SlideShare una empresa de Scribd logo

Extracción de ADN animal

Practica de laboratorio de Bioquímica- Extracción del ADN animal

1 de 8
Descargar para leer sin conexión
“Año de la Diversificación Productiva y del Fortalecimiento
de la Educación”
BIOQUIMICA
Docente: Jorge Cordero Azabache
Alumnos:
Ccancce Martínez Anais..................... U2008110426
Semestre:VI
HUANCAYO – 2015-11
EXTRACCION DEL ADN
ANIMAL
EXTRACCIÓN DEL ADN ANIMAL
OBJETIVOS
 Extraer ADN en muestras de tejidos animales.
MARCO TEORICO
Para la extracción del ADN del núcleo de las células, es necesario homogenizar las
levaduras en hidróxido de sodio (NaOH) y sodio duodecil sulfato (SDS). Este tratamiento
favorece la ruptura de la pared y de la membrana celular, además de contribuir a la
desnaturalización de las proteínas.
Con el fin de liberar el ADN de las proteínas, se utilizan una serie de agentes
desnaturalizantes, como el perclorato de sodio y la mezcla de cloroformo y alcohol
isoamilo. Después de agregar los agentes desnaturalizantes, se centrifuga la solución y
se obtienen dos fases: una orgánica y una acuosa, separadas por una interfase de
proteínas desnaturalizadas; en la fase acuosa se encuentra el ADN. La mezcla de
cloroformo y alcohol no solo desnaturaliza las proteínas, sino que disuelve los lípidos de la
muestra y aumenta la separación de las fases.
El ADN de la fase acuosa se recupera por precipitación. La precipitación en etanol
absoluto en presencia de una sal es un método muy utilizado en los procesos de
extracción de ADN. Luego, el ADN se disuelve en solución salina, y puede ser
almacenado para utilizarlo en experimentos posteriores.
MATERIALES
 Hígado de pollo 200 gr.
 Varilla de vidrio.
 SDS El dodecilsulfato sódico ( cualquier detergente concentrado)
 Arena.
 Pedazos de tela para usar como filtro.
 Vasos precipitados de 200 ml o 500 ml.
 Probeta.
 Embudo.
 Mortero y pilón.
REACTIVOS
 Alcohol de 96°
 Cloruro sódico 2M
PROCEDIMIENTO
 Triturar 200 g hígado de pollo en un mortero. Añadir arena para que al
triturar se puedan romper las membranas y queden los núcleos sueltos.
 Añadir al triturado, 50 centímetros cúbicos de agua destilada. Remover
hasta hacer una especie de papilla o puré.
 Filtrar varias veces sobre una tela para separar los restos de tejidos que
hayan quedado por romper.
 Medir el volumen del filtrado con una probeta.
 Añadir al filtrado un volumen igual de cloruro sódico 2M. Con esto
conseguimos producir el estallido de los núcleos para que queden libres las
fibras de cromatina.
 A continuación se añade 1 centímetro cúbico de SDS.
 Añadir mediante una pipeta 50 centímetros cúbicos de alcohol de 96° el
alcohol debe de estar frio. Hay que hacerlo de forma que el alcohol resbale
por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la interface, precipita el
ADN.
 Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma dirección. Sobre
la varilla se van adhiriendo unas fibras blancas, visibles a simple vista, que
son el resultado de la agrupación de muchas fibras de ADN.
RESULTADOS
En la extraccion del ADN animal se observo lo siguiente:
DISCUSION
En la práctica de laboratorio extracción del ADN animal, se identificó y se
obtuvieron los siguientes resultados:
Al extraer el ADN del tejido animal, del hígado de pollo el cual se encuentra en el
interior del núcleo celular, disperso y muy replegado, unido a proteínas para formar
la cromatina, donde fue necesario homogeneizar el tejido y romper las células para
separar el núcleo, además de la envoltura nuclear para liberar su contenido, se
separó el ADN de las proteínas que lo protegen y se precipito para extraerlo de la
solución. Una vez realizado esto, el ADN iba apareciendo poco a poco en la
interfase agua-alcohol en forma de grumos blancos. Es así que se obtuvieron
finalmente hebras blancas que corresponden a miles de fibras de ADN.
De acuerdo con la teoría, se concuerda con lo siguiente: Las características
fisiológicas y bioquímicas de todo ser vivo están contenidas en sus respectivos
genomas. Los genomas de bacterias, hongos, plantas, animales y algunos virus
Capa de
ALCOHOL
INTERFASE
con el ADN
Capa de
FILTRADO
están compuestos por moléculas de ácido desoxirribonucleico (comúnmente
llamado ADN). El ADN es una estructura química cuyos elementos fundamentales
(nucleótidos) se organizan de manera lineal generando enormes secuencias de
información. La información que define y codifica un carácter determinado se
denomina gen (Lewin 1995). Los genes se organizan linealmente y se agrupan
formando estructuras llamadas cromosomas, los cuales pueden ser vistos bajo el
microscopio durante ciertas etapas del ciclo de vida de la célula.
Todos los procesos de extracción, purificación y almacenamiento se basan en las
características fisicoquímicas del ADN. Pues aparte de ser una molécula de alto
peso molecular, muy larga y delicada, es un ácido capaz de formar sales con iones
cargados positivamente (cationes). Además, es soluble en soluciones
concentradas de sales (sal de cocina, por ejemplo), pero insoluble en alcoholes
(tipo etanol o isopropanol). Adicionalmente, el ADN es destruido a pH ácido
(menor de 4,0), es insoluble a pH 5.6, pero es soluble a pH 8,0. Por lo tanto, los
procesos de extracción, purificación y almacenamiento del ADN deben mantener
el pH óptimo y brindar una alta concentración iónica (Howell 1973).
CONCLUSIONES
 Se logró correctamente extracción y separación del ADN a partir de tejido
animal (hígado), con la separación de interfaces y seguidamente la
obtención de hebras blancas que corresponden a miles de fibras de ADN.
 En la extracción del ADN animal se puso de manifiesto su estructura fibrilar
y el grado de arrollamiento, que permite el empaquetamiento en el núcleo
celular de las largas cadenas de esta molécula.
 Los métodos de extracción del ADN permiten obtener ácidos nucleicos
purificados a partir de diversas fuentes para después realizar análisis
específicos de modificaciones genéticas mediante la reacción en cadena
de la polimerasa (PCR). Para extraer los ácidos nucleicos del material
biológico es preciso provocar una lisis celular, inactivar las nucleasas
celulares y separar los ácidos nucleicos de los restos de células. Es posible
romper la membrana celular e inactivar las nucleasas intracelulares al
mismo tiempo. Tras la lisis celular y la inactivación de las nucleasas, los
restos de células se eliminan fácilmente por filtración o precipitación. A
menudo se efectúa una extracción con disolventes para eliminar los
contaminantes de los ácidos nucleicos. También puede realizarse una
precipitación selectiva con concentraciones salinas elevadas (precipitación
salina) o una precipitación de las proteínas mediante cambios del pH.
CUESTIONARIO
1. ¿Qué dificultades se presentaron para la realización de la práctica?
Las dificultades que se presentaron para la realización de la práctica, básicamente
fueron el tiempo de triturado del hígado de pollo y arena, y el proceso de filtrado
del tejido que no se rompió y al hacer que el alcohol baje por las paredes del vaso
y forme las dos capaz.
2. ¿Qué observas en las fibras?
En las fibras se observaron hebras blancas que corresponden a miles de fibras
agrupadas de ADN.
3. ¿Cuál es la función del detergente y agentes quelantes en la purificación del ADN?
La función del detergente y agentes quelantes en la purificación del ADN, son:
el detergente completa la rotura de las membranas al disolver y separar los
lípidos de las mismas. También interviene en la separación de las proteínas
que rodean al ADN. Y los agentes quelantes protegen el ADN de la acción de
las enzimas nucleasas, las altas concentraciones.
4. ¿Por qué se dice que las proteínas contaminan al ADN purificado?
Se dice que las proteínas contaminan al ADN purificado, debido a que en la lisis de
las células cuyo DNA se desea purificar. Este paso se realiza mediante un
detergente aniónico que solubiliza los componentes celulares. Dicha rotura celular
se lleva a cabo en presencia de “conservantes”, que garantizan la integridad del
DNA; esto es, que impiden o limitan la acción de las DNAsas presentes en las
células o contaminantes del medio. El RNA presente se elimina mediante
tratamiento con RNAsa. A continuación se eliminan las proteínas y otros
contaminantes celulares, mediante precipitación salina (que sustituye al
tratamiento clásico con disolventes orgánicos tóxicos). Finalmente, el DNA
genómico se aísla mediante precipitación en presencia de alcohol y se disuelve en
agua o en una solución tamponada que puede contener “conservantes” del DNA.
5. ¿Por qué es útil el estudiar y analizar al ADN de una célula?
Es útil el estudiar y analizar al ADN de una célula, Debido a que en el ADN se
encuentran cifradas las instrucciones que definen las características propias de
cada organismo, diversas tecnologías y sistemas de análisis se han desarrollado
para la caracterización de esta molécula. Los resultados de tales estudios
demuestran que características como la resistencia a enfermedades,
potencialidades de producción, tamaño y color de los frutos, entre otros, son
debidas a la expresión de la información genética y su interacción con el medio

