UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA
FACULTAD DE CIENCIAS
INFORME Nº 2
TEMA : “ CURVA ESPECTRAL Y LEY DE BEER ”
CURSO : INSTRUMENTACION QUIMICA I
PROFESOR (A) : ISRAEL JIMENEZ
ALUMNO(S) : POMA LLANTOY VICTOR RAÚL
FECHA DE REALIZACIÓN : 08-09-2009
FECHA DE PRESENTACIÓN : 15-09-2009
2009
1.- OBJETIVOS :
Graficar las curvas espectrales y determinar los máximos de absorción
Determinar la longitud de onda de máxima absorción
Graficar la correspondiente curva de calibración
Determinar la cantidad de la correspondiente sustancia absorbente ( analito)
2.- MARCO TEÓRICO:
2.1.- Introducción
Un método espectrofotométrico está basado en la medida directa de la absorción de
radiación electromagnética por parte de una muestra, cuantificable a través de la
Absorbancia, y la correlación de esta variable con la concentración de la especie de interés
en dicha muestra.
Todo analito molecular tiene la capacidad de absorber ciertas longitudes de onda
características de la radiación electromagnética. En este proceso, la radiación es
transferida temporalmente a la molécula y, como consecuencia, disminuye la intens idad
de la radiación . Dicha disminución, debida a la absorción experimentada por el analito,
puede ser cuantificada utilizando diversas magnitudes, siendo la Absorbancia , A , la más
comúnmente utilizada en la espectrofotometría de UV-VIS. Dicha absorbancia se define
por la expresión:
donde A es la Absorbancia, P0 la potencia del haz de radiación incidente y P la potencia
de dicho haz tras atravesar la muestra.
2.2.- Ley de Beer
De acuerdo con la ley de Beer, la absorbancia está relacionada linealmente con la
concentración de la especie absorbente, c, y con la longitud de la trayectoria de la
radiación en el medio absorbente o camino óptico, b. Esto es:
donde a es una constante de proporcionalidad llamada absortividad. Cuando la
concentración c se expresa en moles por litro, y b en centímetros, la constante de
proporcionalidad se denomina absortividad molar, y se designa por el símbolo e, y, puesto
que la absorbancia es una magnitud adimensional, tendrá unidades de L cm-1 mol-1. En
este caso, la ley de Beer adquiere la forma:
2.3.- Transmitancía y Absorbancia
Cuando un rayo de luz de una determinada longitud de onda de intensidad Io incide
perpendicularmente sobre una disolución de un compuesto químico que absorbe luz o
cromóforo, el compuesto absorberá una parte de la radiación incidente (Ia) y dejará pasar
el resto (It), de forma que se cumple: Io = Ia + It
La transmitancia (T) de una sustancia en solución es la relación entre la cantidad de luz
transmitida que llega al detector una vez que ha atravesado la muestra, It, y la cantidad
de luz que incidió sobre ella, Io, y se representa normalmente en tanto por ciento:
% T = It/Io x 100
La transmitancia nos da una medida física de la relación de intensidad incidente y
transmitida al pasar por la muestra. La relación entre %T y la concentración no es lineal,
pero asume una relación logarítmica inversa.
La absorbancia (A) es un concepto más relacionado con la muestra puesto que nos indica
la cantidad de luz absorbida por la misma, y se define como el logaritmo de 1/T, en
consecuencia: A = log 1/T = -log T = -log It/ Io.
Cuando la intensidad incidente y transmitida son iguales (Io = It), la transmitancia es del
100% e indica que la muestra no absorbe a una determinada longitud de onda, y entonces
A vale log 1 = 0.
La cantidad de luz absorbida dependerá de la distancia que atraviesa la luz a través de la
solución del cromóforo y de la concentración de éste.
