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Propiedades generales de los virus.pptx

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Propiedades generales de los virus.pptx

  1. 1. Propiedades Generales de los Virus ● ARANCIBIA RAMIREZ PEDRO ● CHANEZ HUARACHI KEVIN GEVER ● COCA CRUZ LIZETH TATIANA ● CRESPO ROJAS MELANY ● FLORES ESCOBAR RODRIGO ● JALLAZA VEIZAN MIJAEL YAMIL ● LIANG HUARACHI PABLO ZHIAN ● MARTINEZ ARCE NOEMY FABIOLA ● PITA CALLE KEYLA JAEL ● QUISPE BERRIOS MAJHERLLY NIKOL ● RODRIGUEZ RAMOS JHONATHAN MOISES ● RUIZ RIOS NAYELI MARIA ● SOLIZ MAMANI PAMELA JHOSEYNA ● VILLAN FLORES LUZ ESMERALDA INTEGRANTES:
  2. 2. TÉRMINOS Y DEFINICIONES EN VIROLOGÍA -Cápside: -Virus defectuosos: -Capsómeros: -Envoltura (cubierta): -Nucleocápside: -Unidades estructurales: -Subunidad: -Virión: En la figura se muestran esquemas de virus con simetría icosaédrica y helicoidal. Los componentes virales indicados se describen a continuación:
  3. 3. cubierta proteínica que rodea al ácido nucleico del genoma. Los capsómeros se conforman por grupos de polipéptidos, aunque las unidades morfológicas no corresponden necesariamente con unidades estructurales definidas desde el punto de vista químico. una partícula viral que es deficiente desde el punto de vista funcional en algunos aspectos de la replicación
  4. 4. Una membrana con lípidos que rodea algunas partículas virales. Se adquiere durante la maduración viral por un proceso de gemación a través de la membrana celular . Las glucoproteínas codifi cadas por el virus se exponen en la superficie de la envoltura. Estas proyecciones se denominan peplómeros
  5. 5. complejo de proteínas y ácido nucleico que representa la forma empacada del genoma viral. El término se utiliza a menudo en casos en los cuales la nucleocápside es una subestructura de una partícula viral más compleja. unidades proteínicas básicas de los bloques de construcción de la cubierta. Por lo común son un conjunto de más de una subunidad proteínica no idéntica. La unidad estructural a menudo se conoce como protómero. una sola cadena polipeptídica viral plegada. partícula viral completa. En algunos casos (p. ej., virus del papiloma, picornavirus), el virión es idéntico a la nucleocápside. En viriones más complejos (virus del herpes, ortomixovirus), incluye la nucleocápside además de la cubierta circundante. Esta estructura, el virión, sirve para transferir ácido nucleico viral de una célula a otra.
  6. 6. ORÍGENES EVOLUTIVOS DE LOS VIRUS Se desconoce el origen de los virus. - Existen notables diferencias entre los DNA virus y RNA virus y aquellos virus que utilizan tanto DNA como RNA en su material genético durante diferentes etapas de su ciclo vital. - Es posible que tipos diferentes de agentes sean de diferentes orígenes. Las dos teorías sobre el origen de los virus pueden resumirse de la siguiente manera:
  7. 7. que adquieren la capacidad de replicarse de manera autónoma y evolucionan de forma independiente. -Son similares a genes que han adquirido la capacidad de existir independientes de la célula. Algunas secuencias virales están relacionadas con porciones de genes celulares que codifi can dominios proteínicos funcionales. Parecería que al menos algunos virus han evolucionado por esta vía.
  8. 8. -No existen pruebas de que los virus evolucionaran a partir de bacterias, aunque otros microorganismos estrictamente intracelulares (como rickettsias y clamidias) tal vez lo hicieron. - Sin embargo, los poxvirus son tan grandes y complejos que pueden representar productos de la evolución de algunos ancestros celulares.
  9. 9. Las siguientes propiedades se han utilizado como base para la clasificación de los virus. 1. Morfología del virión. 2. Propiedades del genoma viral, ADN y ARN. 3. Organización del genoma y replicación. 4. Propiedades de las proteínas virales. 5. Propiedades antigénicas 6. Propiedades fisicoquímicas del virión, 7. Propiedades biológicas
  10. 10. • Se ha establecido un sistema en el que los virus se separan en grupos principales (denominados familias) • Los nombres de cada familia de virus tienen el sufijo viridae. • En cada familia hay subdivisiones, conocidas como género genómicas, fisicoquímicas o serológicas. • Los nombres del género se acompañan del sufijo -virus. • Pueden utilizarse órdenes de virus para agrupar las familias de virus que comparten características comunes. Mononegavirales abarca las familias Bornaviridae, Filoviridae, Paramyxoviridae y Rhabdoviridae. • En el año de 2013, el International Committee on Taxonomy of Viruses (ICTV) organizó más de 2 500 especies de virus de animales y de plantas, en 103 familias y 455 géneros.