Recomendados

Extracción del ADN vegetal
Extracción del ADN vegetalExtracción del ADN vegetal
Extracción del ADN vegetalNasha Ccancce
 
Informe practica #1 (carbohidratos)
Informe practica #1 (carbohidratos)Informe practica #1 (carbohidratos)
Informe practica #1 (carbohidratos)Pedro Rodriguez
 
INFORME DE LA EXTRACCION CASERA DEL ADN
INFORME  DE LA EXTRACCION CASERA DEL ADNINFORME  DE LA EXTRACCION CASERA DEL ADN
INFORME DE LA EXTRACCION CASERA DEL ADNXinithap
 
Practica #5 Reconocimiento de Aldehídos y Cetonas
Practica #5 Reconocimiento de Aldehídos y CetonasPractica #5 Reconocimiento de Aldehídos y Cetonas
Practica #5 Reconocimiento de Aldehídos y CetonasAngy Leira
 

Más contenido relacionado

La actualidad más candente

Practica Extraccion Adn
Practica Extraccion AdnPractica Extraccion Adn
Practica Extraccion Adnjcblbiologia
 
Práctica 5. identificación de lípidos.
Práctica 5. identificación de lípidos.Práctica 5. identificación de lípidos.
Práctica 5. identificación de lípidos.Leslie Romero Vázquez
 
OBTENCIÓN DEL ADN EN LABORATORIO
OBTENCIÓN DEL ADN EN LABORATORIOOBTENCIÓN DEL ADN EN LABORATORIO
OBTENCIÓN DEL ADN EN LABORATORIODMITRIX
 
Aislamiento de la caseína de la leche
Aislamiento de la caseína de la lecheAislamiento de la caseína de la leche
Aislamiento de la caseína de la lecheJhonás A. Vega
 
Práctica 6. Identificación de proteínas.
Práctica 6. Identificación de proteínas.Práctica 6. Identificación de proteínas.
Práctica 6. Identificación de proteínas.Leslie Romero Vázquez
 