2.4.- Espectros de absorción
Un espectro de absorción es una representación gráfica de la absorbancia de un analito (o
de otra magnitud equivalente) en función de la longitud de onda de la radiación , l ,
(o de otro parámetro relacionado con la energía de la radiación utilizada). El máximo de
absorbancia obtenido en el espectro de absorción de un analito, nos dará la longitud de
onda que proporciona la mayor sensibilidad posible, y por tanto será la que se utilizará en
el análisis espectrofotométrico de dicho
analito. Todas las disoluciones que presentan color, absorben radiación electromagné t ica
perteneciente al espectro visible, el cual puede dividirse en varias zonas según se muestra
en la tabla
siguiente:
En dicha tabla, la columna del "color" indica la porción del espectro que es absorbida,
mientras que la correspondiente al "color complementario" indica la porción de radiación
electromagnética que no absorbe la muestra y que por tanto es transmitida a través de ella
y puede ser captada por el ojo humano (color de la disolución). Así, por ejemplo, una
disolución de color amarillo absorbe la radiación de color azul, y por tanto cabe esperar
que presente un máximo de absorbancia en la zona de longitud de onda en la banda de
435-480 nm
3.- PARTE EXPERIMENTAL
3.1 .- Materiales
Espectrofotómetro UV-Visible-1201V-SHIMADZU, con celdas de 1cm
05 fiolas
01 bureta de 50 ml
01 Vaso de 50 ml
02 vasos de 100ml
01 bagueta
01 piceta
3.2 .- Reactivos
Permanganato de potasio ( KMnO4).. 3X10-4 M
Acido sulfúrico concentrado ( H2SO4) 18M
Acido sulfúrico 0.1 M
3.3 .- Procedimiento Experimental
Preparación de soluciones
Se preparo una solución de KMnO4 3X10-4 M. Añadiendo H2SO4 (CC) antes del
enrase
Se preparo una solución de H2SO4 0.1 M
Curva espectral
Desde la bureta se agrego 5 ml de la solución de KMnO4 a una fiola de 25 ml y
se enraso con un cierto volumen de H2SO4 0.1 M
Se vació una pequeña cantidad de esta solución a la celda espectrofotométrica
y se registro respecto al blanco las absorbancias, usando longitudes de onda en el
rango de 400 a 620 nm
Las mediciones realizadas fueron tomadas de la siguiente manera: 10 en 10
nm de 400-500 nm, 5 en 5nm de 500-560 y nuevamente de 10 en 10nm de 500-
560 nm
Corrección de absorbancia
Se llenaron las 2 celdas con la solución de H2SO4 0.1 M hasta unos ¾ de su
altura. Se toma una de ellas como el blanco y se midió la absorbancia de la otra
como muestra. Se repitió el procedimiento girando la celda 180°.
Curva de calibración
Desde la bureta se agregó 2,4,6,8 y 10 ml de la solución de KMnO4 a fiolas
diferentes de 25 ml marcadas previamente con las letras E1,E2,E3,E4,E5
respectivamente, luego se enrasaron dichas fiolas con H2SO4 0.1 M por ultimo
se registro las absorbancias de cada uno de estos estándares a una longitud
de onda que es la de máxima absorción
4.- TABULACION DE DATOS OBTENIDOS Y GRAFICOS
4.1.- Datos
Preparación de soluciones
Tabla N°1
Masa del KMnO4 0.01185g
Volumen de agua para diluir el H2SO4(cc) 5.55 ml
4.2.- Curva espectral
Tabla N°2
Absorbancia λmax (nm)
0.126 528.5
0.119 548.5
4.3.- Curva de calibración
Tabla N°3
Soluciones Absorbancia λ (nm)
[E1] = 0.24 x10-4 M 0 0
[E2] = 0.48x10-4 M 0 0
[E3] = 0.72 x10-4 M 0.049
0.052
549.5
529.5
[E4] = 0.96 x10-4 M 0.159
0.167
548.5
529.5
[E5] = 1.20 x10-4 M 0.202
0.212
548.5
529.5
0.161 512.5
Tabal Nº 4
L(nm) ABS
410 0.006
420 0.006
430 0.009
450 0.013
460 0.023
480 0.035
500 0.088
520 0.115
530 0.127
540 0.12
550 0.112
570 0.078
580 0.041
590 0.016
600 0.007
620 0.006
4.4.- graficos :
Grafico Nº 1
curva espectral del permanganato
ABS max(0.126)
0.14
0.12
0.1