  11. 11. A. Parvovirus B. Anellovirus C. Poliomavirus D. Papilomavirus E. Adenovirus F. Hepadnavirus G. Herpesvirus H. Poxvirus
  12. 12. A. Parvovirus • Tiene un tamaño de partícula de entre 18 y 26 nm. • Las partículas tienen simetría cúbica con 32 capsómeros, pero no tienen envoltura. • El genoma es lineal, DNA monocatenario, con un tamaño de 5 kb. • La replicación ocurre sólo en las células con división activa. • la cápside se ensambla en el núcleo de la célula infectada. • Los parvovirus humanos B19 se replican en células eritroides inmaduras y causan varias consecuencias adversas que incluyen crisis aplásica, eritema infeccioso y muerte fetal
  13. 13. B. Anellovirus • Los anellovirus (del latín anello, anillo) • son viriones icosahédricos pequeños (diámetro cercano a 30 nm) sin cubierta. • El genoma viral incluye DNA de 2 a 4 kb de tamaño, dispuesto en sentido negativo, circular, DNA monocatenario. • Los anellovirus incluyen los virus torqueteno distribuido a nivel global en la población humana y otras especies animales. • Hasta la fecha no se ha corroborado un vínculo específico con enfermedades.
  14. 14. C. Poliomavirus • (virus de polioma) son virus pequeños (45 nm), sin cubierta, termoestables, resistentes a solubilización, que presentan simetría cúbica con 72 capsómeros. • Su nombre proviene de los términos griegos poly (muchos) y –oma (tumor) y denota la capacidad de algunos de estos virus para producir tumores u hospedadores infectados. • El genoma es de DNA bicatenario circular de 5 kb de tamaño. • Estas partículas tienen un ciclo de crecimiento lento • Los poliomavirus más conocidos son el JC, el virus BK, y el virus de células de Merkel, SV40, virus de primates, también infecta a seres humanos.
  15. 15. D. Papilomavirus • (virus del papiloma) son similares a los poliomavirus en algunos aspectos, pero su genoma (8 kb) y tamaño (55 a 60 nm) son más grandes. • El nombre proviene del latín papilla (pezón) y del griego –oma (tumor) • Algunos tipos de virus del papiloma humano son agentes causales de cáncer genital en la población. • Los virus de papiloma muestran gran especificidad de hospedador y tejidos, y no proliferan in vitro en células cultivadas. • Muchas especies animales son portadoras del virus de papiloma
  16. 16. E. Adenovirus • adenovirus (del latín adenos, glándula) son virus sin cubierta, de tamaño mediano (70 a 90 nm) que presentan simetría cúbica y protuberancias filiformes que sobresalen de los capsómeros • Su genoma es DNA bicatenario lineal de 26 a 48 kb de tamaño. • En el núcleo se efectúa la replicación. • Los perfiles complejos de empalme generan mRNA. • Cuando menos 57 tipos infectan a los seres humanos, en particular en las membranas mucosas, y algunos de ellos persisten en el tejido linfoide. • Los adenovirus originan enfermedades agudas de vías respiratorias, conjuntivitis y gastroenteritis.
  17. 17. F. Hepadnavirus • Los hepadnavirus (del latín hepa, hígado) son virus pequeños (40 a 48 nm) con cubierta que contiene moléculas de DNA parcialmente bicatenario y circular, que tienen en promedio tamaño de 3.2 kbp. • La replicación comprende la reparación de espacios monocatenarios en DNA, transcripción de RNA y transcripción inversa del RNA para elaborar DNA genómico. • El virus consiste en un centro de la nucleocápside icosahédrico de 27 nm con una cubierta fuertemente adherida que contiene lípido y un antígeno de superficie viral. • Los hepadnavirus como el virus de hepatitis B originan hepatitis aguda y crónica; las infecciones persistentes conllevan un gran riesgo de que al final se desarrolle cáncer de hígado.
  18. 18. G. Herpesvirus • Los herpesvirus (virus del herpes) son una familia de virus grandes 150 a 200 nm de diámetro. • El término proviene del latín herpes (reptar), que describe propagada de las lesiones cutáneas por tales partículas. • La nucleocápside tiene 100 nm de diámetro con simetría cúbica y 162 capsómeros, rodeados de una cubierta que tiene lípido. • El genoma es de DNA bicatenario lineal, de 120 a 240 kb de tamaño. • Los virus herpéticos de seres humanos incluyen los tipos 1 y 2 del virus de herpes simple (lesiones de boca y genitales); el virus de varicela-zóster el virus citomegálico, el de Epstein-Barr los herpesvirus humanos 6 y 7 y el herpesvirus humano 8
  19. 19. H. Poxvirus • Los poxvirus son grandes partículas rectangulares u ovoides de 220 a 450 nm de largo × 140-260 nm de ancho × 140-260 nm de espesor. • La estructura de la partícula es compleja, con una cubierta que contiene lípido. • Su nombre proviene del término anglosajón pokkes que denota bolsa, y se refiere a las lesiones vesiculares características de la piel. • El genoma es lineal, con cierre covalente, DNA bicatenario y un tamaño de 130 a 375 kb. • Las partículas de poxvirus contienen casi 100 proteínas, las cuales incluyen muchas con actividad enzimática, como la RNA polimerasa dependiente de DNA. • Todos los poxvirus tienden a causar lesiones cutáneas.