Práctica 6 Crenación, Hemólisis, Plasmólisis y Turgencia
Práctica 6  Crenación, Hemólisis, Plasmólisis y TurgenciaPráctica 6  Crenación, Hemólisis, Plasmólisis y Turgencia
Práctica 6 Crenación, Hemólisis, Plasmólisis y TurgenciaQuímico Farmacobiólogo
 
Proyecto: Extracción del ADN del hígado de pollo.
Proyecto: Extracción del ADN del hígado de pollo.Proyecto: Extracción del ADN del hígado de pollo.
Proyecto: Extracción del ADN del hígado de pollo.Luis Armando Paccha Aguilar
 
Desnaturalización y Renaturalización de la cadena de ADN
Desnaturalización y Renaturalización de la cadena de ADNDesnaturalización y Renaturalización de la cadena de ADN
Desnaturalización y Renaturalización de la cadena de ADNKaren Gabriela Marcillo Valencia
 
Extraccion del adn de un plátano
Extraccion del adn de un plátanoExtraccion del adn de un plátano
Extraccion del adn de un plátanoRuben Guerra
 
Reporte de practica de identificacion de proteinas.
Reporte de practica de identificacion de proteinas.Reporte de practica de identificacion de proteinas.
Reporte de practica de identificacion de proteinas.cetis 62
 
Informe de química orgánica I - Alcoholes
Informe de química orgánica I - AlcoholesInforme de química orgánica I - Alcoholes
Informe de química orgánica I - AlcoholesJoseph Fretel Arteaga
 
Reconocimiento de carbohidratos
Reconocimiento de carbohidratosReconocimiento de carbohidratos
Reconocimiento de carbohidratosAndres Granados
 
Practica 1. Preparación de soluciones.
Practica 1. Preparación de soluciones. Practica 1. Preparación de soluciones.
Practica 1. Preparación de soluciones. Universidad Veracruzana
 

La actualidad más candente (20)

Practica Extraccion Adn
Practica Extraccion AdnPractica Extraccion Adn
Practica Extraccion Adn
 
Práctica 5. identificación de lípidos.
Práctica 5. identificación de lípidos.Práctica 5. identificación de lípidos.
Práctica 5. identificación de lípidos.
 
OBTENCIÓN DEL ADN EN LABORATORIO
OBTENCIÓN DEL ADN EN LABORATORIOOBTENCIÓN DEL ADN EN LABORATORIO
OBTENCIÓN DEL ADN EN LABORATORIO
 
Aislamiento de la caseína de la leche
Aislamiento de la caseína de la lecheAislamiento de la caseína de la leche
Aislamiento de la caseína de la leche
 
Práctica 6. Identificación de proteínas.
Práctica 6. Identificación de proteínas.Práctica 6. Identificación de proteínas.
Práctica 6. Identificación de proteínas.
 
Práctica 6 Crenación, Hemólisis, Plasmólisis y Turgencia
Práctica 6  Crenación, Hemólisis, Plasmólisis y TurgenciaPráctica 6  Crenación, Hemólisis, Plasmólisis y Turgencia
Práctica 6 Crenación, Hemólisis, Plasmólisis y Turgencia
 
Tinciones microbianas
Tinciones microbianasTinciones microbianas
Tinciones microbianas
 
Coloraciones
ColoracionesColoraciones
Coloraciones
 
Informe n 3 fraccionamiento celular
Informe n  3  fraccionamiento celularInforme n  3  fraccionamiento celular
Informe n 3 fraccionamiento celular
 
Proyecto: Extracción del ADN del hígado de pollo.
Proyecto: Extracción del ADN del hígado de pollo.Proyecto: Extracción del ADN del hígado de pollo.
Proyecto: Extracción del ADN del hígado de pollo.
 
Desnaturalización y Renaturalización de la cadena de ADN
Desnaturalización y Renaturalización de la cadena de ADNDesnaturalización y Renaturalización de la cadena de ADN
Desnaturalización y Renaturalización de la cadena de ADN
 
Informe electroforesis
Informe electroforesisInforme electroforesis
Informe electroforesis
 
Extraccion del adn de un plátano
Extraccion del adn de un plátanoExtraccion del adn de un plátano
Extraccion del adn de un plátano
 
Practica 3. tincion de gram
Practica 3.  tincion de gramPractica 3.  tincion de gram
Practica 3. tincion de gram
 
Reporte de practica de identificacion de proteinas.
Reporte de practica de identificacion de proteinas.Reporte de practica de identificacion de proteinas.
Reporte de practica de identificacion de proteinas.
 
Informe de química orgánica I - Alcoholes
Informe de química orgánica I - AlcoholesInforme de química orgánica I - Alcoholes
Informe de química orgánica I - Alcoholes
 
Hidrólisis del almidón por la amilasa salival
Hidrólisis del almidón por la amilasa salivalHidrólisis del almidón por la amilasa salival
Hidrólisis del almidón por la amilasa salival
 
Practica de enzimas
Practica de enzimasPractica de enzimas
Practica de enzimas
 
Reconocimiento de carbohidratos
Reconocimiento de carbohidratosReconocimiento de carbohidratos
Reconocimiento de carbohidratos
 
Practica 1. Preparación de soluciones.
Practica 1. Preparación de soluciones. Practica 1. Preparación de soluciones.
Practica 1. Preparación de soluciones.
 