0.08
0.06
0.04
0.02
0
λmax =528.5
400 450 500 550 600 650 700
A
B
S
O
R
B
A
N
C
I
A
LONGITUD DE ONDA (nm)
Curva de calibración
Tabla N°5
Soluciones Absorbancia λ (nm)
[E1] = 0.24 x10-4 M 0 0
[E2] = 0.48x10-4 M 0 0
[E3] = 0.72 x10-4 M 0.049
0.052
549.5
529.5
[E4] = 0.96 x10-4 M 0.159
0.167
548.5
529.5
[E5] = 1.20 x10-4 M 0.202
0.212
0.161
548.5
529.5
512.5
Tabla Nº 6
Concentracion M Absorbancia
0.24 0
0.48 0
0.72 0.049
0.96 0.159
1.2 0.202
CURVA DE CALIBRACION DEL PERMANGANATO
y = 0.2463x - 0.0911
R² = 0.909
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
-0.05
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4
ABSORBANCIA
CONCENTRACION 10-4 M
Tabla Nº 7
Concentración M Absorbancia
0.24 0
0.48 0
0.72 0.052
0.96 0.167
1.2 0.212
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
CURVA DE CALIBRACION DEL PERMANGANATO
Para calcular las curvas de calibración se convierte las concentraciones de
cada solución en ppm y μg/100ml
Tabla N°8
Concentración ppm μg/100ml
[E1] = 0.24 x10-4 M 1.318 131.8
[E2] = 0.48x10-4 M 2.637 263.7
[E3] = 0.72 x10-4 M 3.956 395.6
[E4] = 096 x10-4 M 5.274 527.4
[E5] = 1.20 x10-4 M 6.597 659.7
Ahora graficamos las curvas de calibración:
y = 0.2463x - 0.0911
R² = 0.909
-0.05
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4
ABSORBANCIA
CONCENTRACION 10-4 M
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
CURVA DE CALIBRACION DEL PERMANGANATO
5.- CALCULOS ANALÍTICOS
Ley de Beer: A= bc
Despejando:
A
bc
A: Absorbancia
b : Paso óptico= 1cm.
C: concentración de la solución de permanganato de potasio ( 0.0003M )
Amax = 0.126
Entonces: ξ = A / b. c = 0.126 / ( 1 cm ). ( 0.0003 M )
ξ = 410.0 ( 1 1 . M cm )
y = 0.0003x - 0.0181
-0.05
0 100 200 300 400 500 600 700
ABSORBANCIA
CONCENTRACION μg/100mL
Determine los siguientes datos estadísticos: coeficiente de correlación r, la recta de
regresión de y sobre x y limite de detección (LDD) del método.
Resumen
Estadísticas de la regresión
Coeficiente de correlación
múlt iple 0.99792586
Coeficiente de determinación
R^2 0.995856023
R^2 ajustado 0.994474697
Error t ípico 0.007879337
Observaciones 5
ANÁLISIS DE VARIANZA
Grados de
libertad Suma de cuadrados
Promedio de los
cuadrados F Valor crítico de F
Regresión 1 0.044758948 0.044758948 720.942239 0.000113359
Residuos 3 0.000186252 6.2084E-05
Total 4 0.0449452
Coeficientes Error típico Estadístico t Probabilidad Inferior 95% Superior 95%
Intercepción -0.013081701 0.008263087 -1.583149271 0.21154625 -0.039378532 0.013215131
Variable X 1 2465.80125 91.83491597 26.85036758 0.00011336 2173.541561 2758.060939
x x y y
2
1
2 2
i
i
i
i
i
i i
x x y y
r
y = 2391.7x - 0.0057
R2 = 0.9962
0.35
0.3
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
0.00E+00 2.00E-05 4.00E-05 6.00E-05 8.00E-05 1.00E-04 1.20E-04 1.40E-04 1.60E-04
Y
Variable X 1 Curva de regresión ajustada
Y
Pronóstico para Y
Linear (Y)
Calculando el Límite de Detección (LDD):
La ecuación de la regresión y = 2391.7x - 0.0057
Calculando el Y = YB + 3SB
YB = 0.0057 para X = 0
El Limite de detección es SB = Sy/x
Entonces Y = YB + 3 Sy/x ... (1)
Calculando la desviación estándar Sy/x :
1
2
y
y
y : valor pronosticado n :numero de datos. En nuestro caso n=5
Sy/x = 0.007879337 Desviación estándar debido a la regresión.
En (1):
Y = 0.0057 + 3 x (0.007879337)
Y = 0.02934
Remplazando en la ecuación de la regresión: 0.02934= 2391.7x - 0.0057
Entonces el LDD es
6.- DISCUSIONES:
X 1.465x10 5
5 X 1.465x10
En esta practica se tomo en cuenta la corrección de la absorbancia de la celda por lo
tanto los datos que obtenemos del espectrofotómetro tendrán mínima desviación del
valor verdadero.