  20. 20. . • LOS PICORNAVIRUS SON VIRUS PEQUEÑOS QUE MIDEN DE (28 A 30 NM), RESISENTES AL ÉTER QUE MUESTRAN SIMETRÍA CÚBICA. • EL GENOMA DE RNA TIENE UNA SOLA CADENA DE SENTIDO POSITIVO (PUEDE ACTUAR COMO EL MRNA) Y UN TAMAÑO DE 7.2 A 8.4 KB • SON SIMILARES EN TAMAÑO A LOS PICORNAVIRUS (28 A 30 NM), PERO LAS PARTÍCULAS MUESTRAN UNA FORMA CARACTERÍSTICA DE ESTRELLA EN SU SUPERFICIE. • EL GENOMA CONSISTE EN MRNA LINEAL, DE SENTIDO POSITIVO Y MONOCATENARIO CON UN TAMAÑO DE 6.8 A 7.0 KB
  21. 21. • SON SIMILARES A LOS PICORNAVIRUS, PERO LIGERAMENTE MÁS GRANDES (27 A 40 NM). • LAS PARTÍCULAS PARECEN TENER DEPRESIONES CÓNCAVAS EN SU SUPERFICIE. • EL GENOMA CONSISTE EN RNA MONOCATENARIO Y DE SENTIDO POSITIVO CON UN TAMAÑO DE 7.3 A 8.3 KB. • ÉSTOS SON SIMILARES A LOS CALICIVIRUS. LAS PARTÍCULAS SON PEQUEÑAS (32 A 34 NM) Y RESISTENTES AL ÉTER. • EL GENOMA CONSISTE EN RNA MONOCATENARIO, DE SENTIDO POSITIVO CON UN TAMAÑO DE 7.2 KB.
  22. 22. • SON VIRUS DE TAMAÑO MEDIO (60 A 80 NM), RESISTENTES AL ÉTER Y SIN ENVOLTURA, CON SIMETRÍA ICOSAÉDRICA. • EL GENOMA CONSISTE EN RNA LINEAL, BICATENARIO, SEGMENTADO (10 A 12 SEGMENTOS), CON UN TAMAÑO TOTAL DE 18 A 30 KB
  23. 23. • LOS ARBOVIRUS Y LOS VIRUS TRANSPORTADOS POR ROEDORES SON GRUPOS ECOLÓGICOS (NO CONSTITUYEN UNA FAMILIA VIRAL) • LOS ARBOVIRUS (QUE INCLUYE MÁS DE 350) TIENEN CICLOS COMPLEJOS QUE COMPRENDEN ARTRÓPODOS COMO VECTORES QUE TRANSMITEN EL VIRUS A HOSPEDADORES VERTEBRADOS POR MEDIO DE UNA PICADURA.
  24. 24. . • MUCHOS ARBOVIRUS QUE SON PATÓGENOS IMPORTANTES EN SERES HUMANOS SE DENOMINAN ALFAVIRUS (P. EJ: EL VIRUS DE LA RUBÉOLA) Y PERTENECEN A ESTE GRUPO. • TIENEN UNA ENVOLTURA QUE CONTIENE LÍPIDOS, SON SUSCEPTIBLES AL ÉTER Y SU GENOMA ESTÁ COMPUESTO POR RNA MONOCATENARIO DE SENTIDO POSITIVO CON UN TAMAÑO DE 9.7 A 11.8 KB. • SON VIRUS CON ENVOLTURA, CON UN DIÁMETRO DE 40 A 60 NM . • CONTIENEN RNA DE SENTIDO POSITIVO,MONOCATENARIO. • EL TAMAÑO DEL GENOMA VARÍA DE 9.5 A 12 KB. • ESTE TIPO DE VIRUS INCLUYE EL VIRUS DE LA FIEBRE AMARILLA Y EL DENGUE.
  25. 25. • SON VIRUS PLEOMORFOS, CON ENVOLTURA, QUE VARÍAN EN TAMAÑO DE 60 A 300 NM (PROMEDIO, 110 A 130 NM). • EL GENOMA CONSISTE EN RNA SEGMENTADO, CIRCULAR Y MONOCATENARIO CON SENTIDO NEGATIVO Y DE DOBLE SENTIDO CON UN TAMAÑO TOTAL DE 10 A 14 KB • LOS CORONAVIRUS SON PARTÍCULAS CON ENVOLTURA, DE 120 A 160 NM DE DIÁMETRO QUE CONTIENEN GENOMA NO SEGMENTADO DE SENTIDO POSITIVO CON RNA MONOCATENARIO Y UN TAMAÑO DE 27 A 32 KB. • EN LA MAYOR PARTE DE LOS SERES HUMANOS, LOS CORONAVIRUS PRODUCEN ENFERMEDAD RESPIRATORIA AGUDA LEVE ,PERO LOS NUEVOS CORONAVIRUS CAUSAN SÍNDROME RESPIRATORIO AGUDO GRAVE (SARS) Y SÍNDROME RESPIRATORIO DE ORIENTE MEDIO (MERS).