Destacado

Destacado (6)

Laboratorio 2 de extraccion de adn
Laboratorio 2 de  extraccion de adnLaboratorio 2 de  extraccion de adn
Laboratorio 2 de extraccion de adn
 
Biologia molecular DNA
Biologia molecular DNABiologia molecular DNA
Biologia molecular DNA
 
Electroforesis
ElectroforesisElectroforesis
Electroforesis
 
30 vegetales con sus cromosomas
30 vegetales con sus cromosomas30 vegetales con sus cromosomas
30 vegetales con sus cromosomas
 
Electroforesis de Acidos Nucleicos en Geles de Agarosa - Genetica UNAH
Electroforesis de Acidos Nucleicos en Geles de Agarosa - Genetica UNAHElectroforesis de Acidos Nucleicos en Geles de Agarosa - Genetica UNAH
Electroforesis de Acidos Nucleicos en Geles de Agarosa - Genetica UNAH
 
Electroforesis
ElectroforesisElectroforesis
Electroforesis
 

Similar a Extracción de ADN animal

estraccion de ADN ...ing ambiental 1er ciclo .pdf
estraccion de ADN ...ing ambiental 1er ciclo .pdfestraccion de ADN ...ing ambiental 1er ciclo .pdf
estraccion de ADN ...ing ambiental 1er ciclo .pdfEslanderNavarro
 
EXTRACCION Y PURIFICACION DEL ADN
EXTRACCION Y PURIFICACION DEL ADNEXTRACCION Y PURIFICACION DEL ADN
EXTRACCION Y PURIFICACION DEL ADNHazzlyGuerrero1
 
Extracción de ADN (experimento casero) PLATANO Y MANDARINA.pdf
Extracción de ADN (experimento casero) PLATANO Y MANDARINA.pdfExtracción de ADN (experimento casero) PLATANO Y MANDARINA.pdf
Extracción de ADN (experimento casero) PLATANO Y MANDARINA.pdfromycuellar
 
la molecula de la vida
la molecula de la vidala molecula de la vida
la molecula de la vidaDMITRIX
 
Extracción de ADN del Platano.pdf
Extracción de ADN del Platano.pdfExtracción de ADN del Platano.pdf
Extracción de ADN del Platano.pdfDannyL13
 
PRACTICA DE LABORATORIO.pdf
PRACTICA DE LABORATORIO.pdfPRACTICA DE LABORATORIO.pdf
PRACTICA DE LABORATORIO.pdfCamiloArteaga20
 
EXTRACCION_DE_ADN.pptx
EXTRACCION_DE_ADN.pptxEXTRACCION_DE_ADN.pptx
EXTRACCION_DE_ADN.pptxEricHernndez16
 
Extraccion de adn desde muestras vegetales
Extraccion de adn desde muestras vegetalesExtraccion de adn desde muestras vegetales
Extraccion de adn desde muestras vegetalesxristian xamorax
 

Similar a Extracción de ADN animal (20)

Extracción de ADN
Extracción de ADNExtracción de ADN
Extracción de ADN
 
Extraccion de ADN de un tomate
Extraccion de ADN de un tomateExtraccion de ADN de un tomate
Extraccion de ADN de un tomate
 
Torres villamil
Torres   villamilTorres   villamil
Torres villamil
 
estraccion de ADN ...ing ambiental 1er ciclo .pdf
estraccion de ADN ...ing ambiental 1er ciclo .pdfestraccion de ADN ...ing ambiental 1er ciclo .pdf
estraccion de ADN ...ing ambiental 1er ciclo .pdf
 
Extracción de ADN
Extracción de ADNExtracción de ADN
Extracción de ADN
 
PRACTICA 13.pdf
PRACTICA 13.pdfPRACTICA 13.pdf
PRACTICA 13.pdf
 
EXTRACCION Y PURIFICACION DEL ADN
EXTRACCION Y PURIFICACION DEL ADNEXTRACCION Y PURIFICACION DEL ADN
EXTRACCION Y PURIFICACION DEL ADN
 
informe de LABORATORIO BIOLOGIA
informe de LABORATORIO BIOLOGIAinforme de LABORATORIO BIOLOGIA
informe de LABORATORIO BIOLOGIA
 
Extracción de ADN (experimento casero) PLATANO Y MANDARINA.pdf
Extracción de ADN (experimento casero) PLATANO Y MANDARINA.pdfExtracción de ADN (experimento casero) PLATANO Y MANDARINA.pdf
Extracción de ADN (experimento casero) PLATANO Y MANDARINA.pdf
 
la molecula de la vida
la molecula de la vidala molecula de la vida
la molecula de la vida
 
INFORME SIMULANDO EL ADN
INFORME SIMULANDO EL ADNINFORME SIMULANDO EL ADN
INFORME SIMULANDO EL ADN
 
SIMULACIÓN DE ADN CASERO
SIMULACIÓN DE ADN CASERO SIMULACIÓN DE ADN CASERO
SIMULACIÓN DE ADN CASERO
 
Extracción de ADN del Platano.pdf
Extracción de ADN del Platano.pdfExtracción de ADN del Platano.pdf
Extracción de ADN del Platano.pdf
 
PRACTICA DE LABORATORIO.pdf
PRACTICA DE LABORATORIO.pdfPRACTICA DE LABORATORIO.pdf
PRACTICA DE LABORATORIO.pdf
 
EXTRACCION_DE_ADN.pptx
EXTRACCION_DE_ADN.pptxEXTRACCION_DE_ADN.pptx
EXTRACCION_DE_ADN.pptx
 
Extraccion de adn desde muestras vegetales
Extraccion de adn desde muestras vegetalesExtraccion de adn desde muestras vegetales
Extraccion de adn desde muestras vegetales
 