De los resultados obtenidos de la rectas de regresión notamos q el valor de R2 o R
son aproximadamente la unidad lo q nos da una buena aproximación a la recta
pronosticada. Esto es, tenemos una buen recta de calibración para calcular la
concentración de una muestra problema cuya matriz es similar a la preparadas en
nuestro laboratorio,
7.- RECOMENDACIONES:
2
/ 2
ˆ
n
s i
i
y x
La precisión de las medidas de absorbancia depende mucho del uso y del
mantenimiento que se haga de las celdas. Las huellas dactilares, la grasa u otras
señales sobre las paredes de las celdas alteraran notablemente las características de
transmisión. Por ello es recomendable una limpieza completa antes y después de su
uso; la superficie de las ventanas no debe tocarse durante su manipulación. Las
cubetas contrastadas nunca deben secarse mediante la acción del calor, en un horno
o sobre una llama este tratamiento puede causar daños físicos o cambios en el camino
óptico. Las cubetas deberían calibrarse regularmente entre si con una disolución
absorbente.
La luz monocromática tiene "un solo color" (una longitud de onda). Aunque es
imposible producir luz monocromática, cuanto mejor es el monocromador más
estrecho es el intervalo de longitudes de onda del haz emergente.
8.- CONCLUSIONES :
9.- REFERENCIAS BIBLIOGRAFICA:
- Skoog, D. A. y West, D. M., Análisis Instrumental, McGraw Hill, 1993
- Meloan, Clifton y Kiser, Robert, Problemas y Experimentos en Anális is
Instrumental, editorial Reverte Mexicana, S. A., 1973
- Miller, J. C. Y Miller, J. N., Estadística para Química Analítica, Adisson-Wesle y
Iberoamericana, 1999.
10.- CUESTIONARIO
1. Son pocas las excepciones a la relación línea entre la absorbancia y la longitud de
trayecto a una concentración fija. Sin embargo es frecuente que se observen
desviaciones respecto de la proporcionalidad directa entre la absorbancia y
concentración cuando la longitud de trayecto b es constante. Entre ellas tenemos:
desviaciones reales, desviaciones instrumentales y desviaciones químicas. Describa
cada una de éstas desviaciones.
Las desviaciones a la Ley de Beer caen en tres categorías: reales, instrumentales y
químicas. Dichas desviaciones pueden ser positivas ; si la absorbancia medida es mayor
que la real (+ ) o negativas (-) si la absorbancia medida es menor que la real , y llevan a
que no se obtengan relaciones lineales entre la absorbancia y la concentración.
Las desviaciones reales : provienen de los cambios en el índice de refracción del sistema
analítico, pues como e depende del índice de refracción de la muestra, la ley de Beer sólo
se cumple para bajas concentraciones, en donde el índice de refracción es esencialme nte
constante, ya que no es la absortividad la que es constante sino la expresión:
e = e verdadero h /(h 2+2)2
donde h es el índice de refracción de la solución.
Las desviaciones instrumentales provienen, en primer lugar de la utilización de luz no
monocromática, ya que la pureza espectral del haz de radiación proveniente de la fuente,
depende del ancho de banda espectral del monocromador. La deducción de la ley de Beer
supone radiación monocromática y los monocromadores en realidad proporcionan una
banda de longitudes de onda.
Cuando se hace una medida de transmitancia con luz de varias longitudes de onda, l' ,l''
... la intensidad del haz que emerge de la solución de muestra será ( Il' + Il'' ...) y la
intensidad del haz que emerge de la celda de referencia será ( I0l' + I0l '' ...) por lo que la
transmitancia leída será :
T = ( Il' + Il'' ...) / ( I0l ' + I0l'' ...) = ( Il' + Il '' ...) / ( I0l '10-e'bc + I0l ''10-e''bc...)
Entonces, la ley de Beer puede cumplirse con pequeños intervalos de error, si la variación
de la absortividad con la longitud de onda es constante en el intervalo de longitudes de
onda que el selector del instrumento deja pasar, siempre que el ajuste de la longitud de
onda nominal sea muy reproducible.