  26. 26. L) RETROVIRUS • Partículas esféricas con envoltura (d =80- 110nm) • Genoma con dos copias de RNA en sentido positivo y lineal • Nucleocapside helicoidal con capside icosaedrica • Enzima transcreptasa inversa • Se replica a través de un “provirus” • Virus de la leucemia y sarcoma, los pirus espumosos de primates y los lentivirus • Causan el síndrome de inmunodeficiencia adquirida
  27. 27. M) ORTOMIXOVIRUS • Con envoltura, tamaño mediano (80 – 120 nm) • Simetría helicoidal • Superficie redondeada o filamentosa • Proyecciones superficiales contienen actividad hemaglutinina o neurominidasa • RNA líneas, segmentado, sentido negativo y monocatenario • Virus de la gripe (influenza) • Fácil arreglo genetico
  28. 28. N) BUNYAVIRUS • Partículas esféricas o pleomorfas • Con envoltura de 80 a 120 nm • RNA segmentado, monocatenario, sentido negativo • 3 Nucleocápsides circulares, con simetría helicoidal • Diámetro 2,5 nm y longitud 200 a 3000 nm • Transmisión por medio de artrópodos
  29. 29. O) BORNAVIRUS • Esféricos (70 – 130 nm) con envoltura • RNA lineal, monocatenario, no segmentado y sentido negativo • La transcripción del genoma viral ocurre en el núcleo • Enfermedad de Borna
  30. 30. P) RABDOVIRUS • Con envoltura, forma de bala, planos en un extremo y redondeados en el otro • Envoltura con espiculas de 10 nm • RNA lineal, monocatenario, segmentado y sentido negativo • Se forman por germinación a partir de la membrana • Virus de la rabia
  31. 31. Q) PARAMYXOVIRUS • Pleomorfas • Nucleocapside interna mide 13 a 18 nm • RNA lineal, monocatenario, no segmentado y sentido negativo • Nucleocapside y hemaglutinina • Virus de parotiditis, sarampión, parainfluenza y sincicial respiratorio • Son estables desde el punto de vista genetico
  32. 32. R) FILOVIRUS • Pleomorfos, con envoltura • Aspecto largo y filiforme • 80nm de ancho y 1000 nm de longitud • Cubierta contiene peplómeros • RNA lineal, sentido negativo, monocatenario • Virus del Ébola y Marburg
  33. 33. S) VIRUS DE RECIENTE INCORPORACION • Nuevos virus se descubren y pertenecen a familias existentes, pero en contadas ocasiones no son clasificables. • Algunos ocasionan enfermedad en seres humanos aunque muchos afectan a otras especies
  34. 34. T) VIROIDES • Originan enfermedades de plantas • Moléculas de acido nucleico sin envoltura proteínica • (Virones vegetales) RNA circulares con cierre covalente y monocatenarios • 360 nucleótidos, estructura cilíndrica • Virus hepatitis D
  35. 35. U) PRIONES • Proteínas sin acido nucleico detectable • Resistentes a la inactivación por calor, formaldehido y luz ultravioleta • Muestra plegamiento erróneo y cambia la conformación de la proteína nativa del prion codificada por un solo gen celular • “Encefalopatías espongiforme”: Encefalopatías espongiforme ovina, la enfermedad de las vacas locas, kuru y enfermedad de Creutzfeldt - Jakob
  36. 36. PRINCIPIOS DE LA ESTRUCTURA VIRAL LA INFORMACION ESTRUCTURAL DE LOS VIRUS SE UTILIZA PARA CLASIFICARLOS Y ESTABLECER RELACIONES ENTRE SU ESTRUCTURA Y LA FUNCIÓN DE SUS PROTEINAS VIRALES Las características estructúrales de cada familia de virus depende de las funciones del virión: • Morfogénesis • Liberación a partir de células infectadas • Transmisión a nuevos hospedadores • Unión, penetración y perdida de la cubierta de células recién infectadas
  37. 37. Tipos de simetría en las partículas virales La microscopia electrónica se ha usado para determinar las características estructurales de los virus mediante el uso de: • Microscopia por crioelectrones • Técnicas de difracción con rayos X En las técnicas microscópicas se hace uso de tinciones con metales pesados • Fosfotungstenato de potasio La estructura viral se agrupa en 3 grupos ordenados en base a la disposición de sus subunidades morfológicas: • Simetría cubica • Simetría helicoidal • Estructuras complejas
  38. 38. En los virus no se habla de formas sino de simetrías. La simetría es la disposición de la nucleocápside en el espacio y de acuerdo con ello se observan distintos tipos: SIMETRIA CÚBICA: Cuando la simetría es icosaédrica tiene el aspecto de un poliedro y presenta veinte caras triangulares que tienen forma de triangulo equilátero, 12 vértices y con 5, 3 y 2 ejes de simetría de rotación Estos virus pueden ser desnudos como el virus papiloma humano (HPV) o envueltos como el virus herpes Simetría icosaédrica desnuda Simetría icosaédrica envuelta