Bio moldn aextract
Bio moldn aextractBio moldn aextract
Bio moldn aextract
 
Aislamiento de-adn
Aislamiento de-adnAislamiento de-adn
Aislamiento de-adn
 
Aislamiento de-adn
Aislamiento de-adnAislamiento de-adn
Aislamiento de-adn
 
Infoorme de adn
Infoorme de adnInfoorme de adn
Infoorme de adn
 

Último

Eclipses solares, estructura de la tierra_ Exposición grupal.pdf
Eclipses solares, estructura de la tierra_ Exposición grupal.pdfEclipses solares, estructura de la tierra_ Exposición grupal.pdf
Eclipses solares, estructura de la tierra_ Exposición grupal.pdfAlissonAlmachi
 
DIVISION_CELULAR_REPRODUCCIÓN_3_MILENA_MOYA.pptx
DIVISION_CELULAR_REPRODUCCIÓN_3_MILENA_MOYA.pptxDIVISION_CELULAR_REPRODUCCIÓN_3_MILENA_MOYA.pptx
DIVISION_CELULAR_REPRODUCCIÓN_3_MILENA_MOYA.pptxmilenamoyaniacato25
 
Fases de la Mitosis_Alisson Almachi.pdf
Fases de la  Mitosis_Alisson Almachi.pdfFases de la  Mitosis_Alisson Almachi.pdf
Fases de la Mitosis_Alisson Almachi.pdfAlissonAlmachi
 
ÓXIDOS SALINOS explicación..pptx[1].pptx
ÓXIDOS SALINOS explicación..pptx[1].pptxÓXIDOS SALINOS explicación..pptx[1].pptx
ÓXIDOS SALINOS explicación..pptx[1].pptxAnderson Jumbo Tigse
 
sistema solar-CIENCIAS DE LA TIERRA DB1.pptx
sistema solar-CIENCIAS DE LA TIERRA DB1.pptxsistema solar-CIENCIAS DE LA TIERRA DB1.pptx
sistema solar-CIENCIAS DE LA TIERRA DB1.pptxEstebanJosue2
 
Relación de la Biología con otras Ciencias.pptx
Relación de la Biología con otras Ciencias.pptxRelación de la Biología con otras Ciencias.pptx
Relación de la Biología con otras Ciencias.pptxYalileChicaiza
 
Libro Metodología de la investigación. Las rutas cuantitativa, cualitativa y ...
Libro Metodología de la investigación. Las rutas cuantitativa, cualitativa y ...Libro Metodología de la investigación. Las rutas cuantitativa, cualitativa y ...
Libro Metodología de la investigación. Las rutas cuantitativa, cualitativa y ...Eduardo Bolaños de Javalois
 
DIVISIÓN_CELULAR_REPRODUCCION_2_MILENA_MOYA.pptx
DIVISIÓN_CELULAR_REPRODUCCION_2_MILENA_MOYA.pptxDIVISIÓN_CELULAR_REPRODUCCION_2_MILENA_MOYA.pptx
DIVISIÓN_CELULAR_REPRODUCCION_2_MILENA_MOYA.pptxmilenamoyaniacato25
 
Presentación: El origen y estructura del átomo
Presentación: El origen y estructura del átomoPresentación: El origen y estructura del átomo
Presentación: El origen y estructura del átomoDavid Rolando Velarde Grefa
 
DETERMINACION DEL DBO5 DEL RIO TITIRE.pdf
DETERMINACION DEL DBO5 DEL RIO TITIRE.pdfDETERMINACION DEL DBO5 DEL RIO TITIRE.pdf
DETERMINACION DEL DBO5 DEL RIO TITIRE.pdfMaribelMamaniGoya
 
ERA CENOZOICA (1).pdf por estudiantes...
ERA CENOZOICA (1).pdf por estudiantes...ERA CENOZOICA (1).pdf por estudiantes...
ERA CENOZOICA (1).pdf por estudiantes...jifarapardes
 
La atmósfera y sus capas_Alisson Almachi
La atmósfera y sus capas_Alisson AlmachiLa atmósfera y sus capas_Alisson Almachi
La atmósfera y sus capas_Alisson AlmachiAlissonAlmachi
 
Mujeres en astronomía_Luz Angela Cubides_17 de Febrero_ 2024
Mujeres en astronomía_Luz Angela Cubides_17 de Febrero_ 2024Mujeres en astronomía_Luz Angela Cubides_17 de Febrero_ 2024
Mujeres en astronomía_Luz Angela Cubides_17 de Febrero_ 2024SOCIEDAD JULIO GARAVITO
 
ERA MEZOSOICA elaborado por estudiantes.
ERA MEZOSOICA elaborado por estudiantes.ERA MEZOSOICA elaborado por estudiantes.
ERA MEZOSOICA elaborado por estudiantes.jifarapardes
 
Presentación sobre el origen del universo
Presentación sobre el  origen del universoPresentación sobre el  origen del universo
Presentación sobre el origen del universoEstebanJosue2
 
Balanceodereaccionesqumicas presentación
Balanceodereaccionesqumicas presentaciónBalanceodereaccionesqumicas presentación
Balanceodereaccionesqumicas presentaciónJosselin Gualinga
 
ÓXIDOS NEUTROS EXPLICACION Y EJEMPLOS .pptx[1].pptx
ÓXIDOS NEUTROS EXPLICACION Y EJEMPLOS .pptx[1].pptxÓXIDOS NEUTROS EXPLICACION Y EJEMPLOS .pptx[1].pptx
ÓXIDOS NEUTROS EXPLICACION Y EJEMPLOS .pptx[1].pptxAnderson Jumbo Tigse
 
Bioelementos primarios y Bioelementos secundarios
Bioelementos primarios y Bioelementos secundariosBioelementos primarios y Bioelementos secundarios
Bioelementos primarios y Bioelementos secundariosJoel Purcachi
 