En el máximo de la curva del espectro de absorción, el coeficiente de absortividad cambia
más lentamente que en el resto de la banda, igualmente la sensibilidad a la concentración
es mayor en el máximo de la banda de absorción, porque la absortividad tiene el valor
máximo en ese punto. Es por esto, que normalmente se selecciona la longitud de onda en
el máximo de la banda para realizar las medidas espectrofotométricas cuantitativas.
Se presentan también desviaciones instrumentales por luz desviada, entendiendo por
esta, la luz de otras longitudes de onda que se superponen a la banda de luz utilizada .
Cuando en los instrumentos se fija una longitud de onda nominal ,lx, el ancho de banda
espectral del monocromador condiciona la banda de luz que pasa, que corresponderá a la
región lx ± D l llamada región de la luz útil. La intensidad de esta banda de luz disminuirá
cuando ocurra la absorción de luz por parte de la muestra, al igual que puede disminuir la
intensidad de la luz desviada, sobre todo para l Ð 230 nm.
La luz que proviene de la celda de referencia induce una corriente fotoeléctrica en el
detector al igual que la luz que proviene de la muestra pero la luz desviada también induce
una corriente adicional en el detector, lo que lleva a una transmitancia falsa, T'' , que tiene
el valor:
T'' = ( I + If ) / ( I0 + If ) donde If es la intensidad de la luz desviada.
Las desviaciones químicas a la ley de Beer también se llaman desviaciones aparentes
porque dependen de la naturaleza química del sistema en estudio y si se trabaja bajo
ciertas condiciones ( pH, concentración de reactivos, etc. ) es posible hacer que el sistema
cumpla dicha ley. Las desviaciones son causadas, generalmente, por equilibrios en
solución que involucran a la especie absorbente y alteran su concentración originando
desviaciones positivas o negativas.
Si alguna reacción química que ocurra en el sistema origina un producto que absorba más
fuertemente que la sustancia ensayada, a la longitud de onda a la cual se hace la medida
o longitud de onda analítica, se producirá una desviación positiva. Si, al contrario, se
origina un producto que no absorbe a la longitud de onda analítica, la concentración de la
sustancia se verá disminuida y se originará una desviación negativa.
Entre los tipos de reacciones químicas que llevan a desviaciones de la ley de Beer están:
reacciones de asociación-disociación, reacciones ácido-base, reacciones de
polimerización, reacciones de formación de complejos y reacciones con el solvente.
2. Evalúe las cantidades restantes de la tabla adjunta. Cuando sea necesario use 200
como masa molar del analito.
Solución A %T
b (cm)
C
(Lmol-1cm-
1)
a (ppn-1cm-1) M ppm
0,172
0,52
0,798
0,179
44,9
39,6
83,6
11,1
5,23
4,23x103
7,95x103
3,73x103
1,35x104
9,78x103
0,0258
0,0912
1.00
1,00
0,100
1,00
1,50
1,00
1,35x10-4
1,71x10-4
8,07x10-6
7,07x10-5
7,19x10-5
1,76
33,6
5,24
Solucion:
Solución A %T
b
(cm)
C
(Lmol-
1cm-1)
a (ppn-1cm-1) M ppm
0,172
0.348
0,52
0.40
0.064
0,078
0,798
0,954
0,281
0,179
67,3
44,9
30,2
39,6
86,3
83,6
15,9
11,1
5,23
66,2
4,23x103
5.15 x103
7,95x103
18,3 x103
3,73x103
9,67x103
3,16x103
1,35x104
9,78x103
2,49 x103
0.0210
0,0258
0.0400
0,0912
0,0187
0,0484
0.3155
0,0688
0,0486
0,0124
1.00
0.50
1,00
2.49
0,100
1,00
1,50
0,98
1,10
1,00
0.41x10-4
1,35x10-4
0.65x10-4
0.088x10-4
1,71x10-4
8,07x10-6
1,68x10-4
7,07x10-5
2,62x10-5
7,19x10-5
8.20
27.0
13.0
1,76
34,2
1,61
33,6
14,14
5,24
14,38
3. Un compuesto X se determina mediante espectrofotometría UV/visible. Se prepara
una curva de calibración a partir de las soluciones patrón de X, con los resultados
siguientes: 0,50 ppm, A=0,24; 1,5 ppm, A=0,36; 2,5 ppm, A=0,44; 3,5 ppm, A=0,59
y 4,5 ppm, A=0,70. Halle la pendiente e intersección de la curva de calibración, el
error estándar de y, la concentración de la solución X desconocida que reporta una
absorbancia de 0,5.