  39. 39. La nucleocápside de simetría helicoidal es cuando los capsómeros se encuentran dispuestos en una hélice, parecida a una escalera caracol. Puede ser rígida extendida como un tubo cilíndrico sin envoltura (virus del mosaico del tabaco) o flexible, enrollada sobre sí misma y con envoltura (virus de la gripe). SIMETRIA HELICOIDAL: Simetría helicoidal desnuda Simetría helicoidal envuelta 1. espículas 2. Nucleocápside 3. envoltura
  40. 40. ESTRUCTURAS COMPLEJAS: Los virus de simetría compleja son aquellos que no contienen cápsides claramente identificables, no son ni icosaédricos ni helicoidales. Los poxvirus (virus de la viruela y virus del molusco contagioso) tienen forma ovalada o de ladrillo y gran tamaño 300 nm. La nucleocápside tiene forma toroidal y a cada lado se sitúan los cuerpos laterales. En la envoltura tienen estructuras con aspecto de mora o de granos de avena y, en otros, la superficie está recorrida por unas estructuras tubulares en forma de cordones 1. ácido nucleico 2. cuerpos laterales Poxvirus con forma de ladrillo
  41. 41. MEDICIÓN DEL TAMAÑO DE LOS VIRUS Son de un tamaño pequeño de 20 a 30 nm y tienen la capacidad de pasar incluso los filtros que retienen a las bacterias Los virus pueden observarse mediante: • Observación directa con el microscopio electrónico de células infectadas en cortes ultradelgados • Sedimentación en la ultracentrifugadora • Mediciones comparativas Mediciones comparativas: 1. Estafilococos con un diámetro de 1.000 nm 2. Virus bacterianos con un diámetro de 10 a 100 nm 3. Moleculas proteicas como la albumina sérica 5nm, globulinas 7nm, hemocianinas 23nm, ribosomas eucarióticos 25 a 30nm, mitocondrias 1-10nm, eritrocitos 6-8 um. La masa de un poxvirus es 1.000 veces mas grande que una partícula de poliovirus y la masa de una bacteria pequeña es 50.000 veces mas grande
  42. 42. Composición química de los virus
  43. 43. Composición química de los virus ● Los virus están compuestos fundamentalmente por ácido desoxirribonucleico (DNA) o ácido ribonucleico (RNA) y proteínas. Algunos también contienen lípidos y glúcidos.
  44. 44. ● Tienen su propio código genético ● Son de estructura simétrica ● Algunos virus pueden cristalizarse ● Carecen de metabolismo propio Composición química de los virus
  45. 45. ● CULTIVOS DE VIRUS ● Detección de las células infectadas con virus ● Formación de cuerpos de inclusión ● CUANTIFICACIÓN DE LOS VIRUS ● Métodos físicos ● Métodos Biológicos CULTIVO Y ANÁLISIS VIRAL
  46. 46. • Muchos virus pueden crecer en cultivos celulares o en huevos fértiles bajo condiciones estrictamente controladas. • Los diagnóstico de laboratorio intentan recuperar virus de muestras clínicas para establecer las causas de la enfermedad. • El desarrollo de células in vitro es fundamental para el cultivo e identificación de virus • Existen tres tipos básicos de cultivos celulares: cultivos primarios, cultivos secundarios y líneas celulares continuas. • El tipo de cultivo celular utilizado utilizado para cultivo viral depende de la sensibilidad de las células a un virus en particular. CULTIVOS DE VIRUS
  47. 47. Detección de células infectadas con virus 1. Cambios morfológicos en las células 2. Aspecto de las proteínas codificadas por el virus 3. La detección de ácidos nucleicos virales específicos 4. Absorción n se eritrocitos por las células infectadas (hemadsorción) 5. El crecimiento de virus en embriones de pollo puede ocasionar la muerte del embrión
  48. 48. • En el curso de multiplicación viral en las células pueden producirse estructuras virales específicas conocidas como cuerpos de inclusión. • A menudo se vuelven mas grandes que las partículas de virus individuales y por los común tienen afinidad por colorantes ácidos. • Pueden ubicarse en el núcleo (herpesvirus), en el citoplasma (poxvirus) o en ambos (virus del sarampión). • En muchas infecciones virales los cuerpos de inclusión son el sitio de desarrollo de viriones (fábricas de virus). Formación de cuerpos de inclusión
  49. 49. CUANTIFICACION DE LOS VIRUS
  50. 50. MÉTODO FÍSICO Diversas pruebas serológicas pueden estandarizarse para cuantificar la cantidad de virus en la muestra La variación en la secuencia viral puede reducir la detección de virus y la cuantificación Pueden cuantificar el numero de copias de genoma viral en una muestra Enzimoinmuno analisis de readsorcion Los análisis se basan en la cuantificación de ácidos nucleicos radioinmunoan alisis Se detectan genomas infecciosos y no infecciosos
  51. 51. Análisis de hemaglutinación Determinados virus contienen una proteína (hemaglutininas) Que tiene la capacidad de producir la aglutinación de eritrocitos Son un método fácil y rápido de cuantificación de estos tipos de virus Las partículas infecciosas y no infecciosas son positivas en esta reaccion Es posible medir la cantidad de virus presentes