CV Leslie Olivares: Me Encuentro en Búsqueda de Nuevas Oportunidades Laborales
CV Leslie Olivares: Me Encuentro en Búsqueda de Nuevas Oportunidades LaboralesCV Leslie Olivares: Me Encuentro en Búsqueda de Nuevas Oportunidades Laborales
CV Leslie Olivares: Me Encuentro en Búsqueda de Nuevas Oportunidades LaboralesBaker Publishing Company
 

Último (20)

Eclipses solares, estructura de la tierra_ Exposición grupal.pdf
Eclipses solares, estructura de la tierra_ Exposición grupal.pdfEclipses solares, estructura de la tierra_ Exposición grupal.pdf
Eclipses solares, estructura de la tierra_ Exposición grupal.pdf
 
DIVISION_CELULAR_REPRODUCCIÓN_3_MILENA_MOYA.pptx
DIVISION_CELULAR_REPRODUCCIÓN_3_MILENA_MOYA.pptxDIVISION_CELULAR_REPRODUCCIÓN_3_MILENA_MOYA.pptx
DIVISION_CELULAR_REPRODUCCIÓN_3_MILENA_MOYA.pptx
 
Fases de la Mitosis_Alisson Almachi.pdf
Fases de la  Mitosis_Alisson Almachi.pdfFases de la  Mitosis_Alisson Almachi.pdf
Fases de la Mitosis_Alisson Almachi.pdf
 
Efectos del terremoto y tsunami en Japón 2011
Efectos del terremoto y tsunami en Japón 2011Efectos del terremoto y tsunami en Japón 2011
Efectos del terremoto y tsunami en Japón 2011
 
ÓXIDOS SALINOS explicación..pptx[1].pptx
ÓXIDOS SALINOS explicación..pptx[1].pptxÓXIDOS SALINOS explicación..pptx[1].pptx
ÓXIDOS SALINOS explicación..pptx[1].pptx
 
sistema solar-CIENCIAS DE LA TIERRA DB1.pptx
sistema solar-CIENCIAS DE LA TIERRA DB1.pptxsistema solar-CIENCIAS DE LA TIERRA DB1.pptx
sistema solar-CIENCIAS DE LA TIERRA DB1.pptx
 
Relación de la Biología con otras Ciencias.pptx
Relación de la Biología con otras Ciencias.pptxRelación de la Biología con otras Ciencias.pptx
Relación de la Biología con otras Ciencias.pptx
 
Libro Metodología de la investigación. Las rutas cuantitativa, cualitativa y ...
Libro Metodología de la investigación. Las rutas cuantitativa, cualitativa y ...Libro Metodología de la investigación. Las rutas cuantitativa, cualitativa y ...
Libro Metodología de la investigación. Las rutas cuantitativa, cualitativa y ...
 
DIVISIÓN_CELULAR_REPRODUCCION_2_MILENA_MOYA.pptx
DIVISIÓN_CELULAR_REPRODUCCION_2_MILENA_MOYA.pptxDIVISIÓN_CELULAR_REPRODUCCION_2_MILENA_MOYA.pptx
DIVISIÓN_CELULAR_REPRODUCCION_2_MILENA_MOYA.pptx
 
Presentación: El origen y estructura del átomo
Presentación: El origen y estructura del átomoPresentación: El origen y estructura del átomo
Presentación: El origen y estructura del átomo
 
DETERMINACION DEL DBO5 DEL RIO TITIRE.pdf
DETERMINACION DEL DBO5 DEL RIO TITIRE.pdfDETERMINACION DEL DBO5 DEL RIO TITIRE.pdf
DETERMINACION DEL DBO5 DEL RIO TITIRE.pdf
 
ERA CENOZOICA (1).pdf por estudiantes...
ERA CENOZOICA (1).pdf por estudiantes...ERA CENOZOICA (1).pdf por estudiantes...
ERA CENOZOICA (1).pdf por estudiantes...
 
La atmósfera y sus capas_Alisson Almachi
La atmósfera y sus capas_Alisson AlmachiLa atmósfera y sus capas_Alisson Almachi
La atmósfera y sus capas_Alisson Almachi
 
Mujeres en astronomía_Luz Angela Cubides_17 de Febrero_ 2024
Mujeres en astronomía_Luz Angela Cubides_17 de Febrero_ 2024Mujeres en astronomía_Luz Angela Cubides_17 de Febrero_ 2024
Mujeres en astronomía_Luz Angela Cubides_17 de Febrero_ 2024
 
ERA MEZOSOICA elaborado por estudiantes.
ERA MEZOSOICA elaborado por estudiantes.ERA MEZOSOICA elaborado por estudiantes.
ERA MEZOSOICA elaborado por estudiantes.
 
Presentación sobre el origen del universo
Presentación sobre el  origen del universoPresentación sobre el  origen del universo
Presentación sobre el origen del universo
 
Balanceodereaccionesqumicas presentación
Balanceodereaccionesqumicas presentaciónBalanceodereaccionesqumicas presentación
Balanceodereaccionesqumicas presentación
 
ÓXIDOS NEUTROS EXPLICACION Y EJEMPLOS .pptx[1].pptx
ÓXIDOS NEUTROS EXPLICACION Y EJEMPLOS .pptx[1].pptxÓXIDOS NEUTROS EXPLICACION Y EJEMPLOS .pptx[1].pptx
ÓXIDOS NEUTROS EXPLICACION Y EJEMPLOS .pptx[1].pptx
 
Bioelementos primarios y Bioelementos secundarios
Bioelementos primarios y Bioelementos secundariosBioelementos primarios y Bioelementos secundarios
Bioelementos primarios y Bioelementos secundarios
 