C(ppm) Absorbancia
0.5 0.24
1.5 0.36
2.5 0.44
3.5 0.59
4.5 0.7
Solución desconocida X: absorbancia=0.5
Reemplazando en la ecuación de la grafica: 0.5=0.115 x + 0.1785
X= 2.79 ppm
Entonces la concentración de la solución desconocida es 2.79 ppm.
Error estándar de y:
1
2
2
y
y
s i
i
y x
/ 2
ˆ
n
Sy /x= {0.133/3}1/2 = 0.2107
4. Un método de análisis de Fe3+ que puede ser usado para una variedad de matrices,
forma complejos altamente coloreados de Fe3+-ácido tioglicólico. El complejo
absorbe fuertemente a 535 nm. La estandarización del método es difícil usando
estándares internos. Un estándar de trabajo con 10.00 ppm de Fe+3 es preparado
transfiriendo 10 mL de una solución stock de 100 ppm de Fe+3. Estándares de
calibración de 1.00, 2.00, 3.00, 4.00, and 5.00 ppm son preparados para luego
transferir cantidades apropiadas de solución stock de 100.00 ppm en una fiola
volumétrica de 50 mL conteniendo cada una 5mL de ácido tioglicólico, 2mL de 20
w/v de citrato de amonio y 5mL de 0.22M NH3. Después de diluir a un volume n
determinado y mezclar, los valores de absorbancia de los estándares externos son
medidos vs un blanco de trabajo apropiado. Las muestras son preparadas para anális is
tomando una porción de aproximadamente 0.1 g de Fe+3 , disolviendo con una mínima
cantidad de HNO3 y diluir a un volumen de 1L en una fiola volumétrica. 1 mL de
alícuota es la cantidad que es transferida a una fiola de 50 mL, con 5 mL de ácido
tioglicólico, 2 mL de 20% w/v de citrato de amonio y 5 mL de 0.22 M de amoniac o
y diluido a volumen. La absorbancia de la solución es usada para determinar la
concentración de Fe+3 en la muestra.
(a) Cuál es el blanco apropiado para esta muestra
(b) Citrato de amonio es agregado para prevenir la precipitación de Al+3. Cómo afectará
la presencia de trazas de Fe+3 en citrato de amonio en la concentración reportada de
Fe en la muestra.
(c) Porqué el procedimiento usa una cantidad de aproximadamente 0.1g de Fe+3 en la
muestra
(d) Es desconocido para el analista, que 100 mL volumétricos del estándar de trabajo de
Fe+3 con 10.00 ppm tiene un volumen significativamente menor que 100.00 mL
Cómo se afectaría la concentración reportada de Fe+3 en la muestra
5. Se desarrolló un método espectrofotométrico para análisis de analgésicos conteniendo
aspirina, fenacitina y cafeína, La muestra es disuelta en CHCl3 y extraída con una
solución acuosa de NaHCO3 para remover la aspirina. Después de terminar la
extracción, el cloroformo es transferido a una fiola volumétrica de 250 mL y diluido
a volumen de CHCl3. Una porción de la solución de 2 mL con CHCl3 es diluida a un
volumen de 200 mL con CHCl3 en una fiola volumétrica. La absorbancia de la
solución final medida a longitudes de onda de 250 nm y 275 nm en las cuales las
absorbancias: en ppm-1cm-1, para cafeína y fenacitina son a250 = 0.0131 y a275 =
0.0485 fenacitina: a250 = 0.0702 y a275 = 0.0159. La aspirina es determinada por la
neutralización de NaHCO3 en la solución acuosa y extrayendo la aspirina con CHCl3.
Los extractos son combinados y diluidos a 500 mL en una fiola volumétrica. Una
porción de 20 mL de la solución es colocada en una fiola de 100mL y diluida a
volumen con CHCl3. La absorbancia de esta solución es medida a 227 nm, donde el
valor que corresponde a la aspirina es 0.00682 ppm-1cm-1. Un tableta de analgés ico
tratada para este procedimiento es encontrado con absorbancias de 0.466 a 250 nm,
0.164 a 275 nm, y 0.600 a 277 nm cuando usamos una celda de 1.00 cm de paso de
luz. Reportar los miligramos de aspirina, cafeína y fenacina en la tableta de analgés ico