  52. 52. METODOS BIOLÓGICOS Dependen de las medición de la muertes animal, infección animal, o los efectos citopáticos de tejidos en diluciones seriales del virus analizado Un método muy utilizado es el análisis de placa Los títulos se expresan como 50%de la dosis infecciosa (ID50) es el reciproco de la dilución de virus que produce un efecto del 50% de culas o animales inoculados Un método rápido de basa en el recuento de células infectadas (inmunofluorecencia)
  53. 53. PURIFICACIÓN E IDENTIFICACIÓN DE VIRUS ● Univ.: pita calle Keyla jael
  54. 54. Purificación de partículas virales - Debe contarse con virus puros - Para su purificación se utiliza medios de cultivo, líquidos corporales o células infectadas. - Se necesita mas de un paso para conseguir la purificación adecuada. El paso final casi siempre incluye centrifugación por gradiente de densidad.
  55. 55. Purificación de partículas virales - Algunos métodos adicionales para la purificación son la cromatografía de columna y la electroforesis de zona. - Los virus icosaédricos son más fáciles de purificar que los virus envueltos - Es muy difícil lograr la pureza completa de los virus
  56. 56. Identificación de una partícula como virus Criterios que identifican a una partícula viral  Puede obtenerse solo de 3 células o tejidos infectados Las partículas son idénticas sin importar su fuente u origen de cultivo  Contienen DNA o RNA  La actividad infecciosa varia con el número de partículas  Destrucción de la partícula física se vincula con la pérdida de actividad
  57. 57. Identificación de una partícula como virus  Ciertas propiedades de las partículas y la infectividad deben ser idénticas  Los antisueros preparados contra el virus infeccioso deben producir una reacción con la partícula  Capaces de producir la enfermedad característica in vivo  La partícula en tejido debe ocasionar la producción de progenie
  58. 58. Reacción de los agentes físicos y químicos
  59. 59. Reacción de los agentes físicos y químicos
  60. 60. Reacción de los agentes físicos y químicos
  61. 61. Reacción de los agentes físicos y químicos
  62. 62. Reacción de los agentes físicos y químicos
  63. 63. Reacción de los agentes físicos y químicos
  64. 64. Reacción de los agentes físicos y químicos
  65. 65. Reacción de los agentes físicos y químicos
  66. 66. Replicación viral
  67. 67. Etapas generales en los ciclos de replicación
  68. 68. • Es en forma simultánea o poco después de la penetración. • Es la separación física del Ácido nucleico viral y puede liberarse de forma libre o como nucleocápside. • Para la perdida de envoltura es necesario que la desintegre el endosoma, perdiendo así su infectividad.
  69. 69.
  70. 70. Pueden acumularse componente virales en cantidades excesivas y dan origen a la formación de cuerpos de inclusión en la célula. Y finalmente la célula muere. Los mecanismo inducidos por los virus pueden regular apoptosis, unos retrasan y otros inducen para facilitar la diseminación.
  71. 71. Genética de los Virus Animales
  72. 72. ¿Cómo se ve un Virus Animal? Los virus animales son pequeños paquetes de proteína y ácidos nucleicos Tienen una capa de proteína, o cápside, y material genético hecho de ADN o ARN, dentro de la cápside. Los virus animales pueden usar una variedad de estrategias (incluyendo algunas sorprendentes y extrañas) para copiar y utilizar su material genético, 80
  73. 73. Análisis genético Es un método poderoso dirigido a la comprensión de la estructura y la función del genoma viral, productos génicos y su participación en la infección y la enfermedad. Puede ayudar a identificar procesos virales específicos que pueden ser sitios de acción apropiados para el desarrollo de tratamientos antivirales
  74. 74. Variantes Virales 82 Las variantes virales surgen a veces de manera natural, con cambios en las propiedades biológicas causados por mutaciones genéticas. Los virus que tienen antígenos estables en su superficie (poliovirus, virus del sarampión) pueden controlarse con vacunación
  75. 75. Términos 83 Los términos siguientes son básicos para el análisis de los aspectos genéticos: ✘ El genotipo se refiere la constitución genética de un organismo. ✘ El fenotipo se refiere a las propiedades observables de un organismo, que puede ser producido por el genotipo en combinación con el medio ambiente. ✘ Una mutación es un cambio hereditario en el genotipo.