CV Leslie Olivares: Me Encuentro en Búsqueda de Nuevas Oportunidades Laborales
CV Leslie Olivares: Me Encuentro en Búsqueda de Nuevas Oportunidades LaboralesCV Leslie Olivares: Me Encuentro en Búsqueda de Nuevas Oportunidades Laborales
CV Leslie Olivares: Me Encuentro en Búsqueda de Nuevas Oportunidades Laborales
 

Extracción de ADN animal

  • 1. “Año de la Diversificación Productiva y del Fortalecimiento de la Educación” BIOQUIMICA Docente: Jorge Cordero Azabache Alumnos: Ccancce Martínez Anais..................... U2008110426 Semestre:VI HUANCAYO – 2015-11 EXTRACCION DEL ADN ANIMAL
  • 2. EXTRACCIÓN DEL ADN ANIMAL OBJETIVOS  Extraer ADN en muestras de tejidos animales. MARCO TEORICO Para la extracción del ADN del núcleo de las células, es necesario homogenizar las levaduras en hidróxido de sodio (NaOH) y sodio duodecil sulfato (SDS). Este tratamiento favorece la ruptura de la pared y de la membrana celular, además de contribuir a la desnaturalización de las proteínas. Con el fin de liberar el ADN de las proteínas, se utilizan una serie de agentes desnaturalizantes, como el perclorato de sodio y la mezcla de cloroformo y alcohol isoamilo. Después de agregar los agentes desnaturalizantes, se centrifuga la solución y se obtienen dos fases: una orgánica y una acuosa, separadas por una interfase de proteínas desnaturalizadas; en la fase acuosa se encuentra el ADN. La mezcla de cloroformo y alcohol no solo desnaturaliza las proteínas, sino que disuelve los lípidos de la muestra y aumenta la separación de las fases. El ADN de la fase acuosa se recupera por precipitación. La precipitación en etanol absoluto en presencia de una sal es un método muy utilizado en los procesos de extracción de ADN. Luego, el ADN se disuelve en solución salina, y puede ser almacenado para utilizarlo en experimentos posteriores. MATERIALES  Hígado de pollo 200 gr.  Varilla de vidrio.  SDS El dodecilsulfato sódico ( cualquier detergente concentrado)  Arena.  Pedazos de tela para usar como filtro.  Vasos precipitados de 200 ml o 500 ml.  Probeta.  Embudo.  Mortero y pilón.
  • 3. REACTIVOS  Alcohol de 96°  Cloruro sódico 2M PROCEDIMIENTO  Triturar 200 g hígado de pollo en un mortero. Añadir arena para que al triturar se puedan romper las membranas y queden los núcleos sueltos.  Añadir al triturado, 50 centímetros cúbicos de agua destilada. Remover hasta hacer una especie de papilla o puré.  Filtrar varias veces sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan quedado por romper.  Medir el volumen del filtrado con una probeta.  Añadir al filtrado un volumen igual de cloruro sódico 2M. Con esto conseguimos producir el estallido de los núcleos para que queden libres las fibras de cromatina.  A continuación se añade 1 centímetro cúbico de SDS.  Añadir mediante una pipeta 50 centímetros cúbicos de alcohol de 96° el alcohol debe de estar frio. Hay que hacerlo de forma que el alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la interface, precipita el ADN.  Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma dirección. Sobre la varilla se van adhiriendo unas fibras blancas, visibles a simple vista, que son el resultado de la agrupación de muchas fibras de ADN. RESULTADOS En la extraccion del ADN animal se observo lo siguiente:
  • 4. DISCUSION En la práctica de laboratorio extracción del ADN animal, se identificó y se obtuvieron los siguientes resultados: Al extraer el ADN del tejido animal, del hígado de pollo el cual se encuentra en el interior del núcleo celular, disperso y muy replegado, unido a proteínas para formar la cromatina, donde fue necesario homogeneizar el tejido y romper las células para separar el núcleo, además de la envoltura nuclear para liberar su contenido, se separó el ADN de las proteínas que lo protegen y se precipito para extraerlo de la solución. Una vez realizado esto, el ADN iba apareciendo poco a poco en la interfase agua-alcohol en forma de grumos blancos. Es así que se obtuvieron finalmente hebras blancas que corresponden a miles de fibras de ADN. De acuerdo con la teoría, se concuerda con lo siguiente: Las características fisiológicas y bioquímicas de todo ser vivo están contenidas en sus respectivos genomas. Los genomas de bacterias, hongos, plantas, animales y algunos virus Capa de ALCOHOL INTERFASE con el ADN Capa de FILTRADO
  • 5. están compuestos por moléculas de ácido desoxirribonucleico (comúnmente llamado ADN). El ADN es una estructura química cuyos elementos fundamentales (nucleótidos) se organizan de manera lineal generando enormes secuencias de información. La información que define y codifica un carácter determinado se denomina gen (Lewin 1995). Los genes se organizan linealmente y se agrupan formando estructuras llamadas cromosomas, los cuales pueden ser vistos bajo el microscopio durante ciertas etapas del ciclo de vida de la célula. Todos los procesos de extracción, purificación y almacenamiento se basan en las características fisicoquímicas del ADN. Pues aparte de ser una molécula de alto peso molecular, muy larga y delicada, es un ácido capaz de formar sales con iones cargados positivamente (cationes). Además, es soluble en soluciones concentradas de sales (sal de cocina, por ejemplo), pero insoluble en alcoholes (tipo etanol o isopropanol). Adicionalmente, el ADN es destruido a pH ácido (menor de 4,0), es insoluble a pH 5.6, pero es soluble a pH 8,0. Por lo tanto, los procesos de extracción, purificación y almacenamiento del ADN deben mantener el pH óptimo y brindar una alta concentración iónica (Howell 1973). CONCLUSIONES  Se logró correctamente extracción y separación del ADN a partir de tejido animal (hígado), con la separación de interfaces y seguidamente la obtención de hebras blancas que corresponden a miles de fibras de ADN.  