir (muestra de ensayo)].

4. Método de cálculo: caso general (recuento de
colonias totales o colonias típicas)
 Aproxime el resultado calculado hasta dos cifras decimales. Al hacer esto, si la
tercera cifra es inferior a 5, no modifique la cifra precedente; si la tercera cifra
es superior o igual a 5, incremente la cifra precedente en una unidad. Exprese el
resultado preferiblemente como un número entre 1,0 y 9,9 multiplicado por la
potencia correspondiente de 10, o un número entero con dos cifras decimales
Reporte el resultado como el número N de microorganismos por mililitro
(productos líquidos) o por gramo (otros productos).

5. Ejemplo: Método de cálculo: caso general
(recuento de colonias totales o colonias típicas)
 El recuento ha producido los siguientes resultados:
- en la primera dilución retenida (10-2): 168 colonias;
- - en la segunda dilución retenida (10-3): 14 colonias.
Aproximando los resultados como se especificó arriba, el número de microorganismos es
17 000 o 1,7 x 104 por mililitro o por gramo de producto.

6. Método de cálculo: después de la
identificación
 Cuando el método utilizado requiere de identificación, se identifica un número
determinado A (por lo general 5) de colonias presuntivas a partir de cada una de las
cajas retenidas para el recuento de colonias. Después de la identificación, calcule
para cada caja el número a de colonias que cumplen con los criterios de
identificación, utilizando la Ecuación (2):
en donde
b = es el número de colonias que cumplen con los criterios de identificación entre las colonias identificadas A;
C = es el número total de colonias presuntivas contadas en la caja.
Aproxime el resultado calculado hasta el número entero más próximo
Calcule el número N de microorganismos identificados presentes en la muestra de ensayo reemplazando
∑C por ∑a

7. EJEMPLO
 El recuento ha producido los siguientes resultados:
 - en la primera dilución retenida o seleccionada (10-3): 66 colonias;
 - en la segunda dilución retenida o seleccionada (10-4): cuatro colonias.
Se realizó el ensayo de las colonias seleccionadas así:
- de la 66 colonias, ocho se sometieron a ensayo, 6 de las cuales cumplieron con
los criterios, entonces a = 50;
- de las 4 colonias, las 4 cumplieron con los criterios, entonces a = 4.
Aproximando el resultado tal como se especifica en el numeral 10.3.2.2, la cantidad de
microorganismos es 49 000 o 4,9 x 104 por mililitro o por gramo de producto.

8. Método de cálculo: recuentos bajos
 Caso en el cual la caja (muestra de ensayo, suspensión inicial o primera dilución)
contiene menos de 10 colonias:
Si la placa contiene menos de 10 colonias, pero por lo menos 4, calcule el resultado
como se indica para el caso general y repórtelo como el número estimado X de
microorganismos por mililitro (productos líquidos) o por gramo (otros productos).

9. Caso en el cual la caja (muestra de ensayo,
suspensión inicial o primera dilución) no
contiene colonias
 Si la caja que contiene la muestra de ensayo (productos líquidos), la
suspensión inicial (otros productos) o la primera dilución inoculada o retenida
no contiene colonias, reporte del resultado de la siguiente manera.
"Menos de 1/d microorganismos por mililitro" (productos líquidos) o "menos de
1/d microorganismos por gramo" (otros productos).
Donde d es el factor de dilución de la suspensión inicial o de la primera dilución
inoculada o retenida (d = 100 = 1 cuando se retiene la muestra de ensayo del
producto líquido inoculada directamente).

10. 10.4 Recuento de mohos y levaduras
 Por lo general, se cuentan las placas que tengan de 10 a 150 colonias. Si la
micoflora consiste principalmente en mohos, seleccione las cajas que tengan
recuentos en el rango de menor población; si la micoflora consiste principalmente
en levaduras, las cajas que tengan recuentos hasta el límite superior se pueden
seleccionar para el mismo.
 Si la identidad de las colonias es dudosa, examine portaobjetos húmedos o
tinciones de células de por lo menos cinco colonias por cada muestra para confirmar
que no haya presencia de bacterias.

11. GRACIAS