  76. 76. Términos 84 ✘ El virus natural denota el virus original a partir del cual se derivaron mutantes y con el cual se comparan dichos mutantes ✘ El término tal vez no describa con precisión al virus, como el que se encuentra aislado en estado natural 1. El genoma es la suma de genes de un organismo Los aislados frescos de virus de hospedadores naturales se conocen como virus aislados de campo o aislados primarios CURIOSIDAD
  77. 77. Cartografía (mapeo) de genomas virales 1. Es posible hacer un mapeo bioquímico, genético y físico por medio de técnicas clásicas. 2. El método implica el análisis de los genomas de diferentes personas 3.Además de la búsqueda de marcadores genéticos que pueden utilizarse para predecir la existencia de una enfermedad 4.Para el mapeo de genomas virales, filogenia comparativa y declaración de propiedades activas con frecuencia 85
  78. 78. 1) Se utilizan el análisis y la comparación de secuencias con virus conocidos. 2) Es posible utilizar endonucleasas de restricción para la identificación de cepas específicas de DNA virus. 3) El DNA viral se aísla y se incuba con una endonucleasa específica hasta que sufren desdoblamiento las secuencias de DNA susceptibles a la nucleasa. 4) Los fragmentos se identifican con base en el tamaño de la electroforesis en gel. 5) Los fragmentos más grandes presentan mayor retraso por el efecto de tamiz del gel, de forma que existe una relación inversa entre el tamaño y la migración observada. 6) Los mapas físicos pueden correlacionarse con los mapas genéticos. 7) Esto permite que los productos génicos virales se mapeen a regiones individuales del genoma, que fue definido por fragmentos de restricción enzimática. 8) La transcripción de mRNA mediante el ciclo de replicación puede asignarse a fragmentos específicos de DNA. 9) Con el uso de mutagénesis es posible introducir mutaciones en sitios definidos del genoma para análisis funcionales. Cartografía (mapeo) de genomas virales 86 Proceso del método del mapeo de genomas virales
  79. 79. Tipos de virus mutantes ● Los mutantes letales condicionados constituyen mutantes que son letales (no se producen virus infecciosos) ● Es dominada bajo una condición predeterminada (denominada condiciones no permisivas), ● Pero que dan origen a progenie infecciosa normal en otras situaciones (denominada condición permisiva). Por ejemplo: ● Los mutantes sensibles a la temperatura proliferan a bajas temperaturas (permisivas), pero no a altas temperaturas (no permisivas). ● Los mutantes de un solo hospedador son capaces de crecer en un tipo de célula (célula permisiva) ● En tanto que ocurre una infección abortiva en otro tipo celular (célula no permisiva). 87 Características
  80. 80. Curiosidad 88 Los estudios de infección mixta con pares de mutantes en situaciones permisivas y no permisivas pueden dar información respecto a las funciones del gen y los mecanismos de replicación viral a nivel molecular Curiosid ad
  81. 81. Virus defectuosos ● Los virus defectuosos son aquellos que carecen de uno o más genes funcionales necesarios para la replicación viral. ● Un tipo de virus defectuoso carece de una porción de su genoma (p. ej., deleción mutante). ● El grado de pérdida por deleción puede variar desde una secuencia corta de bases a una gran cantidad del genoma. 89
  82. 82. Virus defectuosos 90  Los mutantes con deleción espontánea pueden interferir con la replicación de virus homólogos (partículas de interferencia viral defectuosas).  Las partículas con interferencia viral han perdido en esencia segmentos de genoma, pero contienen proteínas normales de la cápside  Requieren infección por un virus homólogo como auxiliador para la replicación e interfieren con la multiplicación del virus homólogo.
  83. 83. Otros virus defectuosos 1. Requiere un virus competente con una replicación no relacionada como colaborador. 1. Algunos ejemplos incluyen los virus satélite adenorrelacionados y el virus de la hepatitis D (agente Delta) 1. Que se replica sólo en presencia de adenovirus o virus de la hepatitis B coinfectantes, respectivamente. 1. Los seudoviriones 2. Los retrovirus de transformación 91
  84. 84. Los seudoviriones Los retrovirus de transformación • Son un tipo diferente de partícula defectuosa • Contiene DNA de la célula hospedadora en lugar de genoma viral. • Durante la replicación viral, la cápside en ocasiones rodea porciones aleatorias de ácido nucleico del hospedador en lugar del ácido nucleico del virus. • Tales partículas tienen el aspecto de partículas virales ordinarias • Cuando se observan con microscopia electrónico, pero no pueden replicarse.  Estos virus suelen ser defectuosos.  Una porción del genoma viral ha sufrido deleción y ha sido sustituida por una parte del DNA de la célula original que codifica una proteína de transformación.  Tales virus permiten la identificación de oncogenes celulares.  Es necesario otro retrovirus como auxiliador a fin de permitir la replicación del virus transformado. Otros virus defectuosos
  85. 85.  Cuando dos o mas partículas virales infectan a la misma célula hospedadora.  Por lo común pertenecen a la misma familia de virus para que ocurra la mayor parte de tipos de interacciones.  La interacción genética da origen a cierta progenie. Existen cuatro tipos de interacciones entre virus que son: 1. Recombinación 2. Complementación 3. Mezcla fenotípica 4. Interferencia
  86. 86. 1.-RECOMBINACION ● El mecanismo clásico es que las cadenas de acido nucleico se rompen y la parte del genoma de una partícula viral se une una con otra región del genoma del segundo virus. ● El virus recombinante es estable desde el punto genético y da origen a una progenie durante la replicación.
  87. 87. 2.-COMPLEMENTACION ● Es la interacción de productos genéticos virales en la célula infectada con dos virus, uno o ambos de los cuales puede ser defectuoso. ● Permite la proliferación del segundo virus. ● Los genotipos de los dos virus permanecen sin cambios.
  88. 88. 3.-MEZCLA FENOTIPICA ● La mezcla fenotípica casi siempre se presenta entre diferentes miembros de la misma familia de virus ● Ocurre cuando un genoma de un virus se incorpora al azar a las proteínas de la cápside especificadas por un virus diferente o la cápside consiste en componentes de ambos virus. ● La cápside con proteínas mezcladas, interactúa de forma correcta para dar origen a una cápside intacta desde el punto de vista estructural. ● La nucleocápside de un virus, es rodeada por una cubierta especifica para otro virus denominado “Formación de seuditipo”
  89. 89. 4.-INTERFERENCIA ● Infección en cultivos celulares o en animales enteros con dos virus, a menudo da origen a la inhibición de la multiplicación de uno de los virus. Existen varios mecanismos como causas de la interferencia: 1) Un virus puede inhibir la capacidad del segundo para unirse a la célula ya sea bloqueando sus receptores(retrovirus, enterovirus) o destruir sus receptores (ortomixovirus) 2) Un virus puede competir con el segundo por componentes del aparato de replicación. Por ejemplo: polimerasa, factor de inicio de la traducción 3) El 1er virus puede ocasionar que la célula infestada llegue a producir un inhibidor que evita la replicación del segundo virus.
  90. 90. ● Los genomas han sido objeto para servir como vectores de replicación. ● Cualquier virus puede ser convertido a un vector, si se conoce sus funciones de replicación, controles de transcripción y señales de empaquetamiento. ● La tecnología viral se basa en: ● DNA virus:SV40, parvovirus, adenovirus, herpes virus, papilomavirus bovino y vaccinia. ● RNA virus:poliuvirus, virus Sindbis y retrovirus. ● La tecnología de DNA, ofrece la posibilidad de generar un antígeno puro con el propósito de crear una vacuna.
  91. 91. HISTORIA NATURAL Y METODOS DE TRANSMISION DE LOS VRUS
  92. 92. HISTORIA NATURAL ● La ecología es el estudio de las interacciones entre los microorganismos vivos y en su entorno. ● Diferentes virus han evolucionado por mecanismos ingeniosos y a menudo complicados para sobrevivir en la naturaleza y para la transmisión de un hospedador a otro. METODOS DE TRANSMISION DE LOS VIRUS ● El modo de transmisión utilizado por un virus dado depende de la naturaleza de las interacciones entre el virus y el hospedador. ● Los virus pueden transmitirse de las siguientes maneras:
  93. 93. LOS VIRUS PUEDEN TRANSMITIRSE DE LAS SIGUIENTES MANERAS: Transmisión directa de una persona a otra por contacto. Los medios principales de transmisión comprenden el contacto con gotitas o aerosoles, por contacto sexual, por contacto mano- boca-ojo o boca-boca o por intercambio de sangre contaminada. Transmisión indirecta por vía fecal-oral o por fómites.
  94. 94. LOS VIRUS PUEDEN TRANSMITIRSE DE LAS SIGUIENTES MANERAS: Transmisión de un animal a otro, con los seres humanos como hospedador accidental. La diseminación puede ser por mordidas o por gotas o aerosoles de roedores contaminados. Transmisión por medio de un vector
  95. 95. SE HA IDENTIFICADO AL MENOS 3 PATRONES DIFERENTES DE TRANSMISIÓN ENTRE LOS VIRUS TRANSPORTADOS POR ARTRÓPODOS: Ciclo del ser humano artrópodo. Ejemplo: fiebre amarilla urbana, dengue. Ciclo vertebrado inferior- artrópodo con infección colateral de seres humanos. El ser humano infectado es un hospedador terminal. Se conocen mecanismos de transmisión común. Ciclo artrópodo - artrópodo con infección ocasional de seres humanos y vertebrados inferiores.
  96. 96. Gracias por su atención

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