En la extracción del ADN animal se puso de manifiesto su estructura fibrilar y el grado de arrollamiento, que permite el empaquetamiento en el núcleo celular de las largas cadenas de esta molécula.  Los métodos de extracción del ADN permiten obtener ácidos nucleicos purificados a partir de diversas fuentes para después realizar análisis específicos de modificaciones genéticas mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Para extraer los ácidos nucleicos del material biológico es preciso provocar una lisis celular, inactivar las nucleasas celulares y separar los ácidos nucleicos de los restos de células. Es posible romper la membrana celular e inactivar las nucleasas intracelulares al mismo tiempo. Tras la lisis celular y la inactivación de las nucleasas, los restos de células se eliminan fácilmente por filtración o precipitación. A menudo se efectúa una extracción con disolventes para eliminar los contaminantes de los ácidos nucleicos. También puede realizarse una precipitación selectiva con concentraciones salinas elevadas (precipitación salina) o una precipitación de las proteínas mediante cambios del pH.
  • 6. CUESTIONARIO 1. ¿Qué dificultades se presentaron para la realización de la práctica? Las dificultades que se presentaron para la realización de la práctica, básicamente fueron el tiempo de triturado del hígado de pollo y arena, y el proceso de filtrado del tejido que no se rompió y al hacer que el alcohol baje por las paredes del vaso y forme las dos capaz. 2. ¿Qué observas en las fibras? En las fibras se observaron hebras blancas que corresponden a miles de fibras agrupadas de ADN. 3. ¿Cuál es la función del detergente y agentes quelantes en la purificación del ADN? La función del detergente y agentes quelantes en la purificación del ADN, son: el detergente completa la rotura de las membranas al disolver y separar los lípidos de las mismas. También interviene en la separación de las proteínas que rodean al ADN. Y los agentes quelantes protegen el ADN de la acción de las enzimas nucleasas, las altas concentraciones. 4. ¿Por qué se dice que las proteínas contaminan al ADN purificado? Se dice que las proteínas contaminan al ADN purificado, debido a que en la lisis de las células cuyo DNA se desea purificar. Este paso se realiza mediante un detergente aniónico que solubiliza los componentes celulares. Dicha rotura celular se lleva a cabo en presencia de “conservantes”, que garantizan la integridad del DNA; esto es, que impiden o limitan la acción de las DNAsas presentes en las células o contaminantes del medio. El RNA presente se elimina mediante tratamiento con RNAsa. A continuación se eliminan las proteínas y otros contaminantes celulares, mediante precipitación salina (que sustituye al tratamiento clásico con disolventes orgánicos tóxicos). Finalmente, el DNA genómico se aísla mediante precipitación en presencia de alcohol y se disuelve en agua o en una solución tamponada que puede contener “conservantes” del DNA. 5. ¿Por qué es útil el estudiar y analizar al ADN de una célula? Es útil el estudiar y analizar al ADN de una célula, Debido a que en el ADN se encuentran cifradas las instrucciones que definen las características propias de cada organismo, diversas tecnologías y sistemas de análisis se han desarrollado para la caracterización de esta molécula. Los resultados de tales estudios demuestran que características como la resistencia a enfermedades, potencialidades de producción, tamaño y color de los frutos, entre otros, son debidas a la expresión de la información genética y su interacción con el medio
  • 7. ambiente. La aplicación de este conocimiento se ha convertido en una herramienta fundamental en programas de mejoramiento genético. 6. Si todos los organismos vivos tienen ADN en sus células, ¿qué es lo que hace a los organismos diferentes de otros? Extracción de contaminantes. El objetivo de extraer ADN es obtener preparaciones enriquecidas en esta molécula. Sin embargo, el ADN está asociado con proteínas (histonas) e inmerso en un medio que contiene estructuras de composición química diversa. Además, los reactivos empleados en los procesos iniciales de purificación se convierten en agentes contaminantes. Las metodologías para retirar los contaminantes de una preparación de ADN incluyen: la centrifugación a altas velocidades, la electroforesis, la separación a través de columnas e incluso la utilización de imanes para obtener preparaciones de alta pureza. Un contaminante generalmente presente en preparaciones de ADN es el ARN (ácido ribonucleico). Esta molécula se degrada por incubación con la enzima ARNasa. 7. ¿Por qué se le agrega arena? Se le agrega arena para ayudar a romper las membranas celulares, dejando intacto el ADN y al añadir el alcohol se consigue separar el ADN, que tiene más afinidad con el alcohol que con el agua, lo que hace posible ver el ADN 8. ¿Qué acción tiene el SDS sobre la cromatina? La acción que tiene el SDS sobre la cromatina junto con el cloruro sódico es producir el estallido de los núcleos para que queden libres las fibras de cromatina. Así mismo el SDS favorece la ruptura de la pared y de la membrana celular, además de contribuir a la desnaturalización de las proteínas. BIBLIOGRAFIA  Dorado P. G., Purificación y análisis de DNA cromosómico bacteriano, Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, Campus Universitario de Rabanales, Edificio Severo Ochoa, 14071-Córdoba.  Pedro J. Rocha Salavarrieta,. Teoría y práctica para la extracción y purificación del ADN de palma de aceite Laboratorio de Marcadores Moleculares, Área de Fisiología y Mejoramiento. Cenipalma, Bogotá, Colombia.  M. Somma, Análisis de la Presencia de Organismos Genéticamente Modificados en Muestras de Alimentos.  platea.pntic.mec.es/~cmarti3/bio/ADN/adn/ppal.